Гетерохроматин — это плотно упакованная форма ДНК или конденсированная ДНК , которая существует в нескольких разновидностях. Эти разновидности лежат в континууме между двумя крайностями конститутивного гетерохроматина и факультативного гетерохроматина . Оба играют роль в экспрессии генов . Поскольку он плотно упакован, считалось, что он недоступен для полимераз и, следовательно, не транскрибируется; однако, согласно Volpe et al. (2002), [1] и многим другим работам, [2] большая часть этой ДНК на самом деле транскрибируется, но она непрерывно оборачивается посредством РНК-индуцированного транскрипционного сайленсинга (RITS). Недавние исследования с использованием электронной микроскопии и окрашивания OsO 4 показывают, что плотная упаковка не связана с хроматином. [3]
Конститутивный гетерохроматин может влиять на гены, расположенные рядом с ним (например, позиционная мозаичность ). Обычно он повторяется и формирует структурные функции, такие как центромеры или теломеры , а также действует как аттрактор для других сигналов экспрессии или репрессии генов.
Факультативный гетерохроматин является результатом генов, которые подавляются посредством такого механизма, как деацетилирование гистонов или Piwi-взаимодействующая РНК (piRNA) через РНКi . Он не повторяется и разделяет компактную структуру конститутивного гетерохроматина. Однако под воздействием специфических сигнальных сигналов развития или окружающей среды он может потерять свою конденсированную структуру и стать транскрипционно активным. [4]
Гетерохроматин был связан с ди- и триметилированием H3K9 в определенных частях человеческого генома. [5] Метилтрансферазы, связанные с H3K9me3 , по- видимому , играют ключевую роль в модификации гетерохроматина во время определения линии в начале органогенеза и в поддержании верности линии. [6]
Хроматин встречается в двух разновидностях: эухроматин и гетерохроматин. [7] Первоначально эти две формы цитологически различались по интенсивности окрашивания — эухроматин менее интенсивен, в то время как гетерохроматин окрашивается интенсивно, что указывает на более плотную упаковку. Гетерохроматин получил свое название по этой причине от ботаника Эмиля Хайца, который обнаружил, что гетерохроматин остается темно окрашенным на протяжении всего клеточного цикла, в отличие от эухроматина, окраска которого исчезает во время интерфазы. [8] Гетерохроматин обычно локализуется на периферии ядра . Несмотря на эту раннюю дихотомию, недавние данные как у животных [9], так и у растений [10] свидетельствуют о том, что существует более двух различных состояний гетерохроматина, и на самом деле он может существовать в четырех или пяти «состояниях», каждое из которых отмечено различными комбинациями эпигенетических меток.
Гетерохроматин в основном состоит из генетически неактивных сателлитных последовательностей , [11] и многие гены репрессированы в различной степени, хотя некоторые вообще не могут быть экспрессированы в эухроматине. [12] И центромеры , и теломеры являются гетерохроматическими, как и тельце Барра второй, инактивированной X-хромосомы у самки.
Гетерохроматин связан с несколькими функциями, от регуляции генов до защиты целостности хромосом; [13] некоторые из этих ролей можно отнести к плотной упаковке ДНК, что делает ее менее доступной для белковых факторов, которые обычно связывают ДНК или связанные с ней факторы. Например, голые двухцепочечные концы ДНК обычно интерпретируются клеткой как поврежденная или вирусная ДНК, вызывая остановку клеточного цикла , восстановление ДНК или разрушение фрагмента, например, эндонуклеазами у бактерий.
Некоторые области хроматина очень плотно упакованы волокнами, которые демонстрируют состояние, сопоставимое с состоянием хромосомы в митозе . Гетерохроматин, как правило, наследуется клонально; когда клетка делится, две дочерние клетки обычно содержат гетерохроматин в тех же областях ДНК, что приводит к эпигенетическому наследованию . Вариации приводят к тому, что гетерохроматин вторгается в соседние гены или отступает от генов на крайних концах доменов. Транскрибируемый материал может быть подавлен путем позиционирования (в цис-положении ) в этих пограничных доменах. Это приводит к уровням экспрессии, которые варьируются от клетки к клетке, [14] что может быть продемонстрировано с помощью позиционно-эффектной пестроты . [15] Последовательности инсуляторов могут действовать как барьер в редких случаях, когда конститутивный гетерохроматин и высокоактивные гены соседствуют (например, инсулятор 5'HS4 выше локуса β-глобина курицы [16] и локусы в двух Saccharomyces spp. [17] [18] ).
Все клетки данного вида упаковывают одни и те же области ДНК в конститутивный гетерохроматин , и, таким образом, во всех клетках любые гены, содержащиеся в конститутивном гетерохроматине, будут слабо экспрессироваться . Например, все человеческие хромосомы 1 , 9 , 16 и Y-хромосома содержат большие области конститутивного гетерохроматина. У большинства организмов конститутивный гетерохроматин находится вокруг центромеры хромосомы и около теломер.
Участки ДНК, упакованные в факультативный гетерохроматин, не будут соответствовать типам клеток в пределах вида, и, таким образом, последовательность в одной клетке, упакованная в факультативный гетерохроматин (и гены внутри нее плохо экспрессируются), может быть упакована в эухроматин в другой клетке (и гены внутри нее больше не будут молчать). Однако образование факультативного гетерохроматина регулируется и часто связано с морфогенезом или дифференциацией . Примером факультативного гетерохроматина является инактивация Х-хромосомы у самок млекопитающих: одна Х-хромосома упакована как факультативный гетерохроматин и молчат, в то время как другая Х-хромосома упакована как эухроматин и экспрессируется.
Среди молекулярных компонентов, которые, по-видимому, регулируют распространение гетерохроматина, находятся белки группы Polycomb и некодирующие гены, такие как Xist . Механизм такого распространения все еще является предметом споров. [19] Поликомбовые репрессивные комплексы PRC1 и PRC2 регулируют уплотнение хроматина и экспрессию генов и играют фундаментальную роль в процессах развития. PRC-опосредованные эпигенетические аберрации связаны с нестабильностью генома и злокачественностью и играют роль в реакции на повреждение ДНК , репарации ДНК и точности репликации . [20]
Saccharomyces cerevisiae , или почкующиеся дрожжи, являются модельными эукариотами , и их гетерохроматин был тщательно определен. Хотя большую часть их генома можно охарактеризовать как эухроматин, у S. cerevisiae есть области ДНК, которые транскрибируются очень плохо. Эти локусы представляют собой так называемые локусы молчащего типа спаривания (HML и HMR), рДНК (кодирующие рибосомальную РНК) и субтеломерные области. Делящиеся дрожжи ( Schizosaccharomyces pombe ) используют другой механизм для образования гетерохроматина в своих центромерах. Заглушение гена в этом месте зависит от компонентов пути РНК-интерференции . Считается, что двухцепочечная РНК приводит к заглушению области посредством ряда шагов.
В делящихся дрожжах Schizosaccharomyces pombe два комплекса РНК-интерференции, комплекс RITS и комплекс РНК-направленной РНК-полимеразы (RDRC), являются частью механизма РНК-интерференции, участвующего в инициации, распространении и поддержании сборки гетерохроматина. Эти два комплекса локализуются в зависимости от siRNA на хромосомах, в месте сборки гетерохроматина. РНК-полимераза II синтезирует транскрипт, который служит платформой для привлечения RITS, RDRC и, возможно, других комплексов, необходимых для сборки гетерохроматина. [21] [22] Как РНК-интерференция, так и процесс деградации РНК, зависящий от экзосом, способствуют подавлению активности гетерохроматиновых генов. Эти механизмы Schizosaccharomyces pombe могут встречаться и у других эукариот. [23] Большая структура РНК, называемая RevCen, также участвует в производстве siRNA для опосредования образования гетерохроматина у некоторых делящихся дрожжей. [24]
Актуальный отчет о текущем понимании повторяющейся ДНК, которая обычно не содержит генетической информации. Если эволюция имеет смысл только в контексте регуляторного контроля генов, мы предполагаем, что гетерохроматин, который является основной формой хроматина у высших эукариот, позиционируется как глубоко эффективная цель для эволюционных изменений. Будущие исследования сборки, поддержания и многих других функций гетерохроматина прольют свет на процессы регуляции генов и хромосом.