Протеиновая тирозинфосфатаза, тип рецептора, C, также известная как PTPRC , представляет собой фермент , который у людей кодируется геном PTPRC . [5] PTPRC также известен как антиген CD45 (CD означает кластер дифференциации ), который изначально назывался общим лейкоцитарным антигеном ( LCA ). [6]
PTPRC является критическим ферментом, участвующим в регуляции функции иммунных клеток. PTPRC является трансмембранным протеином тирозинфосфатазой, экспрессируемой на поверхности всех ядросодержащих гемопоэтических клеток , в частности лимфоцитов . Он играет ключевую роль в активации и дифференциации Т-клеток , В-клеток и других иммунных клеток, модулируя сигнальные пути. Он функционирует путем дефосфорилирования определенных остатков тирозина на целевых белках, тем самым контролируя различные сигнальные процессы, необходимые для иммунного ответа и гомеостаза . [7] [8]
Белковый продукт этого гена, наиболее известный как CD45, является членом семейства протеинтирозинфосфатазы (PTP). PTP — это сигнальные молекулы, которые регулируют различные клеточные процессы, включая рост клеток, дифференциацию, митотический цикл и онкогенную трансформацию. CD45 содержит внеклеточный домен, один трансмембранный сегмент и два тандемных внутрицитоплазматических каталитических домена и, таким образом, принадлежит к семейству PTP рецепторного типа . [ необходима цитата ]
CD45 — это трансмембранный белок типа I , который присутствует в различных изоформах на всех дифференцированных гемопоэтических клетках (кроме эритроцитов и плазматических клеток ). [9] Было показано, что CD45 является важным регулятором сигнализации рецепторов антигенов Т- и В-клеток . Он функционирует либо посредством прямого взаимодействия с компонентами комплексов рецепторов антигенов через свой внеклеточный домен (форма костимуляции ), либо посредством активации различных киназ семейства Src, необходимых для сигнализации рецепторов антигенов через свой цитоплазматический домен. CD45 также подавляет киназы JAK и, таким образом, функционирует как отрицательный регулятор сигнализации рецепторов цитокинов . [ необходима цитата ]
Было описано множество вариантов альтернативно сплайсированных транскриптов этого гена, которые кодируют различные изоформы. [6] Антитела против различных изоформ CD45 используются в рутинной иммуногистохимии для дифференциации типов иммунных клеток, а также для дифференциации гистологических срезов лимфом и карцином . [10 ]
Семейство белков CD45 состоит из нескольких членов, которые являются продуктами одного сложного гена. Этот ген содержит 34 экзона , производя массивный белок с внеклеточными и цитоплазматическими доменами, которые оба необычно велики. Экзоны 4, 5 и 6 (соответствующие белковым областям A, B и C) альтернативно сплайсируются для получения до восьми различных белковых продуктов, включающих комбинации нуля, одного, двух или всех трех экзонов. [11]
Большой внеклеточный домен CD45 сильно гликозилирован, и эти восемь изоформ допускают широкое разнообразие в структуре его боковых цепей. Изоформы влияют на N-концевую область белка, которая линейно простирается от клетки и несет O-связанные гликановые цепи. [ необходима цитата ]
Изоформы CD45 демонстрируют специфическую для типа клеток и стадии дифференциации экспрессию, которая довольно хорошо сохраняется у млекопитающих. [7] Эти изоформы часто используются в качестве маркеров, которые идентифицируют и различают различные типы иммунных клеток.
Наивные Т-лимфоциты обычно положительны для CD45RA, который включает только область белка A. Активированные и памяти Т-лимфоциты экспрессируют CD45RO, самую короткую изоформу CD45, в которой отсутствуют все три области A, B и C. Эта самая короткая изоформа способствует активации Т-клеток. [ необходима цитата ]
CD45R (также известный как CD45RABC) содержит все три возможных экзона. Это самый длинный белок, который мигрирует на 200 кДа при выделении из Т-клеток. В-клетки также экспрессируют CD45R с более тяжелым гликозилированием, что приводит к молекулярной массе 220 кДа, отсюда и название B220 (изоформа В-клеток 220 кДа).
Было показано, что PTPRC взаимодействует с:
Недавно было показано, что CD45 взаимодействует с белком UL11 вируса ЦМВИ . Это взаимодействие приводит к функциональному параличу Т-клеток . [19] Кроме того, было показано, что CD45 является мишенью белка аденовируса вида D 19a E3/49K для ингибирования активации NK- и Т-клеток. [20]
CD45 — это панлейкоцитарная фракция белка с активностью тирозинфосфатазы, участвующая в регуляции передачи сигнала в кроветворении. CD45 не колокализован с липидными плотами на мышиных и человеческих нетрансформированных кроветворных клетках, но позиционирование CD45 в липидных плотах изменяется во время их онкогенной трансформации в острый миелоидный лейкоз . CD45 колокализован с липидными плотами на клетках ОМЛ, что способствует повышенной интенсивности сигнала GM-CSF , участвующего в пролиферации лейкозных клеток. [ необходима цитата ]
Терапия рака крови, включая острый миелоидный лейкоз, была предложена на основе концепции генетической модификации CD45 здоровых клеток, среди других клеточных маркеров, чтобы быть невосприимчивыми к лечению, которое убивает все нормальные клетки CD45, включая раковые. [21] Существует конъюгат антитела с лекарством , который убивает специфические клетки с неизмененным CD45, и были разработаны «защищенные» клетки с модифицированным CD45, которые избегают этого. [21] Трансплантация стволовых клеток крови будет использоваться для замены исходных здоровых клеток крови модифицированными стволовыми клетками, а затем будет применено лечение. [21]
У мышей есть два идентифицируемых аллеля CD45: CD45.1 (исторически Ly5.1) и CD45.2 (исторически Ly5.2). [22] Считается, что эти два типа CD45 функционально идентичны. Таким образом, они обычно используются в научных исследованиях для идентификации клеток. Например, лейкоциты могут быть перенесены из донорской мыши CD45.1 в мышь-хозяина CD45.2 и впоследствии могут быть идентифицированы по их экспрессии CD45.1. Этот метод также обычно используется при создании химер . Альтернативной системой является использование аллелей CD90 (Thy1), которые используют систему CD90.1/CD90.2 таким же образом, как и систему CD45.1/CD45.2. [ необходима цитата ]
В 2016 году на основе C57BL/6 была создана новая мышь knock-in, которая стала идеальным конгенным штаммом. [23] Эта мышь, названная мышью CD45.1STEM, отличается от штамма C57BL/6 одной парой оснований, что приводит к изменению одной аминокислоты, что обеспечивает разницу в реактивности антител анти-CD45.1 и анти-CD45.2. Этот штамм был разработан для конкурентных анализов трансплантации костного мозга и продемонстрировал идеальную эквивалентность, в отличие от предыдущего стандарта, мыши "SJL", более формально известной как Pep Boy. [24]