stringtranslate.com

Элюирование

Принцип элюирования колоночной хроматографии

В аналитической и органической химии элюирование — это процесс извлечения одного материала из другого путем промывки растворителем: промывка загруженных ионообменных смол для удаления захваченных ионов или элюирование белков или других биополимеров из колонки гель- электрофореза или хроматографии .

Например, в эксперименте по жидкостной хроматографии аналит обычно адсорбируется («связывается») с адсорбентом в колонке для жидкостной хроматографии. Адсорбент, твердая фаза, называемая «неподвижной фазой», представляет собой порошок, нанесенный на твердую основу. В зависимости от состава адсорбента он может иметь разную способность «удерживать» другие молекулы, образуя тонкую пленку на поверхности своих частиц. Элюирование тогда представляет собой процесс удаления аналитов из адсорбента путем пропускания растворителя, называемого «элюентом», мимо комплекса адсорбент-аналит. Когда молекулы растворителя «элюируются» или перемещаются вниз по хроматографической колонке, они могут либо проходить мимо комплекса адсорбент-аналит, либо вытеснять аналит, связываясь с адсорбентом на его месте. После того как молекулы растворителя вытеснят аналит, аналит можно вынести из колонки для анализа. Вот почему, когда подвижная фаза, называемая «элюатом», выходит из колонки, она обычно попадает в детектор или собирается коллектором фракций для анализа состава.

Прогнозирование и контроль порядка элюирования является ключевым аспектом методов колоночной хроматографии и колоночного электрофореза .

Элюотропная серия

Элюотропный ряд представляет собой список различных соединений в порядке элюирующей способности для данного адсорбента . «Элюирующая способность» растворителя во многом является мерой того, насколько хорошо растворитель может «оттягивать» аналит от адсорбента, к которому оно прикреплено. Это часто происходит, когда элюент адсорбируется на неподвижной фазе, вытесняя аналит. Такие ряды полезны для определения необходимых растворителей, необходимых для хроматографии химических соединений. Обычно такая серия развивается от неполярных растворителей, таких как н-гексан , к полярным растворителям, таким как метанол или вода . Порядок растворителей в элюотропном ряду зависит как от неподвижной фазы , так и от соединения, используемого для определения порядка.

Элюент

Элюент или элюент представляет собой «носитель» подвижной фазы. Он перемещает аналиты через хроматограф . В жидкостной хроматографии элюентом является жидкий растворитель; в газовой хроматографии — газ-носитель. [1]

Элюат

Элюат содержит аналит , который выходит из хроматографа . В частности, он включает в себя как аналиты, так и совместно элюирующие растворы, проходящие через колонку, тогда как элюент является только носителем.

Время элюирования и объем элюирования

« Время элюирования» растворенного вещества — это время между началом разделения (моментом, когда растворенное вещество попадает в колонку) и временем, когда растворенное вещество элюируется. Таким же образом, объем элюирования — это объем элюента, необходимый для того, чтобы вызвать элюирование. В стандартных условиях для известной смеси растворенных веществ в определенном методе объем элюирования может быть достаточной информацией для идентификации растворенных веществ. Например, смесь аминокислот можно разделить с помощью ионообменной хроматографии . При определенном наборе условий аминокислоты будут элюироваться в одном и том же порядке и в одном и том же объеме элюирования.

Элюирование антител

Элюция антител — это процесс удаления антител, которые прикреплены к своим мишеням, например, к поверхности эритроцитов . Методы включают использование тепла, цикла замораживания-оттаивания, ультразвука, кислот или органических растворителей. Ни один метод не является лучшим во всех ситуациях. [2]

Смотрите также

Рекомендации

  1. ^ "Золотая книга ИЮПАК: элюент" . Международный союз теоретической и прикладной химии. дои : 10.1351/goldbook.E02040 . Проверено 28 сентября 2008 г. {{cite journal}}: Требуется цитировать журнал |journal=( помощь )
  2. ^ Джордж Х. Робертс (2006). «Методы элюирования в банке крови» (PDF) . Американские медицинские технологи (АМТ) . Архивировано из оригинала (PDF) 11 июля 2019 г. Проверено 22 июля 2020 г.

Внешние ссылки