Стерилизация влажным теплом описывает методы стерилизации , в которых в качестве стерилизующего агента используется горячий водяной пар. [1] [2] Нагревание изделия является одной из самых ранних форм стерилизации. Различные процедуры, используемые для выполнения процесса стерилизации влажным теплом, вызывают разрушение микроорганизмов путем денатурации макромолекул. [ необходима цитата ]
Нагревание предмета является одной из самых ранних форм стерилизации, применяемых на практике. Процессы стерилизации влажным теплом стерилизуют с использованием горячего воздуха, который сильно загружен водяным паром, который играет самую важную роль в стерилизации. [1] [2] Кипячение образца в течение 30 минут или более убьет практически все присутствующие вегетативные клетки, но не убьет споры , которые могут вскоре прорасти и возобновить рост. Поэтому кипячение является недостаточным методом для достижения стерилизации. [ необходима цитата ]
Влажное тепло вызывает разрушение микроорганизмов путем денатурации макромолекул, в первую очередь белков. Разрушение клеток путем лизиса также может играть определенную роль. Хотя «стерильность» подразумевает разрушение свободноживущих организмов, которые могут расти внутри образца, стерилизация не обязательно влечет за собой разрушение инфекционного материала. Прионы являются примером инфекционного агента, который может выживать при стерилизации влажным теплом, в зависимости от условий. [ необходима цитата ]
Для обеспечения эффективной стерилизации паром и давлением используются несколько методов проверки и индикации; к ним относятся цветные индикаторные ленты и биологические индикаторы. При использовании биологических индикаторов образцы, содержащие споры термостойких микробов, таких как Geobacillus stearothermophilis, стерилизуются вместе со стандартной загрузкой, а затем инкубируются в стерильных средах (часто содержащихся в образце в стеклянной ампуле, которую следует разбить после стерилизации). Изменение цвета в среде (указывающее на выработку кислоты бактериями; требует, чтобы среда была сформулирована для этой цели) или появление мутности (помутнение, указывающее на рассеивание света бактериальными клетками) указывает на то, что стерилизация не была достигнута, и цикл стерилизации может нуждаться в пересмотре или улучшении. [ необходима цитата ]
Более эффективным методом является Тиндаллизация , которая использует три последовательные обработки паром для достижения стерилизации в течение трех дней. Это работает путем уничтожения вегетативных клеток, позволяя прорастать выжившим спорам и убивая полученные вегетативные клетки до того, как они успеют сформировать новые споры. Любые выжившие споры от первой обработки или споры, случайно образованные в течение первого инкубационного периода, убиваются в третьем цикле обработки паром. [ необходима цитата ]
Более распространенным методом, когда длительное нагревание не является проблемой, является использование автоклава или скороварки . При стерилизации таким образом образцы помещаются в паровую камеру на полке или приподнятом полу, и камера закрывается и нагревается так, чтобы пар вытеснял воздух из вентиляционных отверстий или выхлопных труб. Затем применяется давление, так что внутренняя температура достигает 121 °C (250 °F), и эта температура поддерживается в течение 15–30 минут. Эта повышенная температура и давление достаточны для стерилизации образцов любых часто встречающихся микробов или спор. Затем камере дают медленно остыть или путем пассивного рассеивания тепла; редко применяется принудительное охлаждение или преднамеренный сброс давления. Стерилизация под давлением является преобладающим методом, используемым для медицинской стерилизации термостойких инструментов, а также для стерилизации материалов для микробиологии и других областей, требующих асептической техники . [ требуется ссылка ]
В случаях, когда предметы необходимо стерилизовать для немедленного использования, может использоваться флэш-стерилизация . [3] Методы флэш-стерилизации обычно работают при минимальном времени, температуре или давлении и могут приносить в жертву некоторые меры безопасности, такие как возможность проверки с помощью биологических индикаторов или предотвращения заражения. [3] Дополнительные протоколы обычно принимаются для смягчения жертв; оборудование для флэш-стерилизации часто хранится в стерильном поле операционной, для предварительной упаковки предметов может использоваться паропроницаемая защитная упаковка, а специально разработанные жесткие системы контейнеров для стерилизации могут использоваться повторно. [3]