Эмбриональный фибробласт мыши

MEF (мышиные эмбриональные фибробласты) на чашке с тканевой культурой.

Фотография эмбриональных стволовых клеток человека (колонии клеток в центре). Веретенообразные клетки, окружающие колонию стволовых клеток, представляют собой MEF.

Мышиные эмбриональные фибробласты (MEF) представляют собой тип фибробластов , полученных из эмбриона мыши . При культивировании in vitro MEF имеют веретенообразную форму , что является типичной особенностью фибробластов. MEF представляет собой ограниченную клеточную линию. После нескольких передач MEF стареют и, наконец, вымирают. Тем не менее, исследователи могут использовать несколько стратегий, таких как заражение вирусом или повторная передача, для иммортализации клеток MEF, что может позволить MEF расти бесконечно, несмотря на некоторые изменения в характеристиках. ^{[1] [2]}

MEF широко используются в исследованиях в области медико-биологических наук, особенно в биологии стволовых клеток .

Подготовка и культура

Для приготовления МЭФ необходимы беременные самки мышей. После убийства самки мыши исследователь должен надрезать ей желудок, а затем отделить эмбрион от плаценты в защитном кожухе. Затем следует вынуть печень и голову. Наконец переварите остатки ферментами, чтобы получить отдельные изолированные клетки и культивировать клетки в чашках для тканевых культур . Клетки MEF можно культивировать in vitro в среде DMEM с 10% FBS . Чтобы передать MEF, исследователи должны использовать трипсин для переваривания клеток (заставляя их отделяться от поверхности) и перенести 1/5 переваренных клеток в новую чашку. ^{[3] [1]}

Применение в биологии

В 1962 году Джордж Тодаро и Говард Грин, два исследователя из Нью-Йоркского университета , увековечили MEF путем повторной передачи. Эти клетки превратились в широко используемую клеточную линию NIH 3T3 . ^[4]

MEF, обработанные митомицином или гамма-лучами (такая обработка заставляет MEF останавливать митоз ), широко используются в качестве питательных веществ в культуре эмбриональных стволовых клеток , поскольку они могут имитировать микроокружение эмбриона. ^[5] В 2006 году Шинья Яманака перепрограммировал MEF в ИПСК, введя 4 фактора, что является примечательным событием в развитии биологии стволовых клеток. ^[6]

Смотрите также

• Фибробласт
• Эмбриональные стволовые клетки

Рекомендации

1. Цзянь-мин Сюй (2005). «Подготовка, культивирование и иммортализация мышиных эмбриональных фибробластов». Современные протоколы молекулярной биологии . 28 (1): 1–8.
2. Мелисса М. Сент-Аманд; Джон А. Ганновер2; Джозеф Шилоах1 (2016). «Сравнение стратегий иммортализации эмбриональных фибробластов мыши». J Биологические методы . 3 (2): е41. doi : 10.14440/jbm.2016.110 (неактивен 20 мая 2024 г.).{{cite journal}}: CS1 maint: DOI неактивен по состоянию на май 2024 г. ( ссылка ) CS1 maint: числовые имена: список авторов ( ссылка )
3. ЛАНКТОТ. «ПОДГОТОВКА И ЗАМОРАЖИВАНИЕ ЭМБРИОНАЛЬНЫХ ФИБРОБЛАСТОВ МЫШИ» (PDF) . Лаборатория LANCTÔT, Массачусетский технологический институт.^{[ постоянная мертвая ссылка ]}
4. ТОДАРО Г.Дж., ЗЕЛЕНЫЙ Х (1963). «Количественные исследования роста клеток эмбрионов мышей в культуре и их развития в устоявшиеся линии». Дж. Клеточная Биол . 17 (2): 299–313. дои : 10.1083/jcb.17.2.299. ПМК 2106200 . ПМИД  13985244. 
5. Регад Т., Сэйерс Т., Рис Р., ред. (2015). Принципы биологии стволовых клеток и рака: будущие применения и терапия . Джон Уайли и сыновья. стр. 3–5. ISBN 978-1-118-67062-0.
6. Кадзутоши Такахаши, Шинья Яманака (25 августа 2006 г.). «Индукция плюрипотентных стволовых клеток из эмбриональных и взрослых культур фибробластов мышей с помощью определенных факторов». Клетка . 126 (4): 663–676. doi :10.1016/j.cell.2006.07.024. hdl : 2433/159777 . ПМИД  16904174.