Генетическая рекомбинация (также известная как генетическая перетасовка ) — это обмен генетическим материалом между различными организмами , который приводит к появлению потомства с комбинациями признаков, которые отличаются от признаков, обнаруженных у любого из родителей. У эукариот генетическая рекомбинация во время мейоза может привести к новому набору генетической информации, которая может далее передаваться от родителей к потомству. Большая часть рекомбинации происходит естественным образом и может быть разделена на два типа: (1) внутрихромосомная рекомбинация , происходящая посредством независимого набора аллелей , локусы которых находятся на разных, но гомологичных хромосомах (случайная ориентация пар гомологичных хромосом в мейозе I); и (2) внутрихромосомная рекомбинация , происходящая посредством кроссинговера. [1]
Во время мейоза у эукариот генетическая рекомбинация включает в себя спаривание гомологичных хромосом . За этим может следовать передача информации между хромосомами. Передача информации может происходить без физического обмена (часть генетического материала копируется с одной хромосомы на другую, без изменения донорской хромосомы) (см. SDSA – путь синтез-зависимого отжига цепи на рисунке); или путем разрыва и повторного соединения цепей ДНК , что образует новые молекулы ДНК (см. путь DHJ на рисунке).
Рекомбинация может также происходить во время митоза у эукариот, где она обычно затрагивает две сестринские хромосомы, образованные после репликации хромосом. В этом случае новые комбинации аллелей не производятся, поскольку сестринские хромосомы обычно идентичны. В мейозе и митозе рекомбинация происходит между схожими молекулами ДНК ( гомологичными последовательностями ). В мейозе негомологичные хромосомы спариваются друг с другом, так что рекомбинация обычно происходит между негомологичными. Как в мейотических, так и в митотических клетках рекомбинация между гомологичными хромосомами является распространенным механизмом, используемым при репарации ДНК .
Генная конверсия — процесс, в ходе которого гомологичные последовательности становятся идентичными, также относится к генетической рекомбинации.
Генетическая рекомбинация и рекомбинационная репарация ДНК также происходят у бактерий и архей , которые используют бесполое размножение .
Рекомбинацию можно искусственно вызвать в лабораторных условиях ( in vitro ), получая рекомбинантную ДНК для различных целей, в том числе для разработки вакцин .
Рекомбинация V(D)J у организмов с адаптивной иммунной системой представляет собой тип сайт-специфической генетической рекомбинации, которая помогает иммунным клеткам быстро диверсифицироваться для распознавания новых патогенов и адаптации к ним .
Во время мейоза синапсис (соединение гомологичных хромосом) обычно предшествует генетической рекомбинации.
Генетическая рекомбинация катализируется многими различными ферментами . Рекомбиназы являются ключевыми ферментами, катализирующими этап переноса цепи во время рекомбинации. RecA , главная рекомбиназа, обнаруженная в Escherichia coli , отвечает за восстановление двухцепочечных разрывов ДНК (DSB). У дрожжей и других эукариотических организмов для восстановления DSB требуются две рекомбиназы. Белок RAD51 необходим для митотической и мейотической рекомбинации, тогда как белок репарации ДНК, DMC1 , специфичен для мейотической рекомбинации. У архей ортологом бактериального белка RecA является RadA.
У бактерий происходит регулярная генетическая рекомбинация, а также неэффективный перенос генетического материала , выражающийся в неудачном переносе или абортивном переносе, который представляет собой любой бактериальный перенос ДНК донорской клетки реципиентам, которые установили входящую ДНК как часть генетического материала реципиента. [ требуется цитирование ] [ требуется уточнение ] Абортивный перенос был зарегистрирован при последующей трансдукции и конъюгации. [ требуется уточнение ] Во всех случаях переданный фрагмент разбавляется ростом культуры. [2] [3] [4]
У эукариот рекомбинация во время мейоза облегчается хромосомным кроссинговером . Процесс кроссинговера приводит к тому, что потомство имеет другие комбинации генов, чем у родителей, и иногда может производить новые химерные аллели . [ требуется цитата ] Перетасовка генов , вызванная генетической рекомбинацией, приводит к увеличению генетической изменчивости . Это также позволяет организмам, размножающимся половым путем, избегать храповика Мюллера , при котором геномы бесполой популяции имеют тенденцию накапливать больше вредных мутаций с течением времени, чем полезных или обратных мутаций. [ требуется цитата ]
Хромосомный кроссинговер включает рекомбинацию между парными хромосомами, унаследованными от каждого из родителей, что обычно происходит во время мейоза . [ требуется ссылка ] Во время профазы I (стадия пахитены) четыре имеющиеся хроматиды находятся в тесном строю друг с другом. [ требуется ссылка ] В этом строю гомологичные участки на двух хроматидах могут тесно спариваться друг с другом и обмениваться генетической информацией. [5]
Поскольку существует небольшая вероятность рекомбинации в любом месте хромосомы, частота рекомбинации между двумя местами зависит от расстояния, разделяющего их. [ необходима цитата ] Таким образом, для генов, достаточно удаленных на одной хромосоме, количество кроссинговеров достаточно велико, чтобы разрушить корреляцию между аллелями. [ необходима цитата ]
Отслеживание движения генов в результате кроссинговеров оказалось весьма полезным для генетиков. Поскольку два гена, которые находятся близко друг к другу, с меньшей вероятностью разделятся, чем гены, которые находятся дальше друг от друга, генетики могут приблизительно определить, насколько далеко друг от друга находятся два гена на хромосоме, если они знают частоту кроссинговеров. [ необходима цитата ] Генетики также могут использовать этот метод для определения присутствия определенных генов. Гены, которые обычно остаются вместе во время рекомбинации, называются связанными . Один ген в связанной паре иногда может использоваться в качестве маркера для определения присутствия другого гена. Обычно это используется для обнаружения присутствия гена, вызывающего заболевание. [6]
Частота рекомбинации между двумя наблюдаемыми локусами — это значение кроссинговера . Это частота кроссинговера между двумя сцепленными генными локусами ( маркерами ), и она зависит от расстояния между наблюдаемыми генетическими локусами . Для любого фиксированного набора генетических и экологических условий рекомбинация в определенном регионе структуры сцепления ( хромосомы ) имеет тенденцию быть постоянной, и то же самое справедливо для значения кроссинговера, которое используется при создании генетических карт . [2] [7]
При генной конверсии часть генетического материала копируется с одной хромосомы на другую, при этом донорская хромосома не изменяется. Генная конверсия происходит с высокой частотой в фактическом месте события рекомбинации во время мейоза . Это процесс, при котором последовательность ДНК копируется из одной спирали ДНК (которая остается неизменной) в другую спираль ДНК, последовательность которой изменяется. Генная конверсия часто изучалась в грибковых скрещиваниях [8], где можно удобно наблюдать 4 продукта отдельных мейозов. События генной конверсии можно различить как отклонения в отдельном мейозе от нормальной схемы сегрегации 2:2 (например, схемы 3:1).
Рекомбинация может происходить между последовательностями ДНК, которые не содержат гомологии последовательностей . Это может вызвать хромосомные транслокации , иногда приводящие к раку.
В-клетки иммунной системы выполняют генетическую рекомбинацию, называемую переключением класса иммуноглобулинов . Это биологический механизм, который изменяет антитело из одного класса в другой, например, из изотипа, называемого IgM, в изотип, называемый IgG .
В генной инженерии рекомбинация может также относиться к искусственной и преднамеренной рекомбинации разрозненных фрагментов ДНК, часто из разных организмов, создавая то, что называется рекомбинантной ДНК . Ярким примером такого использования генетической рекомбинации является нацеливание генов , которое может использоваться для добавления, удаления или иного изменения генов организма. Эта техника важна для биомедицинских исследователей , поскольку она позволяет им изучать эффекты определенных генов. Методы, основанные на генетической рекомбинации, также применяются в белковой инженерии для разработки новых белков, представляющих биологический интерес.
Примерами служат интеграция, опосредованная ферментами рестрикции , сборка Гибсона и клонирование Golden Gate .
Повреждения ДНК, вызванные различными экзогенными агентами (например, ультрафиолетовым светом , рентгеновскими лучами , химическими сшивающими агентами), могут быть восстановлены с помощью гомологичной рекомбинационной репарации (HRR). [9] [10] Эти результаты свидетельствуют о том, что повреждения ДНК, возникающие в результате естественных процессов , таких как воздействие активных форм кислорода, которые являются побочными продуктами нормального метаболизма, также восстанавливаются с помощью HRR. У людей дефицит генных продуктов, необходимых для HRR во время мейоза, вероятно, вызывает бесплодие [11] У людей дефицит генных продуктов, необходимых для HRR, таких как BRCA1 и BRCA2 , увеличивает риск рака (см. Расстройство, связанное с дефицитом репарации ДНК ).
У бактерий трансформация — это процесс переноса генов, который обычно происходит между отдельными клетками одного и того же вида бактерий. Трансформация включает интеграцию донорской ДНК в хромосому реципиента путем рекомбинации. Этот процесс, по-видимому, является адаптацией для восстановления повреждений ДНК в хромосоме реципиента с помощью HRR. [12] Трансформация может быть полезна для патогенных бактерий, позволяя восстанавливать повреждения ДНК, особенно повреждения, которые возникают в воспалительной, окислительной среде, связанной с инфекцией хозяина.
Когда два или более вируса, каждый из которых содержит летальные геномные повреждения, заражают одну и ту же клетку-хозяина, геномы вирусов часто могут образовывать пары друг с другом и подвергаться HRR для получения жизнеспособного потомства. Этот процесс, называемый реактивацией множественности, изучался на лямбда- и T4-бактериофагах [13] , а также на нескольких патогенных вирусах. В случае патогенных вирусов реактивация множественности может быть адаптивным преимуществом для вируса, поскольку она позволяет восстанавливать повреждения ДНК, вызванные воздействием окислительной среды, образующейся во время инфицирования хозяина. [12] См. также реассортация .
Молекулярная модель механизма мейотической рекомбинации, представленная Андерсоном и Секелски [14], представлена на первом рисунке в этой статье. Две из четырех хроматид, присутствующих на ранней стадии мейоза (профаза I), спарены друг с другом и способны взаимодействовать. Рекомбинация в этой модели инициируется двухцепочечным разрывом (или пробелом), показанным в молекуле ДНК (хроматиде) в верхней части рисунка. Другие типы повреждений ДНК также могут инициировать рекомбинацию. Например, межцепочечная поперечная сшивка (вызванная воздействием сшивающего агента, такого как митомицин С) может быть восстановлена с помощью HRR.
Производится два типа рекомбинантного продукта. Справа указан тип «кроссовера» (CO), где фланкирующие области хромосом обмениваются, а слева — тип «некроссовера» (NCO), где фланкирующие области не обмениваются. Тип рекомбинации CO включает промежуточное образование двух «соединений Холлидея», обозначенных в правом нижнем углу рисунка двумя X-образными структурами, в каждой из которых происходит обмен одиночными цепями между двумя участвующими хроматидами. Этот путь обозначен на рисунке как путь DHJ (двойное соединение Холлидея).
Рекомбинанты NCO (показаны слева на рисунке) производятся в процессе, называемом «синтез-зависимым отжигом цепи» (SDSA). События рекомбинации типа NCO/SDSA, по-видимому, более распространены, чем типа CO/DHJ. [15] Путь NCO/SDSA вносит небольшой вклад в генетическую изменчивость, поскольку плечи хромосом, фланкирующие событие рекомбинации, остаются в родительской конфигурации. Таким образом, объяснения адаптивной функции мейоза, которые фокусируются исключительно на кроссинговере, недостаточны для объяснения большинства событий рекомбинации.
Ахиазмия — это явление, при котором аутосомная рекомбинация полностью отсутствует у одного пола вида. Ахиазматическая хромосомная сегрегация хорошо документирована у самцов Drosophila melanogaster . «Правило Холдейна-Хаксли» гласит, что ахиазмия обычно возникает у гетерогаметного пола . [16]
Гетерохиазмия возникает, когда скорости рекомбинации различаются между полами одного вида. [16] У людей каждый ооцит имеет в среднем 41,6 ± 11,3 рекомбинаций, что в 1,63 раза больше, чем у сперматозоидов. Этот половой диморфный паттерн в скорости рекомбинации наблюдается у многих видов. У млекопитающих самки чаще всего имеют более высокие скорости рекомбинации. [17]
Многочисленные РНК-вирусы способны к генетической рекомбинации, когда в одной и той же клетке-хозяине присутствуют по крайней мере два вирусных генома . [18] [19] Рекомбинация в значительной степени отвечает за разнообразие РНК-вирусов и уклонение от иммунного ответа. [20] Рекомбинация РНК, по-видимому, является основной движущей силой в определении архитектуры генома и хода вирусной эволюции среди пикорнавирусов ( (+)ssRNA ) (например, полиовируса ). [21] У ретровирусов ((+)ssRNA) (например, ВИЧ ) повреждение в РНК-геноме, по-видимому, избегается во время обратной транскрипции путем переключения нитей, формы рекомбинации. [22] [23]
Рекомбинация также происходит у реовирусов (дцРНК) (например, реовирусов), ортомиксовирусов ((-)оцРНК) (например, вируса гриппа ) [23] и коронавирусов ((+)оцРНК) (например, SARS ). [24] [25]
Рекомбинация в РНК-вирусах, по-видимому, является адаптацией для преодоления повреждений генома. [18] Переключение между цепями шаблонов во время репликации генома, называемое рекомбинацией с выбором копии, изначально было предложено для объяснения положительной корреляции событий рекомбинации на коротких расстояниях в организмах с ДНК-геномом (см. первый рисунок, путь SDSA ). [26]
Рекомбинация может происходить нечасто между вирусами животных одного вида, но разных линий. Полученные рекомбинантные вирусы иногда могут вызывать вспышку инфекции у людей. [24]
Особенно в коронавирусах рекомбинация может происходить даже среди отдаленно родственных эволюционных групп (подродов) из-за их характерного механизма транскрипции, который включает субгеномные мРНК, образующиеся путем переключения шаблонов. [27] [25]
При репликации своего генома (+)ssRNA , РНК-зависимая РНК-полимераза полиовируса (RdRp) способна осуществлять рекомбинацию. Рекомбинация, по-видимому, происходит с помощью механизма выбора копирования, в котором RdRp переключает шаблоны (+)ssRNA во время синтеза отрицательной цепи. [28] Рекомбинация путем переключения цепи RdRp также происходит в (+)ssRNA растительных кармовирусах и томбусвирусах . [29]
Рекомбинация, по-видимому, является основной движущей силой в определении генетической изменчивости коронавирусов, а также способности видов коронавирусов переходить от одного хозяина к другому и, в редких случаях, в возникновении новых видов, хотя механизм рекомбинации неясен. [24]
В начале 2020 года во многих геномных последовательностях австралийских изолятов SARS-CoV-2 были обнаружены делеции или мутации (29742G>A или 29742G>U; «G19A» или «G19U») в s2m, что позволяет предположить, что в этом элементе РНК могла произойти рекомбинация РНК. 29742G («G19»), 29744G («G21») и 29751G («G28») были предсказаны как очаги рекомбинации. [30] В течение первых месяцев пандемии COVID-19 предполагалось, что такое событие рекомбинации стало критическим шагом в эволюции способности SARS-CoV-2 заражать людей. [31] Анализ неравновесия сцепления подтвердил, что рекомбинация РНК с мутацией 11083G > T также способствовала увеличению мутаций среди вирусного потомства. Результаты показывают, что мутация 11083G > T SARS-CoV-2 распространилась во время карантина на борту Diamond Princess и возникла в результате рекомбинации РНК de novo под давлением положительного отбора. У трех пациентов на круизе Diamond Princess две мутации, 29736G > T и 29751G > T (G13 и G28), были обнаружены в мотиве коронавируса 3′ stem-loop II (s2m) SARS-CoV-2. Хотя s2m считается мотивом РНК, высококонсервативным в 3'-нетранслируемой области среди многих видов коронавирусов, этот результат также предполагает, что s2m SARS-CoV-2 является горячей точкой рекомбинации/мутации РНК. [32]
На основании предварительных наблюдений выяснилось, что весь мотив связывания рецептора SARS-CoV-2 был введен посредством рекомбинации из коронавирусов панголинов . [33] Однако более полный анализ позже опроверг это предположение и показал, что SARS-CoV-2, вероятно, эволюционировал исключительно в пределах летучих мышей и с незначительной рекомбинацией или без нее. [34] [35]
Новак и Оцуки [36] отметили, что происхождение жизни ( абиогенез ) также является происхождением биологической эволюции . Они указали, что вся известная жизнь на Земле основана на биополимерах , и предположили, что любая теория происхождения жизни должна включать биологические полимеры, которые действуют как носители информации и катализаторы. Леман [37] утверждал, что рекомбинация была эволюционным развитием, таким же древним, как и происхождение жизни. Смейл и др. [38] предположили, что на изначальной Земле рекомбинация играла ключевую роль в расширении изначально коротких информационных полимеров (предположительно РНК ), которые были предшественниками жизни.
В этой статье использованы материалы из Science Primer, находящиеся в открытом доступе. NCBI . Архивировано из оригинала 2009-12-08.