Chelex 100 — хелатирующий материал от Bio-Rad [1], используемый для очистки других соединений посредством ионного обмена . Он примечателен своей способностью связывать ионы переходных металлов .
Это сополимер стирола и дивинилбензола, содержащий группы иминодиуксусной кислоты .
Концентрированный раствор металлов получают путем элюирования смолы небольшим объемом 2 М азотной кислоты , которая протонирует иминодиацетатные группы.
Смола Chelex часто используется для извлечения ДНК при подготовке к полимеразной цепной реакции путем связывания с катионами, включая Mg2 + , который является важным кофактором для ДНКаз . Chelex защищает образец от ДНКаз, которые могут оставаться активными после кипячения и впоследствии могут деградировать ДНК, делая ее непригодной для ПЦР. После кипячения препарат Chelex-ДНК стабилен и может храниться при температуре 4°C в течение 3–4 месяцев. [2] Полярные гранулы смолы связывают полярные клеточные компоненты после разрушения открытых клеток, в то время как ДНК и РНК остаются в водном растворе над смолой Chelex.
Однако нагревание приводит к денатурации двойной спирали, и полученная одноцепочечная ДНК менее стабильна при хранении.
{{cite journal}}: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )