stringtranslate.com

Пилус

Схематическое изображение бактериальной конъюгации. 1- Донорская клетка производит пилус. 2. Пилюс прикрепляется к клетке-реципиенту, объединяет две клетки. 3. Мобильная плазмида разрезается, а затем одна цепь ДНК переносится в клетку-реципиент. 4- Обе клетки рециркулируют свои плазмиды, синтезируют вторые нити и воспроизводят пили; обе клетки теперь являются жизнеспособными донорами.

Пилюс ( лат. « волосы»; мн.: пили ) — это волосоподобный придаток, обнаруженный на поверхности многих бактерий и архей . [1] Термины пилус и фимбрия (лат. «бахрома»; множественное число: фимбрии ) могут использоваться как взаимозаменяемые, хотя некоторые исследователи оставляют термин пилус для придатка, необходимого для бактериальной конъюгации . Все конъюгативные пили состоят в основном из пилинов – волокнистых белков , которые являются олигомерными .

На поверхности бактерий и архей могут существовать десятки таких структур. Некоторые бактерии, вирусы или бактериофаги прикрепляются к рецепторам пилей в начале репродуктивного цикла.

Пили антигенны . Они также хрупкие и постоянно заменяются пилями различного состава, что приводит к изменению антигенности. Специфические реакции хозяина на старые структуры пилей не эффективны для новой структуры. Рекомбинация между генами некоторых (но не всех) пилей кодирует вариабельные (V) и константные (C) области пилей (аналогично разнообразию иммуноглобулинов ). В качестве первичных антигенных детерминант, факторов вирулентности и факторов безнаказанности на клеточной поверхности ряда видов грамотрицательных и некоторых грамположительных бактерий, включая Enterobacteriaceae , Pseudomonadaceae и Neisseriaceae , большой интерес вызвало изучение пилей как органеллы адгезию и в качестве компонентов вакцин. Первое детальное исследование пилей было проведено Бринтоном и его коллегами, которые продемонстрировали существование двух различных фаз внутри одного бактериального штамма: пилей (p+) и непилейных) [2].

Типы по функциям

Разным типам пилей дано несколько названий в зависимости от их функции. Классификация не всегда пересекается со структурными или эволюционными типами, поскольку происходит конвергентная эволюция . [3]

Конъюгативные пили

Конъюгативные пили позволяют передавать ДНК между бактериями в процессе бактериальной конъюгации . Их иногда называют «секс-пили» по аналогии с половым размножением , поскольку они позволяют обмениваться генами посредством образования «брачных пар». Пожалуй, наиболее хорошо изученным является F-пилус Escherichia coli , кодируемый половым фактором F.

Escherichia coli подвергается конъюгации . Бактерии производят длинные внеклеточные придатки, называемые половыми пилями, которые соединяют две соседние клетки и служат физическим каналом для передачи ДНК. Адаптировано из [4]

Половой пилус обычно имеет диаметр от 6 до 7 нм . Во время конъюгации пилус, выходящий из бактерии-донора, захватывает бактерию-реципиент, притягивает ее к себе и в конечном итоге запускает образование мостика спаривания , который устанавливает прямой контакт и образование контролируемой поры, позволяющей перенести ДНК от донора к получатель. Обычно передаваемая ДНК состоит из генов, необходимых для создания и переноса пилей (часто закодированных на плазмиде ), и поэтому является своего рода эгоистичной ДНК ; однако часто передаются и другие фрагменты ДНК, и это может привести к распространению генетических признаков по всей бактериальной популяции, таких как устойчивость к антибиотикам . Соединение, установленное F-пилусом, чрезвычайно устойчиво механически и термохимически благодаря прочным свойствам F-пилуса, что обеспечивает успешный перенос генов в различных средах. [5] Не все бактерии могут образовывать конъюгативные пили, но конъюгация может происходить между бактериями разных видов. [6] [7]

Предлагаемые механизмы конъюгации между клетками донора и реципиента у архей (слева) и бактерий (справа). На схеме показано, как субстраты оцДНК генерируются механизмом HerA-NurA в донорских архейных клетках и кодируемой плазмидой релаксосомой в бактериях. Рисунок воспроизведен из [8].

Гипертермофильные археи кодируют пили, структурно сходные с бактериальными конъюгативными пилями. [8] Однако, в отличие от бактерий, где аппарат конъюгации обычно опосредует перенос мобильных генетических элементов, таких как плазмиды или транспозоны, у гипертермофильных архей используется конъюгативный аппарат, называемый Ced (кренархейная система обмена ДНК) [9] и Ted ( Thermoproteales (система обмена ДНК) [8] , по-видимому, отвечает за перенос клеточной ДНК между представителями одного и того же вида. Было высказано предположение, что у этих архей полностью приручен механизм конъюгации, способствующий репарации ДНК посредством гомологичной рекомбинации, а не распространения мобильных генетических элементов. [8]

Фимбрии

Кишечная палочка .

Фимбрия ( лат. «бахрома», мн.: fimbriae ) — это термин, обозначающий короткий пилус, который используется для прикрепления бактерии к поверхности, иногда также называемый «прикрепляющимся пилусом» [10] или адгезивным пилусом . Термин «фимбрии» может относиться ко многим различным (структурным) типам пилуса. Действительно, для адгезии использовалось много различных типов пилей, что является примером конвергентной эволюции . [3] Система Gene Ontology не рассматривает фимбрии как отдельный тип придатков, вместо этого использует общий тип пилуса (GO:0009289).

Диаметр этого придатка составляет от 3 до 10 нанометров, а длина может достигать нескольких микрометров. Фимбрии используются бактериями для прикрепления друг к другу, а также к клеткам животных и некоторым неодушевленным предметам. Бактерия может иметь до 1000 фимбрии. Фимбрии видны только при использовании электронного микроскопа . Они могут быть прямыми или гибкими.

Фимбрии обладают адгезинами , которые прикрепляют их к определенному субстрату, благодаря чему бактерии могут противостоять силам сдвига и получать питательные вещества. Например, E. coli использует их для прикрепления к маннозным рецепторам .

Некоторые аэробные бактерии образуют очень тонкий слой на поверхности бульонной культуры . Этот слой, называемый пелликулой, состоит из множества аэробных бактерий, которые прикрепляются к поверхности своими бахромками. Таким образом, фимбрии позволяют аэробным бактериям сохраняться как в бульоне, из которого они берут питательные вещества, так и вблизи воздуха.

Фимбрии необходимы для образования биопленки , поскольку они прикрепляют бактерии к поверхности хозяина для колонизации во время инфекции. Фимбрии либо располагаются у полюсов клетки, либо равномерно распределены по всей ее поверхности.

Этот термин также использовался в широком смысле для обозначения всех пилей теми, кто использует слово «пилус» конкретно для обозначения половых пилей. [11]

Типы по сборке системы или конструкции

Передача

Семейство Тра (переносное) включает все известные половые пили (по состоянию на 2010 год). Они связаны с системой секреции IV типа (T4SS). [3] Их можно разделить на F-подобный тип (после F-пилуса) и P-подобный тип. Как и их секреторные аналоги, пилюсы вводят материал, в данном случае ДНК, в другую клетку. [12]

Тип IV пили

Подвижность пилуса IV типа 1. Pre-PilA вырабатывается в цитоплазме и перемещается во внутреннюю мембрану. 2. Pre-PilA вводится во внутреннюю мембрану. 3. PilD, пептидаза , удаляет лидерную последовательность, тем самым делая Pre-PilA короче и превращая ее в PilA, основной белок-строительный блок пили. 4. PilF, NTP -связывающий белок, который обеспечивает энергию для сборки пилей IV типа. 5. Белок секретин PilQ, обнаруженный на внешней мембране клетки, необходим для развития/расширения пилуса. PilC — это первый белок, образующий пилус, который отвечает за общее прикрепление пилуса. 6. Как только пилус типа IV прикрепляется или взаимодействует с тем, что ему нужно, он начинает втягиваться. Это происходит, когда PilT начинает разрушать последние части PilA в пилусе. Механизм PilT очень похож на PilF. 7. Разложение пилуса на компоненты, которые будут использованы и снова синтезированы в PilA. [13]
Архитектурная модель машины Pilus Type IVa

Некоторые пили, называемые пилями IV типа (T4P), генерируют подвижные силы. [14] Внешние концы пилей прикрепляются к твердой подложке: либо к поверхности, к которой прикреплена бактерия, либо к другим бактериям. Затем, когда пили сокращаются, они тянут бактерию вперед, как крюк. Движения, производимые пилями IV типа, обычно резкие, поэтому их называют подергивающейся подвижностью , в отличие от других форм бактериальной подвижности, таких как подвижность жгутиков . Однако некоторые бактерии, например Myxococcus xanthus , обладают скользящей подвижностью . Бактериальные пили IV типа по структуре сходны с компонентными белками архей (архейных жгутиков), и оба относятся к системе секреции типа II (T2SS); [15] их объединяют в группу филаментных систем IV типа . Помимо архей, многие археи производят адгезивные пили 4-го типа, которые позволяют клеткам архей прикрепляться к различным субстратам. N-концевые альфа-спиральные части пилинов и архееллинов архейного типа 4 гомологичны соответствующим областям бактериального T4P; однако С-концевые домены, богатые бета-цепями, по-видимому, не связаны между собой у бактериальных и архейных пилинов. [16]

Генетическая трансформация — это процесс, посредством которого бактериальная клетка-реципиент поглощает ДНК из соседней клетки и интегрирует эту ДНК в свой геном путем гомологичной рекомбинации . У Neisseria meningitidis (также называемого менингококком) трансформация ДНК требует присутствия коротких последовательностей поглощения ДНК (DUS), которые представляют собой 9-10 мономеров, находящихся в кодирующих областях донорской ДНК. Специфическое распознавание DUS опосредовано пилином IV типа . [17] Пили меннингококка IV типа связываются с ДНК через минорный пилин ComP через электроположительную полоску, которая, как ожидается, будет обнажена на поверхности нити. ComP демонстрирует изысканные предпочтения привязки для выборочных DUS. Распределение DUS в геноме N. meningitides благоприятствует определенным генам, что позволяет предположить, что существует предвзятость в отношении генов, участвующих в поддержании и восстановлении генома. [18] [19]

Первоначально это семейство было идентифицировано как «бахромки IV типа» по их внешнему виду под микроскопом. Эта классификация сохранилась, поскольку соответствует кладе. [20] Было показано, что некоторые пилины архейного типа IV могут существовать в 4 различных конформациях, образуя два пилина с совершенно разной структурой. [21] Примечательно, что оба пили были произведены одним и тем же механизмом секреции. Однако то, какой из двух пилей образуется, по-видимому, зависит от условий роста, что позволяет предположить, что два пили функционально различны. [21]

Фимбрии 1 типа

Другой тип называется фимбриями 1 типа. [22] На «кончиках» они содержат адгезины FimH. Путь шаперон -ушер отвечает за перемещение многих типов фимбрий из клетки, включая фимбрии типа 1 [23] и P-фимбрии . [24]

Керли

На этом рисунке изображена адгезия фимбрий. В этом процессе бахромки бактериальной клетки (справа) прикрепляются к специфическим белкам, называемым рецепторами, расположенным на внешней мембране клетки-хозяина (слева). Они делают это за счет специфического взаимодействия между рецепторами клетки-хозяина и идеально подобранными адгезиями, обнаруженными на фимбриях бактерий. Этот процесс присоединения бактерий к клетке-хозяину может привести к колонизации этой клетки-хозяина по мере того, как вокруг нее собирается все больше и больше бактерий, и является неотъемлемой частью дальнейшего выживания бактерий, позволяя им инфицировать ткани и целые органы. [25]

«Грам-отрицательные бактерии собирают функциональные амилоидные поверхностные волокна, называемые курли ». [26] Курли представляют собой разновидность фимбрий. [22] Керли состоят из белков, называемых керлинами. [26] Некоторые из задействованных генов: CsgA , CsgB , CsgC , CsgD , CsgE , CsgF и CsgG . [26]

Вирулентность

Пили ответственны за вирулентность патогенных штаммов многих бактерий, включая кишечную палочку , холерный вибрион и многие штаммы стрептококков . [27] [28] Это связано с тем, что наличие пилей значительно увеличивает способность бактерий связываться с тканями организма, что затем увеличивает скорость репликации и способность взаимодействовать с организмом-хозяином. [27] Если у вида бактерий есть несколько штаммов, но только некоторые из них являются патогенными, вполне вероятно, что патогенные штаммы будут иметь пили, а непатогенные штаммы - нет. [29] [30]

Развитие прикрепленных пилей может затем привести к развитию дальнейших признаков вирулентности. Фимбрии являются одним из основных механизмов вирулентности бактерий E. coli , Bordetella pertussis , стафилококков и стрептококков . Их присутствие значительно увеличивает способность бактерий прикрепляться к хозяину и вызывать заболевание. [31] Непатогенные штаммы V. cholerae впервые развили пили, что позволило им связываться с тканями человека и образовывать микроколонии . [27] [30] Эти пили затем служили сайтами связывания для лизогенного бактериофага , который несет болезнетворный токсин . [27] [30] Ген этого токсина, однажды включенный в геном бактерии, экспрессируется, когда экспрессируется ген, кодирующий пилус (отсюда и название «пилус, опосредованный токсином»). [27]

Смотрите также

Рекомендации

  1. ^ «пилус» в Медицинском словаре Дорланда.
  2. ^ Бринтон, Чарльз (1954). «Исследование электрофореза и чувствительности к фагам варианта бактерии E. coli, продуцирующего нити». Биохимика и биофизика Acta . 15 (4): 533–542. дои : 10.1016/0006-3002(54)90011-6. ПМИД  13230101.
  3. ^ abcd Шагно, C; Зоргани, Массачусетс; Астрюк, Т; Дево, М. (14 октября 2013 г.). «Белковые детерминанты поверхностной колонизации бактерий: бактериальная адгезия и образование биопленок с точки зрения секреции белка». Границы микробиологии . 4 : 303. дои : 10.3389/fmicb.2013.00303 . ПМК 3796261 . ПМИД  24133488. 
  4. ^ «Кишечные бактерии используют суперполимеры, чтобы уклониться от антибиотиков | Imperial News | Имперский колледж Лондона» . Имперские новости .
  5. ^ Патковски, Йонаш Б.; Дальберг, Тобиас; Амин, Химани; Галот, Дхармендер К.; Виджайраджратнам, Сухитасри; Фогель, Джозеф П.; Фрэнсис, Мэтью С.; Бейкер, Джозеф Л.; Андерссон, Магнус; Коста, Тьяго РД (5 апреля 2023 г.). «Биомеханическая адаптируемость F-pilus ускоряет конъюгативное распространение устойчивости к противомикробным препаратам и образование биопленок». Природные коммуникации . 14 (1): 1879. doi : 10.1038/s41467-023-37600-y. ПМЦ 10076315 . ПМИД  37019921. 
  6. ^ Петижан, Мари; Кондамин, Бенедикт; Бурде, Чарльз; Денамур, Эрик; Руппе, Этьен (2021). «Типовой барьер и внутривидовая филогения Escherichia coli способствуют приобретению генов устойчивости к антибиотикам». Микробная геномика . 7 (8): 000489. doi : 10.1099/mgen.0.000489 . ISSN  2057-5858. ПМЦ 8549366 . ПМИД  34435947. 
  7. ^ Гшвинд, Реми; Петижан, Мари; Фурнье, Клодин; Лао, Джули; Клермон, Оливье; Нордманн, Патрис; Мельманн, Александр; Денамур, Эрик; Пуарель, Лоран; Руппе, Этьен (3 апреля 2024 г.). Улеманн, Анн-Катрин (ред.). «Межтиповая циркуляция гена, кодирующего бета-лактамазу: редкое, но наблюдаемое событие». Антимикробные средства и химиотерапия . 68 (4): e0145923. дои : 10.1128/aac.01459-23. ISSN  0066-4804. ПМЦ 10989005 . ПМИД  38441061. 
  8. ^ abcd Бельтран, Летисия К.; Цвиркайте-Крупович, Вирджиния; Миллер, Джессалин; Ван, Фэнбинь; Крейцбергер, Марк AB; Патковски, Йонаш Б.; Коста, Тьяго Р.Д.; Схоутен, Стефан; Левенталь, Илья; Контичелло, Винсент П.; Эгельман, Эдвард Х.; Крупович, Март (07 февраля 2023 г.). «Аппарат для импорта ДНК архей гомологичен аппарату бактериальной конъюгации». Природные коммуникации . 14 (1): 666. Бибкод : 2023NatCo..14..666B. дои : 10.1038/s41467-023-36349-8. ISSN  2041-1723. ПМЦ 9905601 . ПМИД  36750723. 
  9. ^ ван Вольферен, Марлен; Вагнер, Александр; ван дер Дос, Крис; Альберс, Соня-Верена (01 марта 2016 г.). «Архейная система Ced импортирует ДНК». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 113 (9): 2496–2501. Бибкод : 2016PNAS..113.2496V. дои : 10.1073/pnas.1513740113 . ISSN  1091-6490. ПМЦ 4780597 . ПМИД  26884154. 
  10. ^ Профт, Т.; Бейкер, EN (февраль 2009 г.). «Пили у грамотрицательных и грамположительных бактерий - строение, сборка и их роль в заболевании». Клеточные и молекулярные науки о жизни . 66 (4): 613–635. дои : 10.1007/s00018-008-8477-4 . ПМЦ 11131518 . PMID  18953686. S2CID  860681. 
  11. ^ Оттоу, JC (1975). «Экология, физиология и генетика бахромок и пилей». Ежегодный обзор микробиологии . 29 : 79–108. дои : 10.1146/annurev.mi.29.100175.000455. ПМИД  1180526.
  12. ^ Филлу, А. (июль 2010 г.). «Разновидность бактериальных пилей, участвующих в горизонтальном переносе генов». Журнал бактериологии . 192 (13): 3243–5. дои : 10.1128/JB.00424-10. ПМЦ 2897649 . ПМИД  20418394. 
  13. ^ Джоан, Слончевски (2017). Микробиология: развивающаяся наука . Фостер, Джон Уоткинс (Четвертое изд.). Нью-Йорк: WW Norton & Company. стр. 1000–1002. ISBN 9780393614039. ОКЛК  951925510.
  14. ^ Мэттик Дж.С. (2002). «Пили IV типа и подергивания моторики». Анну. Преподобный Микробиол . 56 (1): 289–314. doi : 10.1146/annurev.micro.56.012302.160938. ПМИД  12142488.
  15. ^ Джаррелл; и другие. (2009). «Археальные жгутики и пили». Пили и жгутики: текущие исследования и будущие тенденции . Кайстер Академик Пресс. ISBN 978-1-904455-48-6.
  16. ^ Ван, Ф; Цвиркайте-Крупович, В; Крейцбергер, МАБ; Су, З; де Оливейра, GAP; Осинский, Т; Шерман, Н; ДиМайо, Ф; Уолл, Дж. С.; Прангишвили, Д; Крупович, М; Эгельман, Э.Х. (2019). «Обильно гликозилированный пилус архей выживает в экстремальных условиях». Природная микробиология . 4 (8): 1401–1410. дои : 10.1038/s41564-019-0458-x. ПМК 6656605 . ПМИД  31110358. 
  17. ^ Чеховин А., Симпсон П.Дж., Макдауэлл М.А., Браун Д.Р., Ношезе Р., Паллетт М., Брэди Дж., Болдуин Г.С., Леа С.М., Мэтьюз С.Дж., Пеличич В. (2013). «Специфическое распознавание ДНК, опосредованное пилином IV типа». Учеб. Натл. акад. наук. США . 110 (8): 3065–70. Бибкод : 2013PNAS..110.3065C. дои : 10.1073/pnas.1218832110 . ПМК 3581936 . ПМИД  23386723. 
  18. ^ Дэвидсен Т., Родланд Э.А., Лагесен К., Сиберг Э., Рогнес Т., Тоньюм Т. (2004). «Смещенное распределение последовательностей поглощения ДНК в отношении генов поддержания генома». Нуклеиновые кислоты Рез . 32 (3): 1050–8. дои : 10.1093/nar/gkh255. ПМЦ 373393 . ПМИД  14960717. 
  19. ^ Каугант Д.А., Maiden MC (2009). «Менингококковое носительство и болезни - популяционная биология и эволюция». Вакцина . 27 Приложение 2 (4): B64–70. doi :10.1016/j.vaccine.2009.04.061. ПМЦ 2719693 . ПМИД  19464092. 
  20. ^ Нуччо С.П. и др. (2007). «Эволюция пути сборки шаперона / помощника: фимбриальная классификация идет по-гречески». Обзоры микробиологии и молекулярной биологии . 71 (4): 551–575. дои : 10.1128/MMBR.00014-07. ПМК 2168650 . ПМИД  18063717. 
  21. ^ Аб Лю, Дж; Истеп, GN; Цвиркайте-Крупович, В; Рич-Нью, Северная Каролина; Крейцбергер, МАБ; Эгельман, Э.Х.; Крупович, М; Ван, Ф (2024). «Две различные структуры пилей архейного типа IV, образованные белками с идентичной последовательностью». Природные коммуникации . 15 (1): 5049. doi : 10.1038/s41467-024-45062-z. ПМЦ 11178852 . ПМИД  38877064. 
  22. ^ Аб Куксон, Алабама; Кули, Вашингтон; Вудворд, MJ (2002), «Роль типа 1 и завитковых бахромок Escherichia coli, продуцирующих шига-токсин, в прилипании к абиотическим поверхностям», Int J Med Microbiol , 292 (3–4): 195–205, doi : 10.1078/ 1438-4221-00203, ПМИД  12398210.
  23. ^ Коленда, Рафаль; Угорский, Мацей; Гжимайло, Кшиштоф (14 мая 2019 г.). «Все, что вы всегда хотели знать о фимбриях сальмонеллы типа 1, но боялись спросить». Границы микробиологии . 10 :1017. дои : 10.3389/fmicb.2019.01017 . ПМК 6527747 . ПМИД  31139165. 
  24. ^ Райс Дж.К., Пэн Т., Спенс Дж.С., штаб-квартира Ванга, Голдблюм Р.М., Кортези Б., Новицкий Б.Дж. (декабрь 2005 г.). «Пиелонефритическая Escherichia coli, экспрессирующая P-фимбрии, снижает иммунный ответ почек мыши». Журнал Американского общества нефрологов . 16 (12): 3583–91. дои : 10.1681/ASN.2005030243 . ПМИД  16236807.
  25. ^ Висконсин, Кеннет Тодар, Мэдисон. «Колонизация и вторжение бактериальных патогенов». www.textbookofbacteriology.net . Проверено 3 декабря 2016 г.{{cite web}}: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )
  26. ^ abc Эпштейн, Э.А.; Рейзиан, Массачусетс; Чепмен, М.Р. (2009), «Пространственная кластеризация липопротеина, секретирующего курлин, требует сборки волокон курли». J Bacteriol , 191 (2): 608–615, номер документа : 10.1128/JB.01244-08, PMC 2620823 , PMID  19011034. 
  27. ^ abcde Крейг, Лиза; Тейлор, Рональд (2014). «Глава 1: Пилус, регулируемый токсином холерного вибриона: структура, сборка и функции, имеющие значение для разработки вакцин». В Барокки, Мишель; Телфорд, Джон (ред.). Бактериальные пили: структура, синтез и роль в заболевании . КАБ Интернешнл. стр. 1–16. ISBN 978-1-78064-255-0.
  28. ^ Ринаудо, Даниэла; Москиони, Моника (2014). «Глава 13: Разработка вакцины против стрептококков на основе пилуса: изменчивость, разнообразие и иммунологический ответ». В Барокки, Мишель; Телфорд, Джон (ред.). Бактериальные пили: структура, синтез и роль в заболевании . КАБ Интернешнл. стр. 182–202. ISBN 978-1-78064-255-0.
  29. ^ Тодар, Кеннет. «Учебник бактериологии: структура бактерий в связи с патогенностью». Учебник бактериологии . Проверено 24 ноября 2017 г.
  30. ^ abc Джорджиаду, Микаэлла; Пеличич, Владимир (2014). «Глава 5: Пили IV типа: функции и биогенез». В Барокки, Мишель; Телфорд, Джон (ред.). Бактериальные пили: структура, синтез и роль в заболевании . КАБ Интернешнл. стр. 71–84. ISBN 978-1-78064-255-0.
  31. ^ Коннелл I, Агаче В., Клемм П., Шембри М., Мэрилд С., Сванборг С. (сентябрь 1996 г.). «Экспрессия фимбрионов типа 1 повышает вирулентность Escherichia coli для мочевыводящих путей». Учеб. Натл. акад. наук. США . 93 (18): 9827–32. Бибкод : 1996PNAS...93.9827C. дои : 10.1073/pnas.93.18.9827 . ПМК 38514 . ПМИД  8790416. 

Внешние ссылки