stringtranslate.com

Машинная перфузия

Машинная перфузия (МП) — это искусственная техника перфузии , часто используемая для сохранения органов, чтобы облегчить трансплантацию органов . МП работает путем непрерывной прокачки специализированного раствора через донорские органы , имитируя естественный кровоток организма , при этом активно контролируя температуру , уровень кислорода , химический состав и механическое напряжение внутри органа. Поддерживая жизнеспособность органа вне тела в течение длительного времени, машинная перфузия решает критические проблемы при трансплантации органов, такие как ограниченное время сохранения. [1] [2] [3]

Машинная перфузия имеет различные формы и может быть классифицирована в зависимости от температуры перфузата: холодная (4 °C) и теплая (37 °C). [4] Машинная перфузия применялась при трансплантации почек , [5] трансплантации печени [6] и трансплантации легких . [7] Это альтернатива статическому холодовому хранению (SCS).

Исследования и разработки

В 2022 году было сообщено о рекордно длительном сохранении органов для трансплантации человека с помощью машинной перфузии печени в течение 3 дней вместо обычных <12 часов. Возможно, этот срок можно продлить до 10 дней и предотвратить существенное повреждение клеток с помощью методов низкотемпературной консервации. [8] [9] Альтернативные подходы включают новые криопротекторные растворители. [10] [11]

В настоящее время разрабатывается новая система перфузии органов, которая может восстанавливать, например, на клеточном уровне, несколько жизненно важных (свиных) органов через час после смерти (во время которой у тела была длительная тепловая ишемия ), [12] [13] и аналогичный метод/система для оживления (свиного) мозга через несколько часов после смерти. [12] [14] Система для клеточного восстановления может быть использована для сохранения донорских органов или для реанимационных процедур в чрезвычайных медицинских ситуациях. [12]

История методов сохранения почек

Схема нормотермической регионарной перфузии органов брюшной полости при подготовке к трансплантации

Существенным предварительным шагом к развитию хранения и трансплантации почек стала работа Алексиса Карреля по разработке методов сосудистого анастомоза . [15] Каррель продолжил описывать первые пересадки почек, которые были выполнены на собаках в 1902 году; Ульман [16] независимо описал похожие эксперименты в том же году. В этих экспериментах почки пересаживались без какой-либо попытки хранения.

Решающим шагом в обеспечении возможности хранения почек in vitro стала демонстрация Фурманом в 1943 году [17] обратимого эффекта гипотермии на метаболические процессы изолированных тканей. До этого почки хранились при нормальной температуре тела с использованием крови или разбавленных перфузатов крови [18] [19] , но успешных реимплантаций не проводилось. Фурман показал, что срезы коркового вещества и мозга почек крыс выдерживали охлаждение до 0,2 °C в течение одного часа, при этой температуре потребление кислорода у них было минимальным. Когда срезы нагревали до 37 °C, их потребление кислорода восстанавливалось до нормы.

Благотворное влияние гипотермии на ишемические неповрежденные почки было продемонстрировано Оуэнсом в 1955 году [20], когда он показал, что если собак охлаждали до 23-26 °C, а их грудные аорты были перекрыты в течение 2 часов, их почки не показывали видимых повреждений, когда собак снова согревали. Этот защитный эффект гипотермии на ишемическое повреждение почек был подтвержден Богардусом [21], который показал защитный эффект поверхностного охлаждения почек собак, почечные ножки которых были пережаты in situ в течение 2 часов. Мойер [22] продемонстрировал применимость этих экспериментов на собаках к человеку, показав одинаковый эффект на функцию почек собак и людей от тех же периодов гипотермической ишемии.

Только в 1958 году было показано, что неповрежденные почки собак переживут ишемию даже лучше, если их охладить до более низких температур. Штюбер [23] показал, что почки переживут пережатие почечной ножки in situ в течение 6 часов, если почки охладить до 0-5 °C, поместив их в охлаждающую рубашку, а Шлёрб [24] показал, что аналогичная техника с охлаждением гепаринизированных почек собак до 2-4 °C обеспечивает защиту в течение 8 часов, но не 12 часов. Шлёрб также попытался провести хранение in vitro и аутотрансплантацию охлажденных почек и имел одного долгоживущего после 4-часового хранения почки с последующей реимплантацией и немедленной контралатеральной нефрэктомией . У него также был почти выживший после 24-часового хранения почки и отсроченной контралатеральной нефрэктомии у собаки, у которой развился поздний артериальный тромбоз в почке.

Эти методы поверхностного охлаждения были улучшены введением методов, при которых сосудистая система почки промывалась холодной жидкостью перед хранением. Это имело эффект увеличения скорости охлаждения почки и удаления эритроцитов из сосудистой системы. Кисер [25] использовал эту технику для достижения успешного 7-часового хранения in vitro почки собаки, когда почка была промыта при 5 °C смесью декстрана и разбавленной крови перед хранением. В 1960 году Лапчинский [26] подтвердил, что подобные периоды хранения возможны, когда он сообщил о восьми собаках, выживших после того, как их почки хранились при 2-4 °C в течение 28 часов, за которыми последовала аутотрансплантация и отсроченная контралатеральная нефрэктомия. Хотя Лапчинский не привел никаких подробностей в своей статье, Хамфрис [27] сообщил, что эти эксперименты включали охлаждение почек в течение 1 часа холодной кровью, а затем хранение при температуре 2-4 °C, после чего следовало повторное нагревание почек в течение 1 часа теплой кровью во время реимплантации. Контралатеральные нефрэктомии были отложены на два месяца.

Хамфрис [27] разработал эту технику хранения, непрерывно перфузируя почку в течение всего периода хранения. Он использовал разбавленную плазму или сыворотку в качестве перфузата и указал на необходимость низкого давления перфузата для предотвращения отека почки, но признал, что оптимальные значения для таких переменных, как температура перфузата, Po2 и поток, остаются неизвестными. Его лучшими результатами на тот момент были 2 собаки, которые выжили после того, как их почки хранились в течение 24 часов при температуре 4-10 °C с последующей аутотрансплантацией и отсроченной контралатеральной нефрэктомией несколько недель спустя.

Calne [28] оспорил необходимость использования методов непрерывной перфузии, продемонстрировав, что успешное 12-часовое сохранение может быть достигнуто с использованием гораздо более простых методов. У Calne была одна почка, поддерживающая жизнь, даже когда контралатеральная нефрэктомия была выполнена одновременно с операцией по реимплантации. Calne просто гепаринизировал почки собак, а затем хранил их в ледяном растворе при температуре 4 °C. Хотя в одном эксперименте было показано, что 17-часовое сохранение возможно, когда нефрэктомия была отложена, никакого успеха не было достигнуто при 24-часовом хранении.

Следующий шаг вперед был сделан Хамфрисом [29] в 1964 году, когда он модифицировал перфузат, используемый в его оригинальной системе непрерывной перфузии, и получил почку собаки, способную поддерживать жизнь после 24-часового хранения, даже если была выполнена немедленная контралатеральная нефрэктомия одновременно с реимплантацией. В этих экспериментах в качестве перфузата использовалась аутогенная кровь, разбавленная на 50% раствором Tis-U-Sol при 10 °C. Давление перфузата составляло 40 мм рт. ст., а pH перфузата — 7,11–7,35 (при 37 °C). Для оксигенации использовалось мембранное легкое, чтобы избежать повреждения крови.

В попытке улучшить эти результаты Манакс [30] исследовал влияние гипербарического кислорода и обнаружил, что успешное 48-часовое хранение почек собак было возможно при 2 °C без использования непрерывной перфузии, когда почки промывались раствором декстрана /Tis-U-Sol перед хранением при давлении 7,9 атмосфер, и если контралатеральная нефрэктомия была отложена до 2–4 недель после реимплантации. Манакс предположил, что гипербарический кислород может работать либо путем ингибирования метаболизма , либо путем содействия диффузии кислорода в клетки почек, но он не сообщил о контрольных экспериментах, чтобы определить, были ли другие аспекты его модели более важными, чем гипербария.

Заметное улучшение сроков хранения было достигнуто Белзером в 1967 году [31] , когда он сообщил об успешном 72-часовом хранении почек после возвращения к использованию непрерывной перфузии с использованием перфузата на основе плазмы собак при температуре 8-12 °C. Белзер [32] обнаружил, что решающим фактором, позволяющим проводить неосложненную 72-часовую перфузию, была криопреципитация плазмы, используемой в перфузате, для уменьшения количества нестабильных липопротеинов , которые в противном случае выпадали из раствора и постепенно закупоривали сосудистую систему почки. Мембранный оксигенатор также использовался в системе в дальнейшей попытке предотвратить денатурацию липопротеинов , поскольку только 35% липопротеинов удалялись криопреципитацией. Перфузат состоял из 1 литра плазмы собаки, 4 мЭкв сульфата магния , 250 мл декстрозы , 80 единиц инсулина , 200 000 единиц пенициллина и 100 мг гидрокортизона . Помимо криопреципитации , перфузат был предварительно профильтрован через фильтр 0,22 микрона непосредственно перед использованием. Белзер использовал pH перфузата 7,4-7,5, Po2 150-190 мм рт. ст. и систолическое давление перфузата 50-80 мм рт. ст. в машине, которая производила пульсирующий поток перфузата. Используя эту систему, Белзер добился того, что 6 собак выжили после того , как их почки хранились в течение 72 часов, а затем были реимплантированы, с немедленными контралатеральными нефрэктомиями во время операций по реимплантации.

Использование Белзером гидрокортизона в качестве вспомогательного средства для консервации было предложено работой Лотке с ломтиками почек собак [33] , в которой гидрокортизон улучшил способность ломтиков выделять ПАУ и кислород после 30-часового хранения при температуре 2-4 °C; Лотке предположил, что гидрокортизон может действовать как стабилизатор лизосомальной мембраны в этих экспериментах. Другие компоненты модели Белзера были получены эмпирическим путем. Инсулин и магний частично использовались в попытке вызвать искусственную гибернацию , поскольку Суомалайнен [34] обнаружил, что этот режим эффективен для индуцирования гибернации у естественных гибернантов. Магний также был предоставлен в качестве метаболического ингибитора после демонстрации Камиямой [35] , что он является эффективным средством для консервации сердца собак. Еще одним обоснованием для магния было то, что он был необходим для замены кальция, который был связан цитратом в плазме .

Белзер [36] продемонстрировал применимость своих экспериментов на собаках к хранению человеческих почек, когда он сообщил о своем опыте трансплантации человеческих почек с использованием тех же методов хранения, которые он использовал для почек собак. Он мог хранить почки до 50 часов, и только 8% пациентов нуждались в послеоперационном диализе, когда донор был хорошо подготовлен.

В 1968 году Хамфрис [37] сообщил об 1 выжившей из 14 собак после 5-дневного хранения их почек в перфузионном аппарате при температуре 10 °C с использованием разбавленной плазменной среды, содержащей дополнительные жирные кислоты. Однако в этих экспериментах для достижения успеха потребовалась отсроченная контралатеральная нефрэктомия через 4 недели после реимплантации, и это указывало на то, что почки были серьезно повреждены во время хранения.

В 1969 году Коллинз [38] сообщил об улучшении результатов, которых можно было достичь с помощью простых неперфузионных методов гипотермического хранения почек. Он основал свою технику на наблюдении Келлера [39] , что потерю электролитов из почки во время хранения можно предотвратить, используя жидкость для хранения, содержащую катионы в количествах, приближающихся к тем, которые обычно присутствуют в клетках. В модели Коллинза собаки были хорошо гидратированы перед нефрэктомией, а также им давали маннитол для стимуляции диуреза . Феноксибензамин, вазодилататор и стабилизатор лизосомальных ферментов, [40] [41] вводили в почечную артерию перед нефрэктомией. Почки погружали в физиологический раствор сразу после удаления и перфузировали через почечную артерию 100-150 мл холодного раствора электролитов с высоты 100 см. Почки оставались в ледяном физиологическом растворе в течение всего оставшегося периода хранения. Раствор, используемый для этих успешных холодовых перфузий, имитировал электролитный состав внутриклеточных жидкостей, содержа большое количество калия и магния. Раствор также содержал глюкозу, гепарин, прокаин и феноксибензамин. pH раствора был 7,0 при 25 °C. Коллинзу удалось добиться успешного 24-часового хранения 6 почек и 30-часового хранения 3 почек, при этом почки функционировали сразу после реимплантации, несмотря на немедленную контралатеральную нефрэктомию. Коллинз подчеркнул плохие результаты, полученные при промывании раствором Рингера, найдя схожие результаты при таком лечении по сравнению с почками, обработанными только поверхностным охлаждением. Лю [42] сообщил, что раствор Коллинза мог обеспечить успешное 48-часовое хранение, когда раствор был модифицирован путем включения аминокислот и витаминов. Однако Лю не проводил контрольных экспериментов, чтобы показать, что эти модификации имели решающее значение.

Другие исследователи обнаружили трудности при повторении успешных экспериментов Белзера по хранению перфузии в течение 72 часов. Вудс [43] смог добиться успешного 48-часового хранения 3 из 6 почек, когда он использовал добавки Белзера с криопреципитированной плазмой в качестве перфузата в гипотермической перфузионной системе, но он не смог продлить время хранения до 72 часов, как это сделал Белзер. Однако Вудс [44] позже добился успешного 3- и 7-дневного хранения почек собак. Вудс модифицировал перфузат Белзера, добавив 250 мг метилпреднизолона, увеличил содержание сульфата магния до 16,2 мЭкв и инсулина до 320 единиц. Шесть из 6 почек продемонстрировали функцию поддержания жизни, когда их реимплантировали после 72-часового хранения, несмотря на немедленную контралатеральную нефрэктомию; 1 из 2 почек воспроизводила функцию поддержания жизни после 96 часов хранения, 1 из 2 после 120 часов хранения и 1 из 2 после 168 часов хранения. Давление перфузата составляло 60 мм рт. ст. при скорости перфузатного насоса 70 ударов в минуту, а pH перфузата автоматически поддерживался на уровне 7,4 с помощью титратора CO2 . Вудс подчеркнул важность гидратации донорских и реципиентных животных. Вудс обнаружил, что без метилпреднизолона хрупкость сосудов становится проблемой, когда время хранения превышает 48 часов.

Значительное упрощение методов хранения гипотермической перфузии было сделано Джонсоном [45] и Клаесом в 1972 году [46] с введением перфузата на основе альбумина. Этот перфузат устранил необходимость в производстве криопреципитированной и профильтрованной через миллипоры плазмы, используемой Белзером. Приготовление этого перфузата было трудоемким и отнимало много времени, и существовал потенциальный риск от вируса гепатита и цитотоксических антител. Отсутствие липопротеинов в перфузате означало, что мембранный оксигенатор можно было исключить из перфузионного контура, поскольку не было необходимости избегать интерфейса перфузат/воздух для предотвращения осаждения липопротеинов. Оба работника использовали те же добавки, которые рекомендовал Белзер.

Раствор, который использовал Джонсон, был приготовлен Лабораторией продуктов крови (Элстри: Англия) путем извлечения термолабильного фибриногена и гамма-глобулинов из плазмы для получения раствора фракции плазменного белка (PPF). Раствор инкубировали при температуре 60 °C в течение 10 часов для инактивации агента сывороточного гепатита. [47] Результатом был 45 г/л раствора человеческого альбумина, содержащего небольшие количества гамма- и бета-глобулинов, который был стабилен при температуре от 0 °C до 30 °C в течение 5 лет. [48] PPF содержал 2,2 ммоль/л свободных жирных кислот. [49]

Эксперименты Джонсона [45] в основном касались хранения почек, поврежденных длительной тепловой травмой. Однако в контрольной группе нетепловых травмированных почек собак Джонсон показал, что 24-часовое сохранение легко достигалось при использовании перфузата PPF, и в другом месте [50] он описал выжившего после 72-часовой перфузии и реимплантации с немедленной контралатеральной нефрэктомией. При теплых травмированных почках перфузия PPF дала лучшие результаты, чем метод Коллинза, при этом 6 из 6 собак выжили после 40-минутной тепловой травмы и 24-часового хранения с последующей реимплантацией почек и немедленной контралатеральной нефрэктомией. Калий, магний, инсулин, глюкоза, гидрокортизон и ампициллин были добавлены в раствор PPF для обеспечения источника энергии и предотвращения утечки внутриклеточного калия. Температура перфузата составляла 6 °C, давление 40–80 мм рт. ст. и Po2 200–400 мм рт. ст. Уровень pH поддерживался в пределах от 7,2 до 7,4.

Клаес [46] использовал перфузат на основе человеческого альбумина (Kabi: Швеция), разбавленный физиологическим раствором до концентрации 45 г/л. Клаес сохранил 4 из 5 почек собак в течение 96 часов, причем почки функционировали сразу после реимплантации, несмотря на немедленную контралатеральную нефрэктомию. Клаес также сравнил этот перфузат с криопреципитированной плазмой Белцера в контрольной группе и не обнаружил существенной разницы между функцией реимплантированных почек в двух группах.

Единственной другой группой, помимо Вудса, которая сообщила об успешном семидневном хранении почек, были Лю и Хамфрис [51] в 1973 году. У них выжили три из семи собак после того, как их почки хранились в течение семи дней, после чего была проведена реимплантация и немедленная контралатеральная нефрэктомия. Их лучшая собака имела пиковый креатинин после реимплантации 50 мг/л (0,44 ммоль/л). Лю использовал хорошо гидратированных собак, прошедших маннитоловый диурез, и хранил почки при температуре 9 °C - 10 °C, используя перфузат, полученный из человеческого PPF. PPF был далее фракционирован с использованием высокорастворимого в воде полимера (Pluronic F-38), а ацетилтриптофанат натрия и каприлат натрия были добавлены к PPF в качестве стабилизаторов для обеспечения пастеризации. К этому раствору добавляли человеческий альбумин, гепарин, маннитол, глюкозу, сульфат магния, хлорид калия, инсулин, метилпреднизолон, карбенициллин и воду для регулировки осмоляльности до 300-310  мосмоль /кг. Перфузат меняли после 3,5 дней хранения. Давление перфузата составляло 60 мм рт. ст. или менее при скорости насоса 60 в минуту. pH перфузата составлял 7,12–7,32 (при 37 °C), Pco2 27–47 мм рт. ст. и Po2 173–219 мм рт. ст. В дальнейшем отчете по этому исследованию Хамфрис [52] обнаружил, что при повторении экспериментов с новой партией ППФ выживших не было получено, а гистология выживших из исходного эксперимента показала гломерулярную гиперцеллюлярность, которую он приписал возможному токсическому эффекту полимера Pluronic.

Джойс и Проктор [53] сообщили об успешном использовании простого перфузата на основе декстрана для 72-часового хранения почек собак. 10 из 17 почек были жизнеспособны после реимплантации и немедленной контралатеральной нефрэктомии. Джойс использовал непульсирующую перфузию при 4 °C с перфузатом, содержащим Декстран 70 (Pharmacia) 2,1% с дополнительными электролитами, глюкозой (19,5 г/л), прокаином и гидрокортизоном. Перфузат не содержал плазмы или плазменных компонентов. Давление перфузата составляло всего 30 см H 2 O, pH 7,34-7,40 и Po 2 250-400 мм рт. ст. Эта работа показала, что для 72-часового хранения не требовались никакие питательные вещества, кроме глюкозы, и низкие давления и потоки перфузата были достаточными.

В 1973 году Сакс [54] показал, что простое хранение во льду может быть успешно использовано для 72-часового хранения, когда новый промывочный раствор использовался для начального охлаждения и промывания почки. Сакс извлекал почки у хорошо гидратированных собак, у которых наблюдался диурез после инфузии маннитола, и промывал почки 200 мл раствора с высоты 100 см. Затем почки просто хранились при температуре 2 °C в течение 72 часов без дальнейшей перфузии. После реимплантации немедленно проводилась контралатеральная нефрэктомия. Промывочный раствор был разработан для имитации состава внутриклеточной жидкости и содержал маннитол в качестве непроницаемого иона для дальнейшего предотвращения отека клеток. Осмоляльность раствора составляла 430 мосмоль/кг, а его pH был 7,0 при 2 °C. Добавки, которые использовались Коллинзом (декстроза, феноксибензамин, прокаин и гепарин), были исключены Саксом.

Эти результаты были повторены Россом [55], который также добился успешного 72-часового хранения без использования непрерывной перфузии, хотя он не смог воспроизвести результаты Коллинза или Сакса, используя оригинальные растворы Коллинза или Сакса. Успешный раствор Росса был похож по электролитному составу на внутриклеточную жидкость с добавлением гипертонического цитрата и маннита. В растворе не присутствовало фосфата, бикарбоната, хлорида или глюкозы; осмоляльность составляла 400 мосмоль/кг, а pH 7,1. Пять из 8 собак пережили реимплантацию своих почек и немедленную контралатеральную нефрэктомию, когда почки хранились в течение 72 часов после промывания раствором Росса; но Росс не смог достичь 7-дневного хранения с помощью этой техники даже при использовании отсроченной контралатеральной нефрэктомии.

Требования для успешного хранения гипотермической перфузии в течение 72 часов были дополнительно определены Коллинзом, который показал, что пульсирующая перфузия не нужна, если используется давление перфузата 49 мм рт. ст., и что 7 °C является лучшей температурой для хранения, чем 2 °C или 12 °C. [56] [57] Он также сравнил различные составы перфузата и обнаружил, что можно успешно использовать перфузат с фосфатным буфером, что устраняет необходимость в подаче углекислого газа. [56] Грундманн [58] также показал, что низкое давление перфузата является достаточным. Он использовал среднее пульсирующее давление 20 мм рт. ст. в 72-часовых перфузиях и обнаружил, что это дало лучшие результаты, чем средние давления 15, 40, 50 или 60 мм рт. ст.

Успешное хранение до 8 дней было сообщено Коэном [59] с использованием различных типов перфузата – с наилучшим результатом, полученным при использовании фосфатного буферного перфузата при 8 °C. Считалось, что невозможность повторить эти успешные эксперименты была связана с изменениями, которые были внесены в способ производства PPF с более высоким содержанием октановой кислоты, что было пагубно. Было показано, что октановая кислота способна стимулировать метаболическую активность во время гипотермической перфузии [60] , и это может быть пагубным.

Характер повреждения почки

Структурная травма

Структурные изменения, происходящие во время 72-часового гипотермического хранения ранее неповрежденных почек, были описаны Маккеем [61], который показал , как происходила прогрессирующая вакуолизация цитоплазмы клеток, которая особенно затронула проксимальные канальцы . При электронной микроскопии было видно, что митохондрии стали набухшими с ранним разделением внутренних кристальных мембран и последующей потерей всей внутренней структуры. Целостность лизосом хорошо сохранялась до позднего времени, и разрушение клетки, по-видимому, не было вызвано литическими ферментами, поскольку не было больше повреждений непосредственно рядом с лизосомами, чем в остальной части клетки. [ необходима цитата ]

Вудс [44] [62] и Лю [51] , описывая успешное хранение почек в течение 5 и 7 дней, описали легкие микроскопические изменения, наблюдаемые в конце перфузии и при вскрытии, но обнаружили мало грубых отклонений, за исключением некоторой инфильтрации лимфоцитами и иногда встречающейся атрофии канальцев.

Изменения во время коротких перфузий почек человека перед реимплантацией были описаны Хиллом [63] , который также проводил биопсию через 1 час после реимплантации. При электронной микроскопии Хилл обнаружил повреждение эндотелия, которое коррелировало с тяжестью отложения фибрина после реимплантации. Изменения, которые Хилл увидел в клубочках при световой микроскопии, представляли собой случайные фибриновые тромбы и инфильтрацию полиморфами. Хилл подозревал, что эти изменения были иммунологически вызванным поражением, но обнаружил, что не было никакой корреляции между тяжестью гистологического поражения и наличием или отсутствием отложений иммуноглобулина. [ необходима цитата ]

Существует несколько отчетов об анализе мочи, вырабатываемой почками во время хранения перфузии. Кастагир [64] проанализировал мочу, вырабатываемую во время 24-часовой перфузии, и обнаружил, что она представляет собой ультрафильтрат перфузата, Скотт [65] обнаружил следы белка в моче во время 24-часового хранения, а Педерсон [66] обнаружил только следы белка после 36-часового хранения перфузии. Педерсон упомянул, что он обнаружил сильную протеинурию во время более ранних экспериментов. Вудс [62] отметил белковые слепки в канальцах жизнеспособных почек после 5-дневного хранения, но он не анализировал мочу, вырабатываемую во время перфузии. В исследовании Коэна [59] наблюдалось прогрессивное увеличение концентрации белка в моче в течение 8-дневного хранения, пока содержание белка в моче не сравнялось с содержанием белка в перфузате. Это могло быть связано с набуханием базальных мембран клубочков и прогрессивным слиянием отростков эпителиальных клеток, которое также наблюдалось в течение того же периода хранения перфузии.

Механизмы повреждения

Механизмы, повреждающие почки при гипотермическом хранении, можно разделить следующим образом:

  1. Нарушение метаболических процессов клетки, вызванное:
    1. Холодный
    2. Аноксия, когда почка теплая как до, так и после периода гипотермического хранения.
    3. Недостаточное поступление необходимых питательных веществ.
    4. Накопление токсинов в перфузате.
    5. Токсическое повреждение от хранящейся жидкости.
    6. Вымывание необходимых субстратов из клеток почек.
  2. Повреждение ядерной ДНК.
  3. Механическое повреждение сосудистой системы почки при гипотермической перфузии.
  4. Пост-реимплантационная травма.

Метаболическое повреждение

Холодный

При нормальных температурах насосные механизмы в клеточных стенках удерживают внутриклеточный калий на высоком уровне и вытесняют натрий. Если эти насосы выходят из строя, натрий поглощается клеткой, а калий теряется. Вода пассивно следует за натрием и приводит к набуханию клеток. Важность этого контроля набухания клеток была продемонстрирована Маклафлином [67] , который обнаружил значительную корреляцию между содержанием воды в корковом веществе почек собак и способностью почек поддерживать жизнь после 36-часового хранения. Насосный механизм приводится в действие ферментной системой, известной как Na+K+-активируемая АТФаза [68], и ингибируется холодом. Леви [69] обнаружил, что метаболическая активность при 10 °C, как показывают измерения потребления кислорода, была снижена примерно до 5% от нормы, и, поскольку все ферментные системы подвержены одинаковому влиянию гипотермии, активность АТФазы заметно снижается при 10 °C.

Однако существуют тканевые и видовые различия в чувствительности этой АТФазы к холоду, которые могут объяснять различия в способности тканей выдерживать гипотермию. Мартин [70] показал, что в кортикальных клетках почек собак некоторая активность АТФазы все еще присутствует при 10 °C, но не при 0 °C. В клетках печени и сердца активность была полностью подавлена ​​при 10 °C, и эта разница в чувствительности АТФазы к холоду коррелировала с большей сложностью контроля набухания клеток во время гипотермического хранения клеток печени и сердца. Отдельная АТФаза обнаружена в стенках сосудов, и, как показал Белзер [71], она полностью подавлена ​​при 10 °C, когда при этой температуре в кортикальных клетках почек АТФаза все еще активна. Эти эксперименты проводились на эндотелии аорты, но если сосудистый эндотелий почек имеет те же свойства, то повреждение сосудов может быть ограничивающим фактором при длительном хранении почек.

Уиллис [72] показал, что у животных, впадающих в спячку, часть способности выживать при низких температурах обусловлена ​​наличием Na+K+-АТФазы, которая способна активно транспортировать натрий и калий через клеточные мембраны при температуре 5 °C, примерно в шесть раз быстрее, чем у животных, не впадающих в спячку; такой скорости транспорта достаточно для предотвращения отека клеток.

Скорость охлаждения ткани также может иметь значение в повреждении ферментных систем. Франкавилла [73] показал, что при быстром охлаждении срезов печени (немедленное охлаждение до 12 °C за 6 минут) анаэробный гликолиз, измеренный при повторном нагревании до 37 °C, был ингибирован примерно на 67% от активности, которая была продемонстрирована в срезах, которые были подвергнуты отсроченному охлаждению. Однако срезы почек собак были менее сильно затронуты быстрым охлаждением, чем срезы печени.

Аноксия

Всем клеткам требуется АТФ в качестве источника энергии для их метаболической активности. Почка повреждается аноксией, когда кортикальные клетки почки неспособны генерировать достаточное количество АТФ в анаэробных условиях для удовлетворения потребностей клеток. При удалении почки некоторая аноксия неизбежна в интервале между разделением почечной артерии и охлаждением почки. Бергстром [74] показал , что 50% содержания АТФ в кортикальных клетках почки собаки теряется в течение 1 минуты после пережатия почечной артерии, и аналогичные результаты были получены Уорником [75] в целых почках мышей, с падением клеточного АТФ на 50% примерно через 30 секунд теплой аноксии. Уорник и Бергстром также показали, что охлаждение почки сразу после удаления заметно снижает дальнейшую потерю АТФ. Когда эти не поврежденные теплом почки были перфузированы оксигенированной гипотермической плазмой, уровень АТФ снизился на 50% после 24-часового хранения, а через 48 часов средние уровни АТФ в тканях были немного выше, что указывает на то, что синтез АТФ произошел. Пегг [76] показал, что почки кролика могут ресинтезировать АТФ после периода перфузионного хранения после тепловой травмы, но в не поврежденных теплом почках ресинтез не происходил.

Теплая аноксия может также возникнуть во время реимплантации почки после хранения. Ланнон [77] показал, измеряя метаболизм сукцината, как почка была более чувствительна к периоду тепловой гипоксии, происходящей после хранения, чем к тому же периоду тепловой гипоксии, происходящей непосредственно перед хранением.

Недостаток необходимых питательных веществ

Активный метаболизм глюкозы с образованием бикарбоната был продемонстрирован Петтерссоном [78] и Коэном [59] .

Исследования Петтерссона [78] были посвящены метаболизму глюкозы и жирных кислот почками во время 6-дневного гипотермического перфузионного хранения, и он обнаружил, что почки потребляли глюкозу со скоростью 4,4 мкмоль/г/день, а жирные кислоты — 5,8 мкмоль/г/день. В исследовании Коэна [59] лучшие почки, хранившиеся 8 дней, потребляли глюкозу со скоростью 2,3 мкмоль/г/день и 4,9 мкмоль/г/день соответственно, что делало вероятным, что они использовали жирные кислоты со скоростью, аналогичной скорости почек собак Петтерссона. Постоянство как скорости потребления глюкозы, так и скорости производства бикарбоната означало, что никакие повреждения не влияли на гликолитический фермент или ферментные системы карбоангидразы.

Ли [79] показал, что жирные кислоты являются предпочтительным субстратом коркового вещества почек кролика при нормотермических температурах, а глюкоза — предпочтительным субстратом для мозговых клеток, которые обычно метаболизируются анаэробно. Абодели [80] показал, что как жирные кислоты, так и глюкоза могут использоваться внешним мозговым веществом почек кролика, но глюкоза использовалась преимущественно. При гипотермии метаболические потребности почек значительно снижаются, но происходит измеримое потребление глюкозы, жирных кислот и кетоновых тел. Хорсбург [49] показал, что липиды используются гипотермическими почками, при этом потребление пальмитата составляет 0–15 % от нормы в корковом веществе почек крысы при 15 °C. Петтерссон [78] показал, что на молярной основе глюкоза и жирные кислоты метаболизировались гипотермически перфузируемыми почками примерно с одинаковой скоростью. Хуан [81] показал, что кора гипотермической почки собаки теряет липиды (потеря 35% от общего количества липидов за 24 часа), если только к перфузату почки не был добавлен олеат. Хуан прокомментировал, что эта потеря может повлиять на структуру клетки и что эта потеря также предполагает, что почка использует жирные кислоты. В более поздней публикации Хуан [82] показал, что срезы коры почки собаки метаболизируют жирные кислоты, но не глюкозу при 10 °C.

Даже если предоставлены правильные питательные вещества, они могут быть потеряны из-за абсорбции в трубках системы сохранения. Ли [83] продемонстрировал, что силиконовый каучук (материал, широко используемый в системах сохранения почек) абсорбировал 46% олеиновой кислоты перфузата после 4 часов перфузии.

Накопление токсинов

Абуна [84] показал, что аммиак выделяется в перфузат во время 3-дневного хранения почек, и предположил, что это может быть токсичным для клеток почек, если не удалять его путем частой замены перфузата. Некоторое обоснование использования обмена перфузата во время длительных перфузий было предоставлено Лю [51], который использовал обмен перфузата в своих успешных экспериментах по 7-дневному хранению. Грундманн [85] также обнаружил, что качество 96-часовой консервации улучшается при использовании двойного объема перфузата или путем обмена перфузата. Однако выводы Грундманна были основаны на сравнении с контрольной группой, состоящей всего из 3 собак. Коэн [59] не смог продемонстрировать какое-либо производство аммиака в течение 8 дней перфузии и никакой пользы от обмена перфузата; было показано, что прогрессирующая щелочность, которая происходила во время перфузии, была вызвана производством бикарбоната.

Токсическое повреждение от перфузата

Было показано, что некоторые перфузаты оказывают токсическое воздействие на почки в результате непреднамеренного включения определенных химических веществ в их формулу. Коллинз [86] показал, что прокаин, включенный в формулу его промывочных жидкостей, может быть токсичным, а Пегг [87] прокомментировал, как токсичные материалы, такие как пластификаторы ПВХ, могут вымываться из трубок перфузионного контура. Дворак [88] показал, что добавление метилпреднизолона к перфузату, которое Вудс [62] считал необходимым , может в некоторых обстоятельствах быть вредным. Он показал, что при добавлении более г метилпреднизолона в 650 мл перфузата (по сравнению с 250 мг в 1 литре, использованных Вудсом) в почке после 20 часов перфузии происходили необратимые гемодинамические и структурные изменения. Наблюдался некроз капиллярных петель, окклюзия пространств Боумена, утолщение базальной мембраны и повреждение эндотелиальных клеток.

Вымывание основных субстратов

Уровень нуклеотидов, остающихся в клетке после хранения, по мнению Уорника [75] , важен для определения того, сможет ли клетка повторно синтезировать АТФ и восстановиться после повторного нагревания. Частая смена перфузата или использование большого объема перфузата имеет теоретический недостаток, заключающийся в том, что расщепленные адениновые нуклеотиды могут вымываться из клеток и, таким образом, быть недоступными для повторного синтеза в АТФ при повторном нагревании почки.

Повреждение ядерной ДНК

Ядерная ДНК повреждается при холодном хранении почек. Лазарус [89] показал, что разрывы одноцепочечной ДНК происходили в течение 16 часов в почках мышей, хранившихся в условиях гипотермии, при этом повреждение немного подавлялось хранением в растворах Коллинза или Сакса. Это ядерное повреждение отличалось от того, которое наблюдалось при тепловом повреждении, когда происходили разрывы двухцепочечной ДНК. [90]

Механическое повреждение сосудистой системы

Методы хранения перфузии могут механически повредить сосудистый эндотелий почки, что приводит к артериальному тромбозу или отложению фибрина после реимплантации. Хилл [63] отметил, что в почках человека отложение фибрина в клубочках после реимплантации и послеоперационной функции коррелирует с продолжительностью хранения перфузии. Он брал биопсии при реваскуляризации из человеческих почек, сохраненных перфузией или хранением на льду, и показал с помощью электронной микроскопии, что разрушение эндотелия происходит только в тех почках, которые были перфузированы. Биопсии, взятые через час после реваскуляризации, показали тромбоциты и фибрин, прилипшие к любым областям оголенной сосудистой базальной мембраны. Другой тип повреждения сосудов был описан Шейлом [91], который показал, как может быть получено струйное поражение дистальнее канюли, привязанной к почечной артерии, что приводит к артериальному тромбозу примерно на 1 см дистальнее места канюли.

Пост-реимплантационная травма

Существуют доказательства того, что иммунологические механизмы могут повреждать гипотермически перфузируемые почки после реимплантации, если перфузат содержал специфические антитела. Кросс [92] описал две пары человеческих трупных почек, которые были перфузированы одновременно криопреципитированной плазмой, содержащей типоспецифические HLA-антитела к одной из пар. Обе эти почки страдали ранним артериальным тромбозом. Лайт [93] описал похожее сверхострое отторжение после хранения перфузии и показал, что используемая криопреципитированная плазма содержала цитотоксические антитела IgM. Эта потенциальная опасность использования криопреципитированной плазмы была экспериментально продемонстрирована Фило [94], который перфузировал почки собак в течение 24 часов специфически сенсибилизированной криопреципитированной плазмой собак и обнаружил, что он может вызывать гломерулярные и сосудистые поражения с капиллярным набуханием, эндотелиальным отеком, инфильтрацией полиморфноядерными лейкоцитами и артериальным тромбозом. Иммунофлуоресцентная микроскопия продемонстрировала специфическое связывание IgG вдоль эндотелиальных поверхностей, в клубочках, а также в сосудах. После реимплантации фиксация комплемента и повреждение тканей происходили по схожей схеме. Была выявлена ​​некоторая корреляция между тяжестью гистологического повреждения и последующей функцией почек.

Многие исследователи пытались предотвратить повторное нагревание почек во время реимплантации, но только Коэн описал использование системы активного охлаждения. [59] Измерения высвобождения лизосомальных ферментов из почек, подвергнутых ложным анастомозам, как в системе охлаждения, так и вне ее, продемонстрировали, насколько чувствительны почки к повторному нагреванию после периода хранения в холоде, и подтвердили эффективность системы охлаждения в предотвращении высвобождения ферментов. Еще одним фактором минимизации травм во время операций по реимплантации могло быть то, что почки хранились при температуре 7 °C внутри охлаждающей спирали, что на один градус ниже температуры, используемой во время хранения перфузии, так что почки не подвергались более значительным изменениям температуры, которые произошли бы при использовании охлаждения льдом.

Демпстер [95] описал использование медленного освобождения сосудистых зажимов в конце операций по реимплантации почки, чтобы избежать повреждения почки, но другие исследователи не упоминали, использовали ли они этот маневр. После того, как Коэн обнаружил сосудистое повреждение с внутрипочечным кровотечением после 3 дней хранения перфузии, [59] для всех последующих экспериментов использовалась техника медленной реваскуляризации с целью дать внутрипочечным сосудам время восстановить свой тонус в достаточной степени, чтобы предотвратить приложение полного систолического давления к хрупким гломерулярным сосудам. Отсутствие грубого сосудистого повреждения в его более поздних перфузиях может быть связано с использованием этого маневра.

Смотрите также

Ссылки

  1. ^ Фудзиёси, Масато; де Мейер, Винсент Э.; Порте, Роберт Дж. (01.01.2021), Орландо, Джузеппе; Кешавджи, Шаф (ред.), «Глава 2 — Машинная перфузия для восстановления донорских органов: от зрения к повседневной клинической практике», Восстановление и регенерация органов , Academic Press, стр. 43–73, ISBN 978-0-12-819451-5, получено 2024-07-31
  2. ^ Цзин, Лэй; Яо, Лианн; Чжао, Майкл; Пэн, Ли-пин; Лю, Миньяо (2018). «Сохранение органов: от прошлого к будущему». Acta Pharmacologica Sinica . 39 (5): 845–857. doi :10.1038/aps.2017.182. ISSN  1745-7254. PMC 5943901. PMID 29565040  . 
  3. ^ Цинь, Гуанци; Джернрид, Виктория; Сьёберг, Трюгве; Стин, Стиг; Нильссон, Йохан (21 марта 2022 г.). «Машинная перфузия для сохранения сердца человека: систематический обзор». Трансплант Интернэшнл . 35 : 10258. дои : 10.3389/ti.2022.10258 . ISSN  0934-0874. ПМЦ 8983812 . ПМИД  35401041. 
  4. ^ Кей, Марк Д.; Хосгуд, Сара А.; Харпер, Саймон Дж. Ф.; Багул, Атул; Уоллер, Хелен Л.; Николсон, Майкл Л. (ноябрь 2011 г.). «Нормотермическая и гипотермическая промывка ex vivo с использованием нового бесфосфатного консервирующего раствора (AQIX) в почках свиньи». Журнал хирургических исследований . 171 (1): 275–282. doi :10.1016/j.jss.2010.01.018. PMID  20421110.
  5. ^ Йонг, Сисси; Хосгуд, Сара А.; Николсон, Майкл Л. (июнь 2016 г.). «Ex-vivo нормотермическая перфузия при трансплантации почек: прошлое, настоящее и будущее». Current Opinion in Organ Transplantation . 21 (3): 301–307. doi :10.1097/MOT.00000000000000316. ISSN  1087-2418. PMID  27145197. S2CID  22627245.
  6. ^ Ceresa, Carlo DL; Nasralla, David; Coussios, Constantin C.; Friend, Peter J. (февраль 2018 г.). «Дело в пользу нормотермической машинной перфузии при трансплантации печени: Ceresa et al». Трансплантация печени . 24 (2): 269–275. doi : 10.1002/lt.25000 . PMID  29272051.
  7. ^ Cypel, Marcelo; Yeung, Jonathan C.; Liu, Mingyao; Anraku, Masaki; Chen, Fengshi; Karolak, Wojtek; Sato, Masaaki; Laratta, Jane; Azad, Sassan; Madonik, Mindy; Chow, Chung-Wai (14.04.2011). "Нормотермическая перфузия легких ex vivo при клинической трансплантации легких" (PDF) . New England Journal of Medicine . 364 (15): 1431–1440. doi :10.1056/NEJMoa1014597. ISSN  0028-4793. PMID  21488765. S2CID  10576812. Архивировано из оригинала (PDF) 22.02.2020.
  8. ^ "Успех трансплантации: печень выживает вне тела в течение нескольких дней". BBC News . 31 мая 2022 г. Получено 24 июня 2022 г.
  9. ^ Клавьен, Пьер-Ален; Дутковски, Филипп; Мюллер, Маттео; Эшмуминов, Дилмуроджон; Баутиста Боррего, Люсия; Вебер, Ахим; Мюлльхаупт, Бит; Соуза да Силва, Ричард X.; Бург, Брайан Р.; Рудольф фон Рор, Филипп; Шулер, Мартин Дж.; Беккер, Дастин; Хефти, Макс; Тиббитт, Марк В. (31 мая 2022 г.). «Трансплантация человеческой печени после 3 дней нормотермического сохранения ex situ». Nature Biotechnology . 40 (11): 1610–1616. doi :10.1038/s41587-022-01354-7. ISSN  1546-1696. PMID  35641829. S2CID  249234907.
  10. ^ «Новые криопротекторные химикаты могут сохранять органы без повреждения льдом». New Atlas . 22 июня 2022 г. Получено 24 июня 2022 г.
  11. ^ Брайант, Саффрон Дж.; Авад, Мийя Н.; Элбурн, Аарон; Кристофферсон, Эндрю Дж.; Мартин, Эндрю В.; Мефтахи, Настаран; Драммонд, Калум Дж.; Гривс, Тамар Л.; Брайант, Гэри (22 июня 2022 г.). «Глубокие эвтектические растворители как криозащитные агенты для клеток млекопитающих». Journal of Materials Chemistry B. 10 ( 24): 4546–4560. doi :10.1039/D2TB00573E. ISSN  2050-7518. PMID  35670530.
  12. ^ abc "Свиные органы частично восстановлены через час после смерти". BBC News . 3 августа 2022 г. Получено 15 сентября 2022 г.
  13. ^ Андриевич, Дэвид; Врселя, Звонимир; Лысый, Тарас; Чжан, Шупей; Скарица, Марио; Спайич, Ана; Деллал, Дэвид; Торн, Стефани Л.; Дакроу, Роберт Б.; Ма, Шаоцзе; Дай, Фан К.; Исиктас, Атагун У.; Лян, Дэн; Ли, Минфэн; Ким, Суэл-Ки; Даниэле, Стефано Г.; Бану, Хадиджа; Перинчери, Судхир; Менон, Мадхав К.; Хаттнер, Анита; Шет, Кевин Н.; Гобеске, Кевин Т.; Титджен, Грегори Т.; Завери, Хиттен П.; Лэтэм, Стивен Р.; Синусас, Альберт Дж.; Сестан, Ненад (август 2022 г.). «Восстановление клеток после длительной тепловой ишемии всего тела» . Nature . 608 (7922): 405–412. Bibcode :2022Natur.608..405A. doi :10.1038/s41586-022-05016-1. ISSN  1476-4687. PMC 9518831 . PMID  35922506. S2CID  251316299. 
  14. ^ Врселя, Звонимир; Даниэле, Стефано Г.; Силберейс, Джон; Тальпо, Франческа; Морозов Юрий М.; Соуза, Андре ММ; Танака, Брайан С.; Скарица, Марио; Плетикос, Миховил; Каур, Навджот; Чжуан, Чжэнь В.; Лю, Чжао; Алькавадри, Рафид; Синусас, Альберт Дж.; Лэтэм, Стивен Р.; Ваксман, Стивен Г.; Сестан, Ненад (апрель 2019 г.). «Восстановление мозгового кровообращения и клеточных функций после смерти». Природа . 568 (7752): 336–343. Бибкод : 2019Natur.568..336V. дои : 10.1038/s41586-019-1099-1. ISSN  1476-4687. PMC 6844189. PMID  30996318 . 
  15. ^ Каррел А (1902). «Операционная техника сосудистых анастомозов и трансплантация внутренних органов». Лион Мед . 98 : 859–864.
  16. ^ Ульман Э (1902). «Экспериментальная трансплантация Нирена». Вейн Клин Вохшр . 15 : 281–282.
  17. ^ Фурман ФА, Филд Дж (1943). «Обратимость ингибирования метаболизма мозга и почек крыс холодом». Am J Physiol . 139 (2): 193–196. doi :10.1152/ajplegacy.1943.139.2.193.
  18. ^ Carrel A, Lindbergh CA (1935). «Культура целых органов» (PDF) . Science . 81 (2112): 621–623. Bibcode : 1935Sci....81..621C. doi : 10.1126/science.81.2112.621. PMID  17733174. S2CID  19034161.
  19. ^ Bainbridge FA, Evans CL (1914). «Препарат сердца, легких и почек». J Physiol . 48 (4): 278–286. doi :10.1113/jphysiol.1914.sp001661. PMC 1420524. PMID  16993254 . 
  20. ^ Оуэнс, Дж. Катберт (1955-01-01). «Длительная экспериментальная окклюзия грудной аорты во время гипотермии». Архив хирургии . 70 (1): 95–7. doi :10.1001/archsurg.1955.01270070097016. ISSN  0004-0010. PMID  13217608.
  21. ^ Bogardus GM, Schlosser RJ (1956). «Влияние температуры на ишемическое повреждение почек». Хирургия . 39 (6): 970–974. PMID  13324611.
  22. ^ Moyer, John H.; Morris, George; DeBakey, Michael E. (январь 1957 г.). «Гипотермия: I. Влияние на почечную гемодинамику и выделение воды и электролитов у собак и людей». Annals of Surgery . 145 (1): 26–40. doi :10.1097/00000658-195701000-00003. ISSN  0003-4932. PMC 1465379. PMID 13395281  . 
  23. ^ Штюбер, П.; Ковач, С.; Колецкий, С.; Перский, Л. (июль 1958 г.). «Региональная почечная гипотермия». Хирургия . 44 (1): 77–83. ISSN  0039-6060. PMID  13556447.
  24. ^ Schloerb, PR; Waldorf, RD; Welsh, JS (ноябрь 1959). «Защитный эффект гипотермии почек на общую ишемию почек». Хирургия, гинекология и акушерство . 109 : 561–565. ISSN  0039-6087. PMID  14442912.
  25. ^ Кисер, Дж. К.; Фарли, Х. Х.; Мюллер, Г. Ф.; Штробель, К. Дж.; Хичкок, К. Р. (1960). «Успешные почечные аутотрансплантаты у собак после семичасового селективного охлаждения почек». Хирургический форум . 11 : 26–28. ISSN  0071-8041. PMID  13756355.
  26. ^ Лапчинский АГ (1960). «Последние результаты экспериментальной трансплантации сохраненных конечностей и почек и возможное использование этой методики в клинической практике». Ann NY Acad Sci . 87 (1): 539–569. Bibcode :1960NYASA..87..539L. doi :10.1111/j.1749-6632.1960.tb23220.x. PMID  14414086. S2CID  41367748.
  27. ^ ab Humphries AL; Russell R; Ostafin J; Goodrich SM; Moretz WH (1962). «Успешная реимплантация почки собаки после 24-часового хранения». Surgical Forum . 13 : 380–382. PMID  13955710.
  28. ^ Calne, RY; Pegg, DE; Pryse-Davies, J.; Brown, FL (1963-09-14). «Сохранение почек путем охлаждения льдом». BMJ . 2 (5358): 640–655. doi :10.1136/bmj.2.5358.640-a. ISSN  0959-8138. PMC 1872740 . PMID  14046169. 
  29. ^ Хамфрис, АЛ; Морец, WH; Пирс, EC (апрель 1964 г.). «Двухчасовое хранение почек с сообщением об успешной аутотрансплантации у собак после тотальной нефрэктомии». Хирургия . 55 : 524–530. ISSN  0039-6060. PMID  14138017.
  30. ^ Манакс, Уильям Г. (1965-05-31). «Гипотермия и гипербария: простой метод сохранения целых органов». JAMA . 192 (9): 755–9. doi :10.1001/jama.1965.03080220019004. ISSN  0098-7484. PMID  14285707.
  31. ^ Белзер, Фолкерт О.; Эшби, Б. Стерри; Данфи, Дж. Энглберт (сентябрь 1967 г.). «24-часовое и 72-часовое сохранение почек у собак». The Lancet . 290 (7515): 536–539. doi :10.1016/S0140-6736(67)90498-9. PMID  4166894.
  32. ^ Belzer, Folkert O.; Ashby, B. Sterry; Huang, Josephine S.; Dunphy, J. Englebert (сентябрь 1968 г.). «Этиология повышения перфузионного давления при перфузии изолированных органов». Annals of Surgery . 168 (3): 382–391. doi :10.1097/00000658-196809000-00008. ISSN  0003-4932. PMC 1387342. PMID 4877588  . 
  33. ^ Lotke PA (1966). «Лизосомостабилизирующие агенты для гипотермического сохранения почек». Nature . 212 (5061): 512–513. Bibcode :1966Natur.212..512L. doi :10.1038/212512a0. PMID  5339142.
  34. ^ Суомалайнен П (1938). «Производство искусственной спячки». Природа . 142 (3609): 1157. Бибкод : 1938Natur.142.1157S. дои : 10.1038/1421157a0 . S2CID  4087215.
  35. ^ Камияма, Тейко М. (1970-05-01). «Сохранение аноксического сердца с помощью метаболического ингибитора и гипотермии». Архивы хирургии . 100 (5): 596–9. doi :10.1001/archsurg.1970.01340230062016. ISSN  0004-0010. PMID  4908950.
  36. ^ Belzer FO, Kountz SL (1970). «Сохранение и трансплантация почек трупа человека: двухлетний опыт». Ann Surg . 172 (3): 394–404. doi :10.1097/00000658-197009000-00009. PMC 1397323 . PMID  4918001. 
  37. ^ Хамфрис, АЛ; Рассел, Р.; Стоддард, Л.Д.; Морец, WH (май 1968 г.). «Успешное пятидневное сохранение почки. Перфузия гипотермической, разбавленной плазмой». Investigative Urology . 5 (6): 609–618. ISSN  0021-0005. PMID  4914852.
  38. ^ Коллинз, генеральный директор; Браво-Шугарман, Мария; Терасаки, ИП (декабрь 1969 г.). «Сохранение почек для транспортировки». Ланцет . 294 (7632): 1219–1222. дои : 10.1016/S0140-6736(69)90753-3. ПМИД  4187813.
  39. ^ Килер, Р.; Суинни, Дж.; Тейлор, Р. М. Р.; Улдалл, П. Р. (декабрь 1966 г.). «Проблема сохранения почек1». British Journal of Urology . 38 (6): 653–656. doi :10.1111/j.1464-410X.1966.tb09773.x. PMID  5335118.
  40. ^ Дафф RS, Гинсберг J (1957). «Некоторые периферические сосудистые эффекты внутриартериального дибенилина у человека». Clin Sci . 16 (1): 187–196. PMID  13414151.
  41. ^ Rangel DM, Bruckner WL, Byfield JE, Dinbar JE, Yakeishi Y, Stevens GH, Fonkalsrud EW (1969). «Ферментативная оценка консервации печени с использованием клеточно-стабилизирующих препаратов». Surg Gynecol Obstet . 129 : 963–972.{{cite journal}}: CS1 maint: multiple names: authors list (link)
  42. ^ Лю, Вэнь-Пен; Хамфрис, Артур Л.; Стоддард, Леланд Д.; Морец, Уильям Х. (август 1970 г.). «48-часовое хранение почек». The Lancet . 296 (7669): 423. doi :10.1016/S0140-6736(70)90041-3. PMID  4194732.
  43. ^ Вудс, Джон Э. (1 ноября 1970 г.). «Проблемы сохранения почек у собак в течение 48–72 часов». Архив хирургии . 101 (5): 605–9. doi :10.1001/archsurg.1970.01340290061013. ISSN  0004–0010. PMID  5479705.
  44. ^ ab Woods JE (1971). «Успешное сохранение почек у собак в течение трех-семи дней». Arch Surg . 102 (6): 614–616. doi :10.1001/archsurg.1971.01350060078024. PMID  4930759.
  45. ^ ab Джонсон, RWG; Андерсон, Мэрилин; Флир, CTG; Мюррей, Шейла GH; Тейлор, RMR; Суинни, Джон (март 1972 г.). «Оценка нового перфузионного раствора для сохранения почек». Трансплантация . 13 (3): 270–275. doi : 10.1097/00007890-197203000-00012 . ISSN  0041-1337. PMID  4553729. S2CID  35755493.
  46. ^ ab Claes, G.; Aurell, M.; Blohmé, I.; Pettersson, S. (1972). «Экспериментальные и клинические результаты непрерывной гипотермической перфузии альбумина». Труды Европейской ассоциации диализа и трансплантации. Европейская ассоциация диализа и трансплантации . 9 : 484–490. ISSN  0071-2736. PMID  4589766.
  47. ^ Мюррей Р., Дифенбах В. К. Л. (1953). «Влияние тепла на возбудителя гомологичного сывороточного гепатита». Proc Soc Exp Biol Med . 84 (1): 230–231. doi :10.3181/00379727-84-20599. PMID  13120994. S2CID  29635377.
  48. ^ Хинк, Дж. Х.; Паппенхаген, . АР; Лундблад, Дж.; Джонсон, FF (июнь 1970 г.). «Фракция белка плазмы (человека)». Vox Sanguinis . 18 (6): 527–541. doi :10.1111/j.1423-0410.1970.tb02185.x. PMID  4104308. S2CID  71936479.
  49. ^ ab Horsburgh T (1973). «Возможная роль свободных жирных кислот в средах для сохранения почек». Nature New Biology . 242 (117): 122–123. doi :10.1038/newbio242122a0. PMID  4513414.
  50. ^ Джонсон Р. В. Г. Исследования по сохранению почек. Ньюкасл, Англия: Университет Ньюкасла, 1973. 94 стр. Диссертация на соискание степени магистра наук.
  51. ^ abc Liu, WP; Humphries, AL; Russell, R.; Stoddard, LD; Garcia, LA; Serkes, KD (1973). «Трех- и семидневная перфузия почки собаки фракцией белка плазмы человека IV-4». Surgical Forum . 24 : 316–318. ISSN  0071-8041. PMID  4806016.
  52. ^ Хамфрис, АЛ; Гарсия, ЛА; Серкес, КД (сентябрь 1974 г.). «Перфузаты для долгосрочного сохранения путем непрерывной перфузии». Transplantation Proceedings . 6 (3): 249–253. ISSN  0041-1345. PMID  4606897.
  53. ^ Джойс М., Проктор Э. (1974). «Гипотермическая перфузия-консервация почек собак в течение 48-72 часов без плазменных производных или мембранной оксигенации». Трансплантация . 18 (6): 548–550. doi : 10.1097/00007890-197412000-00014 . PMID  4612890.
  54. ^ Сакс, Стивен А.; Петрич, Питер Х.; Кауфман, Джозеф Дж. (май 1973 г.). «Консервация почек у собак с использованием нового перфузата». The Lancet . 301 (7811): 1024–1028. doi :10.1016/S0140-6736(73)90665-X. PMID  4122110.
  55. ^ Росс, Х.; Маршалл, Вернон К.; Эскотт, Маргарет Л. (июнь 1976 г.). «72-часовое сохранение почек у собак без непрерывной перфузии». Трансплантация . 21 (6): 498–501. doi : 10.1097/00007890-197606000-00009 . ISSN  0041-1337. PMID  936278. S2CID  29098639.
  56. ^ ab Collins GM, Halasz NA (1974). «Упрощенное 72-часовое хранение почек». Surgical Forum . 25 : 275–277. PMID  4612775.
  57. ^ Коллинз GM, Халас NA (1973). «Роль пульсирующего потока в сохранении почек». Трансплантация . 16 (4): 378–379. doi : 10.1097/00007890-197310000-00018 . PMID  4583153.
  58. ^ Грундманн, Р.; Рааб, М.; Мейзель, Э.; Кирхгофф, Р.; Пихльмайер, Х. (март 1975 г.). «Анализ оптимального перфузионного давления и скорости потока почечного сосудистого сопротивления и потребления кислорода в гипотермической перфузируемой почке». Хирургия . 77 (3): 451–461. ISSN  0039-6060. PMID  1092016.
  59. ^ abcdefg Коэн, Джеффри Леонард (1982). 8-дневное сохранение почки. copac.jisc.ac.uk (диссертация Ch.M). Ливерпульский университет. OCLC  757144327. EThOS  uk.bl.ethos.535952. ( требуется регистрация )
  60. ^ Коэн, GL; Бердетт, K.; Джонсон, RWG (декабрь 1985 г.). «Стимуляция потребления кислорода олеиновой и октановой кислотой во время гипотермического сохранения почек». Криобиология . 22 (6): 615–616. doi :10.1016/0011-2240(85)90078-1.
  61. ^ Mackay B, Moloney PJ, Rix DB. «Использование электронной микроскопии при сохранении и перфузии почек». В: Norman JC, ed. Органная перфузия и сохранение. Нью-Йорк: Appleton Century Crofts, 1968:697-714.
  62. ^ abc Woods, JE; Fleisher, GA; Hirsche, BL (сентябрь 1974 г.). «Пятидневная перфузия почек собак: постулируемый эффект стероидов». Transplantation Proceedings . 6 (3): 255–260. ISSN  0041-1345. PMID  4153357.
  63. ^ ab Hill, GS; Light, JA; Perloff, LJ (апрель 1976 г.). «Повреждение, связанное с перфузией при трансплантации почек». Хирургия . 79 (4): 440–447. ISSN  0039-6060. PMID  769223.
  64. ^ Kastagir BK, Kabb K, Leonards JR (1969). «Ультраструктура почки собаки, сохраненная в течение 24 часов». Trans Am Soc Artif Intern Organs . 15 : 214–218. PMID  4893029.{{cite journal}}: CS1 maint: multiple names: authors list (link)
  65. ^ Скотт, ДФ; Морли, А.Р.; Суинни, Дж. (сентябрь 1969 г.). «Сохранение почек у собак после гипотермической перфузии и последующая функция». British Journal of Surgery . 56 (9): 688–691. doi :10.1002/bjs.1800560913. PMID  4897217. S2CID  44273808.
  66. ^ Педерсен, Ф. Б.; Хринчук, Дж. Р.; Шайбель, Дж. Х.; Сёренсен, Б. Л. (январь 1973 г.). «Выработка мочи и метаболизм глюкозы и молочной кислоты в почках в течение 36 часов охлаждения и перфузии разбавленной плазмой». Scandinavian Journal of Urology and Nephrology . 7 (1): 68–73. doi :10.3109/00365597309133675. ISSN  0036-5599. PMID  4701659.
  67. ^ Маклафлин, Джерард А.; Селлс, Роберт А.; Тиррелл, Ирен (май 1974 г.). «Оценка методов сохранения почек». British Journal of Surgery . 61 (5): 406–409. doi :10.1002/bjs.1800610520. PMID  4598857. S2CID  3249755.
  68. ^ Glynn IM (1968). «Мембранная аденозинтрифосфатаза и транспорт катионов». Br Med Bull . 24 (2): 165–169. doi :10.1093/oxfordjournals.bmb.a070620. PMID  4231272.
  69. ^ Levy MN (1959). «Потребление кислорода и кровоток в гипотермической, перфузируемой почке». Am J Physiol . 197 (5): 1111–1114. doi :10.1152/ajplegacy.1959.197.5.1111. PMID  14416432.
  70. ^ Мартин, Дэвид Р.; Скотт, Дэвид Ф.; Даунс, Гленн Л.; Белзер, Фолкерт О. (январь 1972 г.). «Основная причина неудачного сохранения печени и сердца: чувствительность системы АТФазы к холоду». Annals of Surgery . 175 (1): 111–117. doi :10.1097/00000658-197201000-00017. ISSN  0003-4932. PMC 1355165. PMID 4258534  . 
  71. ^ Белзер, Фолкерт О.; Хоффман, Роберт; Хуан, Жозефина; Даунс, Гленн (октябрь 1972 г.). «Эндотелиальное повреждение перфузируемой почки собаки и чувствительность сосудистой NaK-АТФазы к холоду». Криобиология . 9 (5): 457–460. doi :10.1016/0011-2240(72)90163-0. PMID  4265432.
  72. ^ Уиллис Дж. С. (1966). «Характеристики транспорта ионов в корковом веществе почек млекопитающих, впадающих в спячку». J Gen Physiol . 49 (6): 1221–1239. doi :10.1085/jgp.0491221. PMC 3328324. PMID  5924109 . 
  73. ^ Франкавилла, Антонио; Браун, Теодор Х.; Фиоре, Роза; Каскардо, Серджио; Тейлор, Пол; Грот, Карл Г. (1973). «Сохранение органов для трансплантации. Доказательства пагубного воздействия быстрого охлаждения». European Surgical Research . 5 (5): 384–389. doi :10.1159/000127678. ISSN  1421-9921. PMID  4595412.
  74. ^ Bergstrom J, Collste H, Groth C, Hultman E, Melin B (1971). «Вода, электролиты и метаболическое содержание в корковой ткани почек собак, сохраненных гипотермией». Proc Eur Dialysis Transplant Ass . 8 : 313–320.{{cite journal}}: CS1 maint: multiple names: authors list (link)
  75. ^ ab Warnick CT, Lazarus HM (1979). «Поддержание уровней адениновых нуклеотидов во время хранения в почках во внутриклеточных растворах». Proc Soc Exp Biol Med . 160 (4): 453–457. doi :10.3181/00379727-160-40469. PMID  450910. S2CID  29011354.
  76. ^ Pegg, D. E; Wusteman, MC; Foreman, J. (ноябрь 1981 г.). «Метаболизм нормальных и ишемически поврежденных почек кролика во время перфузии в течение 48 часов при 10 °C». Трансплантация . 32 (5): 437–443. doi : 10.1097/00007890-198111000-00020 . ISSN  0041-1337. PMID  7330963.
  77. ^ Ланнон, С.Г.; Тукарам, К.Т.; Оливер, Дж.А.; Маккиннон, К.Дж.; Доссетор, Дж.Б. (май 1967 г.). «Сохранение почек, оцененное по биохимическому параметру». Хирургия, гинекология и акушерство . 124 (5): 999–1004. ISSN  0039-6087. PMID  5336874.
  78. ^ abc Pettersson, Silas; Claes, Göran; Scherstén, Tore (1974). «Использование жирных кислот и глюкозы во время непрерывной гипотермической перфузии почек собак». European Surgical Research . 6 (2): 79–94. doi :10.1159/000127708. ISSN  1421-9921. PMID  4425410.
  79. ^ Ли, Джеймс Б.; Вэнс, Вернон К.; Кэхилл, Джордж Ф. (1962-07-01). «Метаболизм субстратов, меченных C 14, корковым и мозговым веществом почек кролика» (PDF) . American Journal of Physiology. Устаревший контент . 203 (1): 27–36. doi :10.1152/ajplegacy.1962.203.1.27. ISSN  0002-9513. PMID  14463505. S2CID  33890310. Архивировано из оригинала (PDF) 26.02.2019.
  80. ^ Abodeely DA, Lee JB (1971). «Топливо дыхания почечного мозгового вещества». Am J Physiol . 220 (6): 1693–1700. doi :10.1152/ajplegacy.1971.220.6.1693. PMID  4253387.
  81. ^ Хуан, Дж. С.; Даунс, Г. Л.; Белзер, Ф. О. (сентябрь 1971 г.). «Использование жирных кислот в перфузируемых гипотермических почках собак». Журнал исследований липидов . 12 (5): 622–627. doi : 10.1016/S0022-2275(20)39482-7 . ISSN  0022-2275. PMID  5098398.
  82. ^ Хуан, Жозефина С.; Даунс, Гленн Л.; Чайлдресс, Гвендолин Л.; Фелтс, Джеймс М.; Белзер, Фолкерт О. (октябрь 1974 г.). «Окисление меченых 14С субстратов корой почек собак при 10 и 38 °C». Криобиология . 11 (5): 387–394. doi :10.1016/0011-2240(74)90105-9. PMID  4452273.
  83. ^ Lee KY (1971). «Потеря липидов в пластиковых трубках». J Lipid Res . 12 (5): 635–636. doi : 10.1016/S0022-2275(20)39484-0 . PMID  5098400.
  84. ^ Абуна, GM; Лим, F.; Кук, JS; Грабб, W.; Крейг, SS; Сейбел, HR; Хьюм, DM (март 1972 г.). «Трехдневное сохранение почек у собак». Хирургия . 71 (3): 436–444. ISSN  0039-6060. PMID  4551562.
  85. ^ Грундманн, Р.; Берр, Ф.; Питчи, Х.; Кирхгофф, Р.; Пихльмайер, Х. (март 1974 г.). «Сохранение почек у собак в течение 96 часов». Трансплантация . 17 (3): 299–305. doi : 10.1097/00007890-197403000-00010 . ISSN  0041-1337. PMID  4592185. S2CID  37365155.
  86. ^ Коллинз ГМ, Халас Н.А. (1976). «Сорокавосьмичасовое хранение почек во льду. Важность содержания катионов». Хирургия . 79 (4): 432–435. PMID  769222.
  87. ^ Pegg, DE; Fuller, BJ; Foreman, J.; Green, CJ (декабрь 1972 г.). «Выбор пластиковых трубок для экспериментов по перфузии органов». Криобиология . 9 (6): 569–571. doi :10.1016/0011-2240(72)90182-4. ISSN  0011-2240. PMID  4658019.
  88. ^ Дворак, Кеннет Дж.; Браун, Уильям Э.; Магнуссон, Магнус О.; Стоу, Николас Т.; Бановски, Линн Х. В. (февраль 1976 г.). «Влияние высоких доз метилпреднизолона на изолированную перфузируемую почку собаки». Трансплантация . 21 (2): 149–157. doi : 10.1097/00007890-197602000-00010 . ISSN  0041-1337. PMID  1251463. S2CID  29825354.
  89. ^ Лазарус, Харрисон М.; Уорник, К. Терри; Хопфенбек, Арлин (апрель 1982 г.). «Разрыв цепи ДНК после хранения в почках». Криобиология . 19 (2): 129–135. doi :10.1016/0011-2240(82)90133-X. PMID  7083879.
  90. ^ Lazarus HM, Hopfenbeck A (1974). «Деградация ДНК во время хранения». Experientia . 30 (12): 1410–1411. doi :10.1007/bf01919664. PMID  4442530. S2CID  5240888.
  91. ^ Шейл, А. Г. Росс; Драммонд, Дж. Малкольм; Булас, Джон (август 1975 г.). «Сосудистый тромбоз в машинно-перфузируемых почечных аллотрансплантатах». Трансплантация . 20 (2): 178–9. doi : 10.1097/00007890-197508000-00016 . ISSN  0041-1337. PMID  1101485.
  92. ^ Кросс, Дональд Э.; Уиттиер, Фредерик К.; Куппейдж, Фрэнсис Э.; Крауч, Томас; Мануэль, Юджин Л.; Грэнтем, Джаред Дж. (июнь 1974 г.). «Сверхострое отторжение почечных аллотрансплантатов после пульсирующей перфузии перфузатом, содержащим специфические антитела». Трансплантация . 17 (6): 626–628. doi : 10.1097/00007890-197406000-00013 . ISSN  0041-1337. PMID  4597928.
  93. ^ Лайт, Джимми А.; Эннэйбл, Чарльз; Перлофф, Леонард Дж.; Салкин, Майкл Д.; Хилл, Гэри С.; Этередж, Эдвард Э.; Спис, Эверетт К. (июнь 1975 г.). «Иммунное повреждение от сохранения органов». Трансплантация . 19 (6): 511–516. doi : 10.1097/00007890-197506000-00010 . ISSN  0041-1337. S2CID  45211253.
  94. ^ Фило, RS; Диксон, LG; Суба, EA; Селл, KW (июль 1974 г.). «Иммунологическое повреждение, вызванное перфузией ex vivo аутотрансплантатов почек у собак». Хирургия . 76 (1): 88–100. ISSN  0039-6060. PMID  4601595.
  95. ^ Демпстер, В. Дж.; Коунц, С. Л.; Йованович, М. (1964-02-15). «Простая техника хранения почек». BMJ . 1 (5380): 407–410. doi :10.1136/bmj.1.5380.407. ISSN  0959-8138. PMC 1813389 . PMID  14085969.