N -Формилметионин (fMet, [2] HCO-Met, [3] For-Met [3] ) является производным аминокислоты метионина , в котором формильная группа была добавлена к аминогруппе . Он специально используется для инициации синтеза белка из бактериальных и органеллярных генов и может быть удален посттрансляционно .
fMet играет важную роль в синтезе белка бактерий, митохондрий и хлоропластов . Он не используется в цитозольном синтезе белка эукариот , где транслируются ядерные гены эукариот . Он также не используется археями . В организме человека fMet распознается иммунной системой как чужеродный материал или как сигнал тревоги, вырабатываемый поврежденными клетками, и стимулирует организм к борьбе с потенциальной инфекцией.
fMet требуется для эффективного инициирования синтеза белка в большинстве групп бактерий. Комплекс 30S рибосома–мРНК специфически рекрутирует тРНК с формилированной аминокислотой – тРНК fMet, прикрепленной к fMet в естественном случае. [4]
Поскольку fMet управляет инициацией, белки в бактериях начинаются ( N -конец ) с остатка fMet вместо метионина. Дальнейшие появления кодона «AUG» приведут к нормальному метионину, поскольку используется нормальная «удлиняющаяся» тРНК Met . [4]
Добавление формильной группы к метионину катализируется ферментом метионил -тРНК формилтрансферазой . Эта модификация выполняется после того, как метионин был загружен на тРНК fMet аминоацил -тРНК синтетазой . Сам метионин может быть загружен либо на тРНК fMet , либо на тРНК Met . Однако формилтрансфераза будет катализировать добавление формильной группы к метионину только в том случае, если метионин был загружен на тРНК fMet , а не на тРНК Met . Это происходит потому, что формилтрансфераза распознает специфические особенности тРНК fMet . [4]
Митохондрии эукариотических клеток, включая клетки человека, и хлоропласты растительных клеток также инициируют синтез белка с fMet. Учитывая, что митохондрии и хлоропласты имеют этот начальный синтез белка с fMet, как и бактерии, это было приведено в качестве доказательства эндосимбиотической теории . [ 5 ]
Неожиданно оказалось, что формилтрансфераза может также воздействовать на эукариотическую инициирующую тРНК в живых дрожжевых клетках. Даже в нормальных условиях формилтрансфераза, кодируемая ядром, не полностью импортируется в митохондрии; еще больше ее остается в цитозоле при стрессе. Эти цитозольные формилтрансферазы производят fMet-тРНК i , которая может использоваться цитозольными рибосомами для производства белков с N-концевым fMet. Эти белки нацелены на деградацию специфическими процессами в клетке. [6]
N - концевой fMet удаляется из большинства белков, как хозяйских, так и рекомбинантных, с помощью последовательности двух ферментативных реакций. Сначала пептиддеформилаза (PDF) деформилирует его, превращая остаток обратно в нормальный метионин. Затем метионинаминопептидаза (MetAP) удаляет остаток из цепи. [7] MetAP действует только на белки с остатками во второй позиции, которые менее объемны, чем валин. [8]
N - концевой fMet, если его не удалить с помощью PDF, по-видимому, действует как дегрон , сигнал к деградации белка. [8]
Формильная группа не является строго обязательной для инициации. Бактерии с нокаутированной формилтрансферазой, которая не позволяет Met-tRNA fMet (т. е. метионину, загруженному на tRNA fMet ) превращаться в fMet-tRNA fMet , могут иметь различную степень остаточной способности начинать синтез белка. E. coli , S. pneumoniae и B. subtilis практически не демонстрируют остаточной способности к трансляции, в то время как P. aeruginosa , S. aureus , H. influenzae и, возможно, S. faecalis все еще производят много белка. У P. aeruginosa эта способность облегчается бактериальным фактором инициации 2 , который может переносить как Met-tRNA fMet , так и fMet-tRNA fMet в рибосому. [9]
Поскольку fMet присутствует в белках, производимых бактериями, но не в белках, производимых эукариотами (за исключением органелл бактериального происхождения), иммунная система может использовать его для различения своего и чужого. Полиморфноядерные клетки могут связывать белки, начиная с fMet, и использовать их для инициирования привлечения лейкоцитов циркулирующей крови , а затем стимулировать микробицидную активность, такую как фагоцитоз . [10] [11] [12]
Поскольку fMet присутствует в белках, вырабатываемых митохондриями и хлоропластами, более поздние теории не рассматривают его как молекулу, которую иммунная система может использовать для различения своего и чужого. [13] Вместо этого, fMet-содержащие олигопептиды и белки, по-видимому, высвобождаются митохондриями поврежденных тканей, а также поврежденными бактериями, и, таким образом, могут квалифицироваться как сигнал «тревоги», как обсуждалось в модели иммунитета Danger . Прототипическим fMet-содержащим олигопептидом является N -формилметионин-лейцил-фенилаланин (FMLP), который активирует лейкоциты и другие типы клеток, связываясь с рецепторами G-белка, сопряженными с формилпептидным рецептором 1 (FPR1) и формилпептидным рецептором 2 (FPR2) этих клеток (см. также формилпептидный рецептор 3 ). Действуя через эти рецепторы, fMet-содержащие олигопептиды и белки являются частью врожденной иммунной системы ; они функционируют для инициирования острых воспалительных реакций, но при других условиях функционируют для ингибирования и разрешения этих реакций. Олигопептиды и белки, содержащие fMet, также функционируют в других физиологических и патологических реакциях.
{{cite book}}
: CS1 maint: отсутствует местоположение издателя ( ссылка )