stringtranslate.com

Антитромбин

Антитромбин (АТ) – небольшой гликопротеин , инактивирующий некоторые ферменты системы свертывания крови . Это белок, состоящий из 464 аминокислот, вырабатываемый печенью . Он содержит три дисульфидные связи и четыре возможных сайта гликозилирования . α-Антитромбин является доминирующей формой антитромбина, обнаруженной в плазме крови , и имеет олигосахарид, занимающий каждый из четырех сайтов гликозилирования. Единственный сайт гликозилирования остается неизменно незанятым в минорной форме антитромбина, β-антитромбине. [5] Его активность многократно увеличивается антикоагулянтом гепарином , который усиливает связывание антитромбина с фактором IIa (тромбином) и фактором Ха . [6]

Состав

Антитромбин также называют антитромбином III (АТ III). Обозначения от антитромбина I до антитромбина IV возникли в ранних исследованиях, проведенных в 1950-х годах Сигерсом, Джонсоном и Феллом. [7]

Антитромбин I (AT I) относится к связыванию тромбина с фибрином после того, как тромбин активировал фибриноген , в некаталитическом сайте связывания тромбина. Антитромбин II (АТ II) относится к кофактору плазмы, который вместе с гепарином препятствует взаимодействию тромбина и фибриногена . Антитромбин III (АТ III) относится к веществу в плазме , которое инактивирует тромбин. Антитромбин IV (АТ IV) относится к антитромбину, который активируется во время и вскоре после свертывания крови . [8] Только AT III и, возможно, AT I имеют медицинское значение. AT III обычно называют исключительно «антитромбином», и именно антитромбин III обсуждается в этой статье.

Рисунок 1. Показано расположение четырех потенциальных сайтов гликозилирования в третичной структуре мономера антитромбина, взятое из файла банка данных белков 2ANT. В этой структуре только Asn 155 гликозилируется путем добавления одного остатка N -ацетилглюкозамина .

Период полувыведения антитромбина в плазме крови составляет около 3 дней. [9] Нормальная концентрация антитромбина в плазме крови человека составляет примерно 0,12 мг/мл, что эквивалентно молярной концентрации 2,3 мкМ. [10] Антитромбин был выделен из плазмы большого числа видов, помимо человека. [11] Как показало секвенирование белков и кДНК , все антитромбины коров, овец, кроликов и мышей состоят из 433 аминокислот, что на одну аминокислоту длиннее человеческого антитромбина. Считается, что дополнительная аминокислота находится в положении аминокислоты 6. Антитромбины коров, овец, кроликов, мышей и человека имеют идентичность аминокислотных последовательностей от 84 до 89%. [12] Шесть аминокислот образуют три внутримолекулярные дисульфидные связи : Cys 8-Cys128, Cys21-Cys95 и Cys248-Cys430. Все они имеют четыре потенциальных сайта N-гликозилирования . Они встречаются с аминокислотами аспарагина (Asn) под номерами 96, 135, 155 и 192 у людей и с аналогичными номерами аминокислот у других видов. Все эти сайты заняты ковалентно присоединенными боковыми цепями олигосахаридов в преобладающей форме человеческого антитромбина, α-антитромбине, в результате чего молекулярная масса этой формы антитромбина равна 58 200. [5] Потенциальный сайт гликозилирования аспарагина 135 не занят минорной формой (около 10%) антитромбина, β-антитромбина (см. рисунок 1 ). [13]

Рекомбинантные антитромбины со свойствами, аналогичными свойствам нормального человеческого антитромбина, были получены с использованием инфицированных бакуловирусом клеток насекомых и линий клеток млекопитающих, выращенных в культуре клеток . [14] [15] [16] [17] Эти рекомбинантные антитромбины обычно имеют паттерны гликозилирования, отличные от нормального антитромбина, и обычно используются в структурных исследованиях антитромбина. По этой причине многие структуры антитромбина, хранящиеся в банке данных по белкам и представленные в этой статье, демонстрируют переменные паттерны гликозилирования.

Антитромбин начинается в нативном состоянии, которое имеет более высокую свободную энергию по сравнению со латентным состоянием, до которого он распадается в среднем через 3 дня. Латентное состояние имеет ту же форму, что и активированное состояние, то есть когда происходит ингибирование тромбина. По сути, это классический пример преимуществ кинетического и термодинамического контроля сворачивания белка.

Функция

Рисунок 2. Реактивная связь arg 393 - ser 394 расположена в открытой петле на поверхности молекулы. Эта петля называется петлей реактивного центра (RSL) или петлей реактивного центра (RCL).
Рисунок 3. Показана аминокислотная последовательность петли реактивного центра человеческого антитромбина. [18] Петля реактивного сайта содержит аминокислотные последовательности с номерами от 377 до 400 (номера показаны под указанной выше последовательностью) или аминокислоты от P1 до P17 и от P1' до P7', используя соглашение Шехтера и Бергера (номера указаны над последовательностью выше). [19] Реактивная связь указана стрелкой.

Антитромбин представляет собой серпин (ингибитор сериновой протеазы) и, таким образом, по структуре похож на большинство других ингибиторов протеаз плазмы , таких как альфа-1-антихимотрипсин , альфа-2-антиплазмин и кофактор гепарина II .

Физиологическими протеазами- мишенями антитромбина являются протеазы контактного пути активации (ранее известного как внутренний путь), а именно активированные формы фактора X (Xa), фактора IX (IXa), фактора XI (XIa), фактора XII (XIIa). и, в большей степени, фактор II (тромбин) (IIa), а также активированную форму фактора VII (VIIa) пути тканевого фактора (ранее известного как внешний путь). [20] Ингибитор также инактивирует калликреин и плазмин , которые также участвуют в свертывании крови. Однако он инактивирует некоторые другие сериновые протеазы, которые не участвуют в коагуляции, такие как трипсин и субъединицу C1s фермента C1, участвующего в классическом пути комплемента . [12] [21]

Инактивация протеазы возникает вследствие захвата протеазы в эквимолярный комплекс с антитромбином, в котором активный центр фермента протеазы недоступен для ее обычного субстрата . [12] Образование комплекса антитромбин-протеаза включает взаимодействие между протеазой и специфической реактивной пептидной связью внутри антитромбина. В человеческом антитромбине эта связь находится между аргинином (arg) 393 и серином (ser) 394 (см. Фигуру 2 и Фигуру 3 ). [12]

Считается, что ферменты протеазы оказываются в ловушке неактивных комплексов антитромбин-протеаза в результате их атаки на реактивную связь. Хотя атака аналогичной связи внутри нормального субстрата протеазы приводит к быстрому протеолитическому расщеплению субстрата, инициирование атаки на реактивную связь с антитромбином приводит к активации антитромбина и захвату фермента на промежуточной стадии протеолитического процесса. Со временем тромбин способен расщепить реактивную связь внутри антитромбина, и неактивный комплекс антитромбин-тромбин диссоциирует, однако время, необходимое для этого, может превышать 3 дня. [22] Однако связи P3-P4 и P1'-P2' могут быть быстро расщеплены нейтрофильной эластазой и бактериальным ферментом термолизином соответственно, в результате чего неактивные антитромбины больше не способны ингибировать активность тромбина. [23]

Скорость ингибирования антитромбином активности протеазы значительно увеличивается за счет его дополнительного связывания с гепарином , а также его инактивации нейтрофильной эластазой . [23]

Антитромбин и гепарин

Антитромбин инактивирует свои физиологические ферменты-мишени, тромбин, фактор Ха и фактор IXa, с константами скорости 7–11 x 10 3 , 2,5 x 10 3 M -1 с -1 и 1 x 10 M -1 с -1 соответственно. [5] [24] Скорость инактивации антитромбина-тромбина увеличивается до 1,5 - 4 х 10 7 М -1 с -1 в присутствии гепарина, т.е. реакция ускоряется в 2000-4000 раз. [25] [26] [27] [28] Ингибирование фактора Ха ускоряется только в 500–1000 раз в присутствии гепарина, а максимальная константа скорости в 10 раз ниже, чем у ингибирования тромбина. [25] [28] Скорость усиления ингибирования антитромбина-фактора IXa увеличивается примерно в 1 миллион раз в присутствии гепарина и физиологических уровней кальция . [24]

AT-III связывается со специфической сульфатированной последовательностью пентасахарида, содержащейся в полимере гепарина.

GlcNAc/NS(6S)-GlcA-GlcNS(3S,6S)-IdoA(2S)-GlcNS(6S)

При связывании с этой пентасахаридной последовательностью ингибирование активности протеазы усиливается гепарином в результате двух различных механизмов. [29] В одном из механизмов стимуляция гепарином фактора IXa и ингибирование Ха зависит от конформационного изменения антитромбина, включающего петлю реактивного сайта, и, таким образом, является аллостерическим . [30] В другом механизме стимуляция ингибирования тромбина зависит от образования тройного комплекса между АТ-III, тромбином и гепарином. [30]

Аллостерическая активация

Рисунок 4. Две кристаллические структуры антитромбина. Модель A взята из файла pdb 2ANT, а модель B — из файла pdb 1AZX. Модель B представляет собой комплекс с пентасахаридом, а модель A не имеет комплекса.

Повышенное ингибирование факторов IXa и Ха требует минимальной последовательности пентасахарида гепарина. Конформационные изменения, которые происходят в антитромбине в ответ на связывание пентасахарида, хорошо документированы. [18] [31] [32]

В отсутствие гепарина аминокислоты P14 и P15 (см. рисунок 3 ) из петли реактивного центра встроены в основную часть белка (в частности, в верхнюю часть бета-листа A). Эта особенность является общей с другими серпинами, такими как кофактор гепарина II , альфа-1-антихимотрипсин и MENT .

Конформационное изменение, наиболее значимое для ингибирования факторов IXa и Ха, затрагивает аминокислоты P14 и P15 в N-концевой области петли реактивного сайта (обведено кружком на рисунке 4, модель B ). Эту область назвали шарнирной областью. Конформационное изменение внутри шарнирной области в ответ на связывание гепарина приводит к изгнанию P14 и P15 из основной части белка, и было показано, что предотвращение этого конформационного изменения не приводит к усилению ингибирования факторов IXa и Ха. [30] Считается, что повышенная гибкость, придаваемая петле реактивного сайта в результате конформационного изменения шарнирной области, является ключевым фактором, влияющим на усиление ингибирования факторов IXa и Ха. Подсчитано, что в отсутствие пентасахарида только одна из каждых 400 молекул антитромбина (0,25%) находится в активной конформации с удаленными аминокислотами Р14 и Р15. [30]

Неаллостерическая активация

Рисунок 5. Структура тройного комплекса антитромбин-тромбин-гепарин , взятого из pdb 1TB6.

Для усиления ингибирования тромбина требуется минимальное количество пентасахарида гепарина плюс, по меньшей мере, дополнительные 13 мономерных единиц. [33] Считается, что это связано с требованием, чтобы антитромбин и тромбин связывались с одной и той же цепью гепарина, прилегающей друг к другу. Это можно увидеть в серии моделей, показанных на рисунке 5 .

В структурах, показанных на фигуре 5, С-концевая часть (P'-сторона) петли реактивного сайта находится в расширенной конформации по сравнению с другими неактивированными или активированными гепарином антитромбиновыми структурами. [34] P'-область антитромбина необычно длинна по сравнению с P'-областью других серпинов и в неактивированных или активированных гепарином антитромбиновых структурах образует прочно связанный водородными связями β-поворот . Удлинение P' происходит за счет разрыва всех водородных связей, участвующих в β-повороте . [34]

Шарнирную область антитромбина в комплексе на фигуре 5 невозможно смоделировать из-за ее конформационной гибкости, а аминокислоты P9-P14 не наблюдаются в этой структуре. Эта конформационная гибкость указывает на то, что внутри комплекса может существовать равновесие между конформацией антитромбина, в которую вставлена ​​петля реактивного сайта P14 P15, и конформацией исключенной петли реактивного сайта P14 P15. В подтверждение этого анализ положения P15 Gly в комплексе на рисунке 5 (обозначенном в модели B) показывает, что он вставлен в бета-лист A (см. модель C). [34]

Влияние гликозилирования на активность

α-Антитромбин и β-антитромбин различаются по сродству к гепарину. [35] Разница в константе диссоциации между ними трехкратная для пентасахарида, показанного на рисунке 3 , и более чем десятикратная для полноразмерного гепарина, при этом β-антитромбин имеет более высокое сродство. [36] Считается, что более высокое сродство β-антитромбина связано с повышенной скоростью, с которой происходят последующие конформационные изменения внутри белка при первоначальном связывании гепарина. Считается, что для α-антитромбина дополнительное гликозилирование Asn-135 не мешает первоначальному связыванию гепарина, а скорее ингибирует любые возникающие конформационные изменения. [35]

Несмотря на то, что он присутствует только на уровне 5–10% от уровней α-антитромбина, из-за его повышенного сродства к гепарину считается, что β-антитромбин более важен, чем α-антитромбин, в контроле тромбогенных событий, возникающих в результате повреждения тканей. Действительно, ингибирование тромбина после повреждения аорты приписывают исключительно β-антитромбину. [37]

Недостатки

Доказательства важной роли антитромбина в регуляции нормального свертывания крови подтверждаются корреляцией между наследственным или приобретенным дефицитом антитромбина и повышенным риском развития тромботических заболеваний у любого больного. [38] Дефицит антитромбина обычно выявляется, когда пациент страдает рецидивирующим венозным тромбозом и тромбоэмболией легочной артерии .

Приобретенный дефицит антитромбина

Приобретенный дефицит антитромбина возникает в результате трех совершенно разных механизмов. Первым механизмом является повышенная экскреция, которая может возникнуть при почечной недостаточности, связанной с нефротическим синдромом протеинурии . Второй механизм возникает в результате снижения продукции, что наблюдается при печеночной недостаточности или циррозе печени или незрелости печени вследствие преждевременных родов . Третий механизм возникает в результате ускоренного потребления, которое наиболее выражено в результате тяжелой травмы, но также может наблюдаться в меньшем масштабе в результате таких вмешательств, как обширное хирургическое вмешательство или искусственное кровообращение . [39]

Наследственный дефицит антитромбина

Частота наследственного дефицита антитромбина оценивается в пределах от 1:2000 до 1:5000 среди нормальной популяции, причем первая семья, страдающая от наследственного дефицита антитромбина, была описана в 1965 году. [40] [41] Впоследствии было предложено, чтобы Классификация наследственного дефицита антитромбина может быть обозначена как тип I или тип II на основании функционального и иммунохимического анализа антитромбина. [42] Поддержание адекватного уровня активности антитромбина, который составляет не менее 70% от нормального функционального уровня, необходимо для обеспечения эффективного ингибирования протеаз свертывания крови. [43] Обычно в результате дефицита антитромбина типа I или типа II функциональные уровни антитромбина снижаются до уровня ниже 50% от нормального. [44]

Дефицит антитромбина I типа

Дефицит антитромбина I типа характеризуется снижением как антитромбиновой активности, так и концентрации антитромбина в крови больных. Дефицит типа I первоначально был разделен на две подгруппы: Ia и Ib, в зависимости от сродства к гепарину. Антитромбин лиц подгруппы Ia показал нормальное сродство к гепарину, тогда как антитромбин лиц подгруппы Ib показал пониженное сродство к гепарину. [45] Последующий функциональный анализ группы случаев 1b выявил не только снижение сродства к гепарину, но и множественные или «плейотрофические» нарушения, влияющие на реактивный сайт, сайт связывания гепарина и концентрацию антитромбина в крови. В пересмотренной системе классификации, принятой Комитетом по науке и стандартизации Международного общества тромбозов и гемостаза, случаи типа Ib теперь обозначаются как ТЭЛА типа II, плейотрофический эффект. [46]

Большинство случаев дефицита I типа обусловлены точечными мутациями , делециями или незначительными вставками в гене антитромбина. Эти генетические мутации приводят к дефициту типа I посредством различных механизмов:

Дефицит антитромбина II типа

Дефицит антитромбина II типа характеризуется нормальным уровнем антитромбина, но сниженной активностью антитромбина в крови больных людей. Первоначально было предложено разделить дефицит II типа на три подгруппы (IIa, IIb и IIc) в зависимости от того, функциональная активность антитромбина снижается или сохраняется. [45]

В пересмотренной системе классификации, вновь принятой Комитетом по науке и стандартизации Международного общества по тромбозам и гемостазу, дефицит антитромбина типа II по-прежнему подразделяется на три подгруппы: уже упомянутый PE типа II наряду с RS типа II, где мутации влияют на реактивный сайт и HBS типа II, где мутации влияют на сайт связывания антитромбина и гепарина. [46] Для целей базы данных мутаций антитромбина, составленной членами Подкомитета по ингибиторам плазменной коагуляции Комитета по науке и стандартизации Международного общества по тромбозам и гемостазу, случаи типа IIa теперь классифицируются как ТЭЛА типа II, случаи типа IIb - как RS типа II и случаи типа IIc, как HBS типа II. [49]

Топонимы

В настоящее время относительно легко охарактеризовать специфическую генетическую мутацию антитромбина. Однако до использования современных методов характеристики исследователи называли мутации в честь города, в котором проживал человек, страдающий от дефицита, т.е. мутация антитромбина обозначалась топонимом . [50] С тех пор современная мутационная характеристика показала, что многие отдельные топонимы антитромбина на самом деле являются результатом одной и той же генетической мутации, например антитромбин-Тояма эквивалентен антитромбину-Кумамото, -Амьен, -Тур, -Париж-1, -Париж. -2, -Алжир, -Падуя-2 и -Барселона. [49]

Медицинское использование

Антитромбин используется в качестве белкового терапевтического препарата , который может быть очищен из плазмы человека [51] или получен рекомбинантным путем (например, атрин, который производится в молоке генетически модифицированных коз [52] [53] ).

Он одобрен FDA в качестве антикоагулянта для предотвращения образования тромбов до, во время или после операции или родов у пациентов с наследственной недостаточностью антитромбина. [51] [53]

Его изучали при сепсисе для снижения диффузного внутрисосудистого свертывания крови и других исходов. Не было обнаружено никакой пользы от него у критически больных людей с сепсисом. [54]

Расщепленный и латентный антитромбин

Рисунок 6. Латентный антитромбин.

Расщепление в реактивном сайте приводит к захвату протеазы тромбина с перемещением петли расщепленного реактивного сайта вместе со связанной протеазой, так что петля образует дополнительную шестую цепь в середине бета-листа А. Это перемещение реактивного сайта петлю также можно индуцировать без расщепления, при этом полученная кристаллографическая структура будет идентична структуре физиологически латентной конформации ингибитора активатора плазминогена-1 (PAI-1). [55] По этой причине конформация антитромбина, в которой петля реактивного сайта включена в нерасщепленную основную часть белка, называется латентным антитромбином. В отличие от PAI-1 переход антитромбина из нормальной или нативной конформации в латентную конформацию необратим.

Нативный антитромбин можно превратить в латентный антитромбин (L-антитромбин) путем нагревания отдельно или в присутствии цитрата . [56] [57] Однако без чрезмерного нагревания и при температуре 37 °C (температура тела) 10% всего антитромбина, циркулирующего в крови, превращается в L-антитромбин в течение 24 часов. [58] [59] Структура L-антитромбина показана на Фигуре 6 .

Трехмерная структура нативного антитромбина была впервые определена в 1994 году. [31] [32] Неожиданно белок кристаллизовался в виде гетеродимера , состоящего из одной молекулы нативного антитромбина и одной молекулы латентного антитромбина. Латентный антитромбин при образовании сразу же связывается с молекулой нативного антитромбина с образованием гетеродимера, и только когда концентрация латентного антитромбина превышает 50% от общего антитромбина, его можно обнаружить аналитически. [59] Латентная форма антитромбина не только неактивна в отношении целевых протеаз свертывания крови, но и ее димеризация с активной в других отношениях молекулой нативного антитромбина также приводит к инактивации нативных молекул. Физиологическое воздействие потери активности антитромбина либо через латентное образование антитромбина, либо через последующее образование димера усугубляется предпочтением возникновения димеризации между активированным гепарином β-антитромбином и латентным антитромбином в отличие от α-антитромбина. [59]

Также была выделена форма антитромбина, которая является промежуточным звеном в превращении нативной и латентной форм антитромбина, и ее назвали прелатентным антитромбином . [60]

Антиангиогенный антитромбин

Ангиогенез — это физиологический процесс, включающий рост новых кровеносных сосудов из ранее существовавших сосудов. В нормальных физиологических условиях ангиогенез жестко регулируется и контролируется балансом ангиогенных стимуляторов и ангиогенных ингибиторов . Рост опухоли зависит от ангиогенеза, и во время развития опухоли требуется устойчивая продукция ангиогенных стимулирующих факторов наряду со снижением количества ангиогенных ингибирующих факторов, продуцируемых опухолевыми клетками. [61] Расщепленная и латентная форма антитромбина мощно ингибируют ангиогенез и рост опухолей на животных моделях. [62] Было показано, что прелатентная форма антитромбина ингибирует ангиогенез in vitro , но на сегодняшний день не тестировалась на экспериментальных моделях животных.

Рекомендации

  1. ^ abc GRCh38: Версия Ensembl 89: ENSG00000117601 — Ensembl , май 2017 г.
  2. ^ abc GRCm38: выпуск Ensembl 89: ENSMUSG00000026715 — Ensembl , май 2017 г.
  3. ^ "Ссылка на Human PubMed:". Национальный центр биотехнологической информации, Национальная медицинская библиотека США .
  4. ^ "Ссылка на Mouse PubMed:". Национальный центр биотехнологической информации, Национальная медицинская библиотека США .
  5. ^ abc Бьорк I, Олсон, Дж. Э. (1997). Антитромбин, очень важный серпин (в химии и биологии серпинов) . Пленум Пресс. стр. 17–33. ISBN 978-0-306-45698-5.
  6. ^ Финли А., Гринберг С. (01.06.2013). «Обзорная статья: чувствительность и резистентность к гепарину: ведение во время искусственного кровообращения». Анестезия и анальгезия . 116 (6): 1210–1222. дои : 10.1213/ANE.0b013e31827e4e62 . ISSN  1526-7598. PMID  23408671. S2CID  22500786.
  7. ^ Сигерс WH, Джонсон Дж. Ф., Фелл С. (1954). «Антитромбиновая реакция на активацию протромбина». Являюсь. Дж. Физиол . 176 (1): 97–103. дои : 10.1152/ajplegacy.1953.176.1.97. ПМИД  13124503.
  8. ^ Инь Э.Т., Весслер С., Столл П.Дж. (1971). «Идентичность плазменного ингибитора фактора X с антитромбином 3 и кофактором гепарина». Ж. Биол. Хим . 246 (11): 3712–3719. дои : 10.1016/S0021-9258(18)62185-4 . ПМИД  4102937.
  9. ^ Коллен Д., Шец Дж., де Кок Ф., Холмер Э., Верстраете М. (1977). «Метаболизм антитромбина III (кофактора гепарина) у человека: эффекты венозного тромбоза при введении гепарина». Евро. Дж. Клин. Вкладывать деньги . 7 (1): 27–35. doi :10.1111/j.1365-2362.1977.tb01566.x. PMID  65284. S2CID  22494710.
  10. ^ Конард Дж., Бросстад Ф., Ли Ларсен М., Самама М., Абильдгаард Ю. (1983). «Молярная концентрация антитромбина в плазме нормального человека». Гемостаз . 13 (6): 363–368. дои : 10.1159/000214823. ПМИД  6667903.
  11. ^ Джордан RE (1983). «Антитромбин у позвоночных: сохранение гепарин-зависимого антикоагулянтного механизма». Арх. Биохим. Биофиз . 227 (2): 587–595. дои : 10.1016/0003-9861(83)90488-5. ПМИД  6607710.
  12. ^ abcd Олсон ST, Бьорк I (1994). «Регуляция активности тромбина антитромбином и гепарином». Семин. Тромб. Гемост . 20 (4): 373–409. дои : 10.1055/с-2007-1001928. PMID  7899869. S2CID  28872063.
  13. ^ Бреннан С.О., Джордж П.М., Джордан Р.Э. (1987). «Физиологический вариант антитромбина-III не имеет углеводной боковой цепи в Asn 135». ФЭБС Летт . 219 (2): 431–436. дои : 10.1016/0014-5793(87)80266-1. PMID  3609301. S2CID  35438503.
  14. ^ Стивенс AW, Сиддики А, Хирс CH (1987). «Экспрессия функционально активного человеческого антитромбина III». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 84 (11): 3886–3890. Бибкод : 1987PNAS...84.3886S. дои : 10.1073/pnas.84.11.3886 . ПМК 304981 . ПМИД  3473488. 
  15. ^ Зеттлмейсль Г., Конрад Х.С., Нимц М., Каргес Х.Э. (1989). «Характеристика рекомбинантного человеческого антитромбина III, синтезированного в клетках яичника китайского хомячка». Ж. Биол. Хим . 264 (35): 21153–21159. дои : 10.1016/S0021-9258(19)30060-2 . ПМИД  2592368.
  16. ^ Гиллеспи Л.С., Хиллесланд К.К., Кнауэр DJ (1991). «Экспрессия биологически активного человеческого антитромбина III рекомбинантным бакуловирусом в клетках Spodoptera frugiperda». Ж. Биол. Хим . 266 (6): 3995–4001. дои : 10.1016/S0021-9258(19)67892-0 . ПМИД  1995647.
  17. ^ Эрсдал-Баджу Э, Лу А, Пэн X, Пикард В, Зендеру П, Тюрк Б, Бьорк I, Олсон С.Т., Бок СК (1995). «Устранение гетерогенности гликозилирования, влияющей на сродство к гепарину рекомбинантного человеческого антитромбина III, путем экспрессии бета-подобного варианта в клетках насекомых, инфицированных бакуловирусом». Биохим. Дж . 310 (Часть 1): 323–330. дои : 10.1042/bj3100323. ПМЦ 1135891 . ПМИД  7646463. 
  18. ^ ab Whisstock JC, Pike RN и др. (2000). «Конформационные изменения серпинов: II. Механизм активации антитромбина гепарином». Дж. Мол. Биол . 301 (5): 1287–1305. дои : 10.1006/jmbi.2000.3982. ПМИД  10966821.
  19. ^ Шехтер I, Бергер А (1967). «О размерах активного центра протеаз. И. Папаин». Биохим. Биофиз. Рез. Коммун . 27 (2): 157–162. дои : 10.1016/S0006-291X(67)80055-X. ПМИД  6035483.
  20. ^ Перссон Э., Бак Х., Олсен Огайо (2001). «Замена валина на лейцин 305 в факторе VIIa увеличивает внутреннюю ферментативную активность». Ж. Биол. Хим . 276 (31): 29195–29199. дои : 10.1074/jbc.M102187200 . ПМИД  11389142.
  21. ^ Огстон Д., Мюррей Дж. Кроуфорд GP (1976). «Ингибирование активированной субъединицы Cls первого компонента комплемента антитромбином III в присутствии гепарина». Тромб. Рез . 9 (3): 217–222. дои : 10.1016/0049-3848(76)90210-3. ПМИД  982345.
  22. ^ Даниэльссон А, Бьорк I (1980). «Медленная, спонтанная диссоциация комплекса антитромбин-тромбин приводит к образованию протеолитически модифицированной формы ингибитора». ФЭБС Летт . 119 (2): 241–244. дои : 10.1016/0014-5793(80)80262-6. PMID  7428936. S2CID  40067251.
  23. ^ аб Чанг В.С., Уорделл М.Р., Ломас Д.А., Каррелл Р.В. (1996). «Изучение конформаций реактивной петли серпина путем протеолитического расщепления». Биохим. Дж . 314 (2): 647–653. дои : 10.1042/bj3140647. ПМК 1217096 . ПМИД  8670081. 
  24. ^ ab Бедстед Т., Суонсон Р., Чуанг Ю.Дж., Бок П.Е., Бьорк И., Олсон С.Т. (2003). «Ионы гепарина и кальция резко усиливают реактивность антитромбина с фактором IXa, создавая новые экзосайты взаимодействия». Биохимия . 42 (27): 8143–8152. дои : 10.1021/bi034363y. ПМИД  12846563.
  25. ^ аб Джордан Р.Э., Ооста GM, Гарднер В.Т., Розенберг Р.Д. (1980). «Кинетика гемостатических фермент-антитромбиновых взаимодействий в присутствии низкомолекулярного гепарина». Ж. Биол. Хим . 255 (21): 10081–10090. дои : 10.1016/S0021-9258(19)70431-1 . ПМИД  6448846.
  26. ^ Гриффит MJ (1982). «Кинетика усиленной гепарином реакции антитромбин III/тромбин. Доказательства шаблонной модели механизма действия гепарина». Ж. Биол. Хим . 257 (13): 7360–7365. дои : 10.1016/S0021-9258(18)34385-0 . ПМИД  7085630.
  27. ^ Олсон С.Т., Бьорк I (1991). «Преобладающий вклад поверхностного приближения в механизм ускорения гепарином реакции антитромбин-тромбин. Выяснение эффектов концентрации соли». Ж. Биол. Хим . 266 (10): 6353–6354. дои : 10.1016/S0021-9258(18)38125-0 . ПМИД  2007588.
  28. ^ аб Олсон С.Т., Бьорк И., Шеффер Р., Крейг П.А., Шор Дж.Д., Чоэй Дж. (1992). «Роль антитромбинсвязывающего пентасахарида в ускорении гепарином антитромбин-протеиназных реакций. Разрешение вклада конформационных изменений антитромбина в повышение скорости гепарина». Ж. Биол. Хим . 267 (18): 12528–12538. дои : 10.1016/S0021-9258(18)42309-5 . ПМИД  1618758.
  29. ^ Джонсон DJ, Лэнгдаун Дж., Ли В., Луис С.А., Бэглин Т.П., Хантингтон Дж.А. (2006). «Кристаллическая структура мономерного нативного антитромбина обнаруживает новую конформацию петли реактивного центра». Ж. Биол. Хим . 281 (46): 35478–35486. дои : 10.1074/jbc.M607204200 . ПМЦ 2679979 . ПМИД  16973611. 
  30. ^ abcd Лэнгдаун Дж., Джонсон DJ, Бэглин Т.П., Хантингтон Дж.А. (2004). «Аллостерическая активация антитромбина критически зависит от расширения шарнирной области». Ж. Биол. Хим . 279 (45): 47288–47297. дои : 10.1074/jbc.M408961200 . ПМИД  15326167.
  31. ^ ab Шредер Х.А., де Бур Б., Дейкема Р., Малдерс Дж., Теуниссен Х.Дж., Гроотенхейс П.Д., Хол WG (1994). «Интактный и расщепленный комплекс антитромбина III человека как модель взаимодействия серпин-протеиназы». Структурная и молекулярная биология природы . 1 (1): 48–54. дои : 10.1038/nsb0194-48. PMID  7656006. S2CID  39110624.
  32. ^ аб Каррелл Р.В., Штейн П.Е., Ферми Г., Уорделл М.Р. (1994). «Биологическое значение структуры 3А димерного антитромбина». Состав . 2 (4): 257–270. дои : 10.1016/S0969-2126(00)00028-9 . ПМИД  8087553.
  33. ^ Петиту М., Эро Ж.П., Бернат А., Дригес П.А., Дюшосой П., Лормо Ж.К., Герберт Ж.М. (1999). «Синтез миметиков гепарина, ингибирующих тромбин, без побочных эффектов». Природа . 398 (6726): 417–422. Бибкод : 1999Natur.398..417P. дои : 10.1038/18877. PMID  10201371. S2CID  4339441.
  34. ^ abc Li W, Джонсон DJ, Эсмон CT, Хантингтон JA (2004). «Структура тройного комплекса антитромбин-тромбин-гепарин раскрывает антитромботический механизм гепарина». Структурная и молекулярная биология природы . 11 (9): 857–862. дои : 10.1038/nsmb811. PMID  15311269. S2CID  28790576.
  35. ^ аб Маккой А.Дж., Пей XY, Скиннер Р., Абрахамс Дж.П., Каррелл Р.В. (2003). «Структура бета-антитромбина и влияние гликозилирования на сродство и активность антитромбина к гепарину». Дж. Мол. Биол . 326 (3): 823–833. дои : 10.1016/S0022-2836(02)01382-7. hdl : 1887/3620879 . ПМИД  12581643.
  36. ^ Турк Б., Бриедитис I, Бок С.К., Олсон С.Т., Бьорк I (1997). «Олигосахаридная боковая цепь Asn-135 альфа-антитромбина, отсутствующая в бета-антитромбине, снижает сродство ингибитора к гепарину, влияя на конформационные изменения, индуцированные гепарином». Биохимия . 36 (22): 6682–6691. дои : 10.1021/bi9702492. ПМИД  9184148.
  37. ^ Фребелиус С., Исакссон С., Сведенборг Дж. (1996). «Ингибирование тромбина антитромбином III на субэндотелии объясняется изоформой АТ бета». Артериосклер. Тромб. Васк. Биол . 16 (10): 1292–1297. дои :10.1161/01.ATV.16.10.1292. ПМИД  8857927.
  38. ^ ван Бовен Х.Х., Лейн Д.А. (1997). «Антитромбин и его наследственные состояния дефицита». Семин. Гематол . 34 (3): 188–204. ПМИД  9241705.
  39. ^ Маклин PS, Тейт RC (2007). «Наследственный и приобретенный дефицит антитромбина: эпидемиология, патогенез и варианты лечения». Наркотики . 67 (10): 1429–1440. дои : 10.2165/00003495-200767100-00005. PMID  17600391. S2CID  46971091.
  40. ^ Лейн Д.А., Кунц Г., Олдс Р.Дж., Тейн С.Л. (1996). «Молекулярная генетика дефицита антитромбина». Кровавый преподобный . 10 (2): 59–74. дои : 10.1016/S0268-960X(96)90034-X. ПМИД  8813337.
  41. ^ Эгеберг О (1965). «Наследственный дефицит антитромбина, вызывающий тромбофилию». Тромб. Диат. Геморр . 13 (2): 516–530. дои : 10.1055/s-0038-1656297. PMID  14347873. S2CID  42594050.
  42. ^ Сас Г, Пето I, Банхедьи Д, Бласко Г, Домьян Г (1980). «Гетерогенность «классического» дефицита антитромбина III». Тромб. Гемост . 43 (2): 133–136. дои : 10.1055/s-0038-1650034. PMID  7455972. S2CID  38459609.
  43. ^ Лейн Д.А., Олдс Р.Дж., Конард Дж., Буасклер М., Бок С.К., Халтин М., Абильдгаард Ю., Ирландия Х., Томпсон Э., Сас Дж. (1992). «Плейотропные эффекты мутаций замены цепи антитромбина 1C». Дж. Клин. Вкладывать деньги . 90 (6): 2422–2433. дои : 10.1172/JCI116133. ПМЦ 443398 . ПМИД  1469094. 
  44. ^ Лейн Д.А., Олдс Р.Дж., Тейн С.Л. (1994). «Антитромбин III: краткое изложение первого обновления базы данных». Нуклеиновые кислоты Рез . 22 (17): 3556–3559. ПМК 308318 . ПМИД  7937056. 
  45. ^ аб Сас Г (1984). «Наследственный дефицит антитромбина III: биохимические аспекты». Гематологическая . 17 (1): 81–86. ПМИД  6724355.
  46. ^ ab Lane DA, Olds RJ, Boisclair M, Chowdhury V, Thein SL, Cooper DN, Blajchman M, Perry D, Emmerich J, Aiach M (1993). «База данных мутаций антитромбина III: первое обновление. Для подкомитета по тромбину и его ингибиторам Комитета по науке и стандартизации Международного общества по тромбозу и гемостазу». Тромб. Гемост . 70 (2): 361–369. дои : 10.1055/s-0038-1649581. PMID  8236149. S2CID  43884122.
  47. ^ Олдс Р.Дж., Лейн Д.А., Бересфорд CH, Абильдгаард Ю., Хьюз П.М., Тейн С.Л. (1993). «Рекуррентная делеция гена антитромбина AT106-108 (-6 п.н.), выявленная методом гетеродуплексного обнаружения ДНК». Геномика . 16 (1): 298–299. дои : 10.1006/geno.1993.1184. ПМИД  8486379.
  48. ^ Олдс Р.Дж., Лейн Д.А., Ирландия Х., Финацци Г., Барбуи Т., Абильдгаард Ю., Джиролами А., Тейн С.Л. (1991). «Общая точечная мутация, вызывающая дефицит антитромбина III типа 1А: AT129 CGA в TGA (Arg to Stop)». Тромб. Рез . 64 (5): 621–625. дои : 10.1016/S0049-3848(05)80011-8. ПМИД  1808766.
  49. ^ ab Имперский колледж Лондона, медицинский факультет, база данных мутаций антитромбина. Проверено 16 августа 2008 г.
  50. ^ Блайхман М.А., Остин Р.К., Фернандес-Рачубински Ф., Шеффилд В.П. (1992). «Молекулярные основы наследственного дефицита антитромбина человека». Кровь . 80 (9): 2159–2171. дои : 10.1182/blood.V80.9.2159.2159 . ПМИД  1421387.
  51. ^ ab «Этикетка Тромбата III» (PDF) . Архивировано из оригинала (PDF) 15 ноября 2012 г. Проверено 23 февраля 2013 г.
  52. ^ Веб-сайт FDA для ATryn (BL 125284)
  53. ^ ab Антитромбин (рекомбинантный) Вкладыш в американский пакет ATryn для инъекций, 3 февраля 2009 г.
  54. ↑ Аллингструп М., Веттерслев Дж., Равн Ф.Б., Мёллер А.М., Афшари А. (9 февраля 2016 г.). «Антитромбин III для пациентов в критическом состоянии: систематический обзор с мета-анализом и последовательным анализом исследований». Интенсивная медицина . 42 (4): 505–520. дои : 10.1007/s00134-016-4225-7. ПМК 2137061 . ПМИД  26862016. 
  55. ^ Моттонен Дж., Стрэнд А., Симерски Дж., Свит Р.М., Дэнли Д.Е., Геохеган К.Ф., Джерард Р.Д., Голдсмит Э.Дж. (1992). «Структурные основы латентного периода ингибитора активатора плазминогена-1». Природа . 355 (6357): 270–273. Бибкод : 1992Natur.355..270M. дои : 10.1038/355270a0. PMID  1731226. S2CID  4365370.
  56. ^ Чанг WS, Харпер PL (1997). «Коммерческий концентрат антитромбина содержит неактивные L-формы антитромбина». Тромб. Гемост . 77 (2): 323–328. дои : 10.1055/s-0038-1655962. PMID  9157590. S2CID  21583152.
  57. ^ Уорделл М.Р., Чанг В.С., Брюс Д., Скиннер Р., Леск А.М., Каррелл Р.В. (1997). «Препаративная индукция и характеристика L-антитромбина: структурного гомолога латентного ингибитора активатора плазминогена-1». Биохимия . 36 (42): 13133–13142. дои : 10.1021/bi970664u. ПМИД  9335576.
  58. ^ Каррелл Р.В., Хантингтон Дж.А., Мушуньдже А., Чжоу А. (2001). «Конформационные основы тромбоза». Тромб. Гемост . 86 (1): 14–22. дои : 10.1055/s-0037-1616196. PMID  11487000. S2CID  21452323.
  59. ^ abc Чжоу А., Хантингтон Дж. А., Каррелл Р.В. (1999). «Образование гетеродимера антитромбина in vivo и возникновение тромбоза». Кровь . 94 (10): 3388–3396. дои : 10.1182/blood.V94.10.3388.422k20_3388_3396. ПМИД  10552948.
  60. ^ Ларссон Х., Акеруд П., Нордлинг К., Рауб-Сегалл Э., Клаессон-Уэлш Л., Бьорк I (2001). «Новая антиангиогенная форма антитромбина с сохраненной способностью связывать протеиназы и сродством к гепарину». Ж. Биол. Хим . 276 (15): 11996–12002. дои : 10.1074/jbc.M010170200 . ПМИД  11278631.
  61. ^ О'Рейли MS (2007). «Антиангиогенный антитромбин». Семин. Тромб. Гемост . 33 (7): 660–666. дои : 10.1055/с-2007-991533. PMID  18000792. S2CID  260321466.
  62. ^ О'Рейли М.С., Пири-Шеперд С., Лейн В.С., Фолкман Дж. (1999). «Антиангиогенная активность расщепленной конформации серпинового антитромбина». Наука . 285 (5435): 1926–1928. дои : 10.1126/science.285.5435.1926. ПМИД  10489375.

дальнейшее чтение

Внешние ссылки