stringtranslate.com

Перенос ядра соматической клетки

Перенос ядра соматической клетки может создавать клоны как для репродуктивных, так и для терапевтических целей.

В генетике и биологии развития перенос ядра соматической клетки ( SCNT ) представляет собой лабораторную стратегию создания жизнеспособного эмбриона из клетки организма и яйцеклетки . Методика заключается в взятии денуклеированного ооцита (яйцеклетки) и имплантации донорского ядра из соматической (телесной) клетки. Он используется как в терапевтическом, так и в репродуктивном клонировании . В 1996 году овца Долли прославилась тем, что стала первым успешным случаем репродуктивного клонирования млекопитающего. [1] В январе 2018 года группа учёных из Шанхая объявила об успешном клонировании двух самок макак-крабоедов (по имени Чжун Чжун и Хуа Хуа ) из ядер плода. [2]

« Терапевтическое клонирование » относится к потенциальному использованию SCNT в регенеративной медицине ; этот подход пропагандировался как ответ на многие вопросы, касающиеся эмбриональных стволовых клеток (ЭСК) и уничтожения жизнеспособных эмбрионов для медицинского использования, хотя остаются вопросы о том, насколько действительно гомологичны эти два типа клеток.

Введение

Перенос ядра соматической клетки — это метод клонирования, при котором ядро ​​соматической клетки переносится в цитоплазму энуклеированной яйцеклетки. После переноса соматических клеток цитоплазматические факторы влияют на ядро, превращая его в зиготу. Стадия бластоцисты развивается в яйцеклетке, чтобы помочь создать эмбриональные стволовые клетки из внутренней клеточной массы бластоцисты. [3] Первым млекопитающим, выведенным с помощью этого метода, была овца Долли в 1996 году. [4]

Начало 20 века

Хотя Долли считается первым животным, клонированным с помощью этого метода, более ранние экземпляры SCNT существуют еще в 1950-х годах. В частности, исследования сэра Джона Гердона в 1958 году повлекли за собой клонирование Xenopus laevis с использованием принципов SCNT. [5] Короче говоря, эксперимент заключался в том, чтобы вызвать у самки овуляцию, после чего у нее были собраны яйцеклетки. Отсюда яйцеклетку подвергли энуклеации с использованием ультрафиолетового облучения, чтобы вывести из строя пронуклеус яйцеклетки. На этом этапе подготовленная яйцеклетка и ядро ​​донорской клетки были объединены, а затем началась инкубация и возможное развитие головастика. [5] Применение SCNT Гердоном отличается от более современных приложений и даже приложений, используемых в других модельных системах того времени (например, Rana pipiens ) из-за того, что он использовал УФ-облучение для энуклеации яйцеклетки вместо использования пипетки для удаления ядра из яйца. яйцо. [6]

Процесс

Электросварной генератор BTX ECM 2001, используемый для приложений SCNT и клонирования.

В процессе переноса ядра соматической клетки участвуют две разные клетки. Первой является женская гамета, известная как яйцеклетка (яйцеклетка/ооцит). В экспериментах по SCNT на людях эти яйцеклетки получают от добровольных доноров с использованием стимуляции яичников. Вторая — соматическая клетка, то есть клетки человеческого тела. Клетки кожи, жировые клетки и клетки печени — это лишь несколько примеров. Генетический материал донорской яйцеклетки удаляется и выбрасывается, оставляя его «депрограммированным». Остаются соматическая клетка и энуклеированная яйцеклетка. Затем они сливаются путем вставки соматической клетки в «пустую» яйцеклетку. [7] После внедрения в яйцеклетку ядро ​​соматической клетки перепрограммируется яйцеклеткой -хозяином. Яйцеклетка, содержащая теперь ядро ​​соматической клетки, подвергается стимуляции шоком и начинает делиться. Яйцеклетка теперь жизнеспособна и способна произвести взрослый организм, содержащий всю необходимую генетическую информацию только от одного родителя. Развитие будет происходить нормально, и после многих митотических делений отдельная клетка образует бластоцисту ( эмбрион ранней стадии , содержащий около 100 клеток) с геномом, идентичным исходному организму (т.е. клон). [8] Затем стволовые клетки можно получить путем разрушения этого клонированного эмбриона для использования в терапевтическом клонировании или, в случае репродуктивного клонирования, клонированный эмбрион имплантируется матери-хозяину для дальнейшего развития и доведения до конца.

Обычный SCNT требует использования микроманипуляторов — дорогостоящих машин, используемых для точного манипулирования клетками. [9] С помощью микроманипулятора учёный проделывает отверстие в прозрачной зоне и с помощью пипетки высасывает исходное ядро ​​яйцеклетки. Затем они делают еще одно отверстие в другой пипетке, чтобы ввести донорское ядро. [10] Альтернативно, можно применить электрическую энергию для слияния пустой яйцеклетки с донорской клеткой, содержащей ядро. [9]

Альтернативный метод, названный «ручное клонирование», был описан индийскими учеными в 2001 году. Этот метод не требует использования микроманипулятора и использовался для клонирования нескольких видов домашнего скота. [11] Удаление ядра может осуществляться химическим путем, с помощью центрифуги или с помощью лезвия. Пустая яйцеклетка приклеивается к донорской клетке с помощью фитогемагглютинина , а затем сплавляется с помощью электричества. (Если используется лезвие, потребуются два этапа слияния: первый слияние происходит между донором и пустой половиной яйца, второй - между «полуэмбрионом» половинного размера и другой пустой половиной яйца.) [9 ]

Приложения

Исследования стволовых клеток

Трансплантация ядра соматических клеток стала предметом изучения в области исследований стволовых клеток . Целью проведения данной процедуры является получение плюрипотентных клеток из клонированного эмбриона. Эти клетки генетически соответствовали донорскому организму, из которого они произошли. Это дает им возможность создавать плюрипотентные клетки, специфичные для пациента, которые затем можно будет использовать в терапии или исследованиях заболеваний. [12]

Эмбриональные стволовые клетки – это недифференцированные клетки эмбриона. Считается, что эти клетки обладают плюрипотентным потенциалом, поскольку они способны давать начало всем тканям взрослого организма. Эта способность позволяет стволовым клеткам создавать клетки любого типа, которые затем можно трансплантировать для замены поврежденных или разрушенных клеток. Разногласия вокруг работы ЭСК человека из-за разрушения жизнеспособных эмбрионов человека побуждают ученых искать альтернативные методы получения плюрипотентных стволовых клеток, одним из таких методов является SCNT.

Потенциальное использование стволовых клеток, генетически соответствующих пациенту, может заключаться в создании клеточных линий, гены которых связаны с конкретным заболеванием пациента. Таким образом, можно было бы создать модель in vitro , которая была бы полезна для изучения этого конкретного заболевания, потенциального открытия его патофизиологии и поиска методов лечения. [13] Например, если человек с болезнью Паркинсона пожертвует свои соматические клетки, стволовые клетки, полученные в результате SCNT, будут иметь гены, которые способствуют развитию болезни Паркинсона. Затем можно было бы изучить линии стволовых клеток, специфичные для заболевания, чтобы лучше понять это состояние. [14]

Еще одним применением исследований стволовых клеток SCNT является использование линий стволовых клеток, специфичных для пациента, для создания тканей или даже органов для трансплантации конкретному пациенту. [15] Полученные клетки будут генетически идентичны донорам соматических клеток, что позволит избежать каких-либо осложнений, связанных с отторжением иммунной системы . [14] [16]

Лишь несколько лабораторий в мире в настоящее время используют методы SCNT в исследованиях стволовых клеток человека. В Соединенных Штатах ученые из Гарвардского института стволовых клеток, Калифорнийского университета в Сан-Франциско , Орегонского университета здоровья и науки , [17] Стемагена (Ла-Хойя, Калифорния) и, возможно, Advanced Cell Technology в настоящее время исследуют метод использования соматических клеток. Перенос ядра клетки для производства эмбриональных стволовых клеток . [18] В Соединенном Королевстве Управление по оплодотворению человека и эмбриологии выдало разрешение исследовательским группам в Институте Рослина и Центре жизни Ньюкасла . [19] SCNT также может встречаться в Китае. [20]

Несмотря на многочисленные успехи в клонировании животных, остаются вопросы относительно механизмов перепрограммирования яйцеклетки. Несмотря на многочисленные попытки, успех в создании эмбриональных стволовых клеток с переносом ядра человека был ограниченным. Проблема заключается в способности человеческой клетки образовывать бластоцисты; клетки не могут пройти дальше восьмиклеточной стадии развития. Считается, что это является результатом неспособности ядра соматической клетки активировать эмбриональные гены, имеющие решающее значение для правильного развития. В этих более ранних экспериментах использовались процедуры, разработанные на животных, не являющихся приматами, но без особого успеха.

Исследовательская группа из Орегонского университета здоровья и науки продемонстрировала процедуры SCNT, разработанные для приматов, успешно использующие клетки кожи. Ключом к их успеху было использование ооцитов в метафазе II (MII) клеточного цикла. Яйцеклетки при МИИ содержат в цитоплазме особые факторы, обладающие особой способностью перепрограммировать имплантированные ядра соматических клеток в клетки с плюрипотентными состояниями. Когда ядро ​​яйцеклетки удаляется, клетка теряет свою генетическую информацию. Это обвиняют в том, что энуклеированные яйцеклетки не способны к перепрограммированию. Предполагается, что критические эмбриональные гены физически связаны с хромосомами ооцита, и энуклеация отрицательно влияет на эти факторы. Другая возможность — удаление ядра яйцеклетки или вставка соматического ядра приводит к повреждению цитопласта, влияя на способность к перепрограммированию.

Принимая это во внимание, исследовательская группа применила свою новую технику в попытке получить стволовые клетки SCNT человека. В мае 2013 года группа из Орегона сообщила об успешном получении линий эмбриональных стволовых клеток человека, полученных с помощью SCNT, с использованием донорских клеток плода и младенца. Используя ооциты MII добровольцев и усовершенствованную процедуру SCNT, были успешно получены клонированные эмбрионы человека. Эти эмбрионы были низкого качества, лишены значительной внутренней клеточной массы и плохо построенной трофэктодермы . Несовершенные эмбрионы препятствовали приобретению ЭСК человека. Добавление кофеина во время удаления ядра яйцеклетки и слияния соматической клетки и яйцеклетки улучшило образование бластоцисты и изоляцию ЭСК. Было обнаружено, что полученные ESC способны образовывать тератомы, экспрессировать плюрипотентные факторы транскрипции и экспрессировать нормальный кариотип 46XX, что указывает на то, что эти SCNT фактически были ESC-подобными. [17] Это был первый случай успешного использования SCNT для перепрограммирования соматических клеток человека. В этом исследовании для производства ЭСК использовались фетальные и инфантильные соматические клетки.

В апреле 2014 года международная исследовательская группа расширила этот прорыв. Оставался вопрос, можно ли добиться того же успеха, используя взрослые соматические клетки. Считалось, что эпигенетические и возрастные изменения могут препятствовать перепрограммированию взрослых соматических клеток. Применяя процедуру, впервые разработанную исследовательской группой из Орегона, они действительно смогли вырастить стволовые клетки, полученные с помощью SCNT, используя взрослые клетки от двух доноров в возрасте 35 и 75 лет, что указывает на то, что возраст не препятствует способности клеток к перепрограммированию. [21] [22]

В конце апреля 2014 года Нью-Йоркскому фонду стволовых клеток удалось создать стволовые клетки SCNT, полученные из соматических клеток взрослых. Одна из этих линий стволовых клеток была получена из донорских клеток больного диабетом 1 типа. Затем группа смогла успешно культивировать эти стволовые клетки и вызвать дифференцировку. При инъекции мышам успешно сформировались клетки всех трех зародышевых листков. Наиболее значимыми из этих клеток были те, которые экспрессировали инсулин и были способны секретировать гормон. [23] Эти клетки, продуцирующие инсулин, могут быть использованы для заместительной терапии у диабетиков, демонстрируя реальный терапевтический потенциал стволовых клеток SCNT.

Стимул к исследованию стволовых клеток на основе SCNT уменьшился из-за разработки и совершенствования альтернативных методов создания стволовых клеток. Методы перепрограммирования нормальных клеток организма в плюрипотентные стволовые клетки были разработаны на людях в 2007 году. В следующем году этот метод достиг ключевой цели исследований стволовых клеток на основе SCNT: создание линий плюрипотентных стволовых клеток, все гены которых связаны с различными заболеваниями. . [24] Некоторые ученые, работающие над исследованиями стволовых клеток на основе SCNT, недавно перешли к новым методам индуцирования плюрипотентных стволовых клеток. Хотя недавние исследования поставили под вопрос, насколько похожи iPS-клетки на эмбриональные стволовые клетки. Эпигенетическая память при iPS влияет на клеточную линию, в которую он может дифференцироваться. Например, iPS-клетка, полученная из клетки крови с использованием только факторов яманака, будет более эффективна при дифференцировке в клетки крови, но менее эффективна при создании нейрона. [25] Однако недавние исследования показывают, что изменения в эпигенетической памяти ИПСК с использованием небольших молекул могут вернуть их в почти наивное состояние плюрипотентности. [26] [27] Исследования даже показали, что посредством тетраплоидной комплементации целый жизнеспособный организм может быть создан исключительно из ИПСК. [28] Было обнаружено, что стволовые клетки SCNT сталкиваются с аналогичными проблемами. Причину низких выходов при клонировании SCNT крупного рогатого скота в последние годы объясняли ранее скрытой эпигенетической памятью соматических клеток, которые вводились в ооцит. [29]

Репродуктивное клонирование

Этот метод в настоящее время является основой для клонирования животных (таких как знаменитая овца Долли ) [30] и был предложен как возможный способ клонирования человека. Использование SCNT в репродуктивном клонировании оказалось трудным и имело ограниченный успех. Высокая смертность плода и новорожденного делает этот процесс очень неэффективным. Полученное в результате клонирование потомство также страдает от нарушений развития и импринтинга у нечеловеческих видов. По этим причинам, а также моральным и этическим возражениям, репродуктивное клонирование человека запрещено более чем в 30 странах. [31] Большинство исследователей полагают, что в обозримом будущем будет невозможно использовать нынешнюю технику клонирования для создания клона человека, который будет развиваться до конца срока. Это остается возможным, хотя потребуются критические корректировки, чтобы преодолеть текущие ограничения на раннем этапе эмбрионального развития SCNT человека. [32] [33]

Существует также потенциал для лечения заболеваний, связанных с мутациями в митохондриальной ДНК. Недавние исследования показывают, что SCNT ядра клетки организма, пораженной одним из этих заболеваний, в здоровый ооцит предотвращает наследование митохондриального заболевания. Этот метод лечения не предполагает клонирования, но позволит родить ребенка от трех генетических родителей. Отец обеспечивает сперматозоид, одна мать обеспечивает ядро ​​яйцеклетки, а другая мать обеспечивает энуклеированную яйцеклетку. [15]

В 2018 году было сообщено о первом успешном клонировании приматов с использованием переноса ядра соматических клеток, того же метода, что и овца Долли , с рождением двух живых клонов самок ( макак-крабоедов по имени Чжун Чжун и Хуа Хуа ). [2] [34] [35] [36] [37]

Межвидовой ядерный перенос

Межвидовой перенос ядер (iSCNT) — это способ переноса ядер соматических клеток, используемый для облегчения спасения видов, находящихся под угрозой исчезновения, или даже для восстановления видов после их исчезновения. Этот метод аналогичен клонированию SCNT , которое обычно проводится между домашними животными и грызунами или там, где имеется готовый запас ооцитов и суррогатных животных. Однако клонирование находящихся под угрозой исчезновения или вымерших видов требует использования альтернативного метода клонирования. При межвидовом ядерном переносе используются хозяин и донор двух разных организмов, которые являются близкородственными видами и принадлежат к одному и тому же роду. В 2000 году Роберт Ланца смог произвести клонированный плод гаура Bos gaurus , успешно объединив его с домашней коровой Bos taurus . [38]

В 2017 году с помощью iSCNT родился первый клонированный двугорбый верблюд с использованием ооцитов одногорбого верблюда и клеток фибробластов кожи взрослого двугорбого верблюда в качестве донорских ядер. [39]

Ограничения

Перенос ядра соматической клетки (SCNT) может быть неэффективным из-за стресса, оказываемого как на яйцеклетку, так и на введенное ядро. Это может привести к низкому проценту успешно перепрограммированных клеток. Например, в 1996 году овца Долли родилась после того, как 277 яиц были использованы для SCNT, в результате чего было создано 29 жизнеспособных эмбрионов, что дало жалкие 0,3% эффективности. [40] Только три из этих эмбрионов дожили до рождения, и только один дожил до взрослого возраста. [30] Милли, потомку, которое выжило, потребовалось 95 попыток для производства. [40] Поскольку процедура не была автоматизирована и ее приходилось выполнять вручную под микроскопом , SCNT была очень ресурсоемкой. Другая причина такого высокого уровня смертности среди клонированных потомков связана с тем, что плод крупнее даже других крупных потомков, что приводит к смерти вскоре после рождения. [40] Биохимия , связанная с перепрограммированием дифференцированного ядра соматической клетки и активацией яйцеклетки-реципиента, также была далека от понимания. Еще одним ограничением является попытка использовать одноклеточные эмбрионы во время SCNT. При использовании только одноклеточных клонированных эмбрионов вероятность провала эксперимента в процессе создания морулы или бластоцисты составляет 65%. Биохимия также должна быть чрезвычайно точной, поскольку большинство смертей клонированных плодов на поздних сроках являются результатом недостаточной плацентации. [40] Однако к 2014 году исследователи сообщали о 70-80% успеха клонирования свиней [41], а в 2016 году корейская компания Sooam Biotech, как сообщалось, производила 500 клонированных эмбрионов в день. [42]

При SCNT не вся генетическая информация донорской клетки передается, поскольку митохондрии донорской клетки , содержащие собственную митохондриальную ДНК, остаются. Образовавшиеся гибридные клетки сохраняют те митохондриальные структуры, которые изначально принадлежали яйцеклетке. Как следствие, клоны, такие как Долли, рожденные от SCNT, не являются идеальными копиями донорского ядра. Этот факт также может препятствовать потенциальной пользе тканей и органов, полученных из SCNT, для терапии, поскольку после трансплантации может возникнуть иммунный ответ на чужую мтДНК. Кроме того, гены, обнаруженные в геноме митохондрий, должны взаимодействовать с геномом клетки, и нарушение ядерного перепрограммирования соматических клеток может привести к отсутствию связи с геномом клетки, что приведет к сбою SCNT. [43]

Эпигенетические факторы играют важную роль в успехе или неудаче попыток SCNT. Различная экспрессия генов ранее активированной клетки и ее мРНК может привести к сверхэкспрессии, недостаточной экспрессии или, в некоторых случаях, к нефункциональным генам, которые повлияют на развивающийся плод. [44] Одним из таких примеров эпигенетических ограничений SCNT является регуляция метилирования гистонов. Различная регуляция этих генов метилирования гистонов может напрямую влиять на транскрипцию развивающегося генома, вызывая отказ SCNT. [45] Другим фактором, способствующим неудаче SCNT, является инактивация Х-хромосомы на ранних стадиях развития эмбриона. Некодирующий ген XIST отвечает за инактивацию одной Х-хромосомы во время развития, однако при SCNT этот ген может иметь аномальную регуляцию, вызывающую смертность развивающегося плода. [45]

Споры

Бластоциста человека : внутренняя клеточная масса (вверху справа)

Методы ядерного переноса представляют собой набор этических соображений, отличный от тех, которые связаны с использованием других стволовых клеток, таких как эмбриональные стволовые клетки, которые являются спорными из-за их необходимости уничтожать эмбрион. Эти различные соображения привели к тому, что некоторые люди и организации, которые не против исследований эмбриональных стволовых клеток человека, обеспокоены или выступают против исследований SCNT. [46] [47] [48]

Одна из проблем заключается в том, что создание бластулы в исследованиях стволовых клеток человека на основе SCNT приведет к репродуктивному клонированию людей. Оба процесса используют один и тот же первый шаг: создание эмбриона с перенесенным ядром, скорее всего, с помощью SCNT. Те, кто придерживается этой точки зрения, часто выступают за строгое регулирование SCNT, чтобы предотвратить имплантацию любых производных продуктов с целью воспроизводства человека [49] или его запрет. [46]

Второй важной проблемой является выбор подходящего источника необходимых яиц. SCNT требует человеческих яйцеклеток , которые можно получить только от женщин. Наиболее распространенным источником этих яиц сегодня являются яйцеклетки, которые производятся сверх клинической потребности во время лечения ЭКО. Это минимально инвазивная процедура, но она несет в себе некоторые риски для здоровья, такие как синдром гиперстимуляции яичников .

Одним из вариантов успешной терапии стволовыми клетками является создание индивидуальных линий стволовых клеток для пациентов. Каждая специальная линия стволовых клеток будет состоять из коллекции идентичных стволовых клеток, каждая из которых несет собственную ДНК пациента, что уменьшает или устраняет любые проблемы с отторжением при трансплантации стволовых клеток для лечения. Например, для лечения мужчины с болезнью Паркинсона клеточное ядро ​​одной из его клеток будет трансплантировано с помощью SCNT в яйцеклетку донора яйцеклеток, создавая уникальную линию стволовых клеток, почти идентичную собственным клеткам пациента. (Могут быть различия. Например, митохондриальная ДНК будет такой же, как у донора яйцеклетки. Для сравнения, его собственные клетки будут нести митохондриальную ДНК его матери.)

Потенциально миллионы пациентов могли бы получить пользу от терапии стволовыми клетками, и каждому пациенту потребуется большое количество донорских яйцеклеток, чтобы успешно создать единую индивидуальную терапевтическую линию стволовых клеток. Такое большое количество донорских яйцеклеток превысит количество яйцеклеток, оставшихся в настоящее время и доступных от пар, пытающихся завести детей с помощью вспомогательных репродуктивных технологий . Следовательно, здоровых молодых женщин необходимо будет убедить продавать яйцеклетки для использования в создании индивидуальных линий стволовых клеток, которые затем можно будет приобрести в медицинской промышленности и продать пациентам. Пока неясно, откуда взялись все эти яйца.

Эксперты по стволовым клеткам считают маловероятным, что такое большое количество донорских человеческих яйцеклеток произойдет в развитой стране из-за неизвестных долгосрочных последствий для общественного здравоохранения лечения большого количества здоровых молодых женщин большими дозами гормонов с целью вызвать гиперовуляцию. (овуляция нескольких яйцеклеток одновременно). Хотя такое лечение проводится уже несколько десятилетий, долгосрочные эффекты не изучались и не были признаны безопасными для использования в больших масштабах у здоровых женщин. Известно, что более длительное лечение с использованием гораздо меньших доз гормонов увеличивает риск развития рака десятилетия спустя. Неизвестно, может ли гормональная терапия, вызывающая гиперовуляцию, иметь аналогичный эффект. Существуют также этические вопросы, связанные с оплатой яиц. В целом продажа частей тела считается неэтичной и запрещена в большинстве стран. [ почему? ] Человеческие яйца уже некоторое время являются заметным исключением из этого правила.

Чтобы решить проблему создания рынка человеческих яйцеклеток, некоторые исследователи стволовых клеток изучают возможность создания искусственных яйцеклеток. В случае успеха не потребуется донорство яйцеклеток человека для создания индивидуальных линий стволовых клеток. Однако до этой технологии может быть еще далеко.

Политика в отношении SCNT человека

SCNT с использованием человеческих клеток в настоящее время разрешен для исследовательских целей в Соединенном Королевстве , поскольку он был включен в Закон об оплодотворении человека и эмбриологии 1990 года . [50] [7] Для проведения или попытки SCNT необходимо получить разрешение от Управления по оплодотворению человека и эмбриологии .

В Соединенных Штатах эта практика остается законной, поскольку она не урегулирована федеральным законом. [51] Однако в 2002 году мораторий на федеральное финансирование SCNT запрещает финансирование этой практики в исследовательских целях. Таким образом, хотя SCNT и является законным, он не может финансироваться из федерального бюджета. [52] Американские ученые недавно заявили, что, поскольку продуктом SCNT является клонированный эмбрион, а не человеческий эмбрион, такая политика морально неправильна и должна быть пересмотрена. [53]

В 2003 году Организация Объединенных Наций приняла предложение Коста-Рики , призывающее государства-члены «запретить все формы клонирования человека, поскольку они несовместимы с человеческим достоинством и защитой человеческой жизни». [54] Эта фраза может включать SCNT, в зависимости от интерпретации.

Конвенция Совета Европы о правах человека и биомедицине и Дополнительный протокол к Конвенции о защите прав человека и достоинства человека в отношении применения биологических и медицинских достижений, о запрете клонирования человека, похоже, запрещают SCNT. человеческих существ. Из 45 государств-членов Совета Конвенцию подписали 31 и ратифицировали 18. Дополнительный протокол подписали 29 стран-членов и ратифицировали 14. [55]

Смотрите также

Рекомендации

  1. ^ Ли, Дж; Лю, Х; Ван, Х; Чжан, С; Лю, Ф; Ван, X; Ван, Ю (2009). «Человеческие эмбрионы, полученные путем переноса ядер соматических клеток с использованием альтернативного подхода энуклеации». Клонирование и стволовые клетки . 11 (1): 39–50. дои : 10.1089/clo.2008.0041 . ПМИД  19196043.
  2. ^ Аб Лю, Чжэнь; и другие. (24 января 2018 г.). «Клонирование макак путем переноса ядер соматических клеток». Клетка . 172 (4): 881–887.e7. дои : 10.1016/j.cell.2018.01.020 . ПМИД  29395327.
  3. ^ "Somatic cell nuclear transfer | biology and technology". Encyclopedia Britannica. Retrieved 27 January 2018.
  4. ^ "Somatic Cell Nuclear Transfer - Embryology". embryology.med.unsw.edu.au. Retrieved 27 January 2018.
  5. ^ a b Elsdale, T. R.; Gurdon, J. B.; Fischberg, M. (1960-12-01). "A Description of the Technique for Nuclear Transplantation inXenopus laevis". Development. 8 (4): 437–444. doi:10.1242/dev.8.4.437. ISSN 0950-1991.
  6. ^ Gurdon, John B. (2013-12-05). "The Egg and the Nucleus: A Battle for Supremacy (Nobel Lecture)". Angewandte Chemie International Edition. 52 (52): 13890–13899. doi:10.1002/anie.201306722. ISSN 1433-7851. PMID 24311340.
  7. ^ a b Pattinson, Shaun D.; Kind, Vanessa (2017-09-12). "Using a moot to develop students' understanding of human cloning and statutory interpretation". Medical Law International. 17 (3): 111–133. doi:10.1177/0968533217726350. PMC 5598875. PMID 28943724.
  8. ^ Wilmut, I.; Schnieke, A. E.; McWhir, J.; Kind, A. J.; Campbell, K. H. S. (1997). "Viable offspring derived from fetal and adult mammalian cells". Nature. 385 (6619): 810–813. Bibcode:1997Natur.385..810W. doi:10.1038/385810a0. PMID 9039911. S2CID 4260518.
  9. ^ a b c Verma, Geetika; Arora, Js; Sethi, Rs; Mukhopadhyay, Cs; Verma, Ramneek (December 2015). "Handmade cloning: recent advances, potential and pitfalls". Journal of Animal Science and Biotechnology. 6 (1): 43. doi:10.1186/s40104-015-0043-y. PMC 4606838. PMID 26473031.
  10. ^ Wakayama, Sayaka; Mizutani, Eiji; Wakayama, Teruhiko (2010). "Production of Cloned Mice from Somatic Cells, ES Cells, and Frozen Bodies". Guide to Techniques in Mouse Development, Part A: Mice, Embryos, and Cells, 2nd Edition. Methods in Enzymology. Vol. 476. pp. 151–169. doi:10.1016/S0076-6879(10)76009-2. ISBN 978-0-12-374775-4. PMID 20691865.
  11. ^ Selokar, Naresh L.; Saini, Monika; Palta, Prabhat; Chauhan, Manmohan S.; Manik, Radhey S.; Singla, Suresh K. (April 2018). "Cloning of Buffalo, a Highly Valued Livestock Species of South and Southeast Asia: Any Achievements?". Cellular Reprogramming. 20 (2): 89–98. doi:10.1089/cell.2017.0051. PMID 29620444.
  12. ^ Lomax, G. P.; Dewitt, N. D. (2013). "Somatic cell nuclear transfer in Oregon: Expanding the pluripotent space and informing research ethics". Stem Cells and Development. 22 (Suppl 1): 25–8. doi:10.1089/scd.2013.0402. PMID 24304071.
  13. ^ Lo, B; Parham, L (2009). "Ethical issues in stem cell research". Endocrine Reviews. 30 (3): 204–13. doi:10.1210/er.2008-0031. PMC 2726839. PMID 19366754.
  14. ^ a b Semb H (2005). "Human embryonic stem cells: origin, properties and applications" (PDF). APMIS. 113 (11–12): 743–50. doi:10.1111/j.1600-0463.2005.apm_312.x. PMID 16480446. S2CID 33346945.
  15. ^ a b Pera, M; Trounson, A (2013). "Cloning debate: Stem-cell researchers must stay engaged". Nature. 498 (7453): 159–61. Bibcode:2013Natur.498..159P. doi:10.1038/498159a. PMID 23765475. S2CID 30273170.
  16. ^ Hadjantonakis AK, Papaioannou VE (July 2002). "Can mammalian cloning combined with embryonic stem cell technologies be used to treat human diseases?". Genome Biol. 3 (8): REVIEWS1023. doi:10.1186/gb-2002-3-8-reviews1023. PMC 139399. PMID 12186652.
  17. ^ a b Tachibana M (2013). "Human Embryonic Stem Cells Derived by Somatic Cell Nuclear Transfer". Cell. 153 (6): 1228–38. doi:10.1016/j.cell.2013.05.006. PMC 3772789. PMID 23683578.
  18. ^ Elizabeth Weise, "Cloning race is on again", USA Today (January 17, 2006, retrieved October 6, 2006)
  19. ^ "Dolly scientists' human clone bid", BBC News (September 28, 2004, retrieved October 6, 2006)
  20. ^ Charles C. Mann, "The First Cloning Superpower", Wired (January 2003, retrieved October 6, 2006)
  21. ^ Human Somatic Cell Nuclear Transfer Using Adult Cells Cell Stem Cell. Retrieved 18 April 2014
  22. ^ Ariana Eunjung Cha (18 April 2014) Cloning advance using stem cells from human adult reopens ethical questions Washington Post. Retrieved 18 April 2014
  23. ^ Yamada, M; Johannesson, B; Sagi, I; Burnett, L. C.; Kort, D. H.; Prosser, R. W.; Paull, D; Nestor, M. W.; Freeby, M; Greenberg, E; Goland, R. S.; Leibel, R. L.; Solomon, S. L.; Benvenisty, N; Sauer, M. V.; Egli, D (2014). "Human oocytes reprogram adult somatic nuclei of a type 1 diabetic to diploid pluripotent stem cells". Nature. 510 (7506): 533–6. Bibcode:2014Natur.510..533Y. doi:10.1038/nature13287. PMID 24776804. S2CID 4457834.
  24. ^ Gretchen Vogel (December 2008). "Breakthrough of the year: Reprogramming Cells". Science. 322 (5909): 1766–1767. doi:10.1126/science.322.5909.1766. PMID 19095902.
  25. ^ Kim, K.; Doi, A.; Wen, B.; Ng, K.; Zhao, R.; Cahan, P.; Kim, J.; Aryee, M. J.; Ji, H.; Ehrlich, L. I. R.; Yabuuchi, A.; Takeuchi, A.; Cunniff, K. C.; Hongguang, H.; McKinney-Freeman, S.; Naveiras, O.; Yoon, T. J.; Irizarry, R. A.; Jung, N.; Seita, J.; Hanna, J.; Murakami, P.; Jaenisch, R.; Weissleder, R.; Orkin, S. H.; Weissman, I. L.; Feinberg, A. P.; Daley, G. Q. (2010). "Epigenetic memory in induced pluripotent stem cells". Nature. 467 (7313): 285–90. Bibcode:2010Natur.467..285K. doi:10.1038/nature09342. PMC 3150836. PMID 20644535.
  26. ^ Qin, H.; Zhao, A.; Fu, X. (2017). "Small molecules for reprogramming and transdifferentiation". Cellular and Molecular Life Sciences. 74 (19): 3553–3575. doi:10.1007/s00018-017-2586-x. PMC 11107793. PMID 28698932. S2CID 26706099.
  27. ^ Xie, M.; Tang, S.; Li, K.; Ding, S. (2017). "Pharmacological Reprogramming of Somatic Cells for Regenerative Medicine". Accounts of Chemical Research. 50 (5): 1202–1211. doi:10.1021/acs.accounts.7b00020. PMID 28453285.
  28. ^ Zhao, X. Y.; Li, W.; Lv, Z.; Liu, L.; Tong, M.; Hai, T.; Hao, J.; Guo, C. L.; Ma, Q. W.; Wang, L.; Zeng, F.; Zhou, Q. (2009). "IPS cells produce viable mice through tetraploid complementation". Nature. 461 (7260): 86–90. Bibcode:2009Natur.461...86Z. doi:10.1038/nature08267. PMID 19672241. S2CID 205217762.
  29. ^ Zhou, C.; Zhang, J.; Zhang, M.; Wang, D.; Ma, Y.; Wang, Y.; Wang, Y.; Huang, Y.; Zhang, Y. (2020). "Transcriptional memory inherited from donor cells is a developmental defect of bovine cloned embryos". FASEB Journal. 34 (1): 1637–1651. doi:10.1096/fj.201900578RR. PMID 31914649. S2CID 210120545.
  30. ^ a b Campbell KH, McWhir J, Ritchie WA, Wilmut I (March 1996). "Sheep cloned by nuclear transfer from a cultured cell line". Nature. 380 (6569): 64–6. Bibcode:1996Natur.380...64C. doi:10.1038/380064a0. PMID 8598906. S2CID 3529638.
  31. ^ Ethics Committee of the American Society for Reproductive Medicine (2012). "Human somatic cell nuclear transfer and cloning". Fertility and Sterility. 98 (4): 804–7. doi:10.1016/j.fertnstert.2012.06.045. PMID 22795681.
  32. ^ Revel M (2000). "Research on animal cloning technologies and their implications in medical ethics: an update". Med Law. 19 (3): 527–43. PMID 11143888.
  33. ^ Rhind SM, Taylor JE, De Sousa PA, King TJ, McGarry M, Wilmut I (November 2003). "Human cloning: can it be made safe?". Nat. Rev. Genet. 4 (11): 855–64. doi:10.1038/nrg1205. PMID 14634633. S2CID 37351908.
  34. ^
    • Normile, Dennis (24 January 2018). "These monkey twins are the first primate clones made by the method that developed Dolly". Science. doi:10.1126/science.aat1066. Retrieved 24 January 2018.
    • Cyranoski, David (24 January 2018). "First monkeys cloned with technique that made Dolly the sheep – Chinese scientists create cloned primates that could revolutionize studies of human disease". Nature. 553 (7689): 387–388. Bibcode:2018Natur.553..387C. doi:10.1038/d41586-018-01027-z. PMID 29368720.
  35. ^ Maron, Dina Fine (24 January 2018). "First Primate Clones Produced Using the "Dolly" Method – The success with monkeys could ignite new ethical debates and medical research". Scientific American. Retrieved 24 January 2018.
  36. ^ Briggs, Helen (24 January 2018). "First monkey clones created in Chinese laboratory". BBC News. Retrieved 24 January 2018.
  37. ^ Kolata, Gina (24 January 2018). "Yes, They've Cloned Monkeys in China. That Doesn't Mean You're Next". The New York Times. Retrieved 25 January 2018.
  38. ^ Lanza, Robert P.; Jose B. Cibelli; Francisca A. Diaz; Carlos T. Moraes; Peter W. Farin; Charlotte E. Farin; Carolyn J. Hammer; Michael D. West; Philip Damiani (2000). "Cloning of an endangered species (Bos gaurus) using interspecies nuclear transfer" (PDF). Cloning. 2 (2): 79–90. CiteSeerX 10.1.1.455.5842. doi:10.1089/152045500436104. PMID 16218862. Retrieved 10 December 2013.
  39. ^ Wani, Nisar Ahmad; Vettical, Binoy S.; Hong, Seung B. (17 May 2017). "First cloned Bactrian camel (Camelus bactrianus) calf produced by interspecies somatic cell nuclear transfer: A step towards preserving the critically endangered wild Bactrian camels". PLOS ONE. 12 (5): e0177800. Bibcode:2017PLoSO..1277800W. doi:10.1371/journal.pone.0177800. PMC 5435326. PMID 28545049.
  40. ^ a b c d Edwards, J. L.; Schrick, F. N.; McCracken, M. D.; Amstel, S. R. Van; Hopkins, F. M.; Welborn, M. G.; Davies, C. J. (2003). "Cloning Adult Farm Animals: A Review of the Possibilities and Problems Associated with Somatic Cell Nuclear Transfer". American Journal of Reproductive Immunology. 50 (2): 113–123. doi:10.1034/j.1600-0897.2003.00064.x. ISSN 1600-0897. PMID 12846674. S2CID 25230664.
  41. ^ Shukman, David (14 January 2014) China cloning on an 'industrial scale' BBC News Science and Environment, Retrieved 10 April 2014
  42. ^ Zastrow, Mark (8 February 2016). "Inside the cloning factory that creates 500 new animals a day". New Scientist. Retrieved 23 February 2016.
  43. ^ Czernik, Marta; Anzalone, Debora A.; Palazzese, Luca; Oikawa, Mami; Loi, Pasqualino (2019-04-16). "Somatic cell nuclear transfer: failures, successes and the challenges ahead". The International Journal of Developmental Biology. 63 (3–4–5): 123–130. doi:10.1387/ijdb.180324mc. ISSN 0214-6282. PMID 31058291.
  44. ^ Malin, Katarzyna; Witkowska-Piłaszewicz, Olga; Papis, Krzysztof (September 2022). "The many problems of somatic cell nuclear transfer in reproductive cloning of mammals". Theriogenology. 189: 246–254. doi:10.1016/j.theriogenology.2022.06.030. ISSN 0093-691X. PMID 35809358.
  45. ^ a b Srirattana, Kanokwan; Kaneda, Masahiro; Parnpai, Rangsun (2022-02-10). "Strategies to Improve the Efficiency of Somatic Cell Nuclear Transfer". International Journal of Molecular Sciences. 23 (4): 1969. doi:10.3390/ijms23041969. ISSN 1422-0067. PMC 8879641. PMID 35216087.
  46. ^ a b Jeremy Rifkin. (February 18, 2002). "Fusion Biopolitics". Archived 2009-06-16 at the Wayback Machine The Nation. Retrieved on August 7, 2006.
  47. ^ Sheryl Gay Stolberg, "Some for Abortion Rights Lean Right in Cloning Fight", New York Times (January 24, 2002)
  48. ^ Lori B. Andrews, et al., Open Letter to US Senate on Human Cloning Archived 2010-11-22 at the Wayback Machine, (March 19, 2002)
  49. ^ Lori B. Andrews et al. (March 19, 2002)."Open Letter to US Senators on Human Cloning and Eugenic Engineering". Archived 2006-09-30 at the Wayback Machine Retrieved on August 7, 2006
  50. ^ Andy Coghlan, "Cloning opponents fear loopholes in new UK law", New Scientist (November 23, 2001, retrieved October 6, 2006)
  51. ^ "Chapter 5: Legal and Policy Considerations. Cloning Human Beings" Archived 2007-07-06 at the Wayback Machine Report and Recommendations of the National Bioethics Advisory Commission, June 1997. Accessed 21 Oct 06
  52. ^ Robertson, John A (2010). "Embryo Stem Cell Research: Ten Years of Controversy". The Journal of Law, Medicine & Ethics. 38 (2): 191–203. CiteSeerX 10.1.1.475.1709. doi:10.1111/j.1748-720x.2010.00479.x. PMID 20579242. S2CID 38108788.
  53. ^ Cunningham, Thomas V (2013). "What justifies the United States ban on federal funding for nonreproductive cloning?". Medicine, Health Care and Philosophy. 16 (4): 825–841. doi:10.1007/s11019-013-9465-5. PMID 23361414. S2CID 1441938.
  54. ^ United Nations, "General Assembly Adopts United Nations Declaration on Human Cloning By Vote of 84-34-37", press release (August 3, 2005, retrieved October 6, 2006)
  55. ^ Council of Europe, Convention for the Protection of Human Rights and Dignity of the Human Being with regard to the Application of Biology and Medicine: Convention on Human Rights and Biomedicine (April 4, 1997, retrieved October 6, 2006); Council of Europe, Additional Protocol to the Convention for the Protection of Human Rights and Dignity of the Human Being with regard to the Application of Biology and Medicine, on the Prohibition of Cloning Human Being (January 12, 1998, retrieved October 6, 2006)

Further reading

External links