Гликозаминогликаны [1] ( ГАГ ) или мукополисахариды [2] представляют собой длинные линейные полисахариды , состоящие из повторяющихся дисахаридных единиц (т. е. двухсахарных единиц). Повторяющаяся двухсахарная единица состоит из уронового сахара и аминосахара , за исключением случая сульфатированного гликозаминогликана кератана , где вместо уронового сахара находится галактозная единица. [3] ГАГ встречаются у позвоночных, беспозвоночных и бактерий. [4]
Поскольку ГАГ являются высокополярными молекулами и притягивают воду, организм использует их в качестве смазок или амортизаторов.
Гликозаминогликаны сильно различаются по молекулярной массе, структуре дисахарида и сульфатированию . Это связано с тем, что синтез ГАГ не управляется шаблонами, как белки или нуклеиновые кислоты, а постоянно изменяется под воздействием ферментов обработки. [5]
ГАГ подразделяются на четыре группы на основе их основных дисахаридных структур: [6]
Гиалуроновая кислота (также известная как гиалуронан), которая синтезируется интегральными мембранными синтазы, которые немедленно секретируют динамически удлиненную дисахаридную цепь. [ необходимо разъяснение ]
HSGAG и CSGAG
HSGAG и CSGAG модифицированные протеогликаны сначала начинаются с консенсусного мотива Ser-Gly/Ala-X-Gly в основном белке. Конструкция тетрасахаридного линкера, который состоит из -GlcAβ1–3Galβ1–3Galβ1–4Xylβ1-O-(Ser)-, где ксилозилтрансфераза , β4-галактозилтрансфераза (GalTI), β3-галактозилтрансфераза (GalT-II) и β3-GlcA трансфераза (GlcAT-I) переносят четыре моносахарида, начинает синтез модифицированного GAG белка. Первая модификация тетрасахаридного линкера определяет, будут ли добавлены HSGAG или CSGAG. Добавление GlcNAc способствует добавлению HSGAG, в то время как добавление GalNAc к тетрасахаридному линкеру способствует развитию CSGAG. [6] GlcNAcT-I переносит GlcNAc в тетрасахаридный линкер, который отличается от гликозилтрансферазы GlcNAcT-II, фермента, который используется для создания HSGAG. Было показано, что EXTL2 и EXTL3, два гена в семействе супрессоров опухолей EXT, обладают активностью GlcNAcT-I. Наоборот, GalNAc переносится в линкер ферментом GalNAcT для инициирования синтеза CSGAG, фермента, который может иметь или не иметь отличную активность по сравнению с активностью трансферазы GalNAc хондроитинсинтазы. [6]
Что касается HSGAG, мультимерный фермент, кодируемый EXT1 и EXT2 семейства генов EXT, переносит как GlcNAc, так и GlcA для удлинения цепи HSGAG. Во время удлинения HSGAG динамически модифицируется, сначала N-деацетилазой, N-сульфотрансферазой ( NDST1 ), которая является бифункциональным ферментом, который отщепляет N-ацетильную группу от GlcNAc и затем сульфатирует N-положение. Затем C-5 уронилэпимераза преобразует d-GlcA в l-IdoA с последующим 2- O -сульфатированием уронового кислого сахара 2- O -сульфотрансферазой ( гепарансульфат 2-O-сульфотрансфераза ). Наконец, положения 6- O и 3- O фрагментов GlcNAc сульфатируются 6- O ( гепарансульфат 6-O-сульфотрансферазой ) и 3-O (3-OST) сульфотрансферазами.
Хондроитинсульфат и дерматансульфат, которые составляют CSGAG, отличаются друг от друга наличием эпимеров GlcA и IdoA соответственно. Подобно образованию HSGAG, уронилэпимераза C-5 преобразует d-GlcA в l-IdoA для синтеза дерматансульфата. Происходят три события сульфатирования цепей CSGAG: 4- O и/или 6- O сульфатирование GalNAc и 2- O сульфатирование уроновой кислоты. Четыре изоформы 4 -O GalNAc сульфотрансфераз (C4ST-1, C4ST-2, C4ST-3 и D4ST-1) и три изоформы 6- O GalNAc сульфотрансфераз (C6ST, C6ST-2 и GalNAc4S-6ST) отвечают за сульфатирование GalNAc. [7]
Типы кератансульфатов
В отличие от HSGAG и CSGAG, третий класс GAG, принадлежащих к типам кератансульфатов , направлен на биосинтез через определенные мотивы белковой последовательности. Например, в роговице и хряще домен кератансульфата аггрекана состоит из серии тандемно повторяющихся гексапептидов с консенсусной последовательностью E(E/L)PFPS. [8] Кроме того, для трех других кератансульфатированных протеогликанов, люмикана , кератокана и мимекана ( OGN ), консенсусная последовательность NX(T/S) вместе с вторичной структурой белка была определена как участвующая в N -связанном удлинении олигосахарида с кератансульфатом. [8] Удлинение кератансульфата начинается на невосстанавливающих концах трех связующих олигосахаридов, которые определяют три класса кератансульфатов. Кератансульфат I (KSI) связан с N -связью через олигосахарид-предшественник типа с высоким содержанием маннозы. Кератансульфат II (KSII) и кератансульфат III (KSIII) связаны O -связями, причем связи KSII идентичны связям в структуре ядра муцина , а KSIII связан с 2 -O -маннозой. Удлинение полимера кератансульфата происходит посредством гликозилтрансферазного присоединения Gal и GlcNAc. Присоединение галактозы происходит в основном посредством фермента β-1,4-галактозилтрансферазы (β4Gal-T1), в то время как ферменты, ответственные за β-3-N-ацетилглюкозамин, не были четко идентифицированы. Наконец, сульфатирование полимера происходит в 6-м положении обоих остатков сахара. Фермент KS-Gal6ST ( CHST1 ) переносит сульфатные группы на галактозу, в то время как N-ацетилглюкозаминил-6-сульфотрансфераза (GlcNAc6ST) ( CHST2 ) переносит сульфатные группы на терминальный GlcNAc в кератансульфате. [9]
Класс гиалуроновой кислоты
Четвертый класс ГАГ, гиалуроновая кислота (ГК), не сульфатируется и синтезируется тремя трансмембранными белками-синтазами HAS1 , HAS2 и HAS3 . HA, линейный полисахарид, состоит из повторяющихся дисахаридных единиц →4)GlcAβ(1→3)GlcNAcβ(1→ и имеет очень высокую молекулярную массу, в диапазоне от 10 5 до 10 7 Да. Каждый фермент HAS способен к трансгликозилированию при поставке с UDP-GlcA и UDP-GlcNAc. [10] [11] HAS2 отвечает за очень большие полимеры гиалуроновой кислоты, в то время как меньшие размеры HA синтезируются HAS1 и HAS3. Хотя каждая изоформа HAS катализирует одну и ту же биосинтетическую реакцию, каждая изоформа HAS активна независимо. Также было показано, что изоформы HAS имеют разные значения K m для UDP-GlcA и UDPGlcNAc. [12] Считается, что благодаря различиям в активности и экспрессии ферментов широкий спектр биологических функций, опосредованных HA, может быть регулируется, например, его участие в регуляции нейронных стволовых клеток в субгранулярной зоне мозга.
Фармакодинамика
HSGAG
Эндогенный гепарин локализуется и хранится в секреторных гранулах тучных клеток . Гистамин , который присутствует в гранулах, протонируется (H 2 A 2+ ) при pH внутри гранул (5,2–6,0), поэтому считается, что гепарин, который имеет сильный отрицательный заряд, выполняет функцию электростатически удерживать и хранить гистамин. [13] В клинике гепарин вводят в качестве антикоагулянта, а также он является препаратом первой линии при тромбоэмболических заболеваниях. [14] [15] Гепарансульфат (ГС) обладает многочисленными биологическими активностями и функциями, включая клеточную адгезию, регуляцию роста и пролиферации клеток, процессы развития, связывание липопротеинлипазы и других белков с клеточной поверхностью, ангиогенез, вирусную инвазию и метастазирование опухолей. [13]
CSGAG взаимодействуют с белками, связывающими гепарин, в частности, взаимодействия дерматансульфата с фактором роста фибробластов FGF-2 и FGF-7 были вовлечены в клеточную пролиферацию и заживление ран [16], в то время как взаимодействия с печеночным фактором роста/фактором рассеивания (HGF/SF) активируют сигнальный путь HGF/SF ( c-Met ) через его рецептор. CSGAG важны для обеспечения поддержки и адгезии в костях, коже и хрящах. Другие биологические функции, для которых CSGAG, как известно, играют критические функции, включают ингибирование роста аксонов и регенерации в развитии ЦНС, роль в развитии мозга, нейритогенную активность и патогенную инфекцию. [17]
Кератансульфаты
Одной из основных функций третьего класса ГАГ, кератансульфатов, является поддержание гидратации тканей. [18] Кератансульфаты находятся в костях, хрящах и роговице глаза. [19] В нормальной роговице дерматансульфат полностью гидратирован, тогда как кератансульфат гидратирован лишь частично, что предполагает, что кератансульфат может вести себя как динамически контролируемый буфер для гидратации. [18] При таких болезненных состояниях, как макулярная дистрофия роговицы , при которых уровни ГАГ, таких как КС, изменяются, потеря гидратации в строме роговицы считается причиной помутнения роговицы, тем самым подтверждая давнюю гипотезу о том, что прозрачность роговицы зависит от надлежащих уровней кератансульфата. Кератансульфатные ГАГ обнаружены во многих других тканях, помимо роговицы, где они, как известно, регулируют адгезию макрофагов , образуют барьеры для роста нейритов , регулируют имплантацию эмбриона в эндометриальную оболочку матки во время менструальных циклов и влияют на подвижность эндотелиальных клеток роговицы. [18] Подводя итог, можно сказать, что КС играет антиадгезивную роль, что предполагает очень важные функции КС в подвижности и прикреплении клеток, а также в других потенциальных биологических процессах.
Дерматансульфаты
Дерматансульфаты функционируют в коже, сухожилиях, кровеносных сосудах и сердечных клапанах. [19]
Гиалуроновая кислота
Гиалуроновая кислота является основным компонентом синовиальных тканей и жидкости , а также основным веществом других соединительных тканей. Гиалуроновая кислота связывает клетки вместе, смазывает суставы и помогает поддерживать форму глазных яблок. [ 19] Вязкоупругость гиалуроновой кислоты делает ее идеальной для смазки суставов и поверхностей, которые движутся друг относительно друга, таких как хрящ. Раствор гиалуроновой кислоты при низком напряжении сдвига имеет гораздо более высокую вязкость, чем при высоком напряжении сдвига. [20] Гиалуронидаза , фермент, вырабатываемый лейкоцитами, сперматозоидами и некоторыми бактериями, расщепляет гиалуроновую кислоту, в результате чего раствор становится более жидким. [19]
In vivo гиалуроновая кислота образует беспорядочно изогнутые спирали, которые переплетаются, образуя гиалуроновую сеть, замедляя диффузию и формируя диффузионный барьер, который регулирует транспорт веществ между клетками. Например, гиалуронан помогает разделять плазменные белки между сосудистыми и внесосудистыми пространствами, что влияет на растворимость макромолекул в интерстиции, изменяет химическое равновесие и стабилизирует структуру коллагеновых волокон. [20]
Другие функции включают матричные взаимодействия с белками, связывающими гиалуронан, такими как гиалуронектин, глиальный белок, связывающий гиалуронан, обогащенный мозгом белок, связывающий гиалуронан, коллаген VI , TSG-6 и ингибитор интер-альфа-трипсина . Взаимодействия клеточной поверхности с участием гиалуронана представляют собой его хорошо известное соединение с CD44 , которое может быть связано с прогрессированием опухоли, а также с RHAMM ( рецептор подвижности, опосредованный гиалуронаном ), который участвует в процессах развития, метастазах опухолей и патологических репаративных процессах.
Фибробласты, мезотелиальные клетки и некоторые типы стволовых клеток окружают себя перицеллюлярным «пальто» , часть которого состоит из гиалуронана, чтобы защитить себя от бактерий, эритроцитов или других молекул матрикса. Например, в отношении стволовых клеток гиалуронан вместе с хондроитинсульфатом помогает формировать нишу стволовых клеток . Стволовые клетки защищены от воздействия факторов роста щитом из гиалуронана и минимально сульфатированного хондроитинсульфата. Во время деления предшественника дочерняя клетка перемещается за пределы этого перицеллюлярного щита, где она затем может подвергнуться влиянию факторов роста для дальнейшей дифференциации.
^ Эско, Джеффри Д.; Кимата, Кодзи; Линдаль, Ульф (2009). "Глава 16: Протеогликаны и сульфатированные гликозаминогликаны". Основы гликобиологии . Cold Spring Harbor Laboratory Press. ISBN 978-0879695590.
^ ДеАнджелис, Пол Л. (2002-11-01). «Эволюция гликозаминогликанов и их гликозилтрансфераз: значение для внеклеточных матриксов животных и капсул патогенных бактерий». The Anatomical Record . 268 (3): 317–326. doi : 10.1002/ar.10163 . ISSN 0003-276X. PMID 12382327. S2CID 38827411.
^ Caligur, Vicki (2008). "Сульфатирование гликозаминогликанов и сигнализация" . Получено 25 ноября 2012 г.
^ abc Sasisekharan, Ram; Raman, Rahul; Prabhakar, Vikas (август 2006 г.). «Подход Glycomics к структурно-функциональным связям гликозаминогликанов». Annual Review of Biomedical Engineering . 8 (1): 181–231. doi : 10.1146/annurev.bioeng.8.061505.095745 . PMID 16834555.
^ Куше-Гуллберг М., Кьеллен Л. (2003). «Сульфотрансферазы в биосинтезе гликозаминогликанов». Current Opinion in Structural Biology . 13 (5): 605–11. doi :10.1016/j.sbi.2003.08.002. PMID 14568616.
^ ab Funderburgh JL. (2002). «Биосинтез сульфата кератана». IUBMB Life . 54 (4): 187–94. doi :10.1080/15216540214932. PMC 2874674. PMID 12512857 .
^ Ямамото Y, Такахаши I, Огата N, Наказава K (2001). «Очистка и характеристика N-ацетилглюкозаминилсульфотрансферазы из куриных роговиц». Архивы биохимии и биофизики . 392 (1): 87–92. doi :10.1006/abbi.2001.2422. PMID 11469798.
^ Yoshida M, Itano N, Yamada Y, Kimata K (2000). «In vitro синтез гиалуронана одним белком, полученным из гена мыши HAS1, и характеристика аминокислотных остатков, необходимых для этой активности». Журнал биологической химии . 275 (1): 497–506. doi : 10.1074/jbc.275.1.497 . PMID 10617644.
^ DeAngelis PL, Weigel PH (1994). «Иммунохимическое подтверждение первичной структуры стрептококковой гиалуронатсинтазы и синтеза высокомолекулярного продукта рекомбинантным ферментом». Биохимия . 33 (31): 9033–39. doi :10.1021/bi00197a001. PMID 8049203.
^ Itano N; Sawai T; Yoshida M; Lenas P; Yamada Y; Imagawa M; Shinomura T; Hamaguchi M; Yoshida Y; Ohnuki Y; Miyauchi S; Spicer AP; McDonald JA; Kimata K (1999). «Три изоформы синтазы гиалуроновой кислоты млекопитающих обладают различными ферментативными свойствами». Журнал биологической химии . 274 (35): 25085–92. doi : 10.1074/jbc.274.35.25085 . PMID 10455188.
^ ab Rabenstein DL. (2002). «Гепарин и гепарансульфат: структура и функция». Natural Product Reports . 19 (3): 312–31. doi :10.1039/B100916H. PMID 12137280.
^ Jin L, Abrahams JP, Skinner R, Petitou M, Pike RN, Carrell RW (1997). «Антикоагулянтная активация антитромбина гепарином». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 94 (26): 14683–88. Bibcode : 1997PNAS...9414683J. doi : 10.1073 /pnas.94.26.14683 . PMC 25092. PMID 9405673.
^ Роден, Л. (1989). Лейн, Д. А. (ред.). Гепарин: химические и биологические свойства, клиническое применение . CRC Press, Inc. стр. 1.
^ ab Trowbridge JM, Gallo RL (2002). «Дерматансульфат: новые функции старого гликозаминогликана». Glycobiology . 12 (9): 117R–125R. doi : 10.1093/glycob/cwf066 . PMID 12213784.
^ Sugahara K, Mikami T, Uyama T, Mizuguchi S, Nomura K, Kitagawa H (2003). «Последние достижения в структурной биологии хондроитинсульфата и дерматансульфата». Current Opinion in Structural Biology . 13 (5): 612–20. doi :10.1016/j.sbi.2003.09.011. PMID 14568617.
^ ab Laurent TC, Laurent UB, Fraser JR (1996). «Структура и функция гиалуронана: обзор». Иммунология и клеточная биология . 74 (2): A1-7. doi :10.1038/icb.1996.32. PMID 8724014.
^ Funderburgh JL. (2000). «Кератансульфат: структура, биосинтез и функция». Glycobiology . 10 (10): 951–58. doi : 10.1093/glycob/10.10.951 . PMID 11030741.
^ Галлахер, Дж. Т., Лион, М. (2000). «Молекулярная структура гепарансульфата и взаимодействия с факторами роста и морфогенами». В Iozzo, М., В. (ред.). Протеогликаны: структура, биология и молекулярные взаимодействия . Нью-Йорк: Marcel Dekker Inc. стр. 27–59. ISBN978-0-8247-0334-9.{{cite book}}: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )