stringtranslate.com

Выжить

Сурвивин , также называемый бакуловирусным ингибитором повторов апоптоза 5 или BIRC5 , представляет собой белок , который у человека кодируется геном BIRC5 . [5] [6]

Сурвивин является членом семейства ингибиторов апоптоза (IAP). Белок сурвивин ингибирует активацию каспазы , тем самым приводя к негативной регуляции апоптоза или запрограммированной гибели клеток . Об этом свидетельствует нарушение путей индукции сурвивина, приводящее к усилению апоптоза и замедлению роста опухоли. Белок сурвивин экспрессируется на высоком уровне в большинстве опухолей человека и тканях плода, но полностью отсутствует в терминально дифференцированных клетках. [7] Эти данные позволяют предположить, что сурвивин может стать новой мишенью для лечения рака, которая позволит различать трансформированные и нормальные клетки. Экспрессия сурвивина также в высокой степени регулируется клеточным циклом и экспрессируется только в фазе G2-M. Известно, что сурвивин локализуется в митотическом веретене за счет взаимодействия с тубулином во время митоза и может играть важную роль в регуляции митоза. Молекулярные механизмы регуляции сурвивина до сих пор недостаточно изучены, но регуляция сурвивина, по-видимому, связана с белком p53 . Он также является прямым геном-мишенью пути Wnt и активируется бета-катенином . [8]

Семейство антиапоптотических белков IAP

Сурвивин является членом семейства антиапоптотических белков IAP . Показано, что его функция сохраняется на протяжении всей эволюции, поскольку гомологи белка обнаружены как у позвоночных , так и у беспозвоночных . [9] Первые идентифицированные члены IAP были из бакуловирусных IAP, Cp-IAP и Op-IAP, которые связываются с каспазами и ингибируют их как механизм, который способствует его эффективному инфицированию и циклу репликации в хозяине. [9] Позже были обнаружены еще пять человеческих IAP, которые включали XIAP , c-IAPl , C-IAP2 , NAIP и сурвивин. Сурвивин, как и другие, был обнаружен благодаря его структурной гомологии с белками семейства IAP в В-клеточной лимфоме человека . Было показано, что человеческие IAP, XIAP, c-IAP1, C-IAP2 связываются с каспазой-3 и -7 , которые являются эффекторными каспазами в сигнальном пути апоптоза. [9] Однако с абсолютной уверенностью не известно, как IAPs механически ингибируют апоптоз на молекулярном уровне.

Общая особенность, которая присутствует во всех IAP в присутствии BIR (бакуловирусный повтор IAP, мотив из ~70 аминокислот) в одной-трех копиях. Это было показано Таммом и др. что выключения BIR2 из XIAP было достаточно, чтобы вызвать потерю функции с точки зрения способности XIAP ингибировать каспазы. Это позволяет предположить, что именно в этих мотивах BIR содержится антиапоптотическая функция этих IAP. Один домен BIR Survivin демонстрирует аналогичную последовательность по сравнению с доменами BIR XIAP. [9]

Изоформы

Один ген сурвивина может давать начало четырем различным альтернативно сплайсированным транскриптам: [10]

  1. Сурвивин , который имеет структуру из трех интронов и четырех экзонов как у мышей, так и у человека.
  2. Survivin-2B , имеющий вставку альтернативного экзона 2.
  3. Survivin-Delta-Ex-3 , у которого удален экзон 3. Удаление экзона 3 приводит к сдвигу рамки, в результате которого образуется уникальный карбоксильный конец с новой функцией. Эта новая функция может включать сигнал ядерной локализации. Кроме того, также генерируется сигнал митохондриальной локализации.
  4. Survivin-3B , имеющий вставку альтернативного экзона 3.

Состав

Структурной особенностью, общей для всех белков семейства IAP, является то, что все они содержат по крайней мере один бакуловирусный домен повтора IAP ( BIR ), характеризующийся консервативным мотивом Cys/His, координирующим цинк, на N-концевой половине белка. [11] [12]

Survivin отличается от других членов семейства IAP тем, что имеет только один домен BIR. [11] [12] Мыши и человеческий BIR-домен сурвивина очень схожи структурно, за исключением двух различий, которые могут влиять на вариабельность функций. Человеческий сурвивин также содержит удлиненную С-концевую спираль, содержащую 42 аминокислоты. [11] [12] Сурвивин имеет массу 16,5 кДа и является самым маленьким членом семейства IAP. [11] [12] Рентгеновская кристаллография показала, что две молекулы человеческого сурвивина объединяются, образуя димер в форме галстука-бабочки через гидрофобный интерфейс. [11] [12] Этот интерфейс включает N-концевые остатки 6–10 непосредственно перед областью домена BIR и область из 10 остатков, соединяющую домен BIR с C-концевой спиралью. [11] [12] Структурная целостность определенной кристаллической структуры сурвивина вполне надежна, поскольку для получения изображений использовались физиологические условия.

Функция

Апоптоз

Апоптоз , процесс запрограммированной гибели клеток, включает в себя сложные сигнальные пути и каскады молекулярных событий. Этот процесс необходим для правильного развития во время роста эмбриона и плода, когда происходит разрушение и реконструкция клеточных структур. У взрослых организмов апоптоз необходим для поддержания дифференцированной ткани путем установления баланса между пролиферацией и гибелью клеток. Известно, что внутриклеточные протеазы, называемые каспазами, разрушают клеточное содержимое клетки путем протеолиза при активации пути смерти.

Клетки млекопитающих имеют два основных пути, ведущих к апоптозу.

1. Внешний путь : инициируется внешними лигандами, связывающимися с рецепторами смерти на поверхности клетки. Примером этого является связывание фактора некроза опухоли-альфа ( ФНО-альфа ) с рецептором ФНО-альфа . Примером рецептора TNF является Fas ( CD95 ), который рекрутирует каспазы-активаторы, такие как каспаза-8, при связывании TNF на поверхности клетки. Активация инициаторных каспаз затем инициирует нижестоящий каскад событий, который приводит к индукции эффекторных каспаз, которые функционируют в режиме апоптоза. [9] [13]

2. Внутренний путь : этот путь инициируется внутриклеточными стимулами или стимулами окружающей среды. Он ориентирован на обнаружение неправильного функционирования митохондрий в клетке и, как следствие, активирует сигнальные пути для совершения самоубийства. Проницаемость мембран митохондрий увеличивается, в цитоплазму высвобождаются определенные белки , что способствует активации инициаторных каспаз. Особый белок, высвобождаемый из митохондрий, — это цитохром с . Цитохром с затем связывается с Apaf-1 в цитозоле и приводит к активации инициатора каспазы-9. Активация инициаторных каспаз затем инициирует нижестоящий каскад событий, который приводит к индукции эффекторных каспаз, которые функционируют в режиме апоптоза. [9] [13]

Одно семейство белков, называемое IAP, играет роль в регулировании гибели клеток, ингибируя этот процесс. IAP, такие как сурвивин, ингибируют апоптоз путем физического связывания и ингибирования правильной функции каспаз. [9] Функция IAP эволюционно консервативна, поскольку было показано, что гомологи IAP у дрозофилы необходимы для выживания клеток. [9]

IAPs участвовали в исследованиях по оказанию регулирующего воздействия на деление клеток. Дрожжевые клетки с нокаутами определенных генов IAP не обнаруживали проблем, связанных с гибелью клеток, но демонстрировали дефекты митоза, характеризующиеся неправильной сегрегацией хромосом или нарушением цитокинеза. [9]

Удаление определенных IAP, по-видимому, не оказывает глубокого влияния на путь гибели клеток, поскольку существует избыточность функций многих IAP, существующих в клетке. [9] Однако предполагается, что они играют роль в поддержании антиапоптотической среды внутриклеточно. Изменение экспрессии определенных IAPs показало увеличение индукции спонтанной гибели клеток или повышение чувствительности к стимулам смерти. [9]

Механизм действия

Ингибирование апоптоза, индуцированного Bax и Fas

Тамм и др. показали, что сурвивин ингибирует пути апоптоза, индуцированные как Bax , так и Fas . [9] Эксперимент включал трансфекцию клеток HEK 293 плазмидой, кодирующей Bax, что приводило к увеличению апоптоза (~ 7 раз), измеренному с помощью окрашивания DAPI . [9] Затем они контртрансфицировали клетки 293 плазмидами, кодирующими Bax, и плазмидами, кодирующими сурвивин. Они заметили, что клетки, трансфицированные вместе с сурвивином, показали значительное снижение апоптоза (~3 раза). Аналогичный результат был также получен для клеток, трансфицированных плазмидой, сверхэкспрессирующей Fas. Были проведены иммуноблоты и подтверждено, что сурвивин не ингибирует механизм предотвращения превращения белков Bax или Fas в полностью функциональные белки. [9] Следовательно, сурвивин должен действовать где-то ниже сигнального пути Bax или Fas, ингибируя апоптоз через эти пути. [9]

Взаимодействие с каспазой-3 и -7

В этой части эксперимента Tamm et al. трансфицировали 293 клетки сурвивином и лизировали их для получения клеточного лизата. Лизаты инкубировали с различными формами каспаз и сурвивин иммуноперципитировали антителом против сурвивина. Идея, лежащая в основе этого, заключается в том, что если сурвивин физически связывается с каспазой, с которой он инкубируется, он будет осаждаться вместе с сурвивином, в то время как все остальное в лизате вымывается. Затем иммунопреципитаты анализировали с помощью электрофореза в ДСН-ПААГ, а затем иммуноблоттинг для обнаружения желаемой каспазы. Если интересующая каспаза была обнаружена, это означало, что она связалась с сурвивином на этапе иммунопреципитации, что означает, что сурвивин и конкретная каспаза связались заранее. Активные каспазы-3 и -7 коиммунопреципитируются с сурвивином. Неактивные проформы каспазы-3 и -7 не связывали сурвивин. [9] Сурвивин также не связывается с активной каспазой-8. [9] Каспаза-3 и -7 являются эффекторными протеазами, тогда как каспаза-8 представляет собой каспазу-инициатор, которая находится выше по пути апоптоза. [9] Эти результаты демонстрируют способность сурвивина связываться с определенными каспазами in vitro , но не обязательно применимы к реальным физиологическим условиям. Позже исследование 2001 года подтвердило, что человеческий сурвивин прочно связывает каспазу-3 и -7 при экспрессии в E. coli . [14]

Дополнительные доказательства в поддержку идеи о том, что сурвивин блокирует апоптоз путем прямого ингибирования каспаз, были предоставлены Tamm et al. 293 клетки трансфицировали либо переэкспонированной плазмидой, кодирующей каспазу-3 или -7, и сурвивином. Они показали, что сурвивин ингибирует процессинг этих двух каспаз в их активные формы. Хотя было показано, что сурвивин, как упоминалось выше, связывается только с активными формами этих каспаз, вполне вероятно, что сурвивин ингибирует активные формы каспаз, возникающие в результате расщепления и активации большего количества его собственных проформ. Таким образом, сурвивин действует, возможно, предотвращая такой каскад расщепления и амплификации активации, приводящий к снижению апоптоза. [9]

Аналогичным образом, если посмотреть на митохондриальный путь апоптоза, цитохром с временно экспрессировался в клетках 293, чтобы оценить ингибирующее действие сурвивина на этот путь. Хотя подробности здесь не приводятся, было показано, что сурвивин также ингибирует активацию каспаз, индуцированную цитохромом С и каспазой-8. [9]

Регуляция цитокинеза

Хотя механизм, с помощью которого сурвивин может регулировать митоз и цитокинез клеток , неизвестен, наблюдения, сделанные по его локализации во время митоза, убедительно свидетельствуют о том, что он каким-то образом участвует в цитокинетическом процессе.

Пролиферирующие клетки Daoy помещали на покровное стекло, фиксировали и окрашивали флуоресцентными антителами к сурвивину и альфа-тубулину. Иммунофлуоресценцию с использованием конфокальной микроскопии использовали для изучения локализации сурвивина и тубулина во время клеточного цикла для поиска каких-либо закономерностей экспрессии сурвивина. Сурвивин отсутствовал в интерфазе , но присутствовал в фазе G2 - M . [10]

Можно было видеть, что на разных стадиях митоза сурвивин следует определенному образцу локализации. В профазе и метафазе сурвивин преимущественно имеет ядерное расположение. [10] Во время профазы, когда хроматин конденсируется и становится видимым под микроскопом, сурвивин начинает перемещаться к центромерам. [10] В прометафазе, когда ядерная мембрана диссоциирует и микротрубочки веретена пересекают ядерную область, сурвивин остается на центромерах . [10] В метафазе, когда хромосомы выравниваются в средней пластинке и с большим напряжением притягиваются к любому полюсу с помощью прикреплений кинетохор, сурвивин затем связывается с кинетохорами. [10] В анафазе, когда происходит разделение хроматид, кинетохорные микротрубочки укорачиваются по мере движения хромосом к полюсам веретена, и сурвивин также перемещается к средней пластинке. [10] Таким образом, сурвивин накапливается в средней пластинке в телофазе. [10] Наконец, сурвивин локализуется в средней части тела в борозде расщепления. [10]

Взаимодействие и локализация в митохондриях

Было показано, что сурвивин может гетеродимеризоваться индивидуально с двумя вариантами сплайсинга Survivin-2B и survivin-deltaEx3. [10] Доказательства гетеродимеризации сплайсированных вариантов сурвивина с сурвивином были продемонстрированы в экспериментах по совместной иммунопреципитации после котрансфекции соответствующих вариантов сурвивина с сурвивином. Чтобы определить локализацию экзогенно экспрессируемых сурвивина-2B и сурвивина-дельтаEx3, были созданы слитые конструкции белков с GFP и HcRed соответственно, и клетки Daoy были трансфицированы плазмидными конструкциями. Сурвивин также был помечен флуоресцентным белком. Слияние вариантов сурвивина с флуоресцентными молекулами позволяет легко определить местоположение клеток с помощью флуоресцентной микроскопии. Сурвивин-2B сам по себе локализуется как в ядерном, так и в цитоплазматическом компартментах, тогда как сурвивин-дельтаEx3 локализуется только в ядре. [10] Однако локализация трех вариантов (сурвивин, сурвивин-2B и сурвивин-дельтаEx3) различается при совместной трансфекции, а не по отдельности. [10]

Чтобы увидеть, какие субклеточные компартменты содержат комплексы сплайсинговых вариантов сурвивина, использовали флуоресцентные маркеры антител для различных органелл в клетке. Предполагается, что при флуоресцентной микроскопии, если конкретный комплекс сурвивина расположен в этом конкретном клеточном компартменте, можно также наблюдать перекрытие флуоресценции, испускаемой меченым комплексом сурвивина и меченым компартментом. Чтобы отличить компартмент от сурвивина, используют флуоресценцию разного цвета.

Чтобы проверить эти наблюдения, они фракционировали субклеточные компартменты и провели вестерн-блот-анализ, чтобы окончательно сказать, что комплексы сурвивина действительно локализуются в этих компартментах.

Роль в раке

Экспрессия в различных карциномах

Известно, что сурвивин экспрессируется во время развития плода и в большинстве типов опухолевых клеток, но редко присутствует в нормальных, незлокачественных взрослых клетках. [15] Тамм и др. показали, что сурвивин экспрессируется во всех 60 различных линиях опухолей человека, используемых в программе скрининга противораковых лекарств Национального института рака , с самыми высокими уровнями экспрессии в линиях рака молочной железы и легких и самыми низкими уровнями при раке почек . [9] Знание относительных уровней экспрессии сурвивина в различных типах опухолей может оказаться полезным, поскольку терапия, связанная с сурвивином, может назначаться в зависимости от уровня экспрессии и зависимости типа опухоли от сурвивина для устойчивости к апоптозу.

Как онкоген

Сурвивин можно рассматривать как онкоген, поскольку его аберрантная сверхэкспрессия в большинстве раковых клеток способствует их устойчивости к апоптотическим стимулам и химиотерапевтической терапии, тем самым способствуя их продолжительному выживанию.

Геномная нестабильность

Было обнаружено, что большинство видов рака человека имеют прирост и потерю хромосом, что может быть связано с хромосомной нестабильностью (CIN). Одной из причин, вызывающих ЦИН, является инактивация генов, которые контролируют правильное разделение сестринских хроматид во время митоза. Чтобы лучше понять функцию сурвивина в митотической регуляции, ученые заглянули в область геномной нестабильности. Известно, что сурвивин связывается с микротрубочками митотического веретена в начале митоза. [16]

В литературе было показано, что нокаут сурвивина в раковых клетках нарушает образование микротрубочек и приводит к полиплоидии , а также к массивному апоптозу. [16] Также было показано, что клетки, обедненные сурвивином, выходят из митоза, не достигая правильного выравнивания хромосом, а затем реформируют отдельные тетраплоидные ядра. [16] Дополнительные данные также свидетельствуют о том, что сурвивин необходим для поддержания остановки митоза при возникновении проблем с митозом. [16] Упомянутые выше данные свидетельствуют о том, что сурвивин играет важную регуляторную роль как в прогрессировании митоза, так и в поддержании остановки митоза. Это кажется странным, поскольку известно, что сурвивин сильно активируется в большинстве раковых клеток (которые обычно содержат характеристики хромосомной нестабильности), а его функция заключается в том, что способствует правильной регуляции митоза.

Регулирование по p53

p53 ингибирует экспрессию сурвивина на уровне транскрипции

Было показано, что р53 дикого типа подавляет экспрессию сурвивина на уровне мРНК. [17] С использованием аденовирусного вектора для р53 дикого типа была трансфицирована линия клеток рака яичников человека 2774qw1 (которая экспрессирует мутантный р53). Уровни мРНК сурвивина были проанализированы с помощью количественной ПЦР в реальном времени ( ОТ-ПЦР ) и показали зависимое от времени снижение уровней мРНК сурвивина, когда клетки были инфицированы p53 дикого типа. [17] Снижение уровня мРНК сурвивина в 3,6 раза наблюдалось через 16 часов после начала инфекции и снижалось в 6,7 раза через 24 часа после заражения. [17] Результаты вестерн-блоттинга действительно показывают, что p53 из аденовирусного вектора действительно экспрессируется в клетках с использованием антител, специфичных для p53. Экспрессия уровней p53, указывающая на его роль в репрессии сурвивина, показывает, что p53 начинает экспрессироваться через 6 часов после заражения и достигает максимального уровня через 16–24 часа. [17] Чтобы дополнительно подтвердить, что эндогенный p53 дикого типа действительно вызывает репрессию экспрессии гена сурвивина, авторы индуцировали A549 (линию клеток рака легких человека с p53 дикого типа) и T47D (линию клеток рака молочной железы человека с мутантным p53) клетки с агентом, повреждающим ДНК адриамицином, чтобы вызвать физиологический апоптотический ответ р53 в этих раковых клетках и сравнить уровни сурвивина, измеренные с теми же клетками без индукции повреждения ДНК. Линия А549, которая по своей сути имеет функционирующий р53 дикого типа, продемонстрировала значительное снижение уровней сурвивина по сравнению с неиндуцированными клетками. [17] Этот же эффект не наблюдался в клетках T47D, несущих мутантный неактивный р53. [17]

Нормальная функция P53 — регулировать гены, контролирующие апоптоз. Поскольку сурвивин является известным ингибитором апоптоза, можно предположить, что репрессия сурвивина р53 является одним из механизмов, с помощью которого клетки могут подвергаться апоптозу при индукции апоптотическими стимулами или сигналами. Когда сурвивин сверхэкспрессируется в клеточных линиях, упомянутых в предыдущем абзаце, апоптозный ответ от повреждающего ДНК агента адриамицина снижается дозозависимым образом. [17] Это предполагает, что снижение регуляции сурвивина с помощью p53 важно для p53-опосредованного пути апоптоза, чтобы успешно привести к апоптозу. Известно, что определяющей характеристикой большинства опухолей является сверхэкспрессия сурвивина и полная потеря р53 дикого типа. [17] Доказательства, представленные Мирзой и др. показывает, что существует связь между сурвивином и р53, которая, возможно, может объяснить критическое событие, способствующее прогрессированию рака.

подавление экспрессии сурвивина p53

Чтобы проверить, оказывает ли реэкспрессия р53 в раковых клетках (которые потеряли экспрессию р53) супрессивный эффект на промотор гена сурвивина, была создана репортерная конструкция люциферазы. Выделенный промотор сурвивина помещали выше репортерного гена люциферазы. В репортерном анализе люциферазы, если промотор активен, ген люциферазы транскрибируется и транслируется в продукт, излучающий свет, который можно измерить количественно и, таким образом, представляет активность промотора. Эту конструкцию трансфицировали в раковые клетки, которые имели либо дикий тип, либо мутантный р53. Высокая активность люциферазы была измерена в клетках с мутантным р53, а значительно более низкие уровни люциферазы были измерены для клеток с р53 дикого типа. [17]

Трансфекция различных типов клеток р53 дикого типа была связана с сильной репрессией промотора сурвивина. [17] Не было показано, что трансфекция мутантным р53 сильно подавляет промотор сурвивина. [17] Были приготовлены дополнительные конструкции люциферазы с различной степенью делеции с 5'-конца области промотора сурвивина. В какой-то момент произошла делеция, которая привела к тому, что уровни сурвивина стали безразличны к присутствию плазмиды со сверхэкспрессией р53, что указывает на то, что существует конкретная область, проксимальная к сайту начала транскрипции , которая необходима для подавления сурвивина р53. [17] Хотя было обнаружено, что два сайта связывания р53 расположены на промоторе гена сурвивина, анализ с использованием делеций и мутаций показал, что эти сайты не являются существенными для инактивации транскрипции. [17]

Вместо этого наблюдается, что модификация хроматина внутри промоторной области может быть ответственна за репрессию транскрипции гена сурвивина. Это объясняется ниже в разделе эпигенетической регуляции. [17]

Регуляция клеточного цикла

Показано, что сурвивин четко регулируется клеточным циклом, поскольку его экспрессия оказывается доминантной только в фазе G2/M. [13] Эта регуляция существует на уровне транскрипции, поскольку есть свидетельства присутствия боксов области гомологии клеточного цикла/гена клеточного цикла (CDE/CHR), расположенных в области промотора сурвивина. [13] Дополнительные доказательства, подтверждающие этот механизм регуляции, включают данные о том, что суривин полиубиквинируется и разлагается протеасомами во время интерфазы клеточного цикла. [13] Более того, было показано, что сурвивин локализуется в компонентах митотического веретена во время метафазы и анафазы митоза. [13] Физическая связь между полимеризованным тубулином и сурвивином также была показана in vitro . [13] Также показано, что посттранскрипционная модификация сурвивина, включающая фосфорилирование Thr34, приводит к повышению стабильности белка в фазе G2/M клеточного цикла. [13]

Известно от Мирзы и др. что репрессия сурвивина р53 не является результатом какой-либо прогрессивной регуляции клеточного цикла. Тот же эксперимент Мирзы и др. Что касается определения р53, то подавление сурвивина на уровне транскрипции повторялось, но на этот раз для клеток, арестованных на разных стадиях клеточного цикла. Было показано, что, хотя р53 в разной степени арестовывает количество клеток на разных фазах, измеренный уровень мРНК сурвивина и уровни белка были одинаковыми во всех образцах, трансфицированных р53 дикого типа. Это показывает, что р53 действует независимо от клеточного цикла, ингибируя экспрессию сурвивина. [17]

Эпигенетическая и генетическая регуляция

Как отмечается в литературе, сурвивин сверхэкспрессируется во многих типах опухолей. Ученые не уверены в механизме, вызывающем аномальную сверхэкспрессию сурвивина; однако уровень р53 снижается почти при всех видах рака, поэтому заманчиво предположить, что сверхэкспрессия сурвивина обусловлена ​​неактивностью р53. Вагнер и др. исследовали возможный молекулярный механизм, связанный с избыточной экспрессией сурвивина при остром миелоидном лейкозе (ОМЛ). В своих экспериментах они провели как эпигенетический, так и генетический анализ области промотора гена сурвивина у пациентов с ОМЛ и сравнили наблюдения с тем, что наблюдалось в мононуклеарных клетках периферической крови (РВМС), которые, как было показано, не экспрессируют сурвивин. Предположив, что молекулярный механизм реэкспрессии сурвивина в раковых клетках находится на уровне транскрипции, авторы решили посмотреть на отдельные части промоторной области сурвивина, чтобы увидеть, что происходит в раковых клетках того, чего не происходит в нормальных клетках, которые вызывает такой высокий уровень сурвивина. Что касается эпигенетического механизма регуляции генов сурвивина, авторы измерили статус метилирования промотора сурвивина, поскольку считается, что метилирование генов играет важную роль в канцерогенезе путем подавления определенных генов или наоборот. Авторы использовали специфичную для метилирования полимеразную цепную реакцию с методами бисульфитного секвенирования для измерения статуса метилирования промотора при ОМЛ и РВМС и обнаружили неметилированные промоторы сурвивина в обеих группах. [18] Этот результат показывает, что статус метилирования ДНК не является важным регулятором реэкспрессии сурвивина во время лейкемогенеза. [18] Однако Де Карвальо и др. провели скрининг метилирования ДНК и установили, что метилирование ДНК IRAK3 играет ключевую роль в повышении регуляции сурвивина при различных типах рака, [19] предполагая, что эпигенетические механизмы играют косвенную роль в аномальной сверхэкспрессии сурвивина. Что касается генетического анализа области промотора сурвивина, выделенную ДНК ОМЛ и РВМС обрабатывали бисульфитом, а последовательность области промотора сурвивина амплифицировали с помощью ПЦР и секвенировали для поиска каких-либо конкретных генетических изменений в последовательности ДНК между двумя группы. Были идентифицированы три однонуклеотидных полиморфизма (SNP), которые присутствовали как у пациентов с ОМЛ, так и у здоровых доноров. Этот результат предполагает, что появление этих SNP в промоторной области гена сурвивина также, по-видимому, не имеет значения для экспрессии сурвивина. [18]Однако пока не исключено, что могут существовать и другие возможные эпигенетические механизмы, которые могут быть ответственны за высокий уровень экспрессии сурвивина, наблюдаемый в раковых клетках, а не в нормальных клетках. Например, также можно посмотреть профиль ацетилирования промоторной области сурвивина. Различные типы рака и тканей могут иметь небольшие или значительные различия в способах регуляции экспрессии сурвивина в клетке, и, таким образом, статус метилирования или генетические различия в промоторе сурвивина могут быть разными в разных тканях. Таким образом, необходимо исследовать дальнейшие эксперименты по оценке эпигенетического и генетического профиля различных типов опухолей.

Как мишень для наркотиков

Экспрессия при раке как инструмент противораковой терапии

Известно, что сурвивин высоко экспрессируется в большинстве типов опухолевых клеток и отсутствует в нормальных клетках, что делает его хорошей мишенью для терапии рака. [20] [21] [22] [23] [24] Использование сверхактивного промотора сурвивина в большинстве типов раковых клеток позволяет доставлять терапевтические средства только в раковые клетки и удалять их из нормальных клеток. [25]

Малые интерферирующие РНК (миРНК) представляют собой синтетические антисмысловые олигонуклеотиды по отношению к мРНК интересующего гена, которые подавляют экспрессию определенного гена путем его комплементарного связывания. siRNA, такие как LY2181308 , связанные с соответствующей мРНК, приводят к нарушению трансляции этого конкретного гена и, следовательно, к отсутствию этого белка в клетке. Таким образом, использование миРНК имеет большой потенциал в качестве терапевтического средства для человека, поскольку оно может нацеливаться и подавлять экспрессию потенциально любого белка, который вы хотите. Проблема возникает, когда экспрессию миРНК в клетке невозможно контролировать, что позволяет ее конститутивной экспрессии вызывать токсические побочные эффекты. Что касается практического лечения рака, необходимо либо доставлять миРНК специфично в раковые клетки, либо контролировать экспрессию миРНК. Предыдущие методы терапии миРНК использовали использование последовательностей миРНК, клонированных в векторы под контролем конститутивно активных промоторов. [25] Это создает проблему, поскольку эта модель неспецифична для раковых клеток и повреждает и нормальные клетки. [25] Зная, что сурвивин сверхэкспрессируется именно в раковых клетках и отсутствует в нормальных клетках, можно предположить, что промотор сурвивина активен только в раковых клетках. Таким образом, использование этой разницы между раковыми и нормальными клетками позволит проводить соответствующую терапию, направленную только на вредные клетки пациента. В эксперименте, демонстрирующем эту идею, Trang et al. создали специфичный для рака вектор, экспрессирующий миРНК зеленого флуоресцентного белка (GFP) под промотором сурвивина человека. Клетки рака молочной железы MCF7 также котрансфицировали этим вектором, а также вектором, экспрессирующим GFP. Их основным открытием было то, что клетки MCF7, трансфицированные вектором siRNA для GFP под промотором сурвивина, имели значительное снижение экспрессии GFP, чем клетки, трансфицированные вектором siRNA под неспецифичным для рака промотором. [25] Более того, нормальные нераковые клетки, трансфицированные таким же образом, как указано выше, не показали значительного снижения экспрессии GFP. [25] Это означает, что в нормальных клетках промотор сурвивина не активен, и, таким образом, миРНК не будет экспрессироваться под неактивным промотором сурвивина. [25]

Антисмысловые олигонуклеотиды, нацеленные на мРНК сурвивина

Как известно, сурвивин сверхэкспрессируется при большинстве видов рака, что может способствовать устойчивости раковых клеток к апоптотическим стимулам из окружающей среды. Использование антисмысловой терапии сурвивином надеется сделать раковые клетки восприимчивыми к апоптозу за счет устранения экспрессии сурвивина в раковых клетках. [8]

Оли и др. разработали различные 20-мерные фосфоротиоатные антисмысловые олигонуклеотиды, которые нацелены на разные участки мРНК гена сурвивина. Антисмысловая функция олигонуклеотидов позволяет связываться с выжившей мРНК и, в зависимости от области, с которой она связывается, может ингибировать трансляцию выжившей мРНК в функциональный белок. ПЦР в реальном времени использовали для оценки уровней мРНК, присутствующей в клеточной линии аденокарциномы легкого A549, которая сверхэкспрессирует сурвивин. Был идентифицирован лучший антисмысловой олигонуклеотид, который эффективно подавлял уровни мРНК сурвивина и приводил к апоптозу клеток. Роль сурвивина в развитии рака в контексте сигнального пути заключается в его способности ингибировать активацию нижестоящих каспаз-3 и -7 от стимулов, индуцирующих апоптоз. Сверхэкспрессия сурвивина в опухолях может способствовать повышению устойчивости опухолей к апоптозу и, таким образом, способствовать бессмертию клеток даже в присутствии стимулов смерти. [25] В этом эксперименте было обнаружено, что олигонуклеотид 4003, нацеленный на нуклеотиды 232-251 мРНК сурвивина, наиболее эффективен в снижении уровня мРНК сурвивина в опухолевой линии A549. [25] Олигонуклеотиды 4003 вводили в опухолевые клетки путем трансфекции. Затем были проведены дальнейшие эксперименты с 4003. Один из дополнительных экспериментов включал определение дозозависимого эффекта 4003 на снижение уровня мРНК сурвивина. Было обнаружено, что концентрация 400 нМ приводила к максимальному подавлению 70% исходной присутствующей мРНК сурвивина. [25] Другой эксперимент на 4003 включал оценку любого биологического или цитотоксического эффекта, который оказывает 4003 на подавление мРНК сурвивина на клетках A549, с использованием МТТ-анализа. Количество клеток А549, трансфицированных 4003, значительно уменьшалось с увеличением концентрации 4003 по сравнению с клетками, трансфицированными либо несовместимой формой 4003, либо контролем липофектина. [25] Было проведено множество физических наблюдений, подтвердивших индукцию апоптоза к 4003 году. Например, лизаты обработанных 4003 клеток показали повышенные уровни активности каспазо-3-подобной протеазы; наблюдалось конденсирование ядер и фрагментация хроматина.

Иммунотерапия рака

В последние годы сурвивин стал объектом внимания в иммунотерапии рака, поскольку это антиген, который экспрессируется в основном в раковых клетках и отсутствует в нормальных клетках. Это связано с тем, что сурвивин считается решающим фактором в выживании опухоли. За прошедшие годы было накоплено много доказательств того, что сурвивин является сильным антигеном, активирующим Т-клетки, и уже начаты клинические испытания, чтобы доказать его полезность в клинике. [26]

Активация адаптивной иммунной системы

А. Клеточный Т-клеточный ответ

Первые доказательства распознавания и уничтожения сурвивин-специфичных CTL были продемонстрированы в анализе, в котором цитотоксические Т-клетки (CTL) индуцировали лизис B-клеток, трансфицированных для представления пептидов сурвивина на своей поверхности. [26] Наивные CD8+ Т-клетки были примированы дендритными клетками и, следовательно, могли распознавать специфические пептиды сурвивина, представленные на поверхности молекул главного комплекса гистосовместимости I (MHC I) В-клеток.

Б. Гуморальный ответ антител

Взяв образцы крови у онкологических больных, ученые обнаружили антитела, специфичные к сурвивину. [26] Эти антитела отсутствовали в образцах крови здоровых пациентов. [26] Таким образом, это показывает, что сурвивин способен вызывать полный гуморальный иммунный ответ. Это может оказаться полезным, поскольку можно будет измерить уровень сурвивин-специфических антител в крови пациента и использовать его для мониторинга прогрессирования опухоли. [26] При приобретении гуморального ответа на опухолевые антигены, такие как сурвивин, CD4+ Т-клетки активируются, чтобы побудить В-клетки вырабатывать антитела, направленные против конкретных антигенов.

Выделение антител, специфичных к пептидам сурвивина, полезно, поскольку можно посмотреть на структуру и последовательность эпитопсвязывающей бороздки антитела и, следовательно, сделать вывод о возможных эпитопах, которые могут поместиться в эту конкретную бороздку антитела. [26] Таким образом, можно определить конкретную пептидную часть белка сурвивина, которая наиболее эффективно и чаще всего связывается гуморальными антителами, вырабатываемыми против сурвивина. Это приведет к производству более специфичных вакцин сурвивина, которые содержат определенную часть белка сурвивина, который, как известно, вызывает хороший иммунный ответ, генерирует иммунную память и обеспечивает защиту от развития опухоли.

Повышенная экспрессия в опухолях и метастатических тканях

Сян и др. обнаружили новый подход к ингибированию роста и метастазирования опухоли путем одновременного воздействия как на опухоль, так и на ее сосудистую сеть с помощью ответа цитотоксических Т-клеток (CTL) против белка сурвивина, что позже приведет к активации апоптоза в опухолевых клетках. [27]

Идея и общий принцип его техники описаны ниже. Мышей иммунизировали пероральной вакцинацией, а затем подвергали воздействию опухоли путем инъекции им в грудную клетку определенного количества опухолевых клеток и предварительно сформированного внеклеточного матрикса Matrigel для удержания опухолевых клеток вместе. Мышей умерщвляли, а ткань эндотелия окрашивали флуоресцентным красителем, который поможет количественно оценить неоваскуляризацию опухоли с использованием анализа Matrigel. Было обнаружено значительное различие между контрольной и тестируемой группами: мыши, которым вводили вакцину, имели меньший ангиогенез в результате заражения опухолью, чем контрольные мыши, которым не вводили никакой вакцины до заражения опухолью. [27] Также были проведены анализы in vitro и другие тесты, чтобы подтвердить идею возникновения фактического иммунного ответа, подтверждающего то, что они наблюдали у мышей. [27] Например, селезенку зараженных мышей выделяли и измеряли на наличие каких-либо цитокинов и специфически активированных групп иммунных клеток, которые указывали бы на то, что после вакцинации действительно возник специфичный иммунный ответ. Выделенные CTL, специфичные для белка сурвивина, после вакцинации мышей использовали в анализах цитотоксичности, где было показано, что опухолевые клетки мышей, экспрессирующие сурвивин, погибают при инкубации со специфическими CTL. [27]

Используя пероральную ДНК-вакцину, содержащую аттенуированную невирулентную форму Salmonella typhimurium, которая кодирует секреторный хемокин CCL21 и белок сурвивин у мышей C57BL/6J, Xiang et al. смогли вызвать иммунный ответ, осуществляемый дендритными клетками (ДК) и ЦТЛ, для устранения и подавления легочных метастазов немелкоклеточной карциномы легкого. Активация иммунного ответа, скорее всего, происходит во вторичном лимфоидном органе, называемом пейеровой бляшкой, в тонком кишечнике, где ДК захватывают белок сурвивин путем фагоцитоза и представляют его на своих поверхностных рецепторах наивным CD8+ Т-клеткам (неинактивированным ЦТЛ). достичь специфического иммунного ответа, нацеленного исключительно на сурвивин. [27] Активированные ЦТЛ, специфичные для определенного антигена, убивают клетки-мишени, сначала распознавая части белка сурвивина, экспрессированного на белках MHC I (иммуногистосовместимости), представленных на поверхности опухолевых клеток и сосудистой сети, а затем высвобождая гранулы, которые побуждают опухолевые клетки подвергнуться воздействию апоптоз. ДНК-вакцина содержала секреторный хемокин CCL21 как способ повысить вероятность возникновения иммунного ответа за счет лучшего опосредования физического взаимодействия антигенпрезентирующих ДК и наивных CD8+ Т-клеток, что приводило к большей вероятности иммунной активации. [27]

Сенсибилизация, опосредованная ресвератролом

Это было показано Фульдой и др. что встречающееся в природе соединение ресвератрол (полифенол, содержащийся в винограде и красном вине) может использоваться в качестве сенсибилизатора апоптоза, вызванного противораковыми препаратами, вызывая остановку клеточного цикла. [28] Эта остановка клеточного цикла вызывает резкое снижение уровня сурвивина в клетках, поскольку из литературы известно, что экспрессия сурвивина тесно связана с фазовым состоянием клеточного цикла. Таким образом, снижение уровня сурвивина, который является фактором, способствующим устойчивости к химиотерапии и методам индукции апоптоза, сделает раковые клетки более склонными к такому лечению рака. Фульда и др. продемонстрировали преимущества ресвератрола посредством серии экспериментов. Во-первых, авторы статьи проверили внутренние цитотоксические эффекты ресвератрола. Они обнаружили, что он индуцирует умеренный уровень апоптоза только в клетках нейробластомы SHEP. [28] После этого они протестировали ресвератрол в сочетании с несколькими различными известными противораковыми средствами. Они обнаружили последовательное увеличение уровня апоптоза, вызванного препаратами, когда также присутствовал ресвератрол. [28] Более того, они меняли порядок, в котором лекарства или ресвератрол вводились в раковые клетки, чтобы определить, имела ли последовательность лечения какой-либо важный эффект. Было обнаружено, что самые высокие уровни индукции апоптоза наблюдались при добавлении ресвератрола перед лечением противораковыми препаратами. [28] Затем авторы проверили любую дифференциальную чувствительность к апоптозу, связанную с фазой клеточного цикла, в которой находились клетки. Анализ с помощью проточной цитометрии выявил накопление клеток в S-фазе при лечении ресвератролом. Клетки также останавливали на разных фазах клеточного цикла с помощью специальных соединений, а затем обрабатывали противораковыми препаратами. Они обнаружили, что клетки, остановленные в S-фазе, были значительно более чувствительны к цитотоксическим эффектам лекарств. [28]

Чтобы определить участие сурвивина в сенсибилизации, опосредованной ресвератролом, авторы решили проверить, будет ли снижение экспрессии специфического белка сурвивина оказывать аналогичный эффект на фенотип клеток, обработанных ресвератролом. Чтобы увидеть, на каком уровне ресвератрол действует, они провели нозерн-блоттинг и обнаружили, что лечение ресвератролом приводило к снижению уровней мРНК сурвивина [28] , что подразумевало ингибирующее действие ресвератрола на уровне транскрипции. Чтобы дополнительно выяснить, играет ли сурвивин ключевую роль в сенсибилизации раковых клеток к цитотоксическим препаратам, антисмысловые олигонуклеотиды сурвивина были использованы для нокдауна любой мРНК сурвивина и, таким образом, также исключалась возможность ее трансляции. siRNA для сурвивина являются комплементарными последовательности последовательности мРНК, кодирующей сурвивин. Когда эти миРНК сурвивина вводятся в клетки, они связываются с соответствующей комплементарной мРНК и, таким образом, предотвращают ее трансляцию, поскольку теперь мРНК не может правильно физически взаимодействовать с механизмом трансляции. Таким образом, миРНК сурвивина эффективно подавляют уровень экспрессии сурвивина в клетке. Клетки, обработанные антисмысловыми олигонуклеотидами сурвивина, показали такую ​​же сенсибилизацию к цитотоксическим препаратам, что и клетки, обработанные ресвератролом, что подтверждает механизм действия ресвератрола. [28]

Рак простаты

Было замечено, что развитие гормональной резистентности при раке предстательной железы может быть связано с активацией антиапоптотических генов, одним из которых является сурвивин. [29]

Чжан и др. выдвинули гипотезу, что, если сурвивин вносит значительный вклад в развитие резистентности к гормональной терапии в клетках рака простаты, нацеливание на сурвивин и его блокирование повысят восприимчивость клеток рака простаты к антиандрогенной терапии. (Антиандрогенная терапия использует препараты для устранения присутствия андрогенов в клетках и клеточной среде, поскольку известно, что такие андрогены повышают бессмертие опухоли в клетках рака простаты.) Zhang et al. впервые оценили уровень экспрессии сурвивина LNCaP (андроген-зависимой линии клеток рака простаты, которая экспрессирует интактные андрогенные рецепторы) с помощью количественного вестерн-анализа и обнаружили высокую экспрессию сурвивина в этих клетках. [29] Клетки, подвергшиеся воздействию дигидротестостерона (ДГТ), показали повышенный уровень экспрессии только сурвивина, но не других членов семейства IAP. [29] Этот результат предполагает, что андрогены могут активировать сурвивин, что способствует устойчивости к апоптозу, наблюдаемой в опухолевых клетках. [29] Затем, при добавлении к клеткам флутамида (антиандрогена), уровни сурвивина значительно снижались. [29] Клетки LNCaP трансдуцировали отдельно различными конструкциями гена сурвивина (мутантного или дикого типа), подвергали обработке флутамидом и оценивали уровень апоптоза. Было показано, что обработанные флутамидом клетки, трансдуцированные мутантом сурвивина, значительно увеличивают апоптоз в два раза по сравнению с лечением только флутамидом. [29] С другой стороны, было обнаружено, что сверхэкспрессия сурвивина дикого типа значительно снижает уровни апоптоза при лечении флутамидом по сравнению с лечением только флутамидом. [29] Таким образом, эти результаты подтверждают гипотезу о том, что сурвивин играет роль в антиапоптотической природе линии раковых клеток LNCaP и что ингибирование сурвивина в клетках рака простаты, по-видимому, усиливает терапевтический эффект флутамида.

Взаимодействия

Было показано, что сурвивин взаимодействует с:

Рекомендации

  1. ^ abc GRCh38: выпуск Ensembl 89: ENSG00000089685 - Ensembl , май 2017 г.
  2. ^ abc GRCm38: выпуск Ensembl 89: ENSMUSG00000017716 - Ensembl , май 2017 г.
  3. ^ "Ссылка на Human PubMed:". Национальный центр биотехнологической информации, Национальная медицинская библиотека США .
  4. ^ "Ссылка на Mouse PubMed:". Национальный центр биотехнологической информации, Национальная медицинская библиотека США .
  5. ^ Альтьери, округ Колумбия (февраль 1994 г.). «Молекулярное клонирование рецептора протеазы-1 эффекторных клеток, нового рецептора клеточной поверхности для фактора протеазы Ха». Ж. Биол. Хим . 269 ​​(5): 3139–42. дои : 10.1016/S0021-9258(17)41838-2 . ПМИД  8106347.
  6. ^ Альтиери, округ Колумбия (ноябрь 1994 г.). «Сплайсинг мРНК рецептора-1 протеазы эффекторных клеток модулируется необычным сохраненным интроном». Биохимия . 33 (46): 13848–55. дои : 10.1021/bi00250a039. ПМИД  7947793.
  7. ^ Сах Н.К., Хан З., Хан Г.Дж., Бисен П.С. (декабрь 2006 г.). «Структурная, функциональная и терапевтическая биология сурвивина». Рак Летт . 244 (2): 164–71. doi : 10.1016/j.canlet.2006.03.007. ПМИД  16621243.
  8. ^ ab Оли Р.А., Симойнс-Вюст А.П., Бауманн Б., Лич Ш., Фаббро Д., Стахель Р.А., Зангемайстер-Виттке У (июнь 2000 г.). «Новый антисмысловой олигонуклеотид, нацеленный на экспрессию сурвивина, индуцирует апоптоз и повышает чувствительность клеток рака легких к химиотерапии». Рак Рез . 60 (11): 2805–9. ПМИД  10850418.
  9. ^ abcdefghijklmnopqrstu Tamm I, Wang Y, Sausville E, Scudiero DA, Vigna N, Oltersdorf T, Reed JC (декабрь 1998 г.). «Белок сурвивин семейства IAP ингибирует активность каспаз и апоптоз, индуцированные Fas (CD95), Bax, каспазами и противораковыми препаратами». Рак Рез . 58 (23): 5315–20. ПМИД  9850056.
  10. ^ abcdefghijkl Калдас Х., Цзян Й., Холлоуэй, член парламента, Фангусаро Дж., Махотка С., Конвей Э.М., Алтура РА (март 2005 г.). «Варианты сплайсинга сурвивина регулируют баланс между пролиферацией и гибелью клеток». Онкоген . 24 (12): 1994–2007. дои : 10.1038/sj.onc.1208350 . ПМИД  15688031.
  11. ^ abcdef Вердеция М.А., Хуан Х., Дутил Э., Кайзер Д.А., Хантер Т., Ноэль Дж.П. (июль 2000 г.). «Структура выжившего антиапоптотического белка человека демонстрирует димерное расположение». Нат. Структура. Биол . 7 (7): 602–8. дои : 10.1038/76838. PMID  10876248. S2CID  30730657.
  12. ^ abcdef Шанталат Л., Скуфиас Д.А., Клеман Дж.П., Юнг Б., Дидеберг О., Марголис Р.Л. (июль 2000 г.). «Кристаллическая структура человеческого сурвивина представляет собой димер в форме галстука-бабочки с двумя необычными альфа-спиральными отростками». Мол. Клетка . 6 (1): 183–9. дои : 10.1016/s1097-2765(00)00019-8 . ПМИД  10949039.
  13. ^ abcdefgh Altieri DC (январь 2003 г.). «Подтверждение сурвивина как терапевтической мишени рака». Нат. Преподобный Рак . 3 (1): 46–54. дои : 10.1038/nrc968. PMID  12509766. S2CID  8567453.
  14. ^ abc Шин С., Сунг Б.Дж., Чо Ю.С., Ким Х.Дж., Ха NC, Хван Дж.И., Чунг К.В., Юнг Ю.К., О Б.Х. (январь 2001 г.). «Антиапоптотический белок человека сурвивин является прямым ингибитором каспаз-3 и -7». Биохимия . 40 (4): 1117–23. дои : 10.1021/bi001603q. ПМИД  11170436.
  15. ^ Амброзини Дж., Адида С., Альтьери, округ Колумбия (1997). «Новый антиапоптотический ген сурвивин, экспрессирующийся при раке и лимфоме». Нат. Мед . 3 (8): 917–21. дои : 10.1038/nm0897-917. PMID  9256286. S2CID  3062648.
  16. ^ abcd Кастедо М, Перфеттини Дж. Л., Румье Т., Андрео К., Медема Р., Кремер Г. (апрель 2004 г.). «Гибель клетки в результате митотической катастрофы: молекулярное определение». Онкоген . 23 (16): 2825–37. дои : 10.1038/sj.onc.1207528 . ПМИД  15077146.
  17. ^ abcdefghijklmno Мирза А., МакГирк М., Хокенберри Т.Н., Ву Q, Ашар Х., Блэк С., Вэнь С.Ф., Ван Л., Киршмайер П., Бишоп В.Р., Нильсен Л.Л., Пикетт CB, Лю С. (апрель 2002 г.). «Человеческий сурвивин отрицательно регулируется р53 дикого типа и участвует в р53-зависимом пути апоптоза». Онкоген . 21 (17): 2613–22. дои : 10.1038/sj.onc.1205353 . ПМИД  11965534.
  18. ^ abc Вагнер М, Шмельц К, Дёркен Б, Тамм I (июль 2008 г.). «Эпигенетический и генетический анализ промотора сурвивина при остром миелолейкозе». Лейк. Рез . 32 (7): 1054–60. doi :10.1016/j.leukres.2007.11.013. ПМИД  18206228.
  19. ^ Де Карвальо Д.Д., Шарма С., Ю Дж.С., Су С.Ф., Таберли ПК, Келли Т.К., Ян X, Лян Г., Джонс П.А. (май 2012 г.). «Скрининг метилирования ДНК выявляет эпигенетические события, способствующие выживанию раковых клеток». Раковая клетка . 21 (5): 655–67. дои : 10.1016/j.ccr.2012.03.045. ПМК 3395886 . ПМИД  22624715. 
  20. ^ Заффарони Н., Пеннати М., Дайдоне М.Г. (2005). «Сурвивин как мишень для новых противораковых вмешательств». Дж. Селл. Мол. Мед . 9 (2): 360–72. дои : 10.1111/j.1582-4934.2005.tb00361.x . ПМК 6740253 . ПМИД  15963255. 
  21. ^ Альтиери, округ Колумбия (март 2006 г.). «Таргетная терапия путем отключения перекрестных сигнальных сетей: парадигма выживания». Мол. Рак Там . 5 (3): 478–82. дои : 10.1158/1535-7163.MCT-05-0436 . ПМИД  16546961.
  22. ^ Пеннати М., Фолини М., Заффарони Н. (июнь 2007 г.). «Нацеливание на сурвивин в терапии рака: выполненные обещания и открытые вопросы». Канцерогенез . 28 (6): 1133–9. дои : 10.1093/carcin/bgm047 . ПМИД  17341657.
  23. ^ Мита AC, Мита ММ, Навроцкий С.Т., Джайлз Ф.Дж. (август 2008 г.). «Сурвивин: ключевой регулятор митоза и апоптоза и новая мишень для лечения рака». Клин. Рак Рез . 14 (16): 5000–5. дои : 10.1158/1078-0432.CCR-08-0746 . ПМИД  18698017.
  24. ^ Пеннати М., Фолини М., Заффарони Н. (апрель 2008 г.). «Нацеливание на сурвивин в терапии рака». Экспертное мнение. Там. Цели . 12 (4): 463–76. дои : 10.1517/14728222.12.4.463. PMID  18348682. S2CID  84568177.
  25. ^ abcdefghij Huynh T, Wälchli S, Sioud M (декабрь 2006 г.). «Транскрипционное нацеливание малых интерферирующих РНК на раковые клетки». Биохим. Биофиз. Рез. Коммун . 350 (4): 854–9. дои : 10.1016/j.bbrc.2006.09.127. ПМИД  17034763.
  26. ^ abcdef Фридрихс Б., Сигель С., Андерсен М.Х., Шмитц Н., Цейс М. (июнь 2006 г.). «Пептидные эпитопы, производные сурвивина, и их роль в индукции противоопухолевого иммунитета при гематологических злокачественных новообразованиях». Лейк. Лимфома . 47 (6): 978–85. дои : 10.1080/10428190500464062. PMID  16840186. S2CID  27915488.
  27. ^ abcdef Сян Р., Мизутани Н., Луо Ю., Чиодони С., Чжоу Х., Мизутани М., Ба Ю., Беккер Дж.К., Рейсфельд Р.А. (январь 2005 г.). «ДНК-вакцина, нацеленная на сурвивин, сочетает в себе апоптоз с подавлением ангиогенеза при ликвидации опухоли легких». Рак Рез . 65 (2): 553–61. дои : 10.1158/0008-5472.553.65.2 . PMID  15695399. S2CID  12221226.
  28. ^ abcdefg Фульда С, Дебатин К.М. (сентябрь 2004 г.). «Сенсибилизация к апоптозу, вызванному противораковыми препаратами, химиопрофилактическим агентом ресвератролом». Онкоген . 23 (40): 6702–11. дои : 10.1038/sj.onc.1207630 . ПМИД  15273734.
  29. ^ abcdefg Чжан М., Латам Д.Э., Делани М.А., Чакраварти А. (апрель 2005 г.). «Сурвивин опосредует устойчивость к антиандрогенной терапии при раке простаты». Онкоген . 24 (15): 2474–82. дои : 10.1038/sj.onc.1208490 . ПМИД  15735703.
  30. ^ ab Уитли С.П., Карвальо А., Вагнарелли П., Эрншоу WC (июнь 2001 г.). «INCENP необходим для правильного нацеливания сурвивина на центромеры и анафазное веретено во время митоза». Курс. Биол . 11 (11): 886–90. дои : 10.1016/s0960-9822(01)00238-x . PMID  11516652. S2CID  381637.
  31. ^ Чен Дж., Джин С., Тахир С.К., Чжан Х., Лю X, Сарти А.В., МакГонигал Т.П., Лю З., Розенберг С.Х., Нг С.К. (январь 2003 г.). «Сурвивин усиливает активность киназы Aurora-B и локализует Aurora-B в клетках человека». Ж. Биол. Хим . 278 (1): 486–90. дои : 10.1074/jbc.M211119200 . ПМИД  12419797.
  32. ^ Сампат СК, Охи Р., Лейсманн О, Салич А, Позняковски А, Фунабики Х (июль 2004 г.). «Хромосомный пассажирский комплекс необходим для индуцированной хроматином стабилизации микротрубочек и сборки веретена». Клетка . 118 (2): 187–202. дои : 10.1016/j.cell.2004.06.026 . PMID  15260989. S2CID  17795816.
  33. ^ Гассманн Р., Карвалью А., Хенцинг А.Дж., Рушо С., Хадсон Д.Ф., Хонда Р., Нигг Э.А., Герлофф Д.Л., Эрншоу У.К. (июль 2004 г.). «Бореалин: новый хромосомный пассажир, необходимый для стабильности биполярного митотического веретена». Дж. Клеточная Биол . 166 (2): 179–91. дои : 10.1083/jcb.200404001. ПМК 2172304 . ПМИД  15249581. 
  34. ^ аб Тамм И, Ван Ю, Сосвилл Э, Скудьеро Д.А., Винья Н, Ольтерсдорф Т, Рид Дж.К. (декабрь 1998 г.). «Белок сурвивин семейства IAP ингибирует активность каспаз и апоптоз, индуцированные Fas (CD95), Bax, каспазами и противораковыми препаратами». Рак Рез . 58 (23): 5315–20. ПМИД  9850056.
  35. ↑ Сун Z, Яо X, Ву М (июнь 2003 г.). «Прямое взаимодействие между сурвивином и Smac/DIABLO важно для антиапоптотической активности сурвивина во время апоптоза, индуцированного таксолом». Ж. Биол. Хим . 278 (25): 23130–40. дои : 10.1074/jbc.M300957200 . ПМИД  12660240.

дальнейшее чтение