stringtranslate.com

Пепсин

Пепсин / ˈpɛp sɪn / — это эндопептидаза , которая расщепляет белки на более мелкие пептиды и аминокислоты . Это один из основных пищеварительных ферментов в пищеварительной системе человека и многих других животных, где он помогает переваривать белки в пище . Пепсин — это аспарагиновая протеаза , использующая каталитический аспартат в своем активном центре . [2]

Это одна из трех основных эндопептидаз (ферментов, разрезающих белки посередине) в пищеварительной системе человека , два других — химотрипсин и трипсин . Существуют также экзопептидазы , которые удаляют отдельные аминокислоты с обоих концов белков ( карбоксипептидазы, вырабатываемые поджелудочной железой, и аминопептидазы, секретируемые тонким кишечником). В процессе пищеварения эти ферменты, каждый из которых специализируется на разрыве связей между определенными типами аминокислот , сотрудничают для расщепления пищевых белков на их компоненты, т. е. пептиды и аминокислоты, которые могут легко всасываться тонким кишечником . Специфичность расщепления пепсина широка, но некоторые аминокислоты, такие как тирозин , фенилаланин и триптофан, увеличивают вероятность расщепления. [3]

Зимоген (профермент) пепсина , пепсиноген, выделяется главными клетками желудка в стенке желудка и при смешивании с соляной кислотой желудочного сока активируется, превращаясь в пепсин. [2]

История

Пепсин был одним из первых ферментов, открытых Теодором Шванном в 1836 году. Шванн придумал его название от греческого слова πέψις pepsis , что означает « пищеварение » (от πέπτειν peptein «переваривать»). [4] [5] [6] [7] Было установлено, что кислое вещество, способное преобразовывать азотсодержащие продукты в водорастворимый материал, является пепсином. [8]

В 1928 году он стал одним из первых ферментов, который удалось кристаллизовать , когда Джон Х. Нортроп кристаллизовал его с помощью диализа, фильтрации и охлаждения. [9]

Предшественник

Пепсин экспрессируется в виде зимогена, называемого пепсиногеном , первичная структура которого содержит на 44 аминокислоты больше, чем у активного фермента.

В желудке главные клетки желудка выделяют пепсиноген. Этот зимоген активируется соляной кислотой (HCl), которая выделяется из париетальных клеток в слизистой оболочке желудка. Гормон гастрин и блуждающий нерв запускают выделение как пепсиногена, так и HCl из слизистой оболочки желудка при приеме пищи. Соляная кислота создает кислую среду, которая позволяет пепсиногену разворачиваться и расщепляться автокаталитическим образом , тем самым генерируя пепсин (активную форму). Пепсин расщепляет 44 аминокислоты из пепсиногена, чтобы создать больше пепсина.

Пепсиногены в основном группируются в 5 различных групп на основе их первичной структуры: пепсиноген А (также называемый пепсиногеном I), пепсиноген B, прогастриксин (также называемый пепсиногеном II и пепсиногеном C), прохимозин (также называемый прореннином) и пепсиноген F (также называемый гликопротеином, связанным с беременностью). [10]

Активность и стабильность

Пепсин наиболее активен в кислой среде при pH от 1,5 до 2,5. [11] [12] Соответственно, его основным местом синтеза и активности является желудок ( pH от 1,5 до 2). У человека концентрация пепсина в желудке достигает 0,5 – 1 мг/мл. [13] [14]

Пепсин неактивен при pH 6,5 и выше, однако пепсин не полностью денатурируется или необратимо инактивируется до pH 8,0. [11] [15] Таким образом, пепсин в растворах с pH до 8,0 может быть реактивирован при повторном подкислении. Стабильность пепсина при высоком pH имеет значительные последствия для заболеваний, связанных с ларингофарингеальным рефлюксом . Пепсин остается в гортани после желудочного рефлюкса. [16] [17] При среднем pH гортаноглотки (pH = 6,8) пепсин будет неактивным, но может быть реактивирован при последующих событиях кислотного рефлюкса, приводящих к повреждению местных тканей.

Пепсин проявляет широкую специфичность расщепления. Пепсин переваривает до 20% поглощенных амидных связей. [18] Остатки в позициях P1 и P1' [19] наиболее важны для определения вероятности расщепления. Как правило, гидрофобные аминокислоты в позициях P1 и P1' увеличивают вероятность расщепления. Фенилаланин , лейцин и метионин в позиции P1, а также фенилаланин , триптофан и тирозин в позиции P1' приводят к самой высокой вероятности расщепления. [3] [18] : 675  Расщеплению препятствуют положительно заряженные аминокислоты гистидин , лизин и аргинин в позиции P1. [3]

При ларингофарингеальном рефлюксе

Пепсин является одной из основных причин повреждения слизистой оболочки во время ларингофарингеального рефлюкса . [20] [21] Пепсин остается в гортани (pH 6,8) после желудочного рефлюкса. [16] [17] Несмотря на то, что в этой среде пепсин ферментативно неактивен, он остается стабильным и может быть повторно активирован при последующих кислотных рефлюксах. [15] Воздействие ферментативно активного пепсина на слизистую оболочку гортани, но не необратимо инактивированного пепсина или кислоты, приводит к снижению экспрессии защитных белков и, таким образом, увеличивает восприимчивость гортани к повреждению. [15] [16] [17]

Пепсин также может вызывать повреждение слизистой оболочки при слабокислом или некислом желудочном рефлюксе. Слабый или некислый рефлюкс коррелирует с симптомами рефлюкса и повреждением слизистой оболочки. [22] [23] [24] [25] В некислых условиях (нейтральный pH) пепсин усваивается клетками верхних дыхательных путей, таких как гортань и гортаноглотка, посредством процесса, известного как рецепторно-опосредованный эндоцитоз . [26] Рецептор, с помощью которого пепсин эндоцитируется, в настоящее время неизвестен. После клеточного поглощения пепсин хранится во внутриклеточных пузырьках с низким pH, при котором его ферментативная активность восстанавливается. Пепсин сохраняется внутри клетки до 24 часов. [27] Такое воздействие пепсина при нейтральном pH и эндоцитоз пепсина вызывают изменения в экспрессии генов, связанных с воспалением, которое лежит в основе признаков и симптомов рефлюкса [28] и прогрессирования опухоли. [29] Это и другие исследования [30] указывают на участие пепсина в канцерогенезе, приписываемом желудочному рефлюксу.

Пепсин в образцах дыхательных путей считается чувствительным и специфичным маркером ларингофарингеального рефлюкса. [31] [32] Исследования по разработке новых терапевтических и диагностических инструментов, нацеленных на пепсин, для желудочного рефлюкса продолжаются. В настоящее время доступна быстрая неинвазивная диагностика пепсина под названием Peptest, которая определяет наличие пепсина в образцах слюны. [33]

Ингибиторы

Пепсин может быть ингибирован высоким pH (см. Активность и стабильность) или ингибиторными соединениями. Пепстатин является низкомолекулярным соединением и мощным ингибитором, специфичным для кислых протеаз с константой ингибирующей диссоциации (Ki) около 10 −10 M для пепсина. Считается, что остаток статила пепстатина отвечает за ингибирование пепсина пепстатином; статин является потенциальным аналогом переходного состояния для катализа пепсином и другими кислыми протеазами. Пепстатин не связывает ковалентно пепсин, и ингибирование пепсина пепстатином, следовательно, обратимо. [34] 1-бис(диазоацетил)-2-фенилэтан обратимо инактивирует пепсин при pH 5, реакция, которая ускоряется в присутствии Cu(II). [35]

Свиной пепсин ингибируется ингибитором пепсина-3 (PI-3), вырабатываемым крупным круглым червем свиньи ( Ascaris suum ). [36] PI-3 занимает активный сайт пепсина, используя его N-концевые остатки, и тем самым блокирует связывание субстрата . Аминокислотные остатки 1 - 3 (Gln-Phe-Leu) зрелого PI-3 связываются с позициями P1' - P3' пепсина. N-конец PI-3 в комплексе PI-3:пепсин позиционируется водородными связями , которые образуют восьмицепочечный β-слой , где три цепи вносятся пепсином и пять - PI-3. [36]

Продукт переваривания белка пепсином ингибирует реакцию. [37] [38]

Сукральфат , препарат, используемый для лечения язвы желудка и других заболеваний, связанных с пепсином, также подавляет активность пепсина. [39]

Приложения

Пепсиновая жевательная резинка Beeman's
Жевательная резинка Adams Pepsin Tutti Frutti Gum, позиционируется как «средство для облегчения расстройства желудка и диспепсии».

Коммерческий пепсин извлекается из железистого слоя свиных желудков. Он является компонентом сычужного фермента, используемого для свертывания молока при производстве сыра. Пепсин используется для различных целей в производстве продуктов питания: для модификации и придания взбиваемых качеств соевому белку и желатину, [40] для модификации растительных белков для использования в немолочных закусках, для превращения предварительно приготовленных злаков в быстрорастворимые каши, [41] и для приготовления гидролизатов животных и растительных белков для использования в качестве ароматизаторов для пищевых продуктов и напитков. Он используется в кожевенной промышленности для удаления волос и остатков тканей со шкур и для восстановления серебра из выброшенных фотопленок путем переваривания желатинового слоя, который удерживает серебро. [42] Пепсин исторически был добавкой к жевательной резинке марки Beeman's gum доктора Эдвина Э. Бимана.

Пепсин обычно используется при получении фрагментов F(ab')2 из антител. В некоторых анализах предпочтительно использовать только антигенсвязывающую (Fab) часть антитела . Для этих целей антитела могут быть ферментативно переварены для получения либо фрагмента Fab, либо фрагмента F(ab')2 антитела. Для получения фрагмента F(ab')2 IgG переваривается пепсином, который расщепляет тяжелые цепи вблизи шарнирной области. [43] Одна или несколько дисульфидных связей, которые соединяют тяжелые цепи в шарнирной области, сохраняются, поэтому два участка Fab антитела остаются соединенными вместе, образуя двухвалентную молекулу (содержащую два сайта связывания антитела), отсюда и обозначение F(ab')2. Легкие цепи остаются нетронутыми и прикрепленными к тяжелой цепи. Фрагмент Fc переваривается на небольшие пептиды. Фрагменты Fab образуются путем расщепления IgG папаином вместо пепсина. Папаин расщепляет IgG выше шарнирной области, содержащей дисульфидные связи, которые соединяют тяжелые цепи, но ниже места дисульфидной связи между легкой цепью и тяжелой цепью. Это создает два отдельных моновалентных (содержащих один сайт связывания антитела) фрагмента Fab и неповрежденный фрагмент Fc. Фрагменты можно очистить с помощью гель-фильтрации, ионного обмена или аффинной хроматографии. [44]

Фрагменты антител Fab и F(ab')2 используются в системах анализа, где наличие области Fc может вызывать проблемы. В таких тканях, как лимфатические узлы или селезенка, или в препаратах периферической крови присутствуют клетки с рецепторами Fc (макрофаги, моноциты, В-лимфоциты и естественные клетки-киллеры), которые могут связывать область Fc интактных антител, вызывая фоновое окрашивание в областях, не содержащих целевой антиген. Использование фрагментов F(ab')2 или Fab гарантирует, что антитела связываются с антигеном, а не с рецепторами Fc. Эти фрагменты также могут быть желательны для окрашивания клеточных препаратов в присутствии плазмы, поскольку они не способны связывать комплемент, который может лизировать клетки. Фрагменты F(ab')2 и в большей степени Fab позволяют более точно локализовать целевой антиген, т. е. при окрашивании ткани для электронной микроскопии. Дивалентность фрагмента F(ab')2 позволяет ему перекрестно связывать антигены, что позволяет использовать его для анализов преципитации, клеточной агрегации через поверхностные антигены или анализов розеткообразования. [45]

Гены

Следующие три гена кодируют идентичные ферменты пепсиногена А человека:

Четвертый человеческий ген кодирует гастриксин, также известный как пепсиноген С:

Ссылки

  1. ^ PDB : 1PSO ​; Fujinaga M, Chernaia MM, Tarasova NI, Mosimann SC, James MN (май 1995). "Кристаллическая структура человеческого пепсина и его комплекса с пепстатином". Protein Science . 4 (5): 960–72. doi :10.1002/pro.5560040516. PMC  2143119 . PMID  7663352.
  2. ^ ab "Enzyme entry 3.4.23.1". Портал ресурсов биоинформатики ExPASy . SIB . Получено 14 декабря 2008 г.
  3. ^ abc Hamuro Y, Coales SJ, Molnar KS, Tuske SJ, Morrow JA (апрель 2008 г.). "Специфичность иммобилизованного свиного пепсина в условиях, совместимых с обменом H/D". Rapid Communications in Mass Spectrometry . 22 (7): 1041–6. Bibcode : 2008RCMS...22.1041H. doi : 10.1002/rcm.3467. PMID  18327892.
  4. ^ Florkin M (март 1957). «[Открытие пепсина Теодором Шванном]». Revue Médicale de Liège (на французском). 12 (5): 139–44. PMID  13432398.
  5. ^ Азимов I (1980). Краткая история биологии . Вестпорт, Коннектикут: Greenwood Press. стр. 95. ISBN 9780313225833.
  6. ^ Харпер Д. «Пепсин». Онлайн-словарь этимологии .
  7. ^ πέψις, πέπτειν. Лидделл, Генри Джордж ; Скотт, Роберт ; Греко-английский словарь в проекте «Персей» .
  8. ^ Fruton JS (июнь 2002 г.). «История пепсина и родственных ферментов». The Quarterly Review of Biology . 77 (2): 127–47. doi :10.1086/340729. JSTOR  3071644. PMID  12089768. S2CID  24979344.
  9. ^ Northrop JH (май 1929). "Кристаллический пепсин". Science . 69 (1796): 580. Bibcode :1929Sci....69..580N. doi :10.1126/science.69.1796.580. PMID  17758437.
  10. ^ Кагеяма Т (февраль 2002 г.). «Пепсиногены, прогастриксины и прохимозины: структура, функция, эволюция и развитие».  Клеточные и молекулярные науки о жизни . 59 (2): 288–306. doi :10.1007/s00018-002-8423-9. PMC 11146132. PMID 11915945. S2CID  8907522. 
  11. ^ ab Piper DW, Fenton BH (октябрь 1965 г.). «pH-стабильность и кривые активности пепсина с особым акцентом на их клиническое значение». Gut . 6 (5): 506–8. doi :10.1136/gut.6.5.506. PMC 1552331 . PMID  4158734. 
  12. ^ "Информация о EC 3.4.23.1 - пепсин А". BRENDA -ферменты . Получено 14 декабря 2008 г.
  13. ^ Zhu H, Hart CA, Sales D, Roberts NB (сентябрь 2006 г.). «Уничтожение бактерий в желудочном соке — влияние pH и пепсина на Escherichia coli и Helicobacter pylori». Журнал медицинской микробиологии . 55 (ч. 9): 1265–1270. doi : 10.1099/jmm.0.46611-0 . PMID  16914658.
  14. ^ Бродкорб А, Эггер Л, Альмингер М, Альвито П, Ассунсао Р, Балланс С, Бон Т, Бурлье-Лаканал С, Бутру Р, Каррьер Ф, Клементе А, Корредиг М, Дюпон Д, Дюфур С, Эдвардс С, Голдинг М , Каракая С., Кирхус Б., Ле Феунтеун С., Лесмес У., Мацержанка А., Маки А.Р., Мартинс С., Марз С., МакКлементс Д.Д., Менар О., Минекус М., Портманн Р., Сантос К.Н., Сушон И., Сингх Р.П., Вегаруд Г.Е., Уикхэм М.С., Вейчис В., Ресио I (апрель 2019 г.). «ИНФОГЕСТ Статическое моделирование желудочно-кишечного переваривания пищи in vitro». Протоколы природы . 14 (4): 991–1014. doi : 10.1038/s41596-018-0119-1 . hdl : 11019/1671 . PMID  30886367.
  15. ^ abc Johnston N, Dettmar PW, Bishwokarma B, Lively MO, Koufman JA (июнь 2007 г.). «Активность/стабильность человеческого пепсина: последствия для рефлюкс-отнесенных заболеваний гортани». The Laryngoscope . 117 (6): 1036–9. doi :10.1097/MLG.0b013e31804154c3. PMID  17417109. S2CID  22124366.
  16. ^ abc Johnston N, Knight J, Dettmar PW, Lively MO, Koufman J (декабрь 2004 г.). «Пепсин и изофермент карбоангидразы III как диагностические маркеры ларингофарингеальной рефлюксной болезни». The Laryngoscope . 114 (12): 2129–34. doi :10.1097/01.mlg.0000149445.07146.03. PMID  15564833. S2CID  23773155.
  17. ^ abc Johnston N, Dettmar PW, Lively MO, Postma GN, Belafsky PC, Birchall M, Koufman JA (январь 2006 г.). «Влияние пепсина на реакцию белков стресса гортани (Sep70, Sep53 и Hsp70): роль в ларингофарингеальной рефлюксной болезни». Annals of Otology, Rhinology, and Laryngology . 115 (1): 47–58. doi :10.1177/000348940611500108. PMID  16466100. S2CID  29939465.
  18. ^ ab Cox M, Nelson DR, Lehninger AL (2008). Принципы биохимии Ленингера . Сан-Франциско: WH Freeman. стр. 96. ISBN 978-0-7167-7108-1.
  19. ^ Положения P1 и P1' относятся к аминокислотным остаткам, расположенным непосредственно рядом со связью, которая должна быть расщепляема, на карбоксильной и аминостороне соответственно. См. Schechter I, Berger A (сентябрь 1968 г.). "Об активном сайте протеаз. 3. Картирование активного сайта папаина; специфические пептидные ингибиторы папаина". Biochemical and Biophysical Research Communications . 32 (5): 898–902. doi :10.1016/0006-291X(68)90326-4. PMID  5682314.
  20. ^ Goldberg HI, Dodds WJ, Gee S, Montgomery C, Zboralske FF (февраль 1969). «Роль кислоты и пепсина при остром экспериментальном эзофагите». Гастроэнтерология . 56 (2): 223–30. doi : 10.1016/S0016-5085(69)80121-6 . PMID  4884956.
  21. ^ Lillemoe KD, Johnson LF, Harmon JW (август 1982). «Роль компонентов гастродуоденального содержимого при экспериментальном кислотном эзофагите». Хирургия . 92 (2): 276–84. PMID  6808683.
  22. ^ Tamhankar AP, Peters JH, Portale G, Hsieh CC, Hagen JA, Bremner CG, DeMeester TR (ноябрь 2004 г.). «Омепразол не снижает гастроэзофагеальный рефлюкс: новые идеи с использованием многоканальной внутрипросветной импедансной технологии». Журнал желудочно-кишечной хирургии . 8 (7): 890–7, обсуждение 897–8. doi :10.1016/j.gassur.2004.08.001. PMID  15531244. S2CID  6574429.
  23. ^ Кавамура О, Аслам М, Риттманн Т, Хофманн К, Шейкер Р (июнь 2004 г.). «Физические и pH-свойства гастроэзофагеального рефлюксата: 24-часовое одновременное амбулаторное исследование импеданса и pH-мониторинга». Американский журнал гастроэнтерологии . 99 (6): 1000–10. doi :10.1111/j.1572-0241.2004.30349.x. PMID  15180717. S2CID  8530885.
  24. ^ Oelschlager BK, Quiroga E, Isch JA, Cuenca-Abente F (январь 2006 г.). «Обнаружение гастроэзофагеального и глоточного рефлюкса с использованием импеданса и 24-часового мониторинга pH у бессимптомных субъектов: определение нормальной среды». Журнал желудочно-кишечной хирургии . 10 (1): 54–62. doi :10.1016/j.gassur.2005.09.005. PMID  16368491. S2CID  41176354.
  25. ^ Mainie I, Tutuian R, Shay S, Vela M, Zhang X, Sifrim D, Castell DO (октябрь 2006 г.). «Кислотный и некислотный рефлюкс у пациентов с сохраняющимися симптомами, несмотря на терапию, подавляющую кислотность: многоцентровое исследование с использованием комбинированного амбулаторного мониторинга импеданса и pH». Gut . 55 (10): 1398–402. doi :10.1136/gut.2005.087668. PMC 1856433 . PMID  16556669. 
  26. ^ Johnston N, Wells CW, Blumin JH, Toohill RJ, Merati AL (декабрь 2007 г.). «Рецепторно-опосредованное поглощение пепсина эпителиальными клетками гортани». The Annals of Otology, Rhinology, and Laryngology . 116 (12): 934–8. doi :10.1177/000348940711601211. PMID  18217514. S2CID  32026624.
  27. ^ Johnston N, Wells CW, Samuels TL, Blumin JH (август 2010 г.). «Обоснование таргетинга пепсина при лечении рефлюксной болезни». Annals of Otology, Rhinology, and Laryngology . 119 (8): 547–58. doi :10.1177/000348941011900808. PMID  20860281. S2CID  44531943.
  28. ^ Сэмюэлс TL, Джонстон Н (ноябрь 2009 г.). «Пепсин как возбудитель воспаления при некислотном рефлюксе». Отоларингология–Хирургия головы и шеи . 141 (5): 559–63. doi :10.1016/j.otohns.2009.08.022. PMID  19861190. S2CID  23855277.
  29. ^ Balkwill F, Mantovani A (февраль 2001 г.). «Воспаление и рак: назад к Вирхову?». Lancet . 357 (9255): 539–45. doi :10.1016/S0140-6736(00)04046-0. PMID  11229684. S2CID  1730949.
  30. ^ Адамс Дж., Хайнц П., Гросс Н., Андерсен П., Эвертс Э., Вакс М., Коэн Дж. (март 2000 г.). «Стимулирование канцерогенеза кислотой/пепсином в защечном мешке хомяка». Архивы отоларингологии–хирургии головы и шеи . 126 (3): 405–9. doi :10.1001/archotol.126.3.405. PMID  10722017.
  31. ^ Knight J, Lively MO, Johnston N, Dettmar PW, Koufman JA (август 2005 г.). «Чувствительный иммуноферментный анализ пепсина для обнаружения ларингофарингеального рефлюкса». The Laryngoscope . 115 (8): 1473–8. doi :10.1097/01.mlg.0000172043.51871.d9. PMID  16094128. S2CID  2196018.
  32. ^ Сэмюэлс TL, Джонстон Н (март 2010). «Пепсин как маркер экстраэзофагеального рефлюкса». Анналы отологии, ринологии и ларингологии . 119 (3): 203–8. doi :10.1177/000348941011900310. PMID  20392035. S2CID  29266257.
  33. ^ Bardhan KD, Strugala V, Dettmar PW (2012). «Reflux revisited: advancing the role of pepsin» (Пересмотр рефлюкса: продвижение роли пепсина). International Journal of Otolaryngology (Международный журнал отоларингологии) . 2012 : 646901. doi : 10.1155/2012/646901 . PMC 3216344. PMID  22242022 . 
  34. ^ Marciniszyn J, Hartsuck JA, Tang J (1977). "Механизм ингибирования пепстатина". Кислотные протеазы: структура, функция и биология . Достижения в экспериментальной медицине и биологии. Т. 95. С. 199–210. doi :10.1007/978-1-4757-0719-9_12. ISBN 978-1-4757-0721-2. PMID  339690.
  35. ^ Husain SS, Ferguson JB, Fruton JS (ноябрь 1971 г.). «Бифункциональные ингибиторы пепсина». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 68 (11): 2765–8. Bibcode :1971PNAS...68.2765H. doi : 10.1073/pnas.68.11.2765 . PMC 389520 . PMID  4941985. 
  36. ^ ab Ng KK, Петерсен Дж. Ф., Черней М. М., Гарен С., Залаторис Дж. Дж., Рао-Найк С., Данн Б. М., Марцен М. Р., Пеанаски Р. Дж., Джеймс М. Н. (август 2000 г.). «Структурная основа ингибирования свиного пепсина ингибитором пепсина-3 Ascaris». Структурная биология природы . 7 (8): 653–7. дои : 10.1038/77950. PMID  10932249. S2CID  39440342.
  37. ^ Нортроп Х. Дж. (1932). «История выделения кристаллического пепсина и трипсина». The Scientific Monthly . 35 (4): 333–340. Bibcode : 1932SciMo..35..333N.
  38. ^ Гринвелл П., Ноулз Дж. Р., Шарп Х. (июнь 1969 г.). «Ингибирование реакций, катализируемых пепсином, продуктами и аналогами продуктов. Кинетические доказательства упорядоченного высвобождения продуктов». Биохимический журнал . 113 (2): 363–8. doi :10.1042/bj1130363. PMC 1184643. PMID  4897199 . 
  39. ^ Samloff IM, O'Dell C (август 1985). «Ингибирование пептической активности сукральфатом». The American Journal of Medicine . 79 (2C): 15–8. doi :10.1016/0002-9343(85)90566-2. PMID  3929601.
  40. ^ Kun LY (2006). Микробная биотехнология: принципы и применение (2-е изд.). Сингапур: World Scientific Publishing Company. ISBN 981-256-677-5.
  41. ↑ Патент США 2259543, Биллингс Х.Дж., «Укрепленные злаки», опубликован в 1938 году, передан Cream of Wheat Corporation 
  42. ^ Смит Э. Р. (сентябрь 1933 г.). «Желатиназа и метод Гейтса-Гилмана-Каугилла оценки пепсина». Журнал общей физиологии . 17 (1): 35–40. doi :10.1085/jgp.17.1.35. PMC 2141270. PMID  19872760 . 
  43. ^ Фалькенбург В.Дж., ван Шаарденбург Д., Оойеваар-де Хир П., Цанг-А-Сджо М.В., Бултинк И.Е., Воскуйл А.Е., Бентлаге А.Е., Видарссон Г., Вольбинк Г., Риспенс Т (январь 2017 г.). «Антишарнирные антитела распознают неоэпитопы, ограниченные подклассом IgG и протеазой». Журнал иммунологии . 198 (1): 82–93. doi : 10.4049/jimmunol.1601096 . ПМИД  27864476.
  44. ^ Лейн Д.С., Харлоу Э. (1988). Антитела: лабораторное руководство . Колд Спринг Харбор, Нью-Йорк: Лаборатория Колд Спринг Харбор. стр. A2926. ISBN 0-87969-314-2.
  45. ^ "Пепсин". Исследователь ферментов . Merck KGaA.

Внешние ссылки