Комплексин (также известный как синафин ) относится к небольшому набору эукариотических цитоплазматических нейрональных белков, которые связываются с комплексом белков SNARE ( SNAREpin ) с высокой аффинностью. Они называются синафинами 1 и 2. В присутствии Ca 2+ белок транспортной везикулы синаптотагмин вытесняет комплексин, позволяя комплексу белков SNARE связывать транспортную везикулу с пресинаптической мембраной.
Комплексин действует как ингибитор и посредник слияния синаптических везикул и высвобождения нейротрансмиттера . В одной конформации он зажимает комплексы SNAREpin , предотвращая слияние везикул, в то время как в другой конформации он высвобождает SNAREpin , позволяя синаптотагмину запустить слияние. [1] В то время как комплексин не является необходимым для экзоцитоза синаптических везикул, он увеличивает высвобождение нейротрансмиттера на 60–70%, как показано при нокауте гена комплексина у мышей. [2] Ряд неврологических заболеваний человека связаны с дефицитом комплексина.
Синафин может способствовать экзоцитозу, способствуя взаимодействию между комплементарными трансмембранными областями синтаксина и синаптобревина , которые находятся в противоположных мембранах до слияния. [2]
Комплексин — небольшой высокозаряженный цитозольный белок, который является гидрофильным, богатым остатками глутаминовой кислоты и лизина . [3] Центральная область комплексина (аминокислоты 48–70) связывается с ядром SNARE как антипараллельная α-спираль , которая прикрепляет комплексин к комплексу SNARE. Он селективно взаимодействует с тройным комплексом SNARE, но не с мономерными белками SNARE. Комплексин связывается с бороздкой между спиралями синаптобревина и синтаксина. Комплексин стабилизирует С-концевую часть комплекса SNARE.
Комплексин действует как положительный регулятор экзоцитоза синаптических везикул и селективно связывается с нейронным комплексом SNARE . Комплексин имеет двойную функцию, поскольку он может действовать как промоутер или ингибитор слияния везикул. Эта двойная функциональность зависит от синаптической активности, такой как деполяризующий стимул, поступающий в синапс . Действуя как зажим слияния при ингибировании слияния и промоутер во время деполяризации , уровни концентрации комплексина регулируют размер пула везикул , такой как размер пула готового к высвобождению, что важно для краткосрочных изменений ответа. [4]
Ингибирование слияния необходимо для предотвращения спонтанного экзоцитоза везикул в синапс. Если зажим не удерживает пулы синаптических везикул стабильными и не препятствует их слиянию, потенциал для спонтанного срабатывания и истощения пула везикул намного больше. Считается, что за эту ингибирующую функцию отвечает С-концевой домен комплексина. [5] У нескольких эукариотических организмов мутации комплексина были связаны с резким увеличением скорости спонтанного экзоцитоза . [6]
Возможный механизм того, как комплексин механически закрепляет везикулы, чтобы предотвратить слияние, включает ингибирующее связывание с собирающимся комплексом SNARE . [7] Предполагается, что N-концевой домен альфа-спирали комплексина включает себя в комплексный спиральный пучок SNARE и предотвращает застегивание сборки. [4] [8] В отличие от этого, другая гипотеза заключается в том, что комплексин, независимо от взаимодействий синаптотагмина , сшивается с комплексами SNARE в зигзагообразном массиве. [7] Последние данные подтверждают первую гипотезу, что синаптотагмин играет роль в возникновении конформационного изменения во взаимодействиях SNARE, аналогичного изменению, вызванному кальцием. [4] Это связывание связанного с кальцием синаптотагмина создает взаимодействие, которое освобождает зажим слияния комплексина, вызывая слияние мембран и экзоцитоз. [9]
При низком уровне кальция комплексин оказывает сравнительно более сильное зажимное и ингибирующее действие на спонтанное высвобождение везикул. Считается, что этому противодействует синаптотагмин при повышении уровня кальция, поскольку активность синаптотагмина увеличивается, предоставляя больше энергии для устранения зажимного эффекта комплексина. [4]
Комплексин также может способствовать слиянию, когда стимул передается в синапс . Независимо от его функции зажима (например, когда С-конец комплексина выведен из строя), комплексин все еще может функционировать как стимулятор экзоцитоза. [10] Этот путь опосредован синаптотагмином -10 [11]
Эксперименты по нокдауну комплексина были связаны с экзоцитозом, зависимым от синаптотагмина -1 и -10. Оба белка синаптотагмина, по-видимому, зависят от кофактора комплексина, что указывает на важность комплексина в семействе синаптотагмина . [11]