Трипановый синий

Краситель синего цвета

Химическое соединение

Трипановый синий — азокраситель . Это прямой краситель для хлопчатобумажных тканей. ^[3] В биологических науках он используется в качестве жизненно важного красителя для избирательного окрашивания мертвых тканей или клеток в синий цвет.

Живые клетки или ткани с интактными клеточными мембранами не окрашиваются. Поскольку клетки очень избирательны в отношении соединений, проходящих через мембрану, в жизнеспособной клетке трипановый синий не усваивается; однако он проникает через мембрану мертвой клетки. Следовательно, мертвые клетки под микроскопом имеют характерный синий цвет. Поскольку живые клетки исключаются из окрашивания, этот метод окрашивания также называют методом исключения красителя .

Предыстория и химия

Трипановый синий получают из толуидина , то есть любого из нескольких изомерных оснований C ₁₄ H ₁₆ N ₂ , полученных из толуола . Трипановый синий назван так потому, что он способен убивать трипаносомы — паразитов, вызывающих сонную болезнь . Аналог трипанового синего — сурамин — применяется в фармакологии против трипаносомоза . Трипановый синий также известен как диаминовый синий и ниагарский синий.

Коэффициент экстинкции трипанового синего составляет 6⋅10 ⁴ М ^-1 см ^-1 при 607 нм в метаноле. ^[4]

Трипановый красный и трипановый синий были впервые синтезированы немецким учёным Паулем Эрлихом в 1904 году.

Применение трипанового синего

Наблюдение под оптическим микроскопом Hyaloperonospora parasitica на листе Arabidopsis thaliana с использованием окрашивания трипановым синим.

Трипановый синий обычно используется в микроскопии (для подсчета клеток) и на лабораторных мышах для оценки жизнеспособности тканей. ^[5] Метод не позволяет различать некротические и апоптотические клетки.

Его можно использовать для наблюдения за гифами грибов ^[6] и страменопилями .

Везикулярно-арбускулярная микориза визуализируется с помощью очистки ткани с последующим окрашиванием трипановым синим.

Почвенное членистоногое окрашивается трипановым синим

Трипановый синий также используется в офтальмологической хирургии катаракты для окрашивания передней капсулы при наличии зрелой катаракты, чтобы облегчить визуализацию перед созданием непрерывного криволинейного капсулорексиса. При кератопластике трипановый синий можно использовать для окрашивания задних стромальных волокон во время глубокой ламеллярной эндотелиальной кератопластики (DLEK) и для окрашивания эндотелия при десцеметовой эндотелиальной кератопластике (DSEK). Трипановый синий также используется при витреоретинальных операциях. ^[7]

В начале 20 века было сделано предположение о существовании барьера, защитного от головного мозга ( гематоэнцефалический барьер ), на основании наблюдения, что введение трипанового синего животным приводило к окрашиванию всего тела, за исключением головного и спинного мозга.

Синонимы

• Азидин синий 3Б
• Бензамин синий 3В
• Бензо Синий bB
• Хлоразол синий 3В
• Диамин синий 3В
• Дианил синий H3G
• Прямой синий 14
• Ниагарский синий 3B

дальнейшее чтение

• Глава «Обнаружение активации каспаз в сочетании с другими зондами апоптоза», Коллекция Eurekah Bioscience, книжная полка NCBI
• Протокол использования красителя (PDF) Северо-Западного университета.
• Уэйнрайт, М. (декабрь 2010 г.). «Красители, трипаносомоз и ДНК: исторический и критический обзор». Биотехника и гистохимия . 85 (6): 341–54. дои : 10.3109/10520290903297528. PMID  21080764. S2CID  46525029.

Рекомендации

1. ПабХим. «CID 9562061 | C34H24N6Na4O14S4 — PubChem». Pubchem.ncbi.nlm.nih.gov . Проверено 19 апреля 2022 г.
2. https://www.sigmaaldrich.com/AU/en/product/sigma/t6146
3. Клаус Хунгер; Питер Мишке; Вольфганг Рипер; Родерих Рауэ; Клаус Кунде; Алоис Энгель (2005). «Азокрасители». Энциклопедия промышленной химии Ульмана . Вайнхайм: Wiley-VCH. дои : 10.1002/14356007.a03_245. ISBN 978-3527306732.
4. «Sigma-Aldrich, 60% трипанового синего, страница продукта» . Проверено 15 июля 2015 г.
5. Стробер, W (май 2001 г.). Тест на исключение трипанового синего на жизнеспособность клеток . Том. Приложение 3. стр. Приложение 3Б. дои : 10.1002/0471142735.ima03bs21. ISBN 978-0471142737. ПМИД  18432654. {{cite book}}: |journal=игнорируется ( помощь )
6. Новицкий, Марцин; и другие. (15 мая 2013 г.), «Простое двойное окрашивание для подробных исследований взаимодействия патогенных растений и грибков», Бюллетень исследований овощных культур , 77 : 61–74, doi : 10.2478/v10032-012-0016-z
7. «Краситель трипановый синий: капсульное окрашивание для хирургии катаракты и многого другого» . Американская академия офтальмологии . 1 апреля 2006 г.