Фактор роста тромбоцитов ( PDGF ) является одним из многочисленных факторов роста , которые регулируют рост и деление клеток . В частности, PDGF играет важную роль в формировании кровеносных сосудов , росте кровеносных сосудов из уже существующей ткани кровеносных сосудов, митогенезе, т. е. пролиферации мезенхимальных клеток, таких как фибробласты, остеобласты, теноциты, сосудистые гладкомышечные клетки и мезенхимальные стволовые клетки, а также хемотаксисе , направленной миграции мезенхимальных клеток. Фактор роста тромбоцитов представляет собой димерный гликопротеин , который может состоять из двух субъединиц A (PDGF-AA), двух субъединиц B (PDGF-BB) или по одной каждой из них (PDGF-AB).
PDGF [1] [2] является мощным митогеном для клеток мезенхимального происхождения, включая фибробласты , гладкомышечные клетки и глиальные клетки . Как у мышей, так и у людей сигнальная сеть PDGF состоит из пяти лигандов, PDGF-AA через -DD (включая -AB), и двух рецепторов, PDGFRalpha и PDGFRbeta. Все PDGF функционируют как секретируемые, связанные дисульфидом гомодимеры, но только PDGFA и B могут образовывать функциональные гетеродимеры.
Хотя PDGF синтезируется, [3] хранится (в альфа-гранулах тромбоцитов ) [4] и высвобождается тромбоцитами при активации, он также вырабатывается другими клетками, включая гладкомышечные клетки, активированные макрофаги и эндотелиальные клетки [5].
Рекомбинантный PDGF используется в медицине для лечения хронических язв , заболеваний глазной поверхности, а также в ортопедической хирургии и пародонтологии в качестве альтернативы костной аутотрансплантации для стимуляции регенерации и восстановления костей.
Существует пять различных изоформ PDGF, которые активируют клеточный ответ через два различных рецептора . Известные лиганды включают: PDGF-AA ( PDGFA ), -BB ( PDGFB ), -CC ( PDGFC ), и -DD ( PDGFD ), и -AB ( гетеродимер PDGFA и PDGFB ) . Лиганды взаимодействуют с двумя мономерами рецепторов тирозинкиназы , PDGFRα ( PDGFRA ) и -Rβ ( PDGFRB ). [6] Семейство PDGF также включает несколько других членов семейства, включая подсемейство VEGF . [7]
Рецептор PDGF, PDGFR, классифицируется как рецепторная тирозинкиназа (RTK), тип рецептора клеточной поверхности . Были идентифицированы два типа PDGFR: PDGFR альфа-типа и бета-типа. [8] Альфа-тип связывается с PDGF-AA , PDGF-BB и PDGF-AB, тогда как PDGFR бета-типа связывается с высокой аффинностью с PDGF-BB и PDGF-AB. [9] PDGF связывается с карманом связывания лиганда PDGFR, расположенным во втором и третьем доменах иммуноглобулина. [10] После активации PDGF эти рецепторы димеризуются и «включаются» путем автофосфорилирования нескольких участков на их цитозольных доменах, которые служат для опосредования связывания кофакторов и последующей активации передачи сигнала , например, через путь PI3K или через активацию пути STAT3 , опосредованную активными формами кислорода (ROS) . [11] Нижестоящие эффекты этого включают регуляцию экспрессии генов и клеточного цикла . Роль PI3K была исследована несколькими лабораториями. Накапливающиеся данные свидетельствуют о том, что, хотя эта молекула, в целом, является частью комплекса сигнализации роста, она играет более глубокую роль в контроле миграции клеток. [12] Различные изоформы лиганда имеют различное сродство к изоформам рецептора, а изоформы рецептора могут по-разному образовывать гетеро- или гомодимеры. Это приводит к специфичности нижестоящей сигнализации. Было показано, что онкоген sis происходит от гена B-цепи PDGF . PDGF-BB является лигандом с самым высоким сродством к PDGFR-бета; PDGFR-бета является ключевым маркером активации звездчатых клеток печени в процессе фиброгенеза . [ необходима цитата ]
PDGF являются митогенными на ранних стадиях развития, управляя пролиферацией недифференцированной мезенхимы и некоторых популяций предшественников . На более поздних стадиях созревания сигнализация PDGF участвует в ремоделировании тканей и клеточной дифференцировке, а также в индуктивных событиях, связанных с паттернированием и морфогенезом. В дополнение к управлению мезенхимальной пролиферацией, было показано, что PDGF направляют миграцию, дифференцировку и функцию различных специализированных мезенхимальных и мигрирующих типов клеток, как во время развития, так и у взрослых животных. [13] [14] [15] Другие факторы роста в этом семействе включают сосудистые эндотелиальные факторы роста B и C (VEGF-B, VEGF-C) [16] [17] , которые активны в ангиогенезе и росте эндотелиальных клеток, и фактор роста плаценты (PlGF), который также активен в ангиогенезе. [18]
PDGF играет роль в эмбриональном развитии, пролиферации клеток, миграции клеток и ангиогенезе . [19] Чрезмерная экспрессия PDGF связана с несколькими заболеваниями, такими как атеросклероз , фиброзные расстройства и злокачественные новообразования. Синтез происходит из-за внешних стимулов, таких как тромбин, низкое напряжение кислорода или другие цитокины и факторы роста. [20]
PDGF является необходимым элементом в клеточном делении фибробластов , типа клеток соединительной ткани, которые особенно распространены при заживлении ран. [20] По сути, PDGF позволяют клетке пропускать контрольные точки G1 для деления. [21] Было показано, что в моноцитах-макрофагах и фибробластах экзогенно вводимый PDGF стимулирует хемотаксис, пролиферацию и экспрессию генов и значительно увеличивает приток воспалительных клеток и фибробластов, ускоряя образование внеклеточного матрикса и коллагена и, таким образом, сокращая время, необходимое для процесса заживления. [22]
С точки зрения остеогенной дифференциации мезенхимальных стволовых клеток, сравнивая PDGF с эпидермальным фактором роста (EGF), который также участвует в стимуляции роста клеток, пролиферации и дифференциации, [23] было показано, что МСК имеют более сильную остеогенную дифференциацию в костеобразующие клетки при стимуляции эпидермальным фактором роста (EGF) по сравнению с PDGF. Однако сравнение сигнальных путей между ними показывает, что путь PI3K активируется исключительно PDGF, а EGF не оказывает никакого эффекта. Химическое ингибирование пути PI3K в стимулированных PDGF клетках сводит на нет дифференциальный эффект между двумя факторами роста и фактически дает PDGF преимущество в остеогенной дифференциации. [23] Вортманнин является ингибитором, специфичным для PI3K, и обработка клеток вортманнином в сочетании с PDGF привела к усилению дифференциации остеобластов по сравнению с одним только PDGF, а также по сравнению с EGF. [23] Эти результаты показывают, что добавление вортманнина может значительно усилить реакцию клеток на остеогенную линию в присутствии PDGF и, таким образом, может снизить потребность в более высоких концентрациях PDGF или других факторов роста, делая PDGF более жизнеспособным фактором роста для остеогенной дифференцировки, чем другие, более дорогие факторы роста, которые в настоящее время используются в этой области, такие как BMP2. [24]
Известно также, что PDGF поддерживает пролиферацию клеток-предшественников олигодендроцитов (OPC). [25] [26] Также было показано, что фактор роста фибробластов (FGF) активирует сигнальный путь, который положительно регулирует рецепторы PDGF в OPC. [27]
PDGF был одним из первых охарактеризованных факторов роста [28] и привел к пониманию механизма многих сигнальных путей факторов роста . [ необходима ссылка ] Первый сконструированный доминантно-негативный белок был разработан для ингибирования PDGF [29]
Рекомбинантный PDGF используется для лечения хронических язв , а также в ортопедической хирургии и пародонтологии для стимуляции регенерации и восстановления костей. [30] PDGF может быть полезен при использовании сам по себе или, особенно, в сочетании с другими факторами роста для стимуляции заживления мягких и твердых тканей (Lynch et al. 1987, 1989, 1991, 1995).
Как и многие другие факторы роста, связанные с болезнью, PDGF и его рецепторы создали рынок для антагонистов рецепторов для лечения болезней. Такие антагонисты включают (но не ограничиваются) специфические антитела , нацеленные на интересующую молекулу , которые действуют только нейтрализующим образом. [31]
Онкоген «c-Sis» происходит от PDGF. [26] [32]
Было показано, что связанное с возрастом снижение регуляции рецептора PDGF на островковых бета-клетках предотвращает пролиферацию островковых бета-клеток как в клетках животных, так и человека, а его повторная экспрессия запускает пролиферацию бета-клеток и корректирует регуляцию глюкозы посредством секреции инсулина. [33] [34]
Невирусный «био-патч» PDGF может регенерировать отсутствующую или поврежденную кость, доставляя ДНК в наночастицах непосредственно в клетки через гены. Среди потенциальных применений — восстановление переломов костей, исправление черепно-лицевых дефектов и улучшение зубных имплантатов. Пластырь использует коллагеновую платформу, засеянную частицами, содержащими гены, необходимые для производства кости. В экспериментах новая кость полностью покрывала раны черепа у подопытных животных и стимулировала рост стромальных клеток костного мозга человека . [35] [36]
Было показано, что добавление PDGF в определенные временные точки стабилизирует сосудистую сеть в коллаген -гликозаминогликановых каркасах. [37]
Гены человека, кодирующие белки, принадлежащие к семейству факторов роста тромбоцитов, включают:
Демонстрация безопасности и эффективности rhPDGF-BB в заживлении хронических язв стопы у пациентов с диабетом и регенерации альвеолярной (челюстной) кости, утраченной из-за хронической инфекции, вызванной пародонтозом, привела к двум одобренным FDA продуктам на основе этой молекулы.