Пресенилины — это семейство родственных многопроходных трансмембранных белков , которые составляют каталитические субъединицы внутримембранного белкового комплекса гамма-секретазы протеазы . Впервые они были идентифицированы Питером Сент-Джорджем-Хислопом при скрининге мутаций, вызывающих ранние формы семейной болезни Альцгеймера . [2] У позвоночных животных есть два гена пресенилина , называемые PSEN1 (расположен на хромосоме 14 у людей), который кодирует пресенилин 1 (PS-1) и PSEN2 (на хромосоме 1 у людей), который кодирует пресенилин 2 (PS-2). [3] Оба гена демонстрируют консервацию между видами, с небольшой разницей между крысиными и человеческими пресенилинами. У нематодного червя C. elegans есть два гена, которые напоминают пресенилины и, по-видимому, функционально схожи, sel-12 и hop-1. [4]
Пресенилины подвергаются расщеплению в альфа-спиральной области одной из цитоплазматических петель, чтобы произвести большой N-концевой и меньший C-концевой фрагмент, которые вместе образуют часть функционального белка. [5] Расщепление пресенилина 1 может быть предотвращено мутацией , которая вызывает потерю экзона 9 и приводит к потере функции. Пресенилины играют ключевую роль в модуляции внутриклеточного Ca 2+, участвующего в пресинаптическом высвобождении нейротрансмиттера и долговременной индукции потенциации. [6]
Пресенилины — это трансмембранные белки с девятью альфа-спиралями . Структуры собранного комплекса гамма-секретазы были определены с помощью криоэлектронной микроскопии , что демонстрирует значительную конформационную гибкость в структуре субъединицы пресенилина комплекса в ответ на связывание лиганда или ингибитора. [7] [1] Пресенилины подвергаются автокаталитической протеолитической обработке после экспрессии, расщепляя область цитоплазматической петли между шестой и седьмой спиралями, чтобы произвести большой N-концевой и меньший C-концевой фрагмент. Два фрагмента остаются в контакте друг с другом в зрелом белке. Два каталитических остатка активного центра аспартата, необходимые для активности аспартилпротеазы, расположены в шестой и седьмой спиралях. [8]
Структура и мембранная топология пресенилинов изначально были спорными, когда они были впервые обнаружены. Ген PSEN1 , как было предсказано, содержит десять трансмембранных доменов; модели согласились с ожидаемой топологией N-концевого фрагмента, но структура C-концевого фрагмента была оспорена. Исследование 2006 года предположило девятипроходную трансмембранную топологию с расщеплением и сборкой в комплекс гамма-секретазы перед вставкой в плазматическую мембрану . [9] Исследования растворов ЯМР C-концевого фрагмента показали три спирали, вероятно, пересекающие мембрану, [5] [10] в то время как исследования рентгеновской кристаллографии архейного гомолога, [11], а также криоэлектронная микроскопия комплекса гамма-секретазы человека указывают на девять трансмембранных спиралей. [7] [1]
Пресенилины являются каталитическим компонентом гамма-секретазной внутримембранной протеазы , четырехкомпонентного белкового комплекса, состоящего из пресенилина, никастрина , APH-1 и PEN-2 . Он имеет очень широкий спектр субстратов для своей протеолитической активности . Его субстратами являются гидрофобные однопроходные трансмембранные спирали с относительно небольшими внеклеточными областями. [12] [13] Эти субстраты возникают после отщепления эктодомена . [13] Более 100 различных интегральных мембранных белков обрабатываются гамма-секретазой. [8] Наиболее охарактеризованными субстратами гамма-секретазы являются рецептор Notch и белок-предшественник амилоида (APP). [7] [13] Роль пресенилинов в сигнальном пути Notch важна для развития; [14] мыши, у которых ген PS1 отключен, умирают на ранних стадиях развития от аномалий развития, аналогичных тем, которые обнаруживаются при нарушении гена notch. [15] У мышей с условным отключением , у которых пресенилин инактивируется только после раннего развития, есть доказательства того, что пресенилины в своей роли компонентов гамма-секретазы важны для выживания нейронов во время старения. [14]
Существуют тонкие и видоспецифичные различия в ролях пресенилина-1 и пресенилина-2 в собранных комплексах гамма-секретазы, при этом многие исследования предполагают основную роль пресенилина-1. [13] У людей два пресенилина различаются по субклеточной локализации и могут также быть специфичными для типа клеток и тканей . [8]
Пресенилины также играют дополнительную некаталитическую роль в других клеточных сигнальных процессах, включая гомеостаз кальция , лизосомальное закисление, аутофагию и транспортировку белков . [16] [17] [18] Роль белков в гомеостазе кальция в нейронах была предметом интереса. [19] Генетическая инактивация пресенилинов в синапсах гиппокампа показала, что это избирательно влияет на долгосрочную потенциацию, вызванную тета , с инактивацией в пресинапсе, но не в постсинапсе, нарушая краткосрочную пластичность и синаптическую фасилитацию. [6] Высвобождение глутамата также было снижено в пресинаптических окончаниях процессами, которые включают модуляцию внутриклеточного высвобождения Ca 2+ . [6] Было высказано предположение, что это «представляет собой общий конвергентный механизм, приводящий к нейродегенерации». [6]
Гомологи были идентифицированы и охарактеризованы в различных эукариотических организмах, включая модельные организмы Drosophila melanogaster и Caenorhabditis elegans , растения, такие как Arabidopsis thaliana и Physcomitrella patens , а также слизистую плесень Dictyostelium discoideum . [17] [18] Предполагается, что в этих функциях пресенилины играют роль каркасных белков , что, вероятно, является предковой ролью семейства белков. [18]
Оба человеческих пресенилина широко распространены в мозге . Два белка различаются по субклеточной локализации , PS1 выражен более широко и присутствует на клеточной мембране , тогда как PS2 присутствует в основном в поздних эндосомах и лизосомах . [8] [20]
Большинство случаев болезни Альцгеймера не являются наследственными. Однако существует небольшая подгруппа случаев, которые имеют более ранний возраст начала и имеют сильный генетический элемент. У пациентов с болезнью Альцгеймера ( аутосомно-доминантное наследственное) могут быть обнаружены мутации в белках пресенилина (PSEN1; PSEN2) или белке-предшественнике амилоида (APP). Большинство этих случаев несут мутантные гены пресенилина. Важной частью процесса заболевания при болезни Альцгеймера является накопление белка бета-амилоида (Aβ). Для образования Aβ APP должен быть разрезан двумя ферментами , бета-секретазами и гамма-секретазой . Пресенилин является субкомпонентом гамма-секретазы, который отвечает за разрезание APP.
Гамма-секретаза может разрезать APP в нескольких точках в пределах небольшой области белка, что приводит к образованию Aβ различной длины. Длины, связанные с болезнью Альцгеймера, составляют 40 и 42 аминокислоты. Aβ 42 с большей вероятностью агрегирует с образованием бляшек в мозге, чем Aβ 40. Мутации пресенилина приводят к увеличению соотношения продуцируемого Aβ 42 по сравнению с Aβ 40, хотя общее количество продуцируемого Aβ остается постоянным. [21] Это может происходить из-за различных эффектов мутаций на гамма-секретазу. [22]
Гены пресенилинов были обнаружены в 1995 году посредством исследований сцепления с использованием мутаций , присутствующих в случаях семейной болезни Альцгеймера . [2] Примерно в то же время гомолог пресенилина в Caenorhabditis elegans , sel-12 , был независимо идентифицирован как фактор, способствующий передаче сигналов Notch . [23] Хотя функция белковых продуктов этих генов не была сразу очевидна, из последующей работы стало ясно, что мутации были связаны с более высокими пропорциями Aβ 42 по сравнению с менее амилоидогенным Aβ40. Роль пресенилинов как каталитического компонента белкового комплекса гамма-секретазы была установлена к началу 2000-х годов. [24] [25]