Вирус лейкемии крупного рогатого скота ( BLV ) — это ретровирус , вызывающий энзоотический лейкоз крупного рогатого скота . Он тесно связан с человеческим Т-лимфотропным вирусом типа 1 ( HTLV-I ). BLV может интегрироваться в геномную ДНК B-лимфоцитов в качестве промежуточного звена ДНК ( провирус ) или существовать в виде неинтегрированных кольцевых или линейных форм. [2] Помимо структурных и ферментативных генов, необходимых для производства вирионов, BLV экспрессирует белок Tax и микроРНК, участвующие в пролиферации клеток и онкогенезе. [3] [4] [5] У крупного рогатого скота большинство инфицированных животных протекают бессимптомно; лейкемия встречается редко (около 5% инфицированных животных), но лимфопролиферация встречается чаще (30%).
Переносчиками вируса лейкоза являются насекомые Anopheles albimanus , Anopheles freeborni , Anopheles quadrimaculatus , Anopheles stephensi , Stomoxys calcitrans и различные Tabanidae, включая Tabanus atratus и Tabanus fuscicostatus , а также клещ Boophilus microplus . [6]
Существует множество потенциальных путей передачи вируса лейкоза крупного рогатого скота. Передача через процедуры, которые передают кровь между животными, такие как удаление рогов, вакцинация и ушная маркировка инструментами или иглами, которые не меняются и не дезинфицируются между животными, является существенным средством распространения вируса лейкоза крупного рогатого скота. Ректальная пальпация с общими рукавами представляет риск, который увеличивается из-за неопытности и повышенной частоты пальпации. Передача через молозиво , молоко и внутриутробное воздействие, как правило, считается причиной относительно небольшой доли инфекций. [7] Перенос эмбрионов и искусственное осеменение также являются причиной небольшого количества новых инфекций, если используются общее оборудование и/или рукава для пальпации. Хотя передача была задокументирована через кровососущих насекомых, значимость этого риска неясна. Передача в основном зависит от передачи инфицированных лимфоцитов от одного животного к другому, и животные с положительным результатом на вирус лейкоза крупного рогатого скота с лимфоцитозом с большей вероятностью могут стать источником инфекции. Вирусные частицы трудно обнаружить, и они не используются для передачи инфекции. [ необходима ссылка ]
В целом, BLV вызывает только доброкачественное заболевание, похожее на мононуклеоз , у крупного рогатого скота . Только у некоторых животных позже развивается В-клеточный лейкоз, называемый энзоотическим лейкозом крупного рогатого скота. [8] В естественных условиях болезнь передается теленку в основном через молоко . [ требуется ссылка ]
Разнообразие органов, в которых встречаются белые кровяные клетки , объясняет многочисленные симптомы: увеличение поверхностных лимфатических узлов, пищеварительная форма, сердечная форма, нервная форма, респираторная форма и другие. [9] Увеличение лимфатических узлов часто является ранним клиническим признаком. [10] Неожиданным клиническим признаком является выпячивание конъюнктивальной мембраны из-за увеличения ретроокулярных лимфатических узлов. [10]
Диагностика основана на иммунодиффузии в агаровом геле, ИФА (иммуноферментный анализ) и ПЦР (полимеразная цепная реакция) . Результаты вскрытия характерны и включают распространенные белые опухоли в большинстве органов. [10]
Лечения для этой болезни не существует. [10] Тестирование и удаление положительных животных из стада является одним из методов контроля. В стадах, где болезнь широко распространена, важно ограничить ее распространение, избегая контакта с кровью между животными. [10]
В Европе были предприняты попытки искоренить вирус путем забоя инфицированных животных. Первой страной, которая считалась свободной от инфекции, была Дания. Вскоре за ней последовало Соединенное Королевство. Как и североамериканские государства, страны Восточного блока в Европе не пытались избавиться от вируса. Но государства Восточной Европы начали избавляться от лейкоза после политических изменений в конце прошлого века. Цитата из информационного бюллетеня Министерства сельского хозяйства США: «Высокая распространенность BLV среди отдельных животных, о которой сообщалось в исследовании Dairy 1996 года, предполагает, что тестирование и забой серопозитивных животных может быть неэффективным с точки зрения затрат методом контроля заболевания. Вместо этого предотвращение передачи заболевания путем внедрения профилактических мер, вероятно, будет более экономически эффективным». [11]
Высокая распространенность вируса была обнаружена в ходе тестирования Министерством сельского хозяйства США. «В рамках исследования молочной промышленности 2007 года было собрано молоко из цистерн из 534 хозяйств с 30 или более молочными коровами и протестировано с помощью иммуноферментного анализа (ИФА) на наличие антител к вирусу лейкоза крупного рогатого скота. Результаты показали, что 83,9 процента молочных хозяйств США дали положительный результат на вирус лейкоза крупного рогатого скота (таблица 1). [11] Инфекцию вируса лейкоза крупного рогатого скота можно обнаружить с помощью ИФА или ПЦР. [11]
Разработана безопасная и эффективная вакцина против BLV. [12] [13] [14] Подход основан на провирусе с делециями или мутациями в генах, необходимых для эффективной репликации (R3, G4, микроРНК, оболочка). Ослабленная вакцина эффективно защищает от инфекции BLV в эндемичных регионах, характеризующихся высокой распространенностью BLV. По сравнению с инфекцией дикого типа гуморальный ответ против антигенов BLV лишь немного снижен у вакцинированных животных. Провирусные нагрузки ослабленной вакцины чаще всего остаются необнаружимыми. Ослабленный штамм не передается от матери к потомству, что подтверждает безопасность вакцины. [12] [13] [14] Таким образом, эта вакцина вызывает стойкий иммунный ответ против BLV за счет поддержания низкого уровня инфекционности, одновременно предотвращая риск заражения вирусом дикого типа.
Вскоре после открытия BLV в 1970-х годах было проведено десять исследований по поиску антител к BLV у людей. Однако антител обнаружено не было, поэтому исследователи пришли к выводу, что BLV не представляет риска для здоровья человека. [15] Однако были разработаны более чувствительные методы обнаружения антител, и в 2003 году тестирование более 200 человек с использованием этих новых тестов показало, что более трети из них имели антитела, реагирующие на BLV, и этот вопрос снова начали исследовать. [16]
Было проведено несколько исследований, чтобы определить, вызывает ли BLV заболевание у людей, в основном проверяя рабочих ферм, которые пьют сырое молоко от инфицированных коров. [9] Могут потребоваться некоторые долгосрочные исследования, поскольку, по-видимому, существует корреляция в случаях рака среди мясников и работников скотобоен. [17] В 2014 году исследователи обнаружили наличие BLV-положительных клеток в ткани молочной железы человека в выборке женщин из США, [18] а исследование случай-контроль, опубликованное в 2015 году, показало, что воздействие BLV связано с раком молочной железы, в том числе и у женщин из США. [19] Более позднее исследование австралийских женщин обнаружило ретротранскрибированную ДНК BLV в ткани молочной железы 40/50 (80%) женщин с раком молочной железы по сравнению с 19/46 (41%) женщин без истории рака молочной железы, что указывает на скорректированное по возрасту отношение шансов и доверительный интервал 4,72 (1,71-13,05). Эти результаты подтверждают выводы предыдущего исследования женщин из США с еще более высоким отношением шансов для австралийского населения. [20] Исследование случай-контроль женщин из Техаса установило связь между наличием BLV в тканях молочной железы и статусом рака молочной железы с отношением шансов OR 5,1. [21]
В 2019 году Гертруда К. Бюринг предложила обзор возможной роли вируса лейкемии крупного рогатого скота в развитии рака молочной железы. [22]
Другое исследование случай-контроль, проведенное на китайских пациентах, не обнаружило никакой связи между BLV и раком молочной железы. Однако в этом исследовании не рассматривались образцы тканей рака молочной железы, только анализ крови. [23] Последующая оценка китайского исследования указала на недостатки в использованной методологии, например, ветеринарный набор для тестирования, разработанный и откалиброванный для крупного рогатого скота, неправильно использовался для тестирования на антитела человека, несмотря на предупреждения об этом в инструкциях к набору. [24] Исчерпывающий анализ 51 целого генома рака молочной железы с помощью секвенирования следующего поколения (NGS) не выявил никаких следов ДНК BLV и, таким образом, исключает клональную вставку (интеграцию в геномную ДНК человека) BLV в ДНК клеток рака молочной железы. [25] Однако все последовательности ДНК, доступные для исследования, были получены из метастатических участков, согласно заявлению поставщика (Национального института рака США), написанному над столбцом последовательностей. У крупного рогатого скота с поздними стадиями инфекции BLV большая часть генома BLV удаляется, и часто остаются только промоторная область и ген, вызывающий рак []. Если эта ситуация также существует у людей, инфицированных BLV, то не стоит ожидать обнаружения BLV в полных геномах метастатических опухолей, которые являются поздними стадиями рака молочной железы человека. Также неинтегрированная ДНК BLV не будет обнаружена с помощью NGS. Необходимо провести больше исследований, чтобы определить, есть ли различия в присутствии BLV в метастатических и первичных клетках рака молочной железы от одного и того же донора тканей человека. [ необходима цитата ]
Другое исследование 95 женщин в Калифорнии показало, что более чем у трети из них в клетках крови были обнаружены признаки ДНК вируса лейкоза, а у трети были обнаружены антитела к вирусу лейкоза, но эти два маркера вируса лейкоза не коррелировали друг с другом у отдельных доноров. [26]
Существуют и другие млекопитающие-хозяева, включая Bubalus bubalis , Mus musculus , Oryctolagus cuniculus и Ovis aries . [6] Естественное заражение животных, отличных от крупного рогатого скота и буйволов , встречается редко, хотя многие животные восприимчивы к искусственному заражению. После искусственного заражения овец большинство животных заболевают лейкемией. Кролики заболевают смертельным СПИД -подобным заболеванием, похожим на Pasteurella , но отличающимся от доброкачественного насморка человека . Неизвестно, связано ли это естественное заболевание кроликов с инфекцией BLV. «Хотя несколько видов могут быть инфицированы путем инокуляции вируса, естественное заражение происходит только у крупного рогатого скота ( Bos taurus и Bos indicus ), буйволов и капибар. Овцы очень восприимчивы к экспериментальной инокуляции и развивают опухоли чаще и в более молодом возрасте, чем крупный рогатый скот. Стойкий ответ антител может также быть обнаружен после экспериментальной инфекции у оленей, кроликов, крыс, морских свинок, кошек, собак, овец, макак-резусов, шимпанзе, антилоп, свиней, коз и буйволов». [27]
Из-за тесной связи между BLV и HTLV-I, исследования BLV важны. Можно использовать опыт с BLV для понимания заболеваний, вызванных HTLV-I, таких как ATL ( взрослый Т-клеточный лейкоз ) и HAM/TSP (HTLV-1-ассоциированная миелопатия/тропический спастический парапарез)-подобные неврологические расстройства. Было проведено несколько исследований случай-контроль, но исследования заболеваний, связанных с BLV, не были столь обширными, как исследования других вирусных заболеваний. [27]
Опасения по поводу того, что этот вирус может заразить человека через воздействие пищевых продуктов от субклинически инфицированных животных, побудили провести 10 исследований, в которых использовались самые современные на тот момент (1975–1979 гг.) иммунологические методы для тестирования образцов сыворотки от 1761 человека, включая больных раком, сельскохозяйственных рабочих и ветеринаров (5). В этих исследованиях не было обнаружено антител против BLV, что побудило Берриджа заключить в своей обзорной статье: «Нет никаких эпидемиологических или серологических доказательств, полученных в ходе исследований на людях, которые бы указывали на то, что BLV может инфицировать человека» (5). Появление иммуноблоттинга, который был ≈100 раз более чувствительным, чем методы 1970-х годов (6), позволило обнаружить антитела, реагирующие с рекомбинантным очищенным капсидным белком BLV p24, в образцах сыворотки 39% из 257 самостоятельно отобранных добровольцев (7).