Ингибирующий мотив иммунорецептора на основе тирозина ( ITIM ) представляет собой консервативную последовательность аминокислот , которая находится внутриклеточно в цитоплазматических доменах многих ингибирующих рецепторов семейства некаталитических фосфорилированных тирозином рецепторов, обнаруженных в иммунных клетках. [1] [2] Эти иммунные клетки включают Т-клетки , В-клетки , NK-клетки , дендритные клетки , макрофаги и тучные клетки . ITIM имеют схожие структуры S/I/V/LxYxxI/V/L, где x — любая аминокислота, Y — остаток тирозина , который может быть фосфорилирован, S — аминокислота серин , I — аминокислота изолейцин , а V — аминокислота валин . [3] ITIM привлекают фосфатазы , содержащие домен SH2 , которые ингибируют клеточную активацию. Рецепторы, содержащие ITIM, часто служат для нацеливания на рецепторы, содержащие иммунорецепторный тирозиновый мотив активации (ITAM), что приводит к врожденному механизму торможения внутри клеток. [3] Рецепторы, содержащие ITIM, играют важную роль в регуляции иммунной системы, обеспечивая отрицательную регуляцию на разных уровнях иммунного ответа . [4]
Список человеческих кандидатов, содержащих ITIM-белки, был создан путем сканирования всего протеома. [5] Он включил более 135 белков с мотивом ITIM. Сообщается, что этот список был расширен путем изучения редких человеческих SNP, которые создают консенсусную сигнатуру мотива S/I/V/LxYxxI/V/L. [6]
Мотивы ITIM определяются как шесть аминокислотных подписей с консенсусной последовательностью S/I/V/LxYxxL/V, где x обозначает любую аминокислоту , Y — остаток тирозина, который может быть фосфорилирован, а S, I, V — аминокислоты серин, изолейцин и валин соответственно. [2] Консервативная последовательность ITIM была впервые идентифицирована в низкоаффинном рецепторе IgG FcγRIIB . [7] Все рецепторы, содержащие ITIM, являются частью суперсемейства иммуноглобулинов . [3]
Главной характеристикой молекул, содержащих ITIM, является то, что они становятся тирозил-фосфорилированными. Для того, чтобы стать фосфорилированными, ингибирующий рецептор должен быть помещен в непосредственной близости от киназы . Это может быть достигнуто путем совместного сшивания с мотивом ITAM активирующего рецептора, который рекрутирует киназу семейства Src . ITIM размещают фосфатазы рядом с рецепторами, содержащими ITAM, позволяя фосфатазам дефосфорилировать. Это приводит к деактивации сигнального пути рецептора, связанного с ITAM. [3] Также может происходить лиганд-независимое фосфорилирование молекул, несущих ITIM. [4]
Затем фосфорилированные молекулы ITIM привлекают фосфатазы, содержащие домен SH2 . Было идентифицировано четыре фосфатазы, содержащие домен SH2: две липидные фосфатазы SHIP1 и SHIP2 и две протеинтирозиновые фосфатазы (PTP) SHP-1 и SHP-2 . Дефосфорилирование критических субстратов активации клеток происходит из-за того, что фосфорилированные ITIM служат сайтами привлечения для SHP-1 и SHP-2. [8] Было обнаружено, что подавляющее большинство рецепторов, содержащих ITIM, привлекают либо SHIP, либо SHP. [9] Эти фосфатазы ингибируют активацию молекул, участвующих в передаче сигналов клетками, [10] чаще всего путем связывания с активирующими рецепторами, включая TCR, BCR и FcR. Затем активируются фосфолипаза Cy и фосфатидилинозитол-3-киназа (PLCy и PI3-K), что вместе приводит к образованию мессенджеров фосфоинозитола и увеличению цитоплазматического Ca 2+ . [11] [12]
Несколько рецепторов, несущих ITIM, связывают SHIP, включая FcγRIIB . SHIP — это 5′-инозитолфосфатаза, которая экспрессируется в большинстве гемопоэтических клеток. Она играет важную регуляторную роль в иммунной системе. SHIP состоит из N-концевого домена SH2, каталитического домена и C-концевого хвоста, который содержит два участка фосфорилирования. Существует несколько изоформ SHIP, и экспрессия этих изоформ различается в разных типах клеток. Кроме того, был идентифицирован другой ген SHIP, SHIP-2. SHIP-2 также экспрессируется в негематопоэтических клетках.
Связывание SHIP с рецепторами, несущими ITIM, опосредовано доменом SH2. Существует несколько механизмов, с помощью которых SHIP может ингибировать активацию клеток. [13] Их можно разделить на механизмы, которые включают каталитическую активность SHIP, и механизмы, которые включают взаимодействие других молекул с C-концевой частью SHIP.
Многие рецепторы, несущие ITIM, рекрутируют SHP-1 и/или SHP-2, включая KIR , ILT, Ly49 , LAIR-1 , CD22 , CD72 и сигнальный регуляторный белок SIRPα . SHP-1 и SHP-2 являются структурно связанными протеинтирозинфосфатазами, но имеют разные паттерны экспрессии и биологические функции. SHP-1 экспрессируется в кроветворных клетках и на более низких уровнях в эпителиальных клетках . Как и SHIP, SHP-1 участвует в отрицательной регуляции активации клеток после различных стимулов, таких как факторы роста, цитокины, сигнализация интегрина и сигнализация рецептора антигена.
SHP-2 повсеместно экспрессируется и считается положительным регулятором сигнализации рецепторов цитокинов и факторов роста. SHP-1 и SHP-2 состоят из двух доменов SH-2, каталитического домена и C-концевого хвоста. N-концевой домен SH2 участвует в механизме автоингибиции, поскольку удаление этого домена активирует фосфатазу. [4]
Рекрутирование SHIP или SHP-1 рецепторами, несущими ITIM, имеет разные результаты: рекрутирование SHP-1 отменяет фосфорилирование тирозина сигнальных молекул, которое могло бы произойти при срабатывании рецептора, несущего ITAM, в то время как рекрутирование SHIP не влияет на начальное фосфорилирование, но мешает рекрутированию нижестоящих эффекторов к месту активации клетки. [14] ITIM также могут работать в сочетании с иммунорецепторными переключающими мотивами на основе тирозина (ITSM) для активации рецепторов, несущих ITIM, таких как SHP-2. [15]
Даже если большинство рецепторов, содержащих ITIM, считаются оказывающими ингибирующее действие на сигнальные пути иммунного ответа, функция SIRPα, CD22, а также PECAM-1 , который экспрессируется на иммунных клетках и эндотелии и участвует во многих сигнальных путях, [16] показывает, что не все так называемые рецепторы, несущие ITIM, можно считать ингибирующими рецепторами. Несколько других белков, которые обычно рассматриваются как стимулирующие рецепторы, содержат последовательности, подобные ITIM, например, IL-4. [17] Напротив, активирующий рецептор NK-клеток NKp44 содержит ITIM, но он, по-видимому, нефункционален. [18]
Некоторые важные рецепторы, несущие мотивы ITIM, перечислены в таблице ниже:
My — миелоидные; Hm — кроветворные; NK — естественные киллеры; EC — эпителиальные клетки; DC — дендритные клетки.
(Изменено в соответствии с [19] )
На основе ингибирующего действия FcγRIIB было сконструировано множество прототипических молекул, которые использовались для разработки новых терапевтических подходов к аллергии. Впервые сообщалось о том, что генетически сконструированная молекула, состоящая из фрагмента Fc человеческого IgG1, слитого с фрагментом Fc человеческого IgE, ингибирует активацию тучных клеток и базофилов человека, вызванную IgE. [19]
В некоторых случаях злокачественных новообразований человека, таких как острый миелоидный лейкоз, аллогенные трансплантации гемопоэтических клеток показали, что развитие донорских NK-клеток у пациентов-реципиентов, у которых отсутствуют донорские лиганды KIR , может привести к улучшению приживления и выживаемости после трансплантации за счет усиления эффекта «трансплантат против лейкемии» при отсутствии реакции «трансплантат против хозяина» . [20]