Фактор транскрипции B архей ( ATFB или TFB ) представляет собой семейство белков внешних факторов транскрипции , которые управляют инициацией транскрипции РНК в организмах, подпадающих под домен Archaea . [1] Он гомологичен эукариотическому TFIIB и, в более отдаленной степени, бактериальному сигма-фактору . [2] Как и эти белки, он участвует в формировании комплексов преинициации транскрипции . [3] Его структура включает несколько консервативных мотивов, которые взаимодействуют с ДНК и другими факторами транскрипции, в частности, с единственным типом РНК-полимеразы , которая осуществляет транскрипцию у архей. [1]
У бактерий и эукариот белки TFIIB и сигма-фактор участвуют в инициации транскрипции, где они способствуют образованию преинициативного комплекса и специфическому связыванию РНК-полимеразы с ДНК. Архейным аналогом этих двух белков является TFB, который впервые был идентифицирован у вида Pyrococcus woesei в 1992 году. [4] [5] С тех пор исследования показали, что для функционирования архейные виды должны содержать хотя бы одну копию TFB, хотя некоторые виды могут иметь несколько изоформ в своем геноме. [6]
TFB представляет собой одиночный полипептид длиной от 280 до 300 аминокислот и массой 34 кДа [3] , который необходим для рекрутирования РНК-полимеразы (РНКП) для начала транскрипции, а также может влиять на структуру транскрипционного комплекса во время изменений. которые происходят до транскрипции, хотя конкретные механизмы неизвестны. Структура TFB состоит из аминоконцевой области (TFB N ) с консервативными последовательностями и сложными структурами, связанной с более крупной глобулярной карбоксильной областью (TFB C ). [1] В то время как N-концевой домен опосредует взаимодействия РНКП, С-концевой домен опосредует взаимодействие с комплексом, образованным ТАТА-боксом и ТБФ, последовательностью ДНК и полипептидом, участвующими в инициации трансляции. [7] Степень консервативности последовательности TFB среди архей колеблется от 50% до 60%. [3] Что касается его эукариотического эквивалента, TFB демонстрирует «высокий уровень структурной и функциональной консервативности». [1] Взаимодействие между TBP и последовательностью, расположенной выше ТАТА-бокса, управляет полярностью транскрипции, «образует архейный преинициативный комплекс» и ориентирует комплекс в направлении, в котором должен транскрибироваться целевой ген. TBP демонстрирует инвертированную ориентацию по сравнению с эукариотическим TFIIB. [8]
TFB N составляет примерно одну треть белка и содержит как мотив B-пальца (гомологичный B-пальцу TFIIB), так и мотив цинкового пальца , [9] последний из которых расположен у аминокислот 2–34. [10] Размер N-концевого домена варьируется от 100 до 120 аминокислот в длину. [3] Эксперименты по сшиванию показали, что этот домен расположен близко к сайту начала транскрипции. Цинковый палец взаимодействует с доменом дока РНКП, а B-палец может влиять на взаимодействие РНКП-промотор. TFB C содержит мотивы, которые взаимодействуют с TATA-связывающим белком (TBP), элементами распознавания TFB (BRE) перед блоком TATA и последовательностями ДНК ниже TATA. [1] Его размер составляет примерно 180 аминокислот и состоит из двух повторов последовательности из 90 аминокислот. В частности, С-концевой домен может влиять на направление преинициативного комплекса. [3] Поскольку TFB N связывает РНКП, а TFB C связывает комплекс TBP-TATA, TBP соединяет их. [7]
TFB рекрутируется другим фактором трансляции, TBP, после того, как он распознает ТАТА-бокс и изгибает ДНК, чтобы могла инициироваться транскрипция. TFB стабилизирует комплекс TBP-ДНК, так что белки могут рекрутировать РНК-полимеразу и плавить ДНК посредством пока неизвестного механизма. Это открытие ДНК не является энергозависимым процессом у архей; поскольку TFB, TBP и RNAP расположены ближе друг к другу, чем у эукарий, плотность белков и их взаимодействие могут обеспечить больше областей контакта для открытия ДНК, а также физически напрячь ДНК, что приводит к открытой транскрипции. сложный. [6]
TFB использует ион цинка (Zn 2+ ) в качестве кофактора и принимает один ион на субъединицу. [10]