Креатинкиназа ( КК ), также известная как креатинфосфокиназа ( КФК ) или фосфокреатинкиназа , представляет собой фермент ( КФ 2.7.3.2), экспрессируемый различными тканями и типами клеток. КК катализирует превращение креатина и использует аденозинтрифосфат (АТФ) для создания фосфокреатина (ФКр) и аденозиндифосфата (АДФ). Эта реакция фермента КК обратима, и, таким образом, АТФ может быть получен из ФКр и АДФ.
В тканях и клетках , которые быстро потребляют АТФ, особенно в скелетных мышцах , а также в мозге, фоторецепторных клетках сетчатки , волосковых клетках внутреннего уха , сперматозоидах и гладких мышцах , PCr служит энергетическим резервуаром для быстрой буферизации и регенерации АТФ in situ , а также для внутриклеточного переноса энергии с помощью челнока или цепи PCr. [2] Таким образом, креатинкиназа является важным ферментом в таких тканях. [3]
В клинических условиях креатинкиназа определяется в анализах крови как маркер повреждения тканей, богатых КК, например, при инфаркте миокарда (сердечном приступе), рабдомиолизе (тяжелом разрушении мышц), мышечной дистрофии , аутоиммунных миозитах и остром повреждении почек . [4]
В клетках цитозольные ферменты CK состоят из двух субъединиц, которые могут быть либо B (мозгового типа), либо M (мышечного типа). Таким образом, существует три различных изофермента : CK-MM, CK-BB и CK-MB. Гены этих субъединиц расположены на разных хромосомах : B на 14q32 и M на 19q13. В дополнение к этим трем цитозольным изоформам CK, существуют два изофермента митохондриальной креатинкиназы, вездесущая форма и саркомерная форма. Функциональная сущность митохондриальных изоформ CK представляет собой октамер, состоящий из четырех димеров каждый. [5]
В то время как митохондриальная креатинкиназа напрямую участвует в образовании фосфокреатина из митохондриального АТФ, цитозольная CK регенерирует АТФ из АДФ, используя PCr. Это происходит во внутриклеточных участках, где АТФ используется в клетке, при этом CK действует как in situ регенератор АТФ.
Изоферментные паттерны различаются в тканях. Скелетные мышцы экспрессируют CK-MM (98%) и низкие уровни CK-MB (1%). Миокард (сердечная мышца), напротив, экспрессирует CK-MM на уровне 70% и CK-MB на уровне 25–30%. CK-BB преимущественно экспрессируется в мозге и гладких мышцах, включая сосудистую и маточную ткань.
Первой структурой креатинкиназы, решенной с помощью рентгеновской кристаллографии белка, была структура октамерной, саркомерной митохондриальной CK мышечного типа (s-mtCK) в 1996 году [6] , за которой последовала структура повсеместной митохондриальной CK (u-mtCK) в 2000 году [7] [8] Атомная структура бананообразной, димерной цитозольной BB-CK мозгового типа была решена в 1999 году с разрешением 1,4 Å . [9] Цитозольная BB-CK, а также мышечная MM-CK образуют симметричные димеры бананообразной формы с одним каталитическим активным центром в каждой субъединице. [10]
Митохондриальная креатинкиназа (CK m ) присутствует в митохондриальном межмембранном пространстве , где она регенерирует фосфокреатин (PCr) из митохондриально генерируемого АТФ и креатина (Cr), импортируемого из цитозоля . Помимо двух митохондриальных форм изофермента CK, то есть повсеместной mtCK (присутствующей в немышечных тканях) и саркомерной mtCK (присутствующей в саркомерных мышцах), в цитозоле присутствуют три цитозольные изоформы CK, в зависимости от ткани. В то время как MM-CK экспрессируется в саркомерных мышцах, то есть скелетных и сердечных мышцах, MB-CK экспрессируется в сердечных мышцах, а BB-CK экспрессируется в гладких мышцах и в большинстве немышечных тканей.
Митохондриальная mtCK и цитозольная CK соединены в так называемый PCr/Cr-шаттл или цепь. PCr, вырабатываемый mtCK в митохондриях, перемещается в цитозольную CK, которая связана с АТФ-зависимыми процессами, например, АТФазами, такими как актомиозиновая АТФаза и кальциевая АТФаза, участвующими в сокращении мышц, и натриевая/калиевая АТФаза, участвующая в задержке натрия в почках. Связанная цитозольная CK принимает PCr, перемещаемый через клетку, и использует АДФ для регенерации АТФ, который затем может использоваться АТФазами в качестве источника энергии (CK тесно связана с АТФазами, образуя функционально связанный микрокомпартмент ). PCr является не только энергетическим буфером, но и клеточной транспортной формой энергии между субклеточными участками производства энергии (АТФ) (митохондрии и гликолиз) и участками использования энергии (АТФазы). [2]
Таким образом, КК усиливает сократимость скелетных, сердечных и гладких мышц, а также участвует в формировании артериального давления . [11] Кроме того, действие креатинкиназы по очистке АДФ было связано с нарушениями свертываемости крови : люди с сильно повышенным уровнем КК в плазме могут быть склонны к серьезным кровотечениям. [12]
Уровень КК часто определяется в рутинной практике в медицинской лаборатории . Раньше его определяли специально у пациентов с болью в груди , чтобы распознать острый инфаркт миокарда, но этот тест был в значительной степени заменен тропонином . Нормальные значения в состоянии покоя обычно составляют от 60 до 400 МЕ/ л , [14] где одна единица — это активность фермента , а точнее количество фермента, которое будет катализировать 1 мкмоль субстрата в минуту при определенных условиях (температура, pH, концентрации субстрата и активаторы. [15] ) Этот тест не является специфическим для типа повышенного уровня КК.
Уровень креатинкиназы в крови может быть высоким как в здоровом состоянии, так и при болезни. Упражнения увеличивают отток креатинкиназы в кровоток на срок до недели, и это является наиболее распространенной причиной высокого уровня CK в крови. [16] Кроме того, высокий уровень CK в крови может быть связан с высоким уровнем внутриклеточной CK, например, у лиц африканского происхождения. [17]
Наконец, высокий уровень CK в крови может быть признаком повреждения богатой CK ткани, например, при рабдомиолизе , инфаркте миокарда , миозите и миокардите . Это означает, что креатинкиназа в крови может быть повышена при широком спектре клинических состояний, включая использование лекарств, таких как статины ; эндокринные расстройства, такие как гипотиреоз ; [18] и заболевания и расстройства скелетных мышц, включая злокачественную гипертермию , [19] и злокачественный нейролептический синдром . [20]
Кроме того, определение изофермента в прошлом широко использовалось как указание на повреждение миокарда при сердечных приступах. Измерение тропонина в значительной степени заменило его во многих больницах, хотя некоторые центры все еще полагаются на CK-MB.
Этот фермент часто упоминается в медицинской литературе под неправильным названием «креатининкиназа». Креатинин не является субстратом или продуктом фермента. [21]