Мембранный белок (М) (ранее называемый E1 , иногда также матричным белком [2] ) представляет собой интегральный мембранный белок , который является наиболее распространенным из четырех основных структурных белков, обнаруженных в коронавирусах . [3] [4] [5] Белок М организует сборку вирионов коронавируса посредством белок-белковых взаимодействий с другими молекулами белка М, а также с тремя другими структурными белками: белками оболочки (E), шипа (S) и нуклеокапсида (N). [4] [6] [7] [8]
Белок M является трансмембранным белком с тремя трансмембранными доменами и имеет длину около 230 аминокислотных остатков . [8] [9] У SARS-CoV-2 , возбудителя COVID-19 , белок M имеет длину 222 остатка. [10] Его мембранная топология ориентирует C-конец к цитозольной поверхности мембраны и, таким образом, во внутреннюю часть вириона. Он имеет короткий N-концевой сегмент и более крупный C-концевой домен. Хотя последовательность белка не очень хорошо сохраняется во всех группах коронавирусов, существует консервативная амфипатическая область вблизи C-конца третьего трансмембранного сегмента. [8] [9]
M функционирует как гомодимер . [4] [5] Исследования белка M в нескольких коронавирусах с помощью криоэлектронной микроскопии выявили две различные функциональные конформации белка , которые, как полагают, играют различную роль в формировании белок-белковых взаимодействий с другими структурными белками. [5] Белок M SARS-CoV-2 гомологичен прокариотическому белку-транспортеру сахара SemiSWEET. [11]
M — это гликопротеин , гликозилирование которого варьируется в зависимости от подгруппы коронавируса; N-связанное гликозилирование обычно встречается в альфа- и гамма -группах, тогда как O-связанное гликозилирование обычно встречается в бета- группе. [8] [9] Существуют некоторые исключения; например, в SARS-CoV , бета-коронавирусе , белок M имеет один сайт N-гликозилирования. [8] [6] Состояние гликозилирования, по-видимому, не оказывает измеримого влияния на рост вируса. [6] [9] [12] Никаких других посттрансляционных модификаций для белка M не описано. [4]
Ген , кодирующий белок M, расположен ближе к 3'-концу положительно-полярной РНК- геномы вируса , вместе с генами трех других структурных белков и различных вирус-специфических вспомогательных белков . [6] [8] M транслируется мембраносвязанными полисомами [6] для вставки в эндоплазматический ретикулум (ER) и транспортировки в промежуточный отсек эндоплазматический ретикулум-Гольджи (ERGIC), внутриклеточный отсек , который дает начало вирусной оболочке коронавируса , или в аппарат Гольджи . [8] [7] [6] Точная локализация зависит от конкретного вирусного белка. [13] Исследования субклеточной локализации белка M MERS-CoV обнаружили сигналы С-концевой последовательности, связанные с транспортировкой в аппарат Гольджи. [14]
Белок М является наиболее распространенным белком в вирионах коронавируса . [8] [5] [4] Он необходим для репликации вируса. [4]
Основная функция белка M — организация сборки новых вирионов. [4] Он участвует в установлении формы и морфологии вируса. Отдельные молекулы M взаимодействуют друг с другом, образуя вирусную оболочку [7] [9] [8] и могут быть способны исключать белки клетки-хозяина из вирусной мембраны. [5] Исследования белка M SARS-CoV показывают, что взаимодействия MM включают как N-, так и C-концы. [6] Коронавирусы умеренно плеоморфны , и конформационные вариации M, по-видимому, связаны с размером вириона. [5]
M образует белок-белковые взаимодействия со всеми тремя другими основными структурными белками. [4] [7] M необходим, но не достаточен для сборки вируса; M и белок E, экспрессируемые вместе, как сообщается, достаточны для образования вирусоподобных частиц , [7] хотя некоторые сообщения различаются в зависимости от экспериментальных условий и конкретного изучаемого вируса. [6] [13] В некоторых сообщениях M, по-видимому, способен вызывать искривление мембраны , [5] хотя другие сообщают, что одного M недостаточно для этого, и требуется E. [7] Хотя белок E не обязательно необходим , он, по-видимому, необходим для нормальной вирусной морфологии и может отвечать за установление искривления или инициирование вирусного почкования . [7] M также, по-видимому, играет функциональную роль на более поздних стадиях созревания вируса, секреции и почкования. [4]
Сообщается, что включение белка шипа (S), который необходим для сборки инфекционных вирионов, происходит посредством взаимодействий M и может зависеть от конкретных конформаций M. [5] [13] Сохраняющаяся амфипатическая область C-конца третьего трансмембранного сегмента важна для взаимодействий шипов. [13] Взаимодействия с M, по-видимому, необходимы для правильной субклеточной локализации S в месте почкования вируса. [12] M взаимодействует напрямую с белком нуклеокапсида (N), не требуя присутствия РНК . [6] Это взаимодействие, по-видимому, происходит в основном через C-концы обоих белков. [4]
Белок М в MERS-CoV , SARS-CoV и SARS-CoV-2 был описан как антагонист ответа на интерферон . [4] [17]
Белок М является иммуногенным и, как сообщается, является детерминантой гуморального иммунитета . [4] Были описаны реакции цитотоксических Т-клеток на М. [16] Антитела к эпитопам , обнаруженным в белке М, были обнаружены у пациентов, выздоровевших от тяжелого острого респираторного синдрома (ТОРС). [18]
Другие недавние исследования выявили, что мембранный белок SAS-COV-2 при обработке человеческих PBMC вызывает значительное увеличение провоспалительных медиаторов, таких как TNF и IL-6. [19] Также изучалось влияние экзогенного мембранного белка SARS-COV-2 на мышей. В этих исследованиях экзогенный мембранный белок, обработанный интраназально, вызвал значительное увеличение легочного воспаления у мышей, что привело к гистологическим изменениям в легких. [20]
Сообщалось, что человеческий коронавирус NL63 полагается на белок M, а также на белок S для опосредования взаимодействий с клеткой-хозяином, предшествующих проникновению вируса . Считается, что M связывает протеогликаны гепарансульфата, находящиеся на поверхности клетки. [21]
Исследование последовательностей SARS-CoV-2, собранных во время пандемии COVID-19, показало, что миссенс-мутации в гене M были относительно редки, и предполагало, что он находился под очищающим отбором . [22] Аналогичные результаты были описаны для более широких популяционных генетических анализов в более широком диапазоне родственных вирусов, обнаружив, что последовательности M и нескольких неструктурных белков в геноме коронавируса наиболее подвержены эволюционным ограничениям. [23]