В молекулярной биологии регулятор ответа — это белок , который опосредует ответ клетки на изменения в ее среде как часть двухкомпонентной регуляторной системы . Регуляторы ответа связаны со специфическими гистидинкиназами , которые служат датчиками изменений окружающей среды. Регуляторы ответа и гистидинкиназы — два наиболее распространенных семейства генов у бактерий , где двухкомпонентные сигнальные системы очень распространены; они также гораздо реже встречаются в геномах некоторых архей , дрожжей , нитчатых грибов и растений . Двухкомпонентные системы не встречаются у многоклеточных животных . [1] [2] [3] [4]
Белки-регуляторы ответа обычно состоят из домена -получателя и одного или нескольких эффекторных доменов, хотя в некоторых случаях они обладают только доменом-получателем и оказывают свое действие посредством белок-белковых взаимодействий . В двухкомпонентной сигнализации гистидинкиназа реагирует на изменения окружающей среды путем автофосфорилирования остатка гистидина , после чего домен-приемник регулятора ответа катализирует перенос фосфатной группы на свой собственный остаток аспартата- получателя. Это вызывает конформационное изменение , которое изменяет функцию эффекторных доменов, что обычно приводит к увеличению транскрипции целевых генов. Механизмы, посредством которых это происходит, разнообразны и включают аллостерическую активацию эффекторного домена или олигомеризацию фосфорилированных регуляторов ответа. [2] В распространенной вариации на эту тему, называемой фосфорелеем, гибридная гистидинкиназа обладает собственным доменом-получателем, а белок фосфопереноса гистидина выполняет окончательный перенос на регулятор ответа. [4]
Во многих случаях гистидинкиназы являются бифункциональными и также служат фосфатазами , катализируя удаление фосфата из остатков аспартата регулятора ответа, так что сигнал, передаваемый регулятором ответа, отражает баланс между активностью киназы и фосфатазы. [4] Многие регуляторы ответа также способны к аутодефосфорилированию, которое происходит в широком диапазоне временных масштабов. [2] Кроме того, фосфоаспартат относительно химически нестабилен и может гидролизоваться неферментативно. [1]
Гистидинкиназы высокоспецифичны для своих родственных регуляторов ответа; перекрестные помехи между различными двухкомпонентными сигнальными системами в одной и той же клетке очень незначительны. [6]
Регуляторы ответа можно разделить по крайней мере на три широких класса, основываясь на особенностях эффекторных доменов: регуляторы с ДНК-связывающим эффекторным доменом, регуляторы с ферментативным эффекторным доменом и однодоменные регуляторы ответа. [3] Возможны более полные классификации, основанные на более детальном анализе архитектуры домена. Помимо этих широких категорий, существуют регуляторы ответа с другими типами эффекторных доменов, включая РНК-связывающие эффекторные домены.
Регуляторы с ДНК-связывающим эффекторным доменом являются наиболее распространенными регуляторами ответа и оказывают прямое влияние на транскрипцию . [7] Они, как правило, взаимодействуют со своими родственными регуляторами на N-концевом домене приемника и содержат ДНК-связывающий эффектор по направлению к C-концу. После фосфорилирования на домене приемника регулятор ответа димеризуется, приобретает повышенную способность связывать ДНК и действует как фактор транскрипции . [8] Архитектура доменов связывания ДНК характеризуется как вариации мотивов спираль-поворот-спираль . Одна вариация, обнаруженная на регуляторе ответа OmpR двухкомпонентной системы EnvZ/OmpR и других регуляторах ответа, подобных OmpR, представляет собой архитектуру «крылатой спирали». [9] Регуляторы ответа, подобные OmpR, являются самой большой группой регуляторов ответа, и мотив крылатой спирали широко распространен. Другие подтипы регуляторов ответа, связывающих ДНК, включают регуляторы, подобные FixJ и NtrC. [10] Регуляторы реакции связывания ДНК участвуют в различных процессах поглощения, включая нитрат / нитрит (NarL, обнаружен у большинства прокариот). [11]
Второй класс регуляторов многодоменного ответа — это регуляторы с ферментативными эффекторными доменами. [12] Эти регуляторы ответа могут участвовать в передаче сигнала и генерировать вторичные молекулы-мессенджеры. Примерами являются регулятор хемотаксиса CheB с доменом метилэстеразы, который ингибируется, когда регулятор ответа находится в неактивной нефосфорилированной конформации. Другие регуляторы ферментативного ответа включают фосфодиэстеразы c-di-GMP (например, VieA в V. cholerae ), протеинфосфатазы и гистидинкиназы. [12]
Относительно небольшое количество регуляторов ответа, однодоменные регуляторы ответа, содержат только домен-приемник, полагаясь на белок-белковые взаимодействия для проявления своих нижестоящих биологических эффектов. [13] Домен-приемник претерпевает конформационные изменения, взаимодействуя с автофосфорилированной гистидинкиназой, и, следовательно, регулятор ответа может инициировать дальнейшие реакции по сигнальному каскаду. Известные примеры включают регулятор хемотаксиса CheY, который взаимодействует с белками жгутикового мотора непосредственно в своем фосфорилированном состоянии. [13]
Секвенирование до сих пор показало, что отдельные классы регуляторов ответа неравномерно распределены по различным таксонам, [14] в том числе по доменам. В то время как регуляторы ответа с доменами связывания ДНК наиболее распространены у бактерий, регуляторы ответа с одним доменом более распространены у архей, а другие основные классы регуляторов ответа, по-видимому, отсутствуют в геномах архей.
Количество двухкомпонентных систем, присутствующих в бактериальном геноме , тесно связано с размером генома, а также с экологической нишей ; бактерии, которые занимают ниши с частыми колебаниями окружающей среды, обладают большим количеством гистидинкиназ и регуляторов реакции. [4] [7] Новые двухкомпонентные системы могут возникать путем дупликации генов или латерального переноса генов , и относительные скорости каждого процесса значительно различаются у разных видов бактерий. [15] В большинстве случаев гены регуляторов реакции расположены в том же опероне , что и их родственная гистидинкиназа; [4] латеральные переносы генов с большей вероятностью сохраняют структуру оперона, чем дупликации генов. [15] Небольшое количество двухкомпонентных систем, присутствующих у эукариот, скорее всего, возникло путем латерального переноса генов из эндосимбиотических органелл; в частности, те, которые присутствуют у растений, вероятно, происходят из хлоропластов . [4]