stringtranslate.com

Эмбриональные стволовые клетки

Эмбриональные стволовые клетки человека в культуре клеток
Плюрипотентность: Эмбриональные стволовые клетки способны развиваться в клетки любого типа, за исключением клеток плаценты. Только эмбриональные стволовые клетки морулы тотипотентны : способны развиваться в клетки любого типа, включая клетки плаценты.

Эмбриональные стволовые клетки ( ЭСК ) — это плюрипотентные стволовые клетки , полученные из внутренней клеточной массы бластоцисты , эмбриона на ранней стадии, предшествующего имплантации . [1] [2] Человеческие эмбрионы достигают стадии бластоцисты через 4–5 дней после оплодотворения , когда они состоят из 50–150 клеток. Выделение внутренней клеточной массы (эмбриобласта) с помощью иммунохирургии приводит к разрушению бластоцисты, процессу , который поднимает этические вопросы , в том числе о том, имеют ли эмбрионы на предимплантационной стадии те же моральные соображения, что и эмбрионы на постимплантационной стадии развития. . [3] [4]

В настоящее время исследователи уделяют большое внимание терапевтическому потенциалу эмбриональных стволовых клеток, а клиническое использование является целью многих лабораторий. [2] Потенциальное использование включает лечение диабета и болезней сердца . [2] Клетки изучаются для использования в качестве клинической терапии, модели генетических нарушений и восстановления клеток/ДНК. Однако также сообщалось о побочных эффектах в исследованиях и клинических процессах, таких как опухоли и нежелательные иммунные реакции . [5]

Характеристики

IPS-ячейка
Транскриптом эмбриональных стволовых клеток

Эмбриональные стволовые клетки (ЭСК), полученные из стадии бластоцисты ранних эмбрионов млекопитающих, отличаются способностью дифференцироваться в любой тип эмбриональных клеток и способностью к самообновлению. Именно эти черты делают их ценными в научной и медицинской областях. ЭСК имеют нормальный кариотип , сохраняют высокую теломеразную активность и демонстрируют значительный долгосрочный пролиферативный потенциал. [6]

Плюрипотентный

Эмбриональные стволовые клетки внутренней клеточной массы являются плюрипотентными , то есть они способны дифференцироваться с образованием примитивной эктодермы, которая в конечном итоге дифференцируется во время гаструляции во все производные трех первичных зародышевых листков : эктодермы , энтодермы и мезодермы . Эти зародышевые листки образуют каждый из более чем 220 типов клеток в организме взрослого человека. При получении соответствующих сигналов ЭСК первоначально образуют клетки-предшественники , которые впоследствии дифференцируются в нужные типы клеток. Плюрипотентность отличает эмбриональные стволовые клетки от взрослых стволовых клеток , которые являются мультипотентными и могут производить только ограниченное количество типов клеток.

Самообновление и ремонт конструкции

При определенных условиях эмбриональные стволовые клетки способны неограниченно самообновляться в недифференцированном состоянии. Условия самообновления должны препятствовать слипанию клеток и поддерживать среду, поддерживающую неспециализированное состояние. [7] Обычно это делается в лаборатории с использованием сред, содержащих сыворотку и фактор, ингибирующий лейкоз, или бессывороточные добавки к средам с двумя ингибирующими препаратами («2i»), ингибитором MEK PD03259010 и ингибитором GSK-3 CHIR99021. [8]

Рост

ЭСК делятся очень часто из-за укороченной фазы G1 в их клеточном цикле . Быстрое деление клеток позволяет клеткам быстро расти в количестве, но не в размере, что важно для раннего развития эмбриона. В ЭСК белки циклин А и циклин Е , участвующие в переходе G1/S , всегда экспрессируются на высоких уровнях. [9] Циклин-зависимые киназы, такие как CDK2 , которые способствуют прогрессированию клеточного цикла, сверхактивны, отчасти из-за подавления их ингибиторов. [10] Белки ретинобластомы , которые ингибируют фактор транскрипции E2F до тех пор, пока клетка не будет готова войти в S-фазу , гиперфосфорилируются и инактивируются в ЭСК, что приводит к постоянной экспрессии генов пролиферации. [9] Эти изменения приводят к ускорению циклов деления клеток. Хотя высокие уровни экспрессии пролиферативных белков и укороченная фаза G1 связаны с поддержанием плюрипотентности, [11] [12] ЭСК, выращенные в бессывороточных условиях 2i, действительно экспрессируют гипофосфорилированные активные белки ретинобластомы и имеют удлиненную фазу G1. . [13] Несмотря на эту разницу в клеточном цикле по сравнению с ЭСК, выращенными в среде, содержащей сыворотку, эти клетки имеют схожие плюрипотентные характеристики. [14] Факторы плюрипотентности Oct4 и Nanog играют роль в транскрипционной регуляции цикла эмбриональных стволовых клеток. [15] [16]

Использование

Из-за их пластичности и потенциально неограниченной способности к самообновлению, терапия эмбриональными стволовыми клетками была предложена для регенеративной медицины и замены тканей после травм или заболеваний. Плюрипотентные стволовые клетки показали себя многообещающе при лечении ряда различных состояний, включая, помимо прочего: травмы спинного мозга , возрастную дегенерацию желтого пятна , диабет , нейродегенеративные расстройства (такие как болезнь Паркинсона ), СПИД и т. д. [ 17] Благодаря своему потенциалу в регенеративной медицине, эмбриональные стволовые клетки представляют собой возможный альтернативный источник тканей/органов, который служит возможным решением дилеммы нехватки доноров. Однако вокруг этого существуют некоторые этические противоречия (см. раздел «Этические дебаты» ниже). Помимо этих применений, ЭСК также можно использовать для исследований раннего развития человека, некоторых генетических заболеваний и токсикологических испытаний in vitro . [6]

Использование

Согласно статье 2002 года в PNAS , «эмбриональные стволовые клетки человека обладают потенциалом дифференцироваться в различные типы клеток и, таким образом, могут быть полезны в качестве источника клеток для трансплантации или тканевой инженерии». [18]

Тканевая инженерия

Эмбриоидные тельца через 24 часа после формирования.

Известно, что в тканевой инженерии использование стволовых клеток имеет важное значение. Чтобы успешно сконструировать ткань, используемые клетки должны быть способны выполнять определенные биологические функции, такие как секреция цитокинов, сигнальных молекул, взаимодействие с соседними клетками и производство внеклеточного матрикса в правильной организации. Стволовые клетки демонстрируют эти специфические биологические функции, а также способны самообновляться и дифференцироваться в один или несколько типов специализированных клеток. Эмбриональные стволовые клетки являются одним из источников, которые рассматриваются для использования в тканевой инженерии. [19] Использование эмбриональных стволовых клеток человека открыло множество новых возможностей для тканевой инженерии, однако существует множество препятствий, которые необходимо преодолеть, прежде чем эмбриональные стволовые клетки человека можно будет использовать. Предполагается, что если эмбриональные стволовые клетки можно будет изменить так, чтобы они не вызывали иммунный ответ при имплантации пациенту, то это станет революционным шагом в тканевой инженерии. [20] Эмбриональные стволовые клетки не ограничиваются тканевой инженерией.

Заместительная клеточная терапия

Исследования были сосредоточены на дифференциации ЭСК в различные типы клеток для возможного использования в качестве клеточно-заместительной терапии. Некоторые из типов клеток, которые уже существуют или разрабатываются в настоящее время, включают кардиомиоциты , нейроны , гепатоциты , клетки костного мозга , островковые клетки и эндотелиальные клетки. [21] Однако получение таких типов клеток из ЭСК не лишено препятствий, поэтому исследования были сосредоточены на преодолении этих барьеров. Например, проводятся исследования по дифференциации ЭСК в тканеспецифичные кардиомиоциты и искоренению их незрелых свойств, которые отличают их от взрослых кардиомиоцитов. [22]

Клинический потенциал

Открытие лекарств

Помимо того, что ЭСК становятся важной альтернативой трансплантации органов, они также используются в области токсикологии и в качестве клеточного скрининга для обнаружения новых химических соединений, которые могут быть разработаны в качестве низкомолекулярных лекарств . Исследования показали, что кардиомиоциты, полученные из ЭСК, используются в моделях in vitro для проверки реакции на лекарства и прогнозирования профилей токсичности. [21] Было показано, что кардиомиоциты, полученные из ЭСК, реагируют на фармакологические стимулы и, следовательно, могут использоваться для оценки кардиотоксичности, такой как тахикардия-мерцание-мерцание . [29]

Гепатоциты, полученные из ЭСК, также являются полезными моделями, которые можно использовать на доклинических стадиях открытия лекарств. Однако развитие гепатоцитов из ЭСК оказалось сложной задачей, и это затрудняет возможность тестирования метаболизма лекарств. Поэтому исследования были сосредоточены на создании полностью функциональных гепатоцитов, происходящих из ЭСК, со стабильной активностью ферментов фазы I и II. [30]

Модели генетических нарушений

Несколько новых исследований начали рассматривать концепцию моделирования генетических нарушений с помощью эмбриональных стволовых клеток. Моделирование генетических нарушений стало возможным с помощью стволовых клеток либо путем генетического манипулирования клетками, либо, в последнее время, путем получения линий больных клеток, выявленных с помощью пренатальной генетической диагностики (ПГД). Этот подход вполне может оказаться полезным при изучении таких заболеваний, как синдром ломкой Х-хромосомы , муковисцидоз и других генетических заболеваний, для которых нет надежной модельной системы.

Юрий Верлинский , российско-американский медицинский исследователь , специализирующийся на эмбриональной и клеточной генетике (генетической цитологии ), разработал методы пренатальной диагностики, позволяющие определять генетические и хромосомные нарушения на полтора месяца раньше стандартного амниоцентеза . В настоящее время эти методы используются многими беременными женщинами и будущими родителями, особенно парами, имеющими в анамнезе генетические аномалии или женщинам старше 35 лет (когда риск генетически связанных заболеваний выше). Кроме того, позволяя родителям выбрать эмбрион без генетических нарушений, они могут спасти жизни братьев и сестер, у которых уже были подобные расстройства и заболевания, используя клетки здорового потомства. [31]

Восстановление повреждений ДНК

Дифференцированные соматические клетки и ES-клетки используют разные стратегии борьбы с повреждениями ДНК. Например, фибробласты крайней плоти человека, один из типов соматических клеток, используют негомологичное соединение концов (NHEJ) , процесс восстановления ДНК, подверженный ошибкам, в качестве основного пути восстановления двухцепочечных разрывов (DSB) на всех стадиях клеточного цикла. [32] Из-за своей склонности к ошибкам NHEJ имеет тенденцию вызывать мутации в клональных потомках клетки.

ES-ячейки используют другую стратегию для работы с DSB. [33] Поскольку ES-клетки дают начало всем типам клеток организма, включая клетки зародышевой линии, мутации, возникающие в ES-клетках из-за дефектной репарации ДНК, представляют собой более серьезную проблему, чем в дифференцированных соматических клетках. Следовательно, в ES-клетках необходимы надежные механизмы для точного восстановления повреждений ДНК, а в случае неудачи восстановления — для удаления клеток с невосстановленными повреждениями ДНК. Таким образом, мышиные ES-клетки преимущественно используют высокоточную гомологичную рекомбинационную репарацию (HRR) для восстановления DSB. [33] Этот тип восстановления зависит от взаимодействия двух сестринских хромосом [ требуется проверка ] , образующихся во время S-фазы и присутствующих вместе во время G2-фазы клеточного цикла. HRR может точно восстанавливать DSB в одной сестринской хромосоме, используя неповрежденную информацию из другой сестринской хромосомы. Клетки в фазе G1 клеточного цикла (т.е. после метафазы/клеточного деления, но до следующего раунда репликации) имеют только одну копию каждой хромосомы (т.е. сестринские хромосомы отсутствуют). Мышиные ES-клетки не имеют контрольной точки G1 и не подвергаются остановке клеточного цикла при повреждении ДНК. [34] Скорее, они подвергаются запрограммированной гибели клеток (апоптозу) в ответ на повреждение ДНК. [35] Апоптоз можно использовать как надежную стратегию удаления клеток с невосстановленными повреждениями ДНК, чтобы избежать мутаций и развития рака. [36] В соответствии с этой стратегией, мышиные ES стволовые клетки имеют частоту мутаций примерно в 100 раз ниже, чем у изогенных соматических клеток мыши. [37]

Клиническое исследование

23 января 2009 года I фаза клинических испытаний по трансплантации олигодендроцитов (тип клеток головного и спинного мозга), полученных из ЭСК человека, людям с травмой спинного мозга, получила одобрение Управления по контролю за продуктами и лекарствами США (FDA), отметив его как первое в мире испытание ЭСК на человеке. [38] Исследование, приведшее к этому научному прорыву, было проведено Хансом Кейрстедом и его коллегами из Калифорнийского университета в Ирвайне при поддержке корпорации Geron Corporation из Менло-Парка, Калифорния , основанной Майклом Д. Уэстом , доктором философии. Предыдущий эксперимент показал улучшение двигательного восстановления у крыс с травмой спинного мозга после 7-дневной отсроченной трансплантации человеческих ЭСК, которые были переведены в олигодендроцитарную линию. [39] В клиническое исследование I фазы было включено около восьми-десяти пациентов с параличом нижних конечностей, у которых травмы были получены не позднее, чем за две недели до начала исследования, поскольку клетки должны быть инъецированы до того, как сможет сформироваться рубцовая ткань. Исследователи подчеркнули, что инъекции не должны полностью излечивать пациентов и восстанавливать подвижность. Основываясь на результатах испытаний на грызунах, исследователи предположили, что может произойти восстановление миелиновых оболочек и увеличение подвижности. Это первое испытание было в первую очередь предназначено для проверки безопасности этих процедур, и если все пройдет хорошо, предполагалось, что оно приведет к будущим исследованиям с участием людей с более серьезными нарушениями. [40] Исследование было приостановлено в августе 2009 года из-за опасений FDA по поводу небольшого количества микроскопических кист, обнаруженных у нескольких обработанных моделей крыс, но приостановление было снято 30 июля 2010 года. [41]

В октябре 2010 года исследователи зарегистрировали и ввели ЭСК первому пациенту в Шеперд-центре в Атланте . [42] Создатели терапии стволовыми клетками, Geron Corporation , подсчитали, что потребуется несколько месяцев, чтобы стволовые клетки реплицировались и чтобы GRNOPC1 терапия была оценена на успех или неудачу.

В ноябре 2011 года компания Geron объявила, что прекращает испытания и прекращает исследования стволовых клеток по финансовым причинам, но продолжит наблюдение за существующими пациентами и пытается найти партнера, который мог бы продолжить свои исследования. [43] В 2013 году компания BioTime , возглавляемая генеральным директором доктором Майклом Д. Уэстом , приобрела все активы Geron по производству стволовых клеток с заявленным намерением возобновить клинические испытания Geron на основе эмбриональных стволовых клеток для исследования травм спинного мозга . [44]

Компания BioTime Asterias Biotherapeutics (NYSE MKT: AST) получила премию стратегического партнерства в размере 14,3 миллиона долларов от Калифорнийского института регенеративной медицины (CIRM) за возобновление первого в мире клинического исследования на людях, основанного на эмбриональных стволовых клетках, при травмах спинного мозга. При поддержке государственных фондов Калифорнии CIRM является крупнейшим в мире спонсором исследований и разработок, связанных со стволовыми клетками. [45]

Награда обеспечивает финансирование Asterias для возобновления клинической разработки AST-OPC1 у пациентов с травмой спинного мозга и расширения клинических испытаний возрастающих доз в целевой популяции, предназначенных для будущих основных исследований. [45]

AST-OPC1 представляет собой популяцию клеток, полученных из эмбриональных стволовых клеток человека (чЭСК), которая содержит клетки-предшественники олигодендроцитов (ОПК). OPC и их зрелые производные, называемые олигодендроцитами, обеспечивают критическую функциональную поддержку нервных клеток спинного и головного мозга. Недавно компания Asterias представила результаты первой фазы клинических испытаний низкой дозы AST-OPC1 у пациентов с неврологически полным повреждением грудного отдела спинного мозга. Результаты показали, что AST-OPC1 был успешно доставлен в поврежденный участок спинного мозга. Пациенты, наблюдаемые через 2–3 года после введения AST-OPC1, не выявили никаких признаков серьезных нежелательных явлений, связанных с клетками, при детальных последующих оценках, включая частые неврологические обследования и МРТ. Иммунный мониторинг субъектов в течение одного года после трансплантации не выявил никаких доказательств антител или клеточного иммунного ответа на AST-OPC1. У четырех из пяти субъектов серийные МРТ-сканирования, выполненные в течение 2–3-летнего периода наблюдения, показали, что могло произойти уменьшение кавитации спинного мозга и что AST-OPC1 мог иметь некоторые положительные эффекты в уменьшении разрушения тканей спинного мозга. По данным Международного стандарта неврологической классификации травм спинного мозга (ISNCSCI) у пяти участников исследования не наблюдалось неожиданной неврологической дегенерации или улучшения. [45]

Грант Стратегического партнерства III от CIRM обеспечит финансирование Asterias для поддержки следующего клинического исследования AST-OPC1 у пациентов с травмой спинного мозга, а также для усилий Asterias по разработке продукта, направленных на совершенствование и масштабирование методов производства для поддержки последующих стадий испытаний и, в конечном итоге, коммерциализация. Финансирование CIRM будет зависеть от одобрения FDA исследования, заключения окончательного соглашения между Asterias и CIRM и дальнейшего продвижения Asterias к достижению определенных заранее определенных этапов проекта. [45]

Обеспокоенность и споры

Побочные эффекты

Основной проблемой, связанной с возможной трансплантацией ЭСК пациентам в качестве терапии, является их способность образовывать опухоли, включая тератомы. [46] Проблемы безопасности побудили FDA приостановить первое клиническое исследование ESC, однако опухолей не наблюдалось.

Основная стратегия повышения безопасности ЭСК для потенциального клинического использования заключается в дифференциации ЭСК в определенные типы клеток (например, нейроны, мышцы, клетки печени), которые имеют сниженную или устраненную способность вызывать опухоли. После дифференцировки клетки подвергают сортировке с помощью проточной цитометрии для дальнейшей очистки. Предполагается, что ЭСК по своей природе более безопасны, чем iPS-клетки , созданные с помощью генетически интегрируемых вирусных векторов, поскольку они не модифицируются генетически с помощью таких генов, как c-Myc, которые связаны с раком. Тем не менее, ЭСК экспрессируют очень высокие уровни генов, индуцирующих iPS, и эти гены, включая Myc, необходимы для самообновления и плюрипотентности ЭСК [47] , и потенциальные стратегии повышения безопасности за счет устранения экспрессии c-Myc вряд ли сохранят жизнеспособность клеток. стволовость». Однако было обнаружено, что N-myc и L-myc индуцируют iPS-клетки вместо c-myc с одинаковой эффективностью. [48] ​​Более поздние протоколы по индукции плюрипотентности полностью обходят эти проблемы за счет использования неинтегрирующихся РНК-вирусных векторов, таких как вирус Сендай , или трансфекции мРНК .

Этические дебаты

Из-за характера исследований эмбриональных стволовых клеток по этой теме существует множество противоречивых мнений. Поскольку сбор эмбриональных стволовых клеток обычно требует уничтожения эмбриона, из которого эти клетки получены, моральный статус эмбриона оказывается под вопросом. Некоторые люди утверждают, что 5-дневная масса клеток слишком молода для достижения индивидуальности или что эмбрион, если он будет пожертвован из клиники ЭКО (где лаборатории обычно приобретают эмбрионы), в противном случае все равно пойдет в медицинские отходы. Противники исследования ЭСК утверждают, что эмбрион — это человеческая жизнь, поэтому его уничтожение — это убийство, и эмбрион необходимо защищать с той же этической точки зрения, что и более развитое человеческое существо. [49]

История

Мартин Эванс открыл новую технику культивирования эмбрионов мышей в матке, позволяющую получать из этих эмбрионов ES-клетки.

Техника и условия выведения и культуры

Происхождение от человека

Экстракорпоральное оплодотворение позволяет получить несколько эмбрионов. Избыток эмбрионов не используется клинически или непригоден для имплантации пациенту, поэтому может быть передан донором с согласия. Эмбриональные стволовые клетки человека могут быть получены из этих донорских эмбрионов или, кроме того, они также могут быть извлечены из клонированных эмбрионов, созданных с использованием клеток пациента и донорской яйцеклетки посредством процесса переноса ядра соматической клетки . [62] Внутренняя клеточная масса (представляющие интерес клетки) на стадии бластоцисты эмбриона отделяется от трофэктодермы, клеток, которые дифференцируются во внеэмбриональную ткань. Для разделения проводится иммунохирургия , процесс, при котором антитела связываются с трофэктодермой и удаляются другим раствором, а также механическое рассечение. Полученные клетки внутренней клеточной массы помещают на клетки, которые будут обеспечивать поддержку. Клетки внутренней клеточной массы прикрепляются и расширяются дальше, образуя недифференцированную линию эмбриональных клеток человека. Эти клетки питаются ежедневно и разделяются ферментативно или механически каждые четыре-семь дней. Для того чтобы произошла дифференцировка, линия эмбриональных стволовых клеток человека удаляется из поддерживающих клеток с образованием эмбриональных телец, культивируется совместно с сывороткой, содержащей необходимые сигналы, или для получения результата прививается в трехмерный каркас. [63]

Происхождение от других животных

Эмбриональные стволовые клетки получают из внутренней клеточной массы раннего эмбриона , которую собирают от материнского животного-донора. Мартин Эванс и Мэтью Кауфман сообщили о методе, который задерживает имплантацию эмбриона, позволяя увеличить внутреннюю клеточную массу. Этот процесс включает в себя удаление яичников матери-донора и введение ей прогестерона , изменяющего гормональную среду, в результате чего эмбрионы остаются свободными в матке. Через 4–6 дней внутриматочной культуры эмбрионы собирают и выращивают в культуре in vitro до тех пор, пока внутренняя клеточная масса не сформирует «структуры, похожие на яичный цилиндр», которые диссоциируются на отдельные клетки, и высеивают на фибробласты , обработанные митомицином-с. (для предотвращения митоза фибробластов ). Клональные клеточные линии создаются путем выращивания одной клетки. Эванс и Кауфман показали, что клетки, выращенные из этих культур, могут образовывать тератомы и эмбриоидные тельца и дифференцироваться in vitro, что указывает на плюрипотентность клеток . [52]

Гейл Мартин получила и культивировала свои ES-клетки по-другому. Она удалила эмбрионы от матери-донора примерно через 76 часов после совокупления и культивировала их в течение ночи в среде, содержащей сыворотку. На следующий день она удалила внутреннюю клеточную массу из поздней бластоцисты с помощью микрохирургии . Извлеченную внутреннюю клеточную массу культивировали на фибробластах , обработанных митомицином-с, в среде, содержащей сыворотку и кондиционированной ES-клетками. Примерно через неделю колонии клеток выросли. Эти клетки росли в культуре и демонстрировали плюрипотентные характеристики, о чем свидетельствует способность образовывать тератомы , дифференцироваться in vitro и образовывать эмбриоидные тельца . Мартин назвал эти клетки ES-клетками. [53]

Теперь известно, что питающие клетки обеспечивают фактор ингибирования лейкемии (LIF), а сыворотка обеспечивает костные морфогенетические белки (BMP), которые необходимы для предотвращения дифференцировки ES-клеток. [64] [65] Эти факторы чрезвычайно важны для эффективности получения ES клеток. Кроме того, было продемонстрировано, что разные линии мышей обладают разной эффективностью выделения ES-клеток. [66] В настоящее время мышиные ES-клетки используются для создания трансгенных мышей, в том числе нокаутных мышей . Для лечения человека необходимы плюрипотентные клетки, специфичные для пациента. Генерация ES клеток человека является более сложной задачей и сталкивается с этическими проблемами. Таким образом, в дополнение к исследованиям человеческих ES-клеток, многие группы занимаются созданием индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (iPS-клеток). [67]

Потенциальные методы получения новых клеточных линий

23 августа 2006 года онлайн-издание научного журнала Nature опубликовало письмо доктора Роберта Ланцы (медицинского директора Advanced Cell Technology в Вустере, Массачусетс), в котором говорится, что его команда нашла способ извлекать эмбриональные стволовые клетки, не разрушая настоящие клетки. эмбрион. [68] Это техническое достижение потенциально позволило бы ученым работать с новыми линиями эмбриональных стволовых клеток, полученными за счет государственного финансирования в США, где федеральное финансирование в то время было ограничено исследованиями с использованием линий эмбриональных стволовых клеток, полученных до августа 2001 года. В марте В 2009 году ограничение было снято. [69]

Эмбриональные стволовые клетки человека также были получены методом переноса ядер соматических клеток (SCNT) . [70] [71] Этот подход также иногда называют «терапевтическим клонированием», поскольку SCNT имеет сходство с другими видами клонирования в том, что ядра переносятся из соматической клетки в энуклеированную зиготу. Однако в данном случае SCNT использовалась для получения линий эмбриональных стволовых клеток в лаборатории, а не живых организмов во время беременности. «Терапевтическая» часть названия включена в надежде, что эмбриональные стволовые клетки, полученные SCNT, могут иметь клиническое применение.

Индуцированные плюрипотентные стволовые клетки

Технология iPS-клеток была впервые разработана лабораторией Синья Яманака в Киото , Япония , который в 2006 году показал, что введение четырех специфических генов, кодирующих факторы транскрипции , может превращать взрослые клетки в плюрипотентные стволовые клетки. [72] Он был удостоен Нобелевской премии 2012 года вместе с сэром Джоном Гердоном «за открытие того, что зрелые клетки могут быть перепрограммированы, чтобы стать плюрипотентными». [73]

В 2007 году было показано, что плюрипотентные стволовые клетки , очень похожие на эмбриональные стволовые клетки, могут быть индуцированы доставкой четырех факторов ( Oc3/4 , Sox2 , c-Myc и Klf4 ) в дифференцированные клетки. [74] Используя четыре ранее перечисленных гена, дифференцированные клетки «перепрограммируются» в плюрипотентные стволовые клетки, что позволяет генерировать плюрипотентные/эмбриональные стволовые клетки без эмбриона. Морфология и факторы роста этих индуцированных в лаборатории плюрипотентных клеток эквивалентны эмбриональным стволовым клеткам, поэтому эти клетки стали известны как индуцированные плюрипотентные стволовые клетки (iPS-клетки). [75] Первоначально это наблюдение наблюдалось в плюрипотентных стволовых клетках мыши, но теперь может быть выполнено в фибробластах взрослого человека с использованием тех же четырех генов. [76]

Поскольку этические проблемы в отношении эмбриональных стволовых клеток обычно связаны с их происхождением от терминированных эмбрионов, считается, что перепрограммирование этих iPS-клеток может быть менее спорным.

Это может позволить создать линии ES-клеток, специфичные для пациентов, которые потенциально могут быть использованы для клеточно-заместительной терапии. Кроме того, это позволит создавать линии ES-клеток от пациентов с различными генетическими заболеваниями и предоставит бесценные модели для изучения этих заболеваний.

Однако в качестве первого признака того, что технология iPS-клеток может быстро привести к новым методам лечения, она была использована исследовательской группой под руководством Рудольфа Джениша из Института биомедицинских исследований Уайтхеда в Кембридже , штат Массачусетс , для лечения мышей от серповидноклеточной анемии. , как сообщило интернет-издание журнала Science от 6 декабря 2007 г. [77] [78]

16 января 2008 года калифорнийская компания Stemagen объявила, что они создали первые зрелые клонированные человеческие эмбрионы из отдельных клеток кожи, взятых у взрослых. Эти эмбрионы могут быть собраны для пациента, подходящего для подбора эмбриональных стволовых клеток. [79]

Загрязнение реагентами, используемыми в культуре клеток

Интернет-издание Nature Medicine 24 января 2005 года опубликовало исследование, в котором говорилось, что человеческие эмбриональные стволовые клетки, доступные для исследований, финансируемых из федерального бюджета, загрязнены нечеловеческими молекулами из культуральной среды, используемой для выращивания клеток. [80] Это распространенный метод использования клеток мыши и других клеток животных для поддержания плюрипотентности активно делящихся стволовых клеток. По словам ученых из Калифорнийского университета в Сан-Диего, проблема была обнаружена, когда было обнаружено, что нечеловеческая сиаловая кислота в питательной среде ставит под угрозу потенциальное использование эмбриональных стволовых клеток в организме человека . [81]

Однако в исследовании, опубликованном в онлайн-издании Lancet Medical Journal 8 марта 2005 г., содержится подробная информация о новой линии стволовых клеток, полученной из человеческих эмбрионов в условиях, полностью лишенных клеток и сыворотки. После более чем 6 месяцев недифференцированной пролиферации эти клетки продемонстрировали потенциал к образованию производных всех трех эмбриональных зародышевых листков как in vitro, так и в тератомах . Эти свойства также успешно сохранялись (более 30 пассажей) у созданных линий стволовых клеток. [82]

Клетки музы

Клетки-музы (многолинейные дифференцирующиеся стрессоустойчивые клетки) представляют собой нераковые плюрипотентные стволовые клетки , обнаруживаемые у взрослых. [83] [84] Они были обнаружены в 2010 году Мари Дезава и ее исследовательской группой. [83] Клетки-музы обитают в соединительной ткани почти каждого органа, включая пуповину, костный мозг и периферическую кровь. [85] [83] [86] [87] [88] Их можно получить из коммерчески доступных мезенхимальных клеток, таких как фибробласты человека , костномозгово-мезенхимальные стволовые клетки и стволовые клетки, полученные из жировой ткани. [89] [90] [91] Клетки-музы способны генерировать клетки, представляющие все три зародышевых листка, из одной клетки как спонтанно, так и под действием цитокинов . Экспрессия генов плюрипотентности и триблобластическая дифференциация самообновляются на протяжении поколений. Клетки-музы не подвергаются образованию тератом при трансплантации в среду хозяина in vivo, что устраняет риск онкогенеза за счет необузданной пролиферации клеток. [83]

Смотрите также

Рекомендации

  1. ^ Томсон; Ицковиц-Элдор, Дж; Шапиро, СС; Вакниц, Массачусетс; Свиргель, Джей Джей; Маршалл, В.С.; Джонс, Дж. М. (1998). «Линии эмбриональных стволовых клеток бластоцисты, полученные от человека». Наука . 282 (5391): 1145–1147. Бибкод : 1998Sci...282.1145T. дои : 10.1126/science.282.5391.1145 . ПМИД  9804556.
  2. ^ abc «Основы стволовых клеток | Информация о стволовых клетках» . Stemcells.nih.gov . Проверено 5 июня 2022 г.
  3. ^ Болдвинг А (2009). «Исследование морали и человеческого эмбриона. Введение в тему для разговора о морали и исследованиях человеческого эмбриона». Отчеты ЭМБО . 10 (4): 299–300. дои : 10.1038/embor.2009.37. ПМЦ 2672902 . ПМИД  19337297. 
  4. ↑ Накая, Андреа К. (1 августа 2011 г.). Биомедицинская этика . Сан-Диего, Калифорния: ReferencePoint Press. стр. 96. ISBN 978-1601521576.
  5. ^ Карла А. Гербертс; Марсель С.Г. Ква; Харм П.Х. Хермсен (2011). «Факторы риска при развитии терапии стволовыми клетками». Журнал трансляционной медицины . 9 (29): 29. дои : 10.1186/1479-5876-9-29 . ПМК 3070641 . ПМИД  21418664. 
  6. ^ Аб Томсон, Дж. А.; Ицковиц-Элдор, Дж; Шапиро, СС; Вакниц, Массачусетс; Свиргель, Джей Джей; Маршалл, В.С.; Джонс, Дж. М. (1998). «Линии эмбриональных стволовых клеток, полученные из бластоцист человека». Наука . 282 (5391): 1145–7. Бибкод : 1998Sci...282.1145T. дои : 10.1126/science.282.5391.1145 . ПМИД  9804556.
  7. ^ Инь; Николс, Дж; Чемберс, я; Смит, А. (2003). «Индукция BMP белков Id подавляет дифференцировку и поддерживает самообновление эмбриональных стволовых клеток в сотрудничестве с STAT3». Клетка . 115 (3): 281–292. дои : 10.1016/S0092-8674(03)00847-X . PMID  14636556. S2CID  7201396.
  8. ^ Мартелло, Г.; Смит, А. (2014). «Природа эмбриональных стволовых клеток». Ежегодный обзор клеточной биологии и биологии развития . 30 : 647–75. doi : 10.1146/annurev-cellbio-100913-013116 . ПМИД  25288119.
  9. ^ аб Бовард, Б.; Ву, Т.; Далтон, С. (2016). «Краткий обзор: контроль судьбы клеток посредством клеточного цикла и сетей плюрипотентности». Стволовые клетки . 34 (6): 1427–36. дои : 10.1002/stem.2345. ПМК 5201256 . ПМИД  26889666. 
  10. ^ Уайт, Дж.; Стед, Э.; Фааст, Р.; Конн, С.; Картрайт, П.; Далтон, С. (2005). «Активация развития пути Rb-E2F и установление регулируемой клеточным циклом циклин-зависимой киназной активности во время дифференцировки эмбриональных стволовых клеток». Молекулярная биология клетки . 16 (4): 2018–27. doi : 10.1091/mbc.e04-12-1056. ПМЦ 1073679 . ПМИД  15703208. 
  11. ^ Тер Хуурне, Менно; Стунненберг, Хендрик Г. (21 апреля 2021 г.). «Прогрессия G1-фазы в плюрипотентных стволовых клетках». Клеточные и молекулярные науки о жизни . 21 (10): 4507–4519. дои : 10.1007/s00018-021-03797-8 . ISSN  1875-9777. ПМК 8195903 . ПМИД  33884444. 
  12. ^ Сингх, Амар М.; Далтон, Стивен (7 августа 2009 г.). «Клеточный цикл и Myc пересекаются с механизмами, регулирующими плюрипотентность и перепрограммирование». Клеточная стволовая клетка . 5 (2): 141–149. дои : 10.1016/j.stem.2009.07.003. ISSN  1875-9777. ПМЦ 2909475 . ПМИД  19664987. 
  13. ^ Тер Хуурне, Менно; Чаппелл, Джеймс; Далтон, Стивен; Стунненберг, Хендрик Г. (5 октября 2017 г.). «Различный контроль клеточного цикла в двух разных состояниях плюрипотентности мыши». Клеточная стволовая клетка . 21 (4): 449–455.e4. doi :10.1016/j.stem.2017.09.004. ISSN  1875-9777. ПМЦ 5658514 . ПМИД  28985526. 
  14. ^ Инь, Ци-Лун; Рэй, Джейсон; Николс, Дженнифер; Батль-Морера, Лаура; Добл, Брэдли; Вуджетт, Джеймс; Коэн, Филип; Смит, Остин (22 мая 2008 г.). «Основное состояние самообновления эмбриональных стволовых клеток». Природа . 453 (7194): 519–523. Бибкод : 2008Natur.453..519Y. дои : 10.1038/nature06968. ISSN  1476-4687. ПМК 5328678 . ПМИД  18497825. 
  15. ^ Ли, Дж.; Иди, Ю.; Канг, И.; Хан, Ю.М.; Ким, Дж. (2010). «Окт-4 контролирует развитие клеточного цикла эмбриональных стволовых клеток». Биохимический журнал . 426 (2): 171–81. дои : 10.1042/BJ20091439. ПМЦ 2825734 . ПМИД  19968627. 
  16. ^ Чжан, X .; Неганова И.; Пшиборский, С.; Ян, К.; Кук, М.; Аткинсон, СП; Анифантис, Г.; Феник, С.; Кейт, Западная Нью-Йорк; Хоар, Сан-Франциско; Хьюз, О.; Страчан, Т.; Стойкович, М.; Хиндс, П.В.; Армстронг, Л.; Лако, М. (2009). «Роль NANOG в переходе G1 на S в эмбриональных стволовых клетках человека посредством прямого связывания CDK6 и CDC25A». Журнал клеточной биологии . 184 (1): 67–82. дои : 10.1083/jcb.200801009. ПМК 2615089 . ПМИД  19139263. 
  17. ↑ Махла, Ранджит (19 июля 2016 г.). «Применение стволовых клеток в регенеративной медицине и терапии заболеваний». Международный журнал клеточной биологии . 2016 : 6940283. doi : 10.1155/2016/6940283 . ПМЦ 4969512 . ПМИД  27516776. 
  18. ^ Левенберг, С. (2002). «Эндотелиальные клетки, полученные из эмбриональных стволовых клеток человека». Труды Национальной академии наук . 99 (7): 4391–4396. Бибкод : 2002PNAS...99.4391L. дои : 10.1073/pnas.032074999 . ПМК 123658 . ПМИД  11917100. 
  19. ^ Чаны, А; Толли, Н.С.; Бишоп, А.Е.; Полак, Дж. М. (01 августа 2005 г.). «Эмбриональные стволовые клетки и тканевая инженерия: доставка стволовых клеток в клинику». Журнал Королевского медицинского общества . 98 (8): 346–350. дои : 10.1177/014107680509800804 . ISSN  0141-0768. ПМЦ 1181832 . ПМИД  16055897. 
  20. ^ Хит, Кэрол А. (1 января 2000 г.). «Клетки для тканевой инженерии». Тенденции в биотехнологии . 18 (1): 17–19. дои : 10.1016/S0167-7799(99)01396-7. ISSN  0167-7799. ПМИД  10631775.
  21. ^ аб Давила, JC; Цезарь, Г.Г.; Тиде, М; Стром, С; Мики, Т; Троско, Дж (2004). «Использование и применение стволовых клеток в токсикологии». Токсикологические науки . 79 (2): 214–223. дои : 10.1093/toxsci/kfh100 . ПМИД  15014205.
  22. ^ Сиу, CW; Мур, Дж. К.; Ли, РА (2007). «Кардиомиоциты, полученные из эмбриональных стволовых клеток человека, для лечения сердца». Целевые лекарственные средства для лечения сердечно-сосудистых и гематологических заболеваний . 7 (2): 145–152. дои : 10.2174/187152907780830851. ПМИД  17584049.
  23. ^ Перье, Ал. (2004). «Происхождение дофаминовых нейронов среднего мозга из эмбриональных стволовых клеток человека». Труды Национальной академии наук . 101 (34): 12543–12548. Бибкод : 2004PNAS..10112543P. дои : 10.1073/pnas.0404700101 . ПМК 515094 . ПМИД  15310843. 
  24. ^ Приход, CL; Аренас, Э. (2007). «Стратегии лечения болезни Паркинсона на основе стволовых клеток». Нейродегенеративные заболевания . 4 (4): 339–347. дои : 10.1159/000101892. PMID  17627139. S2CID  37229348.
  25. ^ Ваезе, EY; Кандель, РА; Стэнфорд, WL (2008). «Применение стволовых клеток в восстановлении костей». Скелетная радиология . 37 (7): 601–608. дои : 10.1007/s00256-007-0438-8. PMID  18193216. S2CID  12401889.
  26. ^ Д'Амур, Калифорния; Банг, АГ; Элиазер, С; Келли, Огайо; Агульник, AD; Смарт, НГ; Мурман, Массачусетс; Кроон, Э; Карпентер, МК; Бетге, Э.Э. (2006). «Производство эндокринных клеток, экспрессирующих гормон поджелудочной железы, из эмбриональных стволовых клеток человека». Природная биотехнология . 24 (11): 1392–1401. дои : 10.1038/nbt1259. PMID  17053790. S2CID  11040949.
  27. ↑ Колен, BD (9 октября 2014 г.) Гигантский скачок в борьбе с диабетом The Harvard Gazette, дата обращения 24 ноября 2014 г.
  28. ^ Менаше, Филипп; Ванно, Валери; Фабрегет, Жан-Рош; Бел, Ален; Тоска, Люси; Гарсия, Сильви (21 марта 2015 г.). «На пути к клиническому использованию сердечных предшественников, полученных из эмбриональных стволовых клеток человека: опыт трансляции». Европейский кардиологический журнал . 36 (12): 743–750. дои : 10.1093/eurheartj/ehu192 . ПМИД  24835485.
  29. ^ Дженсен, Дж; Хиллнер, Дж; Бьёрквист, П. (2009). «Технологии эмбриональных стволовых клеток человека и открытие лекарств». Журнал клеточной физиологии . 219 (3): 513–519. дои : 10.1002/jcp.21732. PMID  19277978. S2CID  36354049.
  30. ^ Седердал, Т; Кюпперс-Мюнтер, Б; Хейнс, Н.; Эдсбагге, Дж; Бьёрквист, П; Котгрив, я; Йернстрем, Б (2007). «Глутатионтрансферазы в гепатоцитоподобных клетках, полученных из эмбриональных стволовых клеток человека». Токсикология in vitro . 21 (5): 929–937. дои : 10.1016/j.tiv.2007.01.021. ПМИД  17346923.
  31. ^ «Доктор Юрий Верлинский, 1943–2009: эксперт в области репродуктивных технологий». Архивировано 8 августа 2009 г. в Wayback Machine Chicago Tribune , 20 июля 2009 г.
  32. ^ Мао З., Боззелла М., Селуанов А., Горбунова В. (сентябрь 2008 г.). «Репарация ДНК путем негомологичного соединения концов и гомологичной рекомбинации во время клеточного цикла в клетках человека». Клеточный цикл . 7 (18): 2902–2906. дои : 10.4161/cc.7.18.6679. ПМК 2754209 . ПМИД  18769152. 
  33. ^ аб Тичи Э.Д., Пиллаи Р., Дэн Л. и др. (ноябрь 2010 г.). «Эмбриональные стволовые клетки мыши, но не соматические клетки, преимущественно используют гомологичную рекомбинацию для восстановления двухцепочечных разрывов ДНК». Стволовые клетки Dev . 19 (11): 1699–1711. дои : 10.1089/scd.2010.0058. ПМК 3128311 . ПМИД  20446816. 
  34. ^ Хонг Ю, Стэмбрук П.Дж. (октябрь 2004 г.). «Восстановление отсутствующего ареста G1 и защита от апоптоза в эмбриональных стволовых клетках после ионизирующей радиации». Учеб. Натл. акад. наук. США . 101 (40): 14443–14448. Бибкод : 2004PNAS..10114443H. дои : 10.1073/pnas.0401346101 . ПМК 521944 . ПМИД  15452351. 
  35. ^ Аладжем М.И., Спайк Б.Т., Родевальд Л.В. и др. (январь 1998 г.). «ЭС-клетки не активируют p53-зависимые реакции на стресс и подвергаются p53-независимому апоптозу в ответ на повреждение ДНК». Курс. Биол . 8 (3): 145–155. дои : 10.1016/S0960-9822(98)70061-2 . PMID  9443911. S2CID  13938854.
  36. ^ Бернштейн С., Бернштейн Х., Пейн СМ, Гаревал Х. (июнь 2002 г.). «Репарация ДНК / проапоптотические белки двойной роли в пяти основных путях репарации ДНК: надежная защита от канцерогенеза». Мутат. Рез . 511 (2): 145–178. дои : 10.1016/S1383-5742(02)00009-1. ПМИД  12052432.
  37. ^ Сервантес Р.Б., Стрингер-младший, Шао С., Тишфилд Дж.А., Стэмбрук П.Дж. (март 2002 г.). «Эмбриональные стволовые клетки и соматические клетки различаются по частоте и типу мутаций». Учеб. Натл. акад. наук. США . 99 (6): 3586–3590. Бибкод : 2002PNAS...99.3586C. дои : 10.1073/pnas.062527199 . ПМК 122567 . ПМИД  11891338. 
  38. ^ «FDA одобряет исследование эмбриональных стволовых клеток человека - CNN.com» . 23 января 2009 года . Проверено 1 мая 2010 г.
  39. ^ Кирстед Х.С., Нистор Г., Бернал Дж. и др. (2005). «Трансплантаты клеток-предшественников олигодендроцитов, полученных из эмбриональных стволовых клеток человека, ремиелинизируют и восстанавливают локомоцию после травмы спинного мозга» (PDF) . Дж. Нейроски . 25 (19): 4694–4705. doi :10.1523/JNEUROSCI.0311-05.2005. ПМК 6724772 . ПМИД  15888645. 
  40. ^ Рейнберг, Стивен (23 января 2009 г.) FDA одобрило первое испытание эмбриональных стволовых клеток. Вашингтон Пост
  41. ^ Герон комментирует решение FDA о приостановке судебного разбирательства по поводу травмы спинного мозга. geron.com (27 августа 2009 г.)
  42. ↑ Вергано, Дэн (11 октября 2010 г.). «Эмбриональные стволовые клетки впервые использованы у пациента». США сегодня . Проверено 12 октября 2010 г.
  43. ↑ Браун, Эрин (15 ноября 2011 г.). «Герон выходит из исследований стволовых клеток». Лос-Анджелес Таймс . Проверено 15 ноября 2011 г.
  44. ^ «Отличные новости: дочерняя компания BioTime Asterias приобретает программу эмбриональных стволовых клеток Geron» . iPScell.com . 1 октября 2013.
  45. ^ abcd Калифорнийский институт регенеративной медицины. Архивировано 24 октября 2017 г. в Wayback Machine . БиоТайм, Инк.
  46. ^ Нопфлер, Пол С. (2009). «Деконструкция онкогенности стволовых клеток: дорожная карта к безопасной регенеративной медицине». Стволовые клетки . 27 (5): 1050–1056. дои : 10.1002/stem.37. ПМЦ 2733374 . ПМИД  19415771. 
  47. ^ Варлаханова, Наталья В.; Коттерман, Ребекка Ф.; Деврис, Вильгельмина Н.; Морган, Джуди; Донахью, Лия Рэй; Мюррей, Стивен; Ноулз, Барбара Б.; Нопфлер, Пол С. (2010). «Myc поддерживает плюрипотентность и самообновление эмбриональных стволовых клеток». Дифференциация . 80 (1): 9–19. doi :10.1016/j.diff.2010.05.001. ПМК 2916696 . ПМИД  20537458. 
  48. ^ Верниг, Мариус; Мейснер, Александр; Кэссиди, Джон П; Йениш, Рудольф (2008). «C-Myc незаменим для прямого перепрограммирования фибробластов мыши». Клеточная стволовая клетка . 2 (1): 10–12. дои : 10.1016/j.stem.2007.12.001 . ПМИД  18371415.
  49. ^ Кинг, Нэнси; Перрин, Джейкоб (7 июля 2014 г.). «Этические проблемы исследования и терапии стволовыми клетками». Исследования и терапия стволовыми клетками . 5 (4): 85. дои : 10.1186/scrt474 . ПМК 4097842 . ПМИД  25157428. 
  50. ^ Кляйнсмит Л.Дж., Пирс ГБ-младший (1964). «Мультипотентность одиночных клеток эмбриональной карциномы». Рак Рез . 24 : 1544–1551. ПМИД  14234000.
  51. ^ Мартин GR (1980). «Тератокарциномы и эмбриогенез млекопитающих». Наука . 209 (4458): 768–776. Бибкод : 1980Sci...209..768M. дои : 10.1126/science.6250214. ПМИД  6250214.
  52. ^ аб Эванс М., Кауфман М. (1981). «Создание в культуре плюрипотентных клеток из эмбрионов мыши». Природа . 292 (5819): 154–156. Бибкод : 1981Natur.292..154E. дои : 10.1038/292154a0. PMID  7242681. S2CID  4256553.
  53. ^ аб Мартин Г (1981). «Выделение плюрипотентной клеточной линии из ранних эмбрионов мыши, культивированных в среде, кондиционированной стволовыми клетками тератокарциномы». Proc Natl Acad Sci США . 78 (12): 7634–7638. Бибкод : 1981PNAS...78.7634M. дои : 10.1073/pnas.78.12.7634 . ПМК 349323 . ПМИД  6950406. 
  54. ^ «Нобелевская премия по физиологии и медицине 2007 года – дополнительная информация» . Нобелевская премия . Нобелевские СМИ.
  55. ^ «Жизнь Долли | Овца Долли» . Проверено 21 февраля 2022 г.
  56. ^ Клоцко, Арлин Джудит; Клоцко, приглашенный научный сотрудник Медицинской школы Королевского бесплатного колледжа и университетского колледжа Арлин Джудит (2006). Ваш собственный клон? Издательство Кембриджского университета. ISBN 978-0-521-85294-4.
  57. ^ Томпсон, Джеймс А.; Ицковиц-Элдор, Джозеф; Шапиро, Сандер С.; Вакниц, Мишель А.; Свиргел, Дженнифер Дж.; Маршалл, Вивьен С.; Джонс, Джеффри М. (6 ноября 1998 г.). «Линии эмбриональных стволовых клеток, полученные из бластоцисты человека». Наука . 282 (5391): 1145–1147. Бибкод : 1998Sci...282.1145T. дои : 10.1126/science.282.5391.1145 . ПМИД  9804556.
  58. ^ "Обращение президента Джорджа Буша об исследованиях стволовых клеток" . CNN Внутри политики. 9 августа 2001 г.
  59. ^ Яманака, Шинья; Такахаси, Кадзутоши (25 августа 2006 г.). «Индукция плюрипотентных стволовых клеток из эмбриональных и взрослых культур фибробластов мышей с помощью определенных факторов». Клетка . 126 (4): 663–676. дои : 10.1016/j.cell.2006.07.024. hdl : 2433/159777 . PMID  16904174. S2CID  1565219.
  60. ^ Вадман, Мередит (27 января 2009 г.). «Стволовые клетки готовы к прайм-тайму». Природа . 457 (7229): 516. дои : 10.1038/457516a . ПМИД  19177087.
  61. ^ «Указ № 13505 — Устранение барьеров на пути ответственных научных исследований с использованием стволовых клеток человека» (PDF) . Федеральный реестр: Президентские документы . 74 (46). 11 марта 2009 г.
  62. ^ Маунтфорд, JC (2008). «Эмбриональные стволовые клетки человека: происхождение, характеристики и потенциал регенеративной терапии». Трансфус Мед . 18 (1): 1–12. дои : 10.1111/j.1365-3148.2007.00807.x. PMID  18279188. S2CID  20874633.
  63. ^ Томсон Дж.А., Ицковиц-Элдор Дж., Шапиро С.С., Вакниц М.А., Свиргель Дж.Дж., Маршалл В.С., Джонс Дж.М. (1998). «Линии эмбриональных стволовых клеток, полученные из бластоцист человека». Наука . 282 (5391): 1145–1147. Бибкод : 1998Sci...282.1145T. дои : 10.1126/science.282.5391.1145 . ПМИД  9804556.
  64. ^ Смит А.Г., Хит Дж.К., Дональдсон Д.Д., Вонг Г.Г., Моро Дж., Шталь М., Роджерс Д. (1988). «Ингибирование плюрипотентной дифференцировки эмбриональных стволовых клеток очищенными полипептидами». Природа . 336 (6200): 688–690. Бибкод : 1988Natur.336..688S. дои : 10.1038/336688a0. PMID  3143917. S2CID  4325137.
  65. ^ Уильямс Р.Л., Хилтон DJ, Пиз С., Уилсон Т.А., Стюарт К.Л., Гиринг Д.П., Вагнер Э.Ф., Меткалф Д., Никола Н.А., Гоф Н.М. (1988). «Фактор, ингибирующий миелолейкоз, поддерживает потенциал развития эмбриональных стволовых клеток». Природа . 336 (6200): 684–687. Бибкод : 1988Natur.336..684W. дои : 10.1038/336684a0. PMID  3143916. S2CID  4346252.
  66. ^ Ледерманн Б, Бюрки К (1991). «Создание компетентной зародышевой линии линии эмбриональных стволовых клеток C57BL/6». Exp Cell Res . 197 (2): 254–258. дои : 10.1016/0014-4827(91)90430-3. ПМИД  1959560.
  67. ^ Такахаши К., Танабе К., Онуки М., Нарита М., Ичисака Т., Томода К., Яманака С. (2007). «Индукция плюрипотентных стволовых клеток из фибробластов взрослого человека определенными факторами». Клетка . 131 (5): 861–872. дои : 10.1016/j.cell.2007.11.019. hdl : 2433/49782 . PMID  18035408. S2CID  8531539.
  68. ^ Климанская И., Чунг Ю., Беккер С., Лу С.Дж., Ланза Р. (2006). «Линии эмбриональных стволовых клеток человека, полученные из одиночных бластомеров». Природа . 444 (7118): 481–485. Бибкод : 2006Natur.444..481K. дои : 10.1038/nature05142. PMID  16929302. S2CID  84792371.
  69. ^ Американские ученые испытали облегчение, когда Обама снял запрет на исследования стволовых клеток, The Guardian , 10 марта 2009 г.
  70. ^ Татибана, Масахито; Амато, Паула; Спарман, Мишель; Гутьеррес, Нурия Марти; Типпнер-Хеджес, Ребекка; Ма, Хонг; Кан, Ынджу; Фулати, Алимуцзян; Ли, Хё-Санг; Шританаудомчай, Хатаитип; Мастерсон, Кейт (6 июня 2013 г.). «Эмбриональные стволовые клетки человека, полученные путем переноса ядер соматических клеток». Клетка . 153 (6): 1228–1238. дои : 10.1016/j.cell.2013.05.006 . ISSN  0092-8674. ПМЦ 3772789 . ПМИД  23683578. 
  71. ^ Чунг, Янг Ги; Ым, Джин Хи; Ли, Чон Ын; Шим, Сун Хан; Сепилиан, Викен; Хон, Сын Ук; Ли, Юми; Трефф, Натан Р.; Чой, Ён Хо; Кимбрел, Эрин А.; Диттман, Ральф Э. (05 июня 2014 г.). «Перенос ядра соматической клетки человека с использованием взрослых клеток». Клеточная стволовая клетка . 14 (6): 777–780. дои : 10.1016/j.stem.2014.03.015 . ISSN  1934-5909. ПМИД  24746675.
  72. ^ Такахаши, К; Яманака, С. (2006). «Индукция плюрипотентных стволовых клеток из культур эмбриональных и взрослых фибробластов мышей с помощью определенных факторов». Клетка . 126 (4): 663–676. дои : 10.1016/j.cell.2006.07.024. hdl : 2433/159777 . PMID  16904174. S2CID  1565219.Значок открытого доступа
  73. ^ «Нобелевская премия по физиологии и медицине - пресс-релиз 2012 г.» . Нобель Медиа АБ. 8 октября 2012 г.
  74. ^ Верниг, Мариус; Мейснер, Александр; Форман, Рут; Брамбринк, Тобиас; Ку, Манчинг; Хохедлингер, Конрад; Бернштейн, Брэдли Э.; Йениш, Рудольф (19 июля 2007 г.). «Перепрограммирование фибробластов in vitro в плюрипотентное состояние, подобное ES-клеткам». Природа . 448 (7151): 318–324. Бибкод : 2007Natur.448..318W. дои : 10.1038/nature05944. ISSN  1476-4687. PMID  17554336. S2CID  4377572.
  75. ^ Такахаси, Кадзутоши; Яманака, Шинья (25 августа 2006 г.). «Индукция плюрипотентных стволовых клеток из эмбриональных и взрослых культур фибробластов мышей с помощью определенных факторов». Клетка . 126 (4): 663–676. дои : 10.1016/j.cell.2006.07.024 . hdl : 2433/159777 . ISSN  0092-8674. PMID  16904174. S2CID  1565219.
  76. ^ Такахаси, Кадзутоши; Танабэ, Кодзи; Онуки, Мари; Нарита, Мегуми; Ичисака, Томоко; Томода, Киитиро; Яманака, Шинья (30 ноября 2007 г.). «Индукция плюрипотентных стволовых клеток из фибробластов взрослого человека определенными факторами». Клетка . 131 (5): 861–872. дои : 10.1016/j.cell.2007.11.019 . hdl : 2433/49782 . ISSN  0092-8674. PMID  18035408. S2CID  8531539.
  77. ^ Вайс, Рик (07 декабря 2007 г.). «Ученые лечат мышей от серповидноклеточной анемии с помощью метода стволовых клеток: новый подход – использование кожи, а не эмбрионов». Вашингтон Пост . стр. А02.
  78. ^ Ханна, Дж.; Верниг, М.; Маркулаки, С.; Солнце, C.-W.; Мейснер, А.; Кэссиди, JP; Борода, К.; Брамбринк, Т.; Ву, Л.-К.; Таунс, ТМ; Джениш, Р. (2007). «Лечение мышиной модели серповидноклеточной анемии с помощью iPS-клеток, полученных из аутологичной кожи». Наука . 318 (5858): 1920–1923. Бибкод : 2007Sci...318.1920H. дои : 10.1126/science.1152092. PMID  18063756. S2CID  657569.
  79. ^ Хелен Бриггс (17 января 2008 г.). «Команда США создает эмбриональный клон мужчины» . Би-би-си . стр. А01.
  80. ↑ Эберт, Джессика (24 января 2005 г.). «Стволовые клетки человека вызывают иммунную атаку». Новости природы . Лондон: Издательская группа Nature . дои : 10.1038/news050124-1. Архивировано из оригинала 24 сентября 2010 г. Проверено 27 февраля 2009 г.
  81. ^ Мартин М.Дж., Муотри А., Гейдж Ф., Варки А. (2005). «Эмбриональные стволовые клетки человека экспрессируют иммуногенную нечеловеческую сиаловую кислоту». Нат. Мед . 11 (2): 228–232. дои : 10.1038/нм1181. PMID  15685172. S2CID  13739919.
  82. ^ Климанская И., Чанг Ю., Мейснер Л., Джонсон Дж., Вест МД, Ланза Р. (2005). «Эмбриональные стволовые клетки человека, полученные без фидерных клеток». Ланцет . 365 (9471): 1636–1641. дои : 10.1016/S0140-6736(05)66473-2. PMID  15885296. S2CID  17139951.
  83. ^ abcd Курода, Ю.; Китада, М.; Вакао, С.; Нисикава, К.; Танимура, Ю.; Макиносима, Х.; Года, М.; Акаши, Х.; Инуцука, А.; Нива, А.; Сигэмото, Т.; Набешима, Ю.; Накахата, Т.; Набешима, Ю.-и.; Фудзиёси, Ю.; Дезава, М. (2010). «Уникальные мультипотентные клетки в популяциях мезенхимальных клеток взрослого человека». Труды Национальной академии наук . 107 (19): 8639–8643. Бибкод : 2010PNAS..107.8639K. дои : 10.1073/pnas.0911647107 . ПМК 2889306 . ПМИД  20421459. 
  84. ^ Клетки музы | СпрингерЛинк.
  85. ^ Цзикуань Ленг 1 2, Дунмин Сунь 2, Цзыхао Хуан 3, Иман Тадмори 2, Нин Чан 2, Никит Кетхиди 2, Ахмед Сабра 2, Ёсихиро Кусида 4, Ю-Шоу Фу 3, Мари Дезава 4, Сицзин Хэ 1, Мудрый Янг 2Количественный анализ клеток SSEA3+ из пуповины человека после трансплантации клеток магнитной сортировки. Июль 2019 г.;28(7):907–923.
  86. ^ Вакао, С.; Китада, М.; Курода, Ю.; Сигэмото, Т.; Мацусэ, Д.; Акаши, Х.; Танимура, Ю.; Цучияма, К.; Кикучи, Т.; Года, М.; Накахата, Т.; Фудзиёси, Ю.; Дезава, М. (2011). «Многолинейные дифференцирующиеся стрессоустойчивые (Muse) клетки являются основным источником индуцированных плюрипотентных стволовых клеток в фибробластах человека». Труды Национальной академии наук . 108 (24): 9875–9880. Бибкод : 2011PNAS..108.9875W. дои : 10.1073/pnas.1100816108 . ПМК 3116385 . ПМИД  21628574. 
  87. ^ Дезава, Мари (2016). «Клетки-музы обеспечивают плюрипотентность мезенхимальных стволовых клеток: прямой вклад клеток-муз в регенерацию тканей». Трансплантация клеток . 25 (5): 849–861. дои : 10.3727/096368916X690881 . ПМИД  26884346.
  88. ^ Хори, Эмико; Хаякава, Юмико; Хаяси, Томохиде; Хори, Сатоши; Окамото, Суши; Сибата, Такаши; Кубо, Мичия; Хориэ, Юкио; Сасахара, Масакиё; Курода, Сатоши (2016). «Мобилизация плюрипотентных мультилинейно-дифференцирующихся стресс-устойчивых клеток при ишемическом инсульте». Журнал инсульта и цереброваскулярных заболеваний . 25 (6): 1473–1481. doi :10.1016/j.jstrokecerebrovasdis.2015.12.033. ПМИД  27019988.
  89. ^ Курода, Ясумаса; Вакао, Сёхей; Китада, Масааки; Мураками, Тору; Нодзима, Макото; Дезава, Мари (2013). «Выделение, культивирование и оценка многолинейных дифференцирующихся стрессоустойчивых (Muse) клеток». Протоколы природы . 8 (7): 1391–1415. дои : 10.1038/nprot.2013.076. PMID  23787896. S2CID  28597290.[ ненадежный медицинский источник? ]
  90. ^ Огура, Фумитака; Вакао, Сёхей; Курода, Ясумаса; Цучияма, Кенитиро; Багери, Можде; Хенейди, Салех; Чейзенбалк, Грегорио; Айба, Сэцуя; Дезава, Мари (2014). «Жировая ткань человека обладает уникальной популяцией плюрипотентных стволовых клеток с неонкогенной и низкой теломеразной активностью: потенциальные последствия в регенеративной медицине». Стволовые клетки и развитие . 23 (7): 717–728. дои : 10.1089/scd.2013.0473. ПМИД  24256547.
  91. ^ Хенейди, Салех; Симерман, Ариэль А.; Келлер, Эрика; Сингх, Прапти; Ли, Синьминь; Думесич, Дэниел А.; Чейзенбалк, Грегорио (2013). «Пробужденные клеточным стрессом: выделение и характеристика новой популяции плюрипотентных стволовых клеток, полученных из жировой ткани человека». ПЛОС ОДИН . 8 (6): е64752. Бибкод : 2013PLoSO...864752H. дои : 10.1371/journal.pone.0064752 . ПМЦ 3673968 . ПМИД  23755141. 

Внешние ссылки

Викискладе есть медиафайлы, связанные с эмбриональными стволовыми клетками .