В биологии и биохимии ингибиторы протеазы или антипротеазы [1] представляют собой молекулы , которые подавляют функцию протеаз ( ферментов , способствующих расщеплению белков ). Многие встречающиеся в природе ингибиторы протеазы являются белками . [2]
В медицине ингибитор протеазы часто используется взаимозаменяемо с альфа-1-антитрипсином (A1AT, который по этой причине сокращенно обозначается как ИП). [3] A1AT действительно является ингибитором протеазы, наиболее часто участвующим в заболеваниях, а именно в дефиците альфа-1-антитрипсина .
Ингибиторы протеазы можно классифицировать либо по типу протеазы, которую они ингибируют, либо по механизму их действия. В 2004 году Роулингс и его коллеги представили классификацию ингибиторов протеазы, основанную на сходстве, обнаруживаемом на уровне аминокислотной последовательности. [4] Эта классификация изначально идентифицировала 48 семейств ингибиторов, которые можно было сгруппировать в 26 связанных суперсемейств (или кланов) по их структуре. Согласно базе данных MEROPS, в настоящее время существует 81 семейство ингибиторов. Эти семейства названы с помощью буквы I, за которой следует номер, например, I14 содержит гирудиноподобные ингибиторы.
Классы протеаз :
Классы механизмов действия ингибиторов :
Это семейство ингибиторов самоубийства протеазы, называемых серпинами . Оно содержит ингибиторы нескольких семейств цистеиновых и сериновых протеаз. Механизм их действия основан на значительном конформационном изменении, которое инактивирует каталитическую триаду их цели .
Ингибиторы пропептидов протеиназы (иногда называемые активационными пептидами) отвечают за модуляцию сворачивания и активности профермента пептидазы или зимогена . Просегмент стыкуется с ферментом, защищая сайт связывания субстрата , тем самым способствуя ингибированию фермента. Несколько таких пропептидов имеют схожую топологию, несмотря на часто низкую идентичность последовательностей . [5] [6] Область пропептида имеет открытую сэндвичевую антипараллельную-альфа/антипараллельную-бета складку с двумя альфа-спиралями и четырьмя бета-цепями с топологией (бета/альфа/бета)x2. Семейство ингибиторов пептидазы I9 содержит пропептидный домен на N-конце пептидаз, принадлежащих к семейству MEROPS S8A, субтилизинов . Пропептид удаляется путем протеолитического расщепления; удаление активирует фермент.
Это семейство включает как микровиридины , так и мариностатины. Кажется вероятным, что в обоих случаях именно С-конец становится активным ингибитором после посттрансляционных модификаций полноразмерного препептида. Именно эфирные связи в ключевом регионе из 12 остатков закольцовывают молекулу, придавая ей ингибирующую конформацию .
В это семейство входит PinA, который ингибирует эндопептидазу La . Он связывается с гомотетрамером La , но не влияет на сайт связывания АТФ или активный сайт La.
Домен ингибитора I29 , который принадлежит к семейству ингибиторов пептидазы MEROPS I29, находится на N-конце различных предшественников пептидазы , которые принадлежат к подсемейству пептидазы MEROPS C1A; к ним относятся катепсин L, папаин и прокарикаин. [7] Он образует альфа-спиральный домен, который проходит через сайт связывания субстрата, предотвращая доступ. Удаление этой области путем протеолитического расщепления приводит к активации фермента . Этот домен также находится в одной или нескольких копиях в различных ингибиторах цистеиновой пептидазы, таких как саларин. [8]
Ингибитор сахаропепсина I34 высокоспецифичен для аспарагиновой пептидазы сахаропепсина. В отсутствие сахаропепсина он в значительной степени неструктурирован, [9] но в его присутствии ингибитор претерпевает конформационное изменение , образуя почти идеальную альфа-спираль от Asn 2 до Met 32 в расщелине активного центра пептидазы.
Домен семейства ингибиторов пептидазы I36 обнаружен только в небольшом количестве белков, ограниченных видами Streptomyces . Все они имеют четыре консервативных цистеина , которые, вероятно, образуют две дисульфидные связи . Один из этих белков из Streptomyces nigrescens — хорошо охарактеризованный ингибитор металлопротеиназы SMPI. [10] [11]
Структура SMPI была определена. Он имеет 102 аминокислотных остатка с двумя дисульфидными мостиками и специфически ингибирует металлопротеиназы , такие как термолизин , который принадлежит к семейству пептидаз MEROPS M4. SMPI состоит из двух бета-слоев , каждый из которых состоит из четырех антипараллельных бета-нитей. Структуру можно рассматривать как два греческих ключевых мотива с 2-кратной внутренней симметрией, греческий ключевой бета-бочка . Одной уникальной структурной особенностью, обнаруженной в SMPI, является его расширение между первой и второй нитями второго греческого ключевого мотива, который, как известно, участвует в ингибирующей активности SMPI. При отсутствии сходства последовательностей структура SMPI показывает явное сходство с обоими доменами кристаллинов хрусталика глаза , обоими доменами белка-S-сенсора кальция, а также однодоменным токсином - убийцей дрожжей . Структура токсина-убийцы дрожжей считалась предшественником двухдоменных белков бета-гамма-кристаллинов из-за ее структурного сходства с каждым доменом бета-гамма-кристаллинов. Таким образом, SMPI представляет собой еще один пример однодоменной структуры белка, которая соответствует предковой складке , из которой, как полагают, произошли двухдоменные белки в суперсемействе бета-гамма-кристаллинов . [12]
Семейство ингибиторов I42 включает в себя шагасин, обратимый ингибитор папаиноподобных цистеиновых протеаз . [13] Шагасин имеет структуру бета-бочонка , которая является уникальным вариантом иммуноглобулиновой складки с гомологией с человеческим CD8альфа . [14] [15]
Семейство ингибиторов I48 включает клитоципин, который связывает и ингибирует цистеиновые протеиназы. Он не имеет сходства ни с одним другим известным ингибитором цистеиновой протеиназы, но имеет некоторое сходство с лектин -подобным семейством белков из грибов . [16]
Членами этого семейства являются белки- ингибиторы пептидазы маданин . Эти белки были выделены из слюны клеща . [17]
Ингибитор бромелаина VI, входящий в семейство ингибиторов I67, представляет собой двухцепочечный ингибитор , состоящий из цепи из 11 остатков и цепи из 41 остатка .
Семейство ингибиторов карбоксипептидазы I68 представляет собой семейство ингибиторов карбоксипептидазы, обнаруженных у клещей . [18]
Семейство ингибиторов пептидазы I78 включает ингибитор эластазы Aspergillus .