Ниша стволовых клеток относится к микросреде в определенном анатомическом месте, где находятся стволовые клетки , которая взаимодействует со стволовыми клетками для регулирования судьбы клеток. [1] Слово «ниша» может относиться к микросреде стволовых клеток in vivo или in vitro . Во время эмбрионального развития различные факторы ниши действуют на эмбриональные стволовые клетки, изменяя экспрессию генов и вызывая их пролиферацию или дифференциацию для развития плода. В организме человека ниши стволовых клеток поддерживают взрослые стволовые клетки в состоянии покоя, но после повреждения ткани окружающая микросреда активно сигнализирует стволовым клеткам о необходимости способствовать либо самообновлению, либо дифференциации для формирования новых тканей. Для регулирования характеристик стволовых клеток в нише важны несколько факторов: межклеточные взаимодействия между стволовыми клетками, а также взаимодействия между стволовыми клетками и соседними дифференцированными клетками, взаимодействия между стволовыми клетками и молекулами адгезии, компоненты внеклеточного матрикса, напряжение кислорода, факторы роста, цитокины и физико-химическая природа окружающей среды, включая pH, ионную силу (например, концентрацию Ca 2+ ) и метаболиты, такие как АТФ . [2] Стволовые клетки и ниша могут индуцировать друг друга во время развития и взаимно сигнализировать друг другу, чтобы поддерживать друг друга во взрослом возрасте.
Ученые изучают различные компоненты ниши и пытаются воспроизвести условия ниши in vivo in vitro . [2] Это связано с тем, что для регенеративной терапии необходимо контролировать пролиферацию и дифференциацию клеток в колбах или планшетах, чтобы производить достаточное количество клеток нужного типа до их повторного введения пациенту для терапии.
Человеческие эмбриональные стволовые клетки часто выращиваются в среде, содержащей фибротастический фактор роста-2, дополненной сывороткой плода быка. Они выращиваются на питающем слое клеток, который, как полагают, поддерживает сохранение плюрипотентных характеристик эмбриональных стволовых клеток. Однако даже эти условия могут не полностью имитировать условия ниши in vivo .
Взрослые стволовые клетки остаются в недифференцированном состоянии на протяжении всей взрослой жизни. Однако, когда их культивируют in vitro , они часто подвергаются процессу «старения», в ходе которого их морфология изменяется, а пролиферативная способность снижается. Считается, что необходимо улучшить правильные условия культивирования взрослых стволовых клеток, чтобы взрослые стволовые клетки могли сохранять свою стволовость с течением времени. [ необходима цитата ]
Обзор Nature Insight определяет нишу следующим образом:
«Популяции стволовых клеток устанавливаются в «нишах» — определенных анатомических местах, которые регулируют их участие в формировании, поддержании и восстановлении тканей. Ниша спасает стволовые клетки от истощения, одновременно защищая хозяина от чрезмерной пролиферации стволовых клеток. Она представляет собой базовую единицу физиологии ткани, интегрируя сигналы, которые опосредуют сбалансированный ответ стволовых клеток на потребности организмов. Однако ниша может также вызывать патологии, навязывая аномальную функцию стволовым клеткам или другим мишеням. Взаимодействие между стволовыми клетками и их нишей создает динамическую систему, необходимую для поддержания тканей и для окончательного дизайна терапии стволовыми клетками... Простого расположения стволовых клеток недостаточно для определения ниши. Ниша должна иметь как анатомические, так и функциональные измерения». [3]
Хотя концепция ниши стволовых клеток преобладала у позвоночных, первая характеристика ниши стволовых клеток in vivo была разработана в ходе изучения зародышевого развития дрозофилы . [ необходима цитата ]
С помощью непрерывной интравитальной визуализации у мышей исследователи смогли изучить структуру ниши стволовых клеток и получить судьбу отдельных стволовых клеток (SC) и их потомства с течением времени in vivo. В частности, в кишечной крипте [4] были идентифицированы две отдельные группы SC: «пограничные стволовые клетки», расположенные в верхней части ниши на границе с транзитными усиливающими клетками (TA), и «центральные стволовые клетки», расположенные в основании крипты. Пролиферативный потенциал двух групп был неравным и коррелировал с расположением клеток (центральным или пограничным). Было также показано, что два отсека SC действовали согласованно, поддерживая постоянную популяцию клеток и устойчивый клеточный оборот. Подобная зависимость потенциала самообновления от близости к границе ниши была зарегистрирована в контексте волосяного фолликула в исследовании с живой визуализацией in vivo. [5]
Эта двухкомпартментная структура ниши стволовых клеток была математически смоделирована для получения оптимальной архитектуры, которая приводит к максимальной задержке в производстве мутантов с двойным попаданием. [6] Они обнаружили, что двухкомпартментная архитектура SC минимизирует скорость производства мутантов с двойным попаданием по сравнению с моделью с одним компартментом SC. Более того, минимальная вероятность генерации мутантов с двойным попаданием соответствует чисто симметричному делению SC с большой скоростью пролиферации пограничных стволовых клеток вместе с небольшой, но ненулевой скоростью пролиферации центральных стволовых клеток. [ необходима цитата ]
Ниши стволовых клеток, в которых постоянно делятся клетки, например, те, что расположены у основания кишечной железы , поддерживаются в небольшом размере популяции. Это представляет собой проблему для поддержания многоклеточных тканей, поскольку небольшие популяции бесполо делящихся особей будут накапливать вредные мутации посредством генетического дрейфа и поддаваться мутационному расплавлению . [7] Математическое моделирование кишечной железы показывает, что небольшой размер популяции в нише стволовых клеток сводит к минимуму вероятность возникновения канцерогенеза в любом месте за счет постепенного накопления вредных мутаций на протяжении всей жизни организма — процесса, который способствует деградации тканей и старению . [8] Таким образом, размер популяции ниши стволовых клеток представляет собой эволюционный компромисс между вероятностью образования рака и скоростью старения.
Зародышевые стволовые клетки (GSC) находятся в организмах, которые непрерывно производят сперму и яйцеклетки, пока они не станут стерильными. Эти специализированные стволовые клетки находятся в нише GSC, начальном месте производства гамет, которое состоит из GSC, соматических стволовых клеток и других соматических клеток. В частности, ниша GSC хорошо изучена в генетическом модельном организме Drosophila melanogaster и обеспечила обширное понимание молекулярной основы регуляции стволовых клеток. [ необходима цитата ]
У Drosophila melanogaster ниша GSC находится в самой передней области каждой овариолы , известной как гермарий. Ниша GSC состоит из необходимых соматических клеток — терминальных филаментных клеток, клеток-крышек, эскортных клеток и других стволовых клеток, которые функционируют для поддержания GSC. [9] Ниша GSC в среднем содержит 2–3 GSC, которые напрямую прикреплены к соматическим клеткам-крышкам и стволовым клеткам-эскортам, которые посылают сигналы поддержания непосредственно в GSC. [10] GSC легко идентифицируются с помощью гистологического окрашивания против белка vasa (для идентификации зародышевых клеток) и белка 1B1 (для определения структур клеток и структуры фьюсомы , специфичной для зародышевой линии ). Их физическое прикрепление к клеткам-крышкам необходимо для их поддержания и активности. [10] GSC будет делиться асимметрично, чтобы произвести один дочерний цистобласт, который затем проходит 4 раунда неполного митоза по мере продвижения вниз по овариоле (через процесс оогенеза ), в конечном итоге появляясь в качестве зрелой яйцеклеточной камеры; фьюсома, обнаруженная в GSC, функционирует в образовании кисты и может регулировать асимметричные клеточные деления GSC. [11] Благодаря обилию генетических инструментов, доступных для использования в Drosophila melanogaster , и простоте обнаружения GSC с помощью гистологического окрашивания, исследователи обнаружили несколько молекулярных путей, контролирующих поддержание и активность GSC. [12] [13]
Лиганды костного морфогенетического белка (BMP) Decapentaplegic (Dpp) и лиганд Glass-bottom-boat (Gbb) напрямую передаются в GSC и необходимы для поддержания и самообновления GSC. [14] Сигнализация BMP в нише функционирует для прямого подавления экспрессии Bag-of-Marbles ( Bam ) в GSC, которая активируется в развивающихся цистобластных клетках. [15] Потеря функции dpp в нише приводит к дерепрессии Bam в GSC, что приводит к быстрой дифференциации GSC. [10] Наряду с сигнализацией BMP, клетки cap также передают сигналы другим молекулам в GSC: Yb и Piwi . Обе эти молекулы требуются GSC неавтономно для пролиферации - piwi также требуется автономно в GSC для пролиферации. [16] В гермарии сигнализация BMP имеет ближний эффект, поэтому физическое присоединение GSC к покрывающим клеткам важно для поддержания и активности. [ необходима цитата ]
GSC физически прикреплены к клеткам крышки с помощью адгезивных соединений Drosophila E-cadherin (DE-cadherin), и если это физическое присоединение потеряно, GSC будут дифференцироваться и терять свою идентичность как стволовые клетки. [10] Ген, кодирующий DE-cadherin, shotgun ( shg ), и ген, кодирующий ортолог бета-катенина, armadillo , контролируют это физическое присоединение. [17] Молекула GTPase, rab11, участвует в клеточном транспорте DE-кадгеринов. Выключение rab11 в GSC приводит к отсоединению GSC от клеток крышки и преждевременной дифференциации GSC. [18] Кроме того, для дифференциации зародышевых клеток требуется нулевой рост популяции ( zpg ), кодирующий щелевой контакт , специфичный для зародышевой линии . [19]
Диета и инсулиноподобный сигнал напрямую контролируют пролиферацию GSC в Drosophila melanogaster . Повышение уровня инсулиноподобного пептида Drosophila (DILP) через диету приводит к увеличению пролиферации GSC. [20] Повышение регуляции DILP в старых GSC и их нише приводит к увеличению поддержания и пролиферации. [21] Также было показано, что DILP регулируют количество клеток крышки и регулируют физическое прикрепление GSC к клеткам крышки. [21]
Существует два возможных механизма обновления стволовых клеток: симметричное деление GSC или дедифференциация цистобластов. Обычно GSC делятся асимметрично, чтобы произвести один дочерний цистобласт, но было высказано предположение, что симметричное деление может привести к тому, что две дочерние клетки останутся GSC. [22] [23] Если GSC удаляются, чтобы создать пустую нишу, а колпачковые клетки все еще присутствуют и посылают сигналы поддержания, дифференцированные цистобласты могут быть привлечены в нишу и дедифференцироваться в функциональные GSC. [24]
По мере того как самка Drosophila стареет, ниша стволовых клеток претерпевает возрастную потерю присутствия и активности GSC. Считается, что эти потери частично вызваны деградацией важных сигнальных факторов из ниши, которая поддерживает GSC и их активность. Прогрессирующее снижение активности GSC способствует наблюдаемому снижению плодовитости Drosophila melanogaster в старости; это снижение активности GSC может быть частично связано со снижением активности сигнальных путей в нише GSC. [25] [26] Было обнаружено, что происходит снижение сигнализации Dpp и Gbb с возрастом. В дополнение к снижению активности сигнальных путей ниши, GSC стареют клеточно-автономно. В дополнение к изучению снижения сигналов, исходящих из ниши, GSC стареют внутренне; наблюдается возрастное снижение адгезии GSC к клеткам колпачка и накопление активных форм кислорода (ROS), что приводит к повреждению клеток, что способствует старению GSC. Наблюдается уменьшение количества клеток крышки и физического прикрепления GSC к клеткам крышки в процессе старения. Shg экспрессируется на значительно более низких уровнях в старой нише GSC по сравнению с молодой. [26]
У самцов Drosophila melanogaster есть два яичка — длинные, трубчатые, спиральные структуры — и на самом переднем конце каждого находится ниша GSC. Ниша GSC яичек построена вокруг популяции немитотических клеток-концентраторов (также известных как клетки ниши), к которым прикрепляются две популяции стволовых клеток: GSC и соматические стволовые клетки (SSC, также известные как стволовые клетки соматической кисты/стволовые клетки кисты). Каждая GSC окружена парой SSC, хотя каждый тип стволовых клеток все еще находится в контакте с клетками-концентраторами. Таким образом, ниша стволовых клеток состоит из этих трех типов клеток, поскольку не только клетки-концентраторы регулируют поведение GSC и SSC, но и стволовые клетки также регулируют активность друг друга. Ниша GSC яичек Drosophila оказалась ценной модельной системой для изучения широкого спектра клеточных процессов и сигнальных путей. [27]
Процесс сперматогенеза начинается, когда GSC делятся асимметрично, образуя GSC, который поддерживает контакт с хабом, и гониальный бласт, который выходит из ниши. SSC делятся со своим партнером GSC, и их немитотическое потомство, соматические цистные клетки (SCC, также известные как цистные клетки), окружают гониальный бласт. Затем гониальный бласт проходит четыре раунда синхронных транзитно-амплифицирующих делений с неполным цитокинезом, образуя шестнадцатиклеточную сперматогониальную кисту. Затем эта сперматогониальная киста дифференцируется и вырастает в сперматоцит, который в конечном итоге претерпит мейоз и произведет сперму. [27]
Два основных молекулярных сигнальных пути, регулирующих поведение стволовых клеток в нише GSC яичек, — это сигнальные пути Jak-STAT и BMP. Сигнализация Jak-STAT возникает в клетках-концентраторах, где лиганд Upd секретируется в GSC и SSC. [28] [29] Это приводит к активации STAT Drosophila , Stat92E, фактора транскрипции, который влияет на адгезию GSC к клеткам-концентраторам, [30] и самообновление SSC через Zfh-1. [31] Сигнализация Jak-STAT также влияет на активацию сигнализации BMP через лиганды Dpp и Gbb. Эти лиганды секретируются в GSC из SSC и клеток-концентраторов, активируют сигнализацию BMP и подавляют экспрессию Bam, фактора дифференциации. [32] За пределами ниши гониобласты больше не получают лиганды BMP и могут свободно начинать свою программу дифференциации. Другие важные сигнальные пути включают MAPK и Hedgehog, которые регулируют зародышевую герминативную герминацию [33] и самообновление соматических клеток [34] соответственно.
Ниша GSC мышей у самцов, также называемая нишей сперматогониальных стволовых клеток (SSC), расположена в базальной области семенных канальцев в яичках. Семенной эпителий состоит из клеток Сертоли, которые находятся в контакте с базальной мембраной канальцев, которая отделяет клетки Сертоли от интерстициальной ткани ниже. Эта интерстициальная ткань включает клетки Лейдига, макрофаги, мезенхимальные клетки, капиллярные сети и нервы. [35]
Во время развития первичные половые клетки мигрируют в семенные канальцы и вниз к базальной мембране, оставаясь прикрепленными к клеткам Сертоли, где они впоследствии дифференцируются в SSC, также называемые A-одиночными сперматогониями. [35] [36] Эти SSC могут либо самообновляться, либо дифференцироваться в сперматозоиды при пролиферации A-одиночных в A-спаренные сперматогонии. Две клетки A-спаренных сперматогоний остаются прикрепленными межклеточными мостиками и впоследствии делятся на A-выровненные сперматогонии, которые состоят из 4–16 соединенных клеток. Затем A-выровненные сперматогонии подвергаются мейозу I для образования сперматоцитов и мейозу II для образования сперматид, которые созревают в сперматозоиды. [37] [38] Эта дифференциация происходит вдоль продольной оси клеток Сертоли, от базальной мембраны до апикального просвета семенных канальцев. Однако клетки Сертоли образуют плотные соединения, которые отделяют SSC и сперматогонии, контактирующие с базальной мембраной, от сперматоцитов и сперматид, создавая базальный и адлюминальный отсеки, в которых дифференцирующиеся сперматоциты должны пересекать плотные соединения. [35] [39] Эти плотные соединения образуют гематотестикулярный барьер (ГТБ) и, как предполагается, играют роль в изоляции дифференцированных клеток в адлюминальном отсеке от секретируемых факторов интерстициальной тканью и сосудистой сетью, соседствующими с базальным отсеком. [35]
Базальная мембрана семенного канальца представляет собой модифицированную форму внеклеточного матрикса, состоящего из фибронектина, коллагенов и ламинина. [35] β1-интегрин экспрессируется на поверхности SSC и участвует в их адгезии к ламининовому компоненту базальной мембраны, хотя другие молекулы адгезии, вероятно, также участвуют в прикреплении SSC к базальной мембране. [40] Было показано, что экспрессия E-кадгерина на SSC у мышей, в отличие от Drosophila , не является обязательной, поскольку трансплантация культивируемых SSC, лишенных E-кадгерина, способна колонизировать семенные канальцы хозяина и подвергаться сперматогенезу. [41] Кроме того, гематотестикулярный барьер обеспечивает архитектурную поддержку и состоит из компонентов плотных соединений, таких как окклюдины, клаудины и зоналы окклюденс (ZO), которые демонстрируют динамическую экспрессию во время сперматогенеза. [42] Например, было показано, что клаудин 11 является необходимым компонентом этих плотных контактов, поскольку у мышей, у которых отсутствует этот ген, наблюдается дефектный гематотестикулярный барьер, и они не производят зрелые сперматозоиды. [40]
Известно, что GDNF (нейротрофический фактор, полученный из глиальных клеток) стимулирует самообновление SSC и секретируется клетками Сертоли под влиянием гонадотропина ФСГ. GDNF является родственным членом суперсемейства факторов роста TGFβ, и при его сверхэкспрессии у мышей наблюдалось увеличение недифференцированных сперматогоний, что приводило к образованию опухолей зародыша. [35] [40] В подтверждение его роли как фактора обновления, гетерозиготные самцы мышей с нокаутом GDNF демонстрируют снижение сперматогенеза, что в конечном итоге приводит к бесплодию. [40] Кроме того, было показано, что добавление GDNF увеличивает экспансию SSC у мышей в культуре. Однако рецептор GDNF c-RET и корецептор GFRa1 экспрессируются не только на SSC, но также на Apaired и Aaligned, что показывает, что GDNF является фактором обновления для Asingle to Aaligned в целом, а не специфичным для популяции Asingle SSC. FGF2 (фактор роста фибробластов −2), секретируемый клетками Сертоли, также, как было показано, влияет на обновление SSC и недифференцированных сперматогоний аналогично GDNF. [35]
Хотя клетки Сертоли, по-видимому, играют важную роль в обновлении, они экспрессируют рецепторы для тестостерона, который секретируется клетками Лейдига, тогда как зародышевые клетки не содержат этого рецептора, что указывает на важную роль клеток Лейдига выше по течению в опосредовании обновления. Клетки Лейдига также продуцируют CSF 1 (колониестимулирующий фактор −1), для которого SSC сильно экспрессируют рецептор CSF1R. [37] Когда CSF 1 был добавлен в культуру с GDNF и FGF2, дальнейшего увеличения пролиферации не наблюдалось, однако, чем дольше зародышевые клетки оставались в культуре с CSF-1, тем больше плотность SSC наблюдалась, когда эти зародышевые клетки были трансплантированы в семенные канальцы хозяина. Это показало, что CSF 1 является специфическим фактором обновления, который склоняет SSC в сторону обновления по сравнению с дифференциацией, а не влияет на пролиферацию SSC и сперматогоний. Было также показано, что GDNF, FGF 2 и CSF 1 влияют на самообновление стволовых клеток в других тканях млекопитающих. [35]
Plzf (промиелоцитарный лейкоз цинковый палец) также участвует в регуляции самообновления SSC и экспрессируется Asingle, Apaired и Aaligned сперматогониями. Plzf напрямую ингибирует транскрипцию рецептора c-kit в этих ранних сперматогониях. Однако его отсутствие в поздних сперматогониях допускает экспрессию c-kit, которая впоследствии активируется его лигандом SCF (фактор стволовых клеток), секретируемым клетками Сертоли, что приводит к дальнейшей дифференциации. Кроме того, было показано, что добавление BMP4 и Activin-A снижает самообновление SSC в культуре и увеличивает дифференциацию стволовых клеток, при этом BMP4, как было показано, увеличивает экспрессию c-kit. [37]
Пролонгированный сперматогенез зависит от поддержания SSC, однако это поддержание снижается с возрастом и приводит к бесплодию. У мышей в возрасте от 12 до 14 месяцев наблюдается снижение веса яичек, снижение сперматогенеза и содержания SSC. Хотя стволовые клетки считаются имеющими потенциал для бесконечной репликации in vitro, факторы, предоставляемые нишей, имеют решающее значение in vivo. Действительно, серийная трансплантация SSC от самцов мышей разного возраста молодым мышам в возрасте 3 месяцев, у которых был удален эндогенный сперматогенез, использовалась для оценки содержания стволовых клеток, учитывая, что каждая стволовая клетка будет генерировать колонию сперматогенеза. [35] [43] Результаты этого эксперимента показали, что трансплантированные SSC могут поддерживаться намного дольше, чем их репликативная продолжительность жизни для их возраста. Кроме того, исследование также показало, что SSC от молодых фертильных мышей не могут поддерживаться или подвергаться сперматогенезу при трансплантации в яички старых бесплодных мышей. В совокупности эти результаты указывают на ухудшение состояния ниши SSC с возрастом, а не на потерю внутренних факторов в SSC. [43]
Ниша гемопоэтических стволовых клеток позвоночных в костном мозге образована клетками субэндостальных остеобластов, синусоидальными эндотелиальными клетками и стромальными клетками костного мозга (иногда также называемыми ретикулярными), которые включают смесь фибробластоидных , моноцитарных и адипоцитарных клеток (которые составляют жировую ткань костного мозга ). [1]
Ниша стволовых клеток волосяного фолликула является одной из наиболее тщательно изученных ниш благодаря ее относительной доступности и роли в таких важных заболеваниях, как меланома . Было показано, что область выпуклости на стыке мышцы, поднимающей пили , с оболочкой волосяного фолликула содержит стволовые клетки кожи, которые могут вносить вклад во все эпителиальные слои кожи. Эти клетки поддерживаются сигнализацией совместно с клетками ниши — сигналы включают паракринные (например, звуковой еж ), аутокринные и юкстакринные сигналы. [44] Область выпуклости волосяного фолликула полагается на эти сигналы для поддержания стволовости клеток. Картирование судьбы или отслеживание клеточной линии показало, что потомство стволовых клеток, положительных по кератину 15, участвует во всех эпителиальных линиях. [45] Фолликул подвергается циклической регенерации, при которой эти стволовые клетки мигрируют в различные регионы и дифференцируются в соответствующий тип эпителиальных клеток. Некоторые важные сигналы в нише стволовых клеток волосяного фолликула, продуцируемые мезенхимальным дермальным сосочком или выпуклостью, включают лиганды BMP, TGF-β и фактора роста фибробластов (FGF) и ингибиторы Wnt. [46] В то время как сигнальные пути Wnt и β-катенин важны для поддержания стволовых клеток, [47] чрезмерная экспрессия β-катенина в волосяных фолликулах вызывает неправильный рост волос. Следовательно, эти сигналы, такие как ингибиторы Wnt, продуцируемые окружающими клетками, важны для поддержания и облегчения ниши стволовых клеток. [48]
Кишечные органоиды использовались для изучения ниш кишечных стволовых клеток. Культура кишечных органоидов может использоваться для косвенной оценки эффекта манипуляции на стволовые клетки посредством оценки выживаемости и роста органоида. Исследования с использованием кишечных органоидов продемонстрировали, что выживаемость кишечных стволовых клеток улучшается за счет присутствия нейронов и фибробластов, [49] и посредством введения IL-22 . [50]
Ниши сердечно-сосудистых стволовых клеток можно найти в свободной стенке правого желудочка, предсердиях и выходных путях сердца. Они состоят из Isl1+/Flk1+ сердечных клеток-предшественников (CPC), которые локализуются в дискретных кластерах внутри ColIV и внеклеточного матрикса ламинина (ECM). ColI и фибронектин преимущественно обнаруживаются вне кластеров CPC в миокарде. Иммуногистохимическое окрашивание использовалось для демонстрации того, что дифференцирующиеся CPC, которые мигрируют от кластеров-предшественников в ColI и фибронектиновый ECM, окружающий нишу, подавляют Isl1, одновременно повышая регуляцию зрелых сердечных маркеров, таких как тропонин C. [51] В настоящее время ведутся споры о роли клеток Isl1+ в сердечно-сосудистой системе. В то время как основные публикации идентифицировали эти клетки как CPC и обнаружили очень большое их количество в мышином и человеческом сердце, недавние публикации обнаружили очень мало клеток Isl1+ в мышином фетальном сердце и приписали их локализацию синоатриальному узлу, [52] который известен как область, которая способствует сердечному ритму. Роль этих клеток и их ниша являются предметом интенсивных исследований и дискуссий. [ необходима цитата ]
Ниши нейральных стволовых клеток делятся на две части: субэпендимальную зону (СЭЗ) и субгранулярную зону (СГЗ).
SEZ представляет собой тонкую область под слоем эпендимальных клеток, которая содержит три типа нейральных стволовых клеток: редко делящиеся нейральные стволовые клетки (NSC), быстро делящиеся транзитные усиливающиеся предшественники (TaP) и нейробласты (NB). Внеклеточный матрикс SEZ ( ECM ) имеет значительные различия в составе по сравнению с окружающими тканями. Недавно было описано, что клетки-предшественники, NSC, TaP и NB были прикреплены к структурам ECM, называемым Fractones . [53] Эти структуры богаты ламинином, коллагеном и протеогликанами гепарансульфата . [54] Другие молекулы ECM, такие как тенасцин-C, MMP и различные протеогликаны, также участвуют в нише нейральных стволовых клеток. [55]
Раковая ткань морфологически неоднородна не только из-за разнообразия присутствующих типов клеток: эндотелиальных, фибробластных и различных иммунных клеток, но и сами раковые клетки не являются однородной популяцией. [ необходима цитата ]
В соответствии с иерархической моделью опухолей раковые стволовые клетки (CSC) поддерживаются биохимическими и физическими контекстными сигналами, исходящими из микроокружения, называемого нишей раковых стволовых клеток. [56] Ниша CSC очень похожа на нишу нормальных стволовых клеток ( эмбриональные стволовые клетки (ESC), взрослые стволовые клетки ASC) по функции (поддержание самообновления, недифференцированного состояния и способности к дифференциации) и по сигнальным путям (Activin/Noda, Akt/PTEN, JAK/STAT, PI3-K, TGF-β, Wnt и BMP). [57] Предполагается, что CSC возникают из аберрантной сигнализации микроокружения и участвуют не только в обеспечении сигналов выживания CSC, но и в метастазах путем индукции эпителиально-мезенхимального перехода (EMT). [ необходима цитата ]
Гипоксическое состояние в нишах стволовых клеток (ESC, ASC или CSC) необходимо для поддержания стволовых клеток в недифференцированном состоянии, а также для минимизации повреждения ДНК посредством окисления. Поддержание гипоксического состояния находится под контролем факторов транскрипции, индуцируемых гипоксией (HIF). [58] HIF способствуют прогрессированию опухоли, выживанию клеток и метастазированию путем регуляции целевых генов, таких как VEGF, GLUT-1, ADAM-1, Oct4 и Notch. [57]
Гипоксия играет важную роль в регуляции ниш стволовых клеток рака и ЭПТ посредством продвижения HIF. [59] Эти HIF помогают поддерживать ниши стволовых клеток рака, регулируя важные гены стволовости , такие как Oct4 , Nanog , SOX2 , Klf4 и cMyc . [60] [61] HIF также регулируют важные гены-супрессоры опухолей, такие как p53 , и гены, способствующие метастазированию . [62] [63] Хотя HIF повышают выживаемость клеток за счет снижения эффектов окислительного стресса , также было показано, что они снижают такие факторы, как RAD51 и H2AX, которые поддерживают геномную стабильность. [64] В гипоксическом состоянии происходит увеличение внутриклеточных активных форм кислорода (ROS), которые также способствуют выживанию CSC посредством реакции на стресс. [65] [66] ROS стабилизирует HIF-1α, который способствует протоонкогену Met , который управляет метастазами или мотогенным побегом в клетках меланомы . [67] Все эти факторы способствуют фенотипу раковых стволовых клеток, поэтому его часто называют нишей гипоксических стволовых клеток. Гипоксические среды часто встречаются в опухолях, где клетки делятся быстрее, чем может происходить ангиогенез . Важно изучать гипоксию как аспект рака, поскольку было показано, что гипоксические среды устойчивы к лучевой терапии . [68] Было показано, что облучение увеличивает количество HIF-1 . [69] Индукция EMT гипоксией, хотя взаимодействие между HIF-1α и ROS имеет решающее значение для метастазирования при таких видах рака, как меланома . Было обнаружено, что многие гены, связанные с меланомой, регулируются гипоксией, например, MXI1, FN1 и NME1. [70]
Эпителиально-мезенхимальный переход — это морфогенетический процесс, обычно происходящий в эмбриогенезе, который «захватывается» раковыми стволовыми клетками, отсоединяясь от своего первичного места и мигрируя в другое. Распространение сопровождается обратным переходом, так называемым эпителиально-мезенхимальным переходом (ЭМП). Этот процесс регулируется микроокружением CSC через те же сигнальные пути, что и в эмбриогенезе, с использованием факторов роста ( TGF-β , PDGF , EGF), цитокина IL-8 и компонентов внеклеточного матрикса. Было показано, что взаимодействие этих факторов роста через внутриклеточные сигнальные преобразователи, такие как β-катенин, индуцирует метастатический потенциал. [71] [72] Характерной чертой ЭПТ является потеря эпителиальных маркеров (E-кадгерин, цитокератины, клаудин, окклюзия, десмоглеин, десмоколин) и увеличение мезенхимальных маркеров (N-кадгерин, виментин, фибронектин). [73]
Также существует определенная степень сходства в хоуминг-мобилизации нормальных стволовых клеток и метастазировании-инвазии раковых стволовых клеток. Важную роль играют матриксные металлопротеиназы (ММП), основные ферменты, разрушающие внеклеточный матрикс, например, матриксные металлопротеиназы-2 и -9 индуцируются к экспрессии и секреции стромальными клетками во время метастазирования рака толстой кишки посредством прямого контакта или паракринной регуляции. Следующая разделяющая молекула - фактор, полученный из стромальных клеток-1 (SDF-1). [73] [74]
ЭМП и прогрессирование рака также могут быть вызваны хроническим воспалением . Главные роли играют молекулы (IL-6, IL-8, TNF-α, NFκB, TGF-β, HIF-1α), которые могут регулировать оба процесса посредством регуляции нисходящей сигнализации, которая перекрывается между ЭМП и воспалением. [57] Нижестоящие пути, участвующие в регуляции CSC, — это Wnt, SHH, Notch, TGF-β, RTKs-EGF, FGF, IGF, HGF.
NFκB регулирует ЭПТ, миграцию и инвазию CSC через Slug, Snail и Twist. Активация NFκB приводит к увеличению не только продукции IL-6, TNF-α и SDF-1, но и доставки факторов роста.
Источником продукции цитокинов являются лимфоциты (ФНО-α), мезенхимальные стволовые клетки (SDF-1, IL-6, IL8).
Интерлейкин 6 опосредует активацию STAT3. Высокий уровень STAT3 был описан в изолированных CSC из печени, костей, шейки матки и рака мозга. Ингибирование STAT3 приводит к резкому снижению их образования. Обычно IL-6 способствует выживанию местных стволовых клеток и, таким образом, способствует возникновению опухолей. [57]
SDF-1α, секретируемый мезенхимальными стволовыми клетками (МСК), играет важную роль в возвращении и поддержании гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) в нише костного мозга, а также в возвращении и распространении ОСК. [74]
Гипоксия является основным стимулятором ангиогенеза , а HIF-1α является основным медиатором. Ангиогенез, вызванный гипоксическими условиями, называется «ангиогенным переключателем». HIF-1 способствует экспрессии нескольких ангиогенных факторов: фактора роста эндотелия сосудов (VEGF), основного фактора роста фибробластов (bFGF), плацентоподобного фактора роста (PLGF), тромбоцитарного фактора роста (PDGF) и эпидермального фактора роста. Но есть доказательства того, что экспрессия ангиогенных агентов раковыми клетками также может быть независимой от HIF-1. Кажется, что существует важная роль белка Ras, и что внутриклеточные уровни кальция регулируют экспрессию ангиогенных генов в ответ на гипоксию. [73]
Ангиогенный переключатель подавляет белки-супрессоры ангиогенеза, такие как тромбоспондин, ангиостатин, эндостатин и тумстатин. Ангиогенез необходим для роста первичной опухоли. [ необходима цитата ]
Во время травмы поддерживающие клетки способны активировать программу восстановления, повторяя аспекты развития в области повреждения. Эти области становятся допускающими для обновления, миграции и дифференциации стволовых клеток. Например, в ЦНС травма способна активировать программу развития в астроцитах, которая позволяет им экспрессировать молекулы, поддерживающие стволовые клетки, такие как хемокины, например SDF-1 [75], и морфогены, такие как Sonic hedgehog. [76]
Очевидно, что биофизико-химические характеристики ECM, такие как состав, форма, топография, жесткость и механическая прочность, могут контролировать поведение стволовых клеток. Эти факторы ECM одинаково важны, когда стволовые клетки выращиваются in vitro. При наличии выбора между взаимодействием нишевых клеток и стволовых клеток и взаимодействием ECM и стволовых клеток, имитация ECM предпочтительнее, поскольку ее можно точно контролировать с помощью методов изготовления каркасов, параметров обработки или модификаций после изготовления. Для имитации важно понимать естественные свойства ECM и их роль в процессах судьбы стволовых клеток. Были проведены различные исследования с участием различных типов каркасов, которые регулируют судьбу стволовых клеток путем имитации этих свойств ECM. [2] )
[77]
{{cite book}}
: |journal=
проигнорировано ( помощь )