Коагулаза — это белковый фермент, вырабатываемый несколькими микроорганизмами , который позволяет преобразовывать фибриноген в фибрин . В лабораторных условиях он используется для различения различных типов изолятов стафилококка . Важно отметить, что S. aureus , как правило, коагулазоположительный, что означает, что положительный тест на коагулазу будет указывать на присутствие S. aureus или любого из 11 других коагулазоположительных стафилококков . [1] Отрицательный тест на коагулазу вместо этого покажет присутствие коагулазоотрицательных организмов, таких как S. epidermidis или S. saprophyticus . Однако теперь известно, что не все S. aureus являются коагулазоположительными. [2] [3] В то время как коагулазоположительные стафилококки обычно являются патогенными , коагулазоотрицательные стафилококки чаще связаны с оппортунистической инфекцией . [4]
Его также производит Yersinia pestis . [5]
Коагулаза реагирует с протромбином в крови. Полученный комплекс называется стафилотромбином , который позволяет ферменту действовать как протеаза для преобразования фибриногена, белка плазмы, вырабатываемого печенью, в фибрин. Это приводит к свертыванию крови. Коагулаза прочно связана с поверхностью бактерии S. aureus и может покрывать ее поверхность фибрином при контакте с кровью. Фибриновый сгусток может защищать бактерию от фагоцитоза и изолировать ее от других защитных сил хозяина. [6] Таким образом, фибриновая оболочка может сделать бактерию более вирулентной. Связанная коагулаза является частью более крупного семейства адгезиновых белков MSCRAMM .
Тест на коагулазу традиционно использовался для дифференциации Staphylococcus aureus от коагулазоотрицательных стафилококков . S.aureus производит две формы коагулазы (т. е. связанную коагулазу и свободную коагулазу). Связанную коагулазу, также известную как «фактор слипания» , можно обнаружить с помощью теста на коагулазу на слайде, а свободную коагулазу можно обнаружить с помощью теста на коагулазу в пробирке.
Тест на коагулазу на слайде проводится с отрицательным контролем, чтобы исключить аутоагглютинацию. Две капли физиологического раствора помещаются на слайд, помеченный номером образца, Тест (T) и контроль (C). Две капли физиологического раствора эмульгируются с тестируемым организмом с помощью проволочной петли, прямой проволоки или деревянной палочки. Каплю плазмы ( рекомендуется кроличья плазма, антикоагулированная ЭДТА ) [7] помещают на инокулированную каплю физиологического раствора, соответствующую тесту, и хорошо перемешивают, затем слайд осторожно покачивают в течение примерно 10 секунд.
Если тест на коагулазу на слайде отрицательный, для подтверждения следует провести тест в пробирке. Слипание в обеих каплях является признаком аутоагглютинации, поэтому следует провести тест в пробирке. Тест в пробирке не проводится в каждом учреждении, но большая часть результата зависит от посевов крови из лаборатории.
В пробирочном тесте используется кроличья плазма , инокулированная стафилококковой колонией (т. е. грамположительными кокками, которые являются каталазоположительными ). Затем пробирку инкубируют при температуре 37 °C в течение 1,5 часов. Если результат отрицательный, то инкубацию продолжают до 18 часов.
