stringtranslate.com

Антитромбин

Антитромбин (АТ) — небольшой гликопротеин , который инактивирует несколько ферментов системы свертывания крови . Это белок из 464 аминокислот, вырабатываемый печенью . Он содержит три дисульфидные связи и в общей сложности четыре возможных участка гликозилирования . α-Антитромбин — доминирующая форма антитромбина, обнаруженная в плазме крови , и имеет олигосахарид, занимающий каждый из его четырех участков гликозилирования. Один участок гликозилирования остается постоянно незанятым в минорной форме антитромбина, β-антитромбине. [5] Его активность многократно увеличивается антикоагулянтным препаратом гепарином , который усиливает связывание антитромбина с фактором IIa (тромбином) и фактором Xa . [6]

Структура

Антитромбин также называется антитромбином III (AT III). Обозначения от антитромбина I до антитромбина IV берут начало в ранних исследованиях, проведенных в 1950-х годах Сигерсом, Джонсоном и Феллом. [7]

Антитромбин I (AT I) относится к связыванию тромбина с фибрином после того, как тромбин активировал фибриноген в некаталитическом месте связывания тромбина. Антитромбин II (AT II) относится к кофактору в плазме, который вместе с гепарином препятствует взаимодействию тромбина и фибриногена . Антитромбин III (AT III) относится к веществу в плазме , которое инактивирует тромбин. Антитромбин IV (AT IV) относится к антитромбину, который активируется во время и вскоре после свертывания крови . [8] Только AT III и, возможно, AT I имеют медицинское значение. AT III обычно называют исключительно «антитромбином», и в этой статье обсуждается именно антитромбин III.

Рисунок 1. Показанорасположение четырех потенциальных участков гликозилирования в третичной структуре мономера антитромбина , взятое из файла банка данных белков 2ANT. В этой структуре только Asn 155 гликозилирован путем добавления одного остатка N -ацетилглюкозамина .

Период полураспада антитромбина в плазме крови составляет около 3 дней. [9] Нормальная концентрация антитромбина в плазме крови человека высока и составляет приблизительно 0,12 мг/мл, что эквивалентно молярной концентрации 2,3 мкМ. [10] Антитромбин был выделен из плазмы большого количества видов, помимо человека. [11] Как следует из секвенирования белков и кДНК , длина антитромбинов коровы, овцы, кролика и мыши составляет 433 аминокислоты, что на одну аминокислоту длиннее, чем у человеческого антитромбина. Предполагается, что дополнительная аминокислота находится в позиции аминокислоты 6. Антитромбины коровы, овцы, кролика, мыши и человека имеют от 84 до 89% идентичности аминокислотной последовательности. [12] Шесть аминокислот образуют три внутримолекулярные дисульфидные связи , Cys 8-Cys128, Cys21-Cys95 и Cys248-Cys430. Все они имеют четыре потенциальных сайта N-гликозилирования . Они встречаются в аминокислотах аспарагина (Asn) с номерами 96, 135, 155 и 192 у людей и в аналогичных аминокислотных номерах у других видов. Все эти сайты заняты ковалентно присоединенными боковыми цепями олигосахаридов в преобладающей форме человеческого антитромбина, α-антитромбине, что приводит к молекулярной массе этой формы антитромбина 58 200. [5] Потенциальный сайт гликозилирования в аспарагине 135 не занят в минорной форме (около 10%) антитромбина, β-антитромбине (см. Рисунок 1 ). [13]

Рекомбинантные антитромбины со свойствами, аналогичными свойствам нормального человеческого антитромбина, были получены с использованием инфицированных бакуловирусом клеток насекомых и клеточных линий млекопитающих, выращенных в клеточной культуре . [14] [15] [16] [17] Эти рекомбинантные антитромбины, как правило, имеют другие паттерны гликозилирования, чем нормальный антитромбин, и обычно используются в структурных исследованиях антитромбина. По этой причине многие из структур антитромбина, хранящихся в банке данных белков и представленных в этой статье, показывают различные паттерны гликозилирования.

Антитромбин начинает свое существование в своем нативном состоянии, которое имеет более высокую свободную энергию по сравнению с латентным состоянием, в которое он распадается в среднем через 3 дня. Латентное состояние имеет ту же форму, что и активированное состояние, то есть, когда оно ингибирует тромбин. Таким образом, это классический пример полезности кинетического и термодинамического контроля сворачивания белка.

Функция

Рисунок 2. Реактивная связь arg 393 - ser 394 расположена на открытой петле на поверхности молекулы. Эта петля называется петлей реактивного сайта (RSL) или петлей реактивного центра (RCL).
Рисунок 3. Показана аминокислотная последовательность петли реактивного сайта человеческого антитромбина. [18] Петля реактивного сайта включает номера аминокислотной последовательности 377–400 (номера показаны под последовательностью выше) или аминокислоты P1–P17 и P1'–P7', используя соглашение Шехтера и Бергера (номер показан над последовательностью выше). [19] Реактивная связь обозначена стрелкой.

Антитромбин представляет собой серпин (ингибитор сериновой протеазы) и поэтому по структуре схож с большинством других ингибиторов протеазы плазмы , таких как альфа-1-антихимотрипсин , альфа-2-антиплазмин и кофактор гепарина II .

Физиологические целевые протеазы антитромбина - это протеазы пути контактной активации (ранее известного как внутренний путь), а именно активированные формы фактора X (Xa), фактора IX (IXa), фактора XI (XIa), фактора XII (XIIa) и, в большей степени, фактора II (тромбина) (IIa), а также активированная форма фактора VII (VIIa) из пути тканевого фактора (ранее известного как внешний путь). [20] Ингибитор также инактивирует калликреин и плазмин [ требуется цитата ] , также участвующие в свертывании крови. Однако он инактивирует некоторые другие сериновые протеазы, которые не участвуют в свертывании, такие как трипсин и субъединица C1s фермента C1, участвующего в классическом пути комплемента . [12] [21]

Инактивация протеазы происходит в результате захвата протеазы в эквимолярном комплексе с антитромбином, в котором активный центр фермента протеазы недоступен для его обычного субстрата . [12] Образование комплекса антитромбин-протеаза включает взаимодействие между протеазой и специфической реактивной пептидной связью в антитромбине. В человеческом антитромбине эта связь находится между аргинином (arg) 393 и серином (ser) 394 (см. Рисунок 2 и Рисунок 3 ). [12]

Считается, что ферменты протеазы попадают в ловушку неактивных комплексов антитромбин-протеаза в результате их атаки на реактивную связь. Хотя атака на похожую связь в пределах нормального субстрата протеазы приводит к быстрому протеолитическому расщеплению субстрата, инициирование атаки на реактивную связь антитромбина заставляет антитромбин активироваться и захватывать фермент на промежуточной стадии протеолитического процесса. Со временем тромбин способен расщепить реактивную связь в пределах антитромбина, и неактивный комплекс антитромбин-тромбин будет диссоциировать, однако время, необходимое для этого, может быть больше 3 дней. [22] Однако связи P3-P4 и P1'-P2' могут быстро расщепляться нейтрофильной эластазой и бактериальным ферментом термолизином , соответственно, в результате чего неактивные антитромбины больше не способны ингибировать активность тромбина. [23]

Скорость ингибирования антитромбином активности протеазы значительно увеличивается за счет его дополнительного связывания с гепарином , как и его инактивация нейтрофильной эластазой . [23]

Антитромбин и гепарин

Антитромбин инактивирует свои физиологические целевые ферменты, тромбин, фактор Xa и фактор IXa с константами скорости 7–11 x 10 3 , 2,5 x 10 3 М −1 с −1 и 1 x 10 М −1 с −1 соответственно. [5] [24] Скорость инактивации антитромбина-тромбина увеличивается до 1,5–4 x 10 7 М −1 с −1 в присутствии гепарина, т. е. реакция ускоряется в 2000–4000 раз. [25] [26] [27] [28] Ингибирование фактора Xa ускоряется всего в 500–1000 раз в присутствии гепарина, а максимальная константа скорости в 10 раз ниже, чем у ингибирования тромбина. [25] [28] Скорость ингибирования антитромбина-фактора IXa увеличивается приблизительно в 1 миллион раз в присутствии гепарина и физиологических уровней кальция . [24]

AT-III связывается со специфической последовательностью сульфатирования пентасахарида, содержащейся в полимере гепарина

GlcNAc/NS(6S)-GlcA-GlcNS(3S,6S)-IdoA(2S)-GlcNS(6S)

При связывании с этой пентасахаридной последовательностью ингибирование активности протеазы усиливается гепарином в результате двух различных механизмов. [29] В одном механизме стимуляция гепарином фактора IXa и ингибирование Xa зависит от конформационного изменения в антитромбине, вовлекающего петлю реактивного сайта, и, таким образом, является аллостерическим . [30] В другом механизме стимуляция ингибирования тромбина зависит от образования тройного комплекса между AT-III, тромбином и гепарином. [30]

Аллостерическая активация

Рисунок 4. Две кристаллические структуры для антитромбина. Модель A взята из файла pdb 2ANT, а модель B — из файла pdb 1AZX. Модель B находится в комплексе с пентасахаридом, тогда как модель A не находится в комплексе.

Усиление ингибирования факторов IXa и Xa требует минимальной последовательности пентасахарида гепарина. Конформационные изменения, которые происходят в антитромбине в ответ на связывание пентасахарида, хорошо документированы. [18] [31] [32]

При отсутствии гепарина аминокислоты P14 и P15 (см. Рисунок 3 ) из петли реактивного сайта встроены в основную часть белка (в частности, в верхнюю часть бета-слоя A). Эта особенность является общей с другими серпинами , такими как кофактор гепарина II , альфа-1-антихимотрипсин и MENT .

Конформационное изменение, наиболее значимое для ингибирования факторов IXa и Xa, включает аминокислоты P14 и P15 в N-концевой области петли реактивного сайта (обведено на рисунке 4, модель B ). Эта область была названа шарнирной областью. Конформационное изменение в шарнирной области в ответ на связывание гепарина приводит к вытеснению P14 и P15 из основной части белка, и было показано, что при предотвращении этого конформационного изменения не происходит повышенного ингибирования факторов IXa и Xa. [30] Считается, что повышенная гибкость, приданная петле реактивного сайта в результате конформационного изменения шарнирной области, является ключевым фактором, влияющим на повышенное ингибирование факторов IXa и Xa. Было подсчитано, что в отсутствие пентасахарида только одна из каждых 400 молекул антитромбина (0,25%) находится в активной конформации с вытесненными аминокислотами P14 и P15. [30]

Неаллостерическая активация

Рисунок 5. Структура тройного комплекса антитромбин-тромбин-гепарин, взятая из pdb 1TB6.

Повышенное ингибирование тромбина требует минимального пентасахарида гепарина плюс по крайней мере 13 дополнительных мономерных единиц. [33] Считается, что это связано с требованием, чтобы антитромбин и тромбин связывались с одной и той же цепью гепарина, смежной друг с другом. Это можно увидеть в серии моделей, показанных на рисунке 5 .

В структурах, показанных на рисунке 5, C-концевая часть (сторона P') петли реактивного сайта находится в расширенной конформации по сравнению с другими неактивированными или активированными гепарином структурами антитромбина. [34] Область P' антитромбина необычно длинная по сравнению с областью P' других серпинов и в неактивированных или активированных гепарином структурах антитромбина образует плотно связанный водородом β-поворот . Удлинение P' происходит посредством разрыва всех водородных связей, вовлеченных в β-поворот . [34]

Шарнирная область антитромбина в комплексе на рисунке 5 не может быть смоделирована из-за ее конформационной гибкости, и аминокислоты P9-P14 не видны в этой структуре. Эта конформационная гибкость указывает на то, что внутри комплекса может существовать равновесие между вставленной в петлю реактивного сайта P14 P15 конформацией антитромбина и выведенной из петли реактивного сайта P14 P15 конформацией. В поддержку этого, анализ позиционирования P15 Gly в комплексе на рисунке 5 (отмечено в модели B) показывает, что он вставлен в бета-слой A (см. модель C). [34]

Влияние гликозилирования на активность

α-Антитромбин и β-антитромбин различаются по своему сродству к гепарину. [35] Разница в константе диссоциации между ними составляет три раза для пентасахарида, показанного на рисунке 3 , и более чем в десять раз для полноразмерного гепарина, при этом β-антитромбин имеет более высокое сродство. [36] Считается, что более высокое сродство β-антитромбина обусловлено повышенной скоростью, с которой происходят последующие конформационные изменения внутри белка при первоначальном связывании гепарина. Для α-антитромбина дополнительное гликозилирование по Asn-135, как полагают, не мешает первоначальному связыванию гепарина, а скорее ингибирует любые возникающие конформационные изменения. [35]

Несмотря на то, что он присутствует только в 5–10% от уровня α-антитромбина, из-за его повышенного сродства к гепарину, считается, что β-антитромбин более важен, чем α-антитромбин, в контроле тромбогенных событий, возникающих в результате повреждения тканей. Действительно, ингибирование тромбина после повреждения аорты приписывалось исключительно β-антитромбину. [37]

Недостатки

Доказательства важной роли антитромбина в регуляции нормального свертывания крови демонстрируются корреляцией между унаследованным или приобретенным дефицитом антитромбина и повышенным риском развития тромботического заболевания у любого пораженного человека. [38] Дефицит антитромбина обычно выявляется, когда пациент страдает рецидивирующим венозным тромбозом и тромбоэмболией легочной артерии .

Приобретенный дефицит антитромбина

Приобретенный дефицит антитромбина возникает в результате трех совершенно разных механизмов. Первый механизм — повышенная экскреция, которая может возникнуть при почечной недостаточности, связанной с протеинурией нефротическим синдромом . Второй механизм возникает из-за снижения продукции, как это наблюдается при печеночной недостаточности или циррозе или незрелой печени вследствие преждевременных родов . Третий механизм возникает из-за ускоренного потребления, которое наиболее выражено как следствие тяжелой травмы , но также может наблюдаться в меньших масштабах в результате вмешательств, таких как крупная операция или сердечно-легочное шунтирование . [39]

Наследственный дефицит антитромбина

Частота наследственного дефицита антитромбина оценивается в пределах от 1:2000 до 1:5000 в нормальной популяции, причем первая семья, страдающая наследственным дефицитом антитромбина, была описана в 1965 году. [40] [41] Впоследствии было предложено классифицировать наследственный дефицит антитромбина как тип I или тип II на основе функционального и иммунохимического анализа антитромбина. [42] Поддержание адекватного уровня активности антитромбина, который составляет не менее 70% от нормального функционального уровня, имеет важное значение для обеспечения эффективного ингибирования протеаз свертывания крови. [43] Обычно в результате дефицита антитромбина типа I или типа II функциональные уровни антитромбина снижаются до уровня ниже 50% от нормы. [44]

Дефицит антитромбина I типа

Дефицит антитромбина типа I характеризуется снижением как активности антитромбина, так и концентрации антитромбина в крови пораженных лиц. Дефицит типа I был первоначально далее разделен на две подгруппы, Ia и Ib, на основе сродства к гепарину. Антитромбин лиц подгруппы Ia показал нормальное сродство к гепарину, в то время как антитромбин лиц подгруппы Ib показал сниженное сродство к гепарину. [45] Последующий функциональный анализ группы случаев 1b показал, что у них не только сниженное сродство к гепарину, но и множественные или «плейотрофные» аномалии, влияющие на реактивный участок, участок связывания гепарина и концентрацию антитромбина в крови. В пересмотренной системе классификации, принятой Научным и стандартизационным комитетом Международного общества по тромбозу и гемостазу, случаи типа Ib теперь обозначаются как ЛЭ II типа, плейотрофный эффект. [46]

Большинство случаев дефицита I типа обусловлены точечными мутациями , делециями или незначительными вставками в гене антитромбина. Эти генетические мутации приводят к дефициту I типа посредством различных механизмов:

Дефицит антитромбина II типа

Дефицит антитромбина II типа характеризуется нормальными уровнями антитромбина, но сниженной активностью антитромбина в крови пораженных лиц. Первоначально было предложено, что дефицит II типа может быть далее разделен на три подгруппы (IIa, IIb и IIc) в зависимости от того, какая функциональная активность антитромбина снижена или сохранена. [45]

В пересмотренной системе классификации, вновь принятой Научным и стандартизационным комитетом Международного общества по тромбозу и гемостазу, дефицит антитромбина II типа по-прежнему подразделяется на три подгруппы: уже упомянутый тип II PE, а также тип II RS, где мутации влияют на реактивный сайт, и тип II HBS, где мутации влияют на сайт связывания антитромбина с гепарином. [46] Для целей базы данных мутаций антитромбина, составленной членами Подкомитета по ингибиторам свертывания плазмы Научного и стандартизационного комитета Международного общества по тромбозу и гемостазу, случаи типа IIa теперь классифицируются как тип II PE, случаи типа IIb как тип II RS и случаи типа IIc как тип II HBS. [49]

Топонимы

В настоящее время относительно легко охарактеризовать конкретную генетическую мутацию антитромбина. Однако до использования современных методов характеристики исследователи называли мутации по названию города, где проживал человек, страдающий от дефицита, т.е. мутация антитромбина была обозначена как топоним . [50] Современная мутационная характеристика с тех пор показала, что многие индивидуальные топонимы антитромбина на самом деле являются результатом одной и той же генетической мутации, например, антитромбин-Тояма эквивалентен антитромбин-Кумамото, -Амьен, -Тур, -Париж-1, -Париж-2, -Алжир, -Падуя-2 и -Барселона. [49]

Медицинское применение

Антитромбин используется в качестве терапевтического белка , который может быть очищен из плазмы человека [51] или получен рекомбинантным путем (например, Атрин, который производится из молока генетически модифицированных коз [52] [53] ).

Он одобрен FDA в качестве антикоагулянта для предотвращения образования тромбов до, во время или после операции или родов у пациентов с наследственным дефицитом антитромбина. [51] [53]

Он изучался при сепсисе для снижения диффузного внутрисосудистого свертывания и других последствий. Не было обнаружено, что он приносит какую-либо пользу тяжелобольным людям с сепсисом. [54]

Расщепленный и латентный антитромбин

Рисунок 6. Латентный антитромбин

Расщепление в реактивном сайте приводит к захвату тромбиновой протеазы с перемещением расщепленной петли реактивного сайта вместе со связанной протеазой, так что петля образует дополнительную шестую нить в середине бета-слоя А. Это перемещение петли реактивного сайта может быть также вызвано без расщепления, при этом результирующая кристаллографическая структура будет идентична структуре физиологически латентной конформации ингибитора активатора плазминогена-1 (PAI-1). [55] По этой причине конформация антитромбина, в которой петля реактивного сайта включена в нерасщепленном виде в основную часть белка, называется латентным антитромбином. В отличие от PAI-1 переход антитромбина из нормальной или нативной конформации в латентную конформацию необратим.

Нативный антитромбин может быть преобразован в латентный антитромбин (L-антитромбин) путем нагревания отдельно или в присутствии цитрата . [56] [57] Однако без экстремального нагревания и при температуре 37 °C (температура тела) 10% всего антитромбина, циркулирующего в крови, преобразуется в L-антитромбин в течение 24 часов. [58] [59] Структура L-антитромбина показана на рисунке 6 .

Трехмерная структура нативного антитромбина была впервые определена в 1994 году. [31] [32] Неожиданно белок кристаллизовался как гетеродимер, состоящий из одной молекулы нативного антитромбина и одной молекулы латентного антитромбина. Латентный антитромбин при образовании немедленно связывается с молекулой нативного антитромбина, образуя гетеродимер, и только когда концентрация латентного антитромбина превысит 50% от общего антитромбина, его можно будет обнаружить аналитически. [59] Латентная форма антитромбина не только неактивна против своих целевых протеаз коагуляции, но и ее димеризация с в остальном активной молекулой нативного антитромбина также приводит к инактивации нативных молекул. Физиологическое влияние потери активности антитромбина либо через латентное образование антитромбина, либо через последующее образование димера усугубляется предпочтением димеризации, происходящей между активированным гепарином β-антитромбином и латентным антитромбином, а не α-антитромбином. [59]

Также была выделена форма антитромбина, которая является промежуточным звеном в превращении нативной и латентной форм антитромбина, и она была названа прелатентным антитромбином . [60]

Антиангиогенный антитромбин

Ангиогенез — это физиологический процесс, включающий рост новых кровеносных сосудов из уже существующих. В нормальных физиологических условиях ангиогенез строго регулируется и контролируется балансом ангиогенных стимуляторов и ангиогенных ингибиторов . Рост опухоли зависит от ангиогенеза, и во время развития опухоли требуется устойчивая продукция ангиогенных стимулирующих факторов наряду с уменьшением количества ангиогенных ингибирующих факторов, вырабатываемых опухолевыми клетками. [61] Расщепленная и латентная форма антитромбина мощно ингибирует ангиогенез и рост опухоли в животных моделях. [62] Было показано, что прелатентная форма антитромбина ингибирует ангиогенез in vitro, но на сегодняшний день она не была протестирована в экспериментальных животных моделях.

Ссылки

  1. ^ abc GRCh38: Ensembl выпуск 89: ENSG00000117601 – Ensembl , май 2017 г.
  2. ^ abc GRCm38: Ensembl выпуск 89: ENSMUSG00000026715 – Ensembl , май 2017 г.
  3. ^ "Human PubMed Reference:". Национальный центр биотехнологической информации, Национальная медицинская библиотека США .
  4. ^ "Mouse PubMed Reference:". Национальный центр биотехнологической информации, Национальная медицинская библиотека США .
  5. ^ abc Bjork I, Olson, JE (1997). Антитромбин, кроваво важный серпин (в химии и биологии серпинов) . Plenum Press. стр. 17–33. ISBN 978-0-306-45698-5.
  6. ^ Finley A, Greenberg C (июнь 2013 г.). «Обзорная статья: чувствительность и резистентность к гепарину: управление во время кардиопульмонального шунтирования». Анестезия и анальгезия . 116 (6): 1210–1222. doi : 10.1213/ANE.0b013e31827e4e62 . PMID  23408671. S2CID  22500786.
  7. ^ Seegers WH, Johnson JF, Fell C (январь 1954). «Реакция антитромбина на активацию протромбина». The American Journal of Physiology . 176 (1): 97–103. doi :10.1152/ajplegacy.1953.176.1.97. PMID  13124503.
  8. ^ Yin ET, Wessler S, Stoll PJ (июнь 1971 г.). «Идентичность ингибитора плазмаактивируемого фактора X с антитромбином 3 и кофактором гепарина». Журнал биологической химии . 246 (11): 3712–3719. doi : 10.1016/S0021-9258(18)62185-4 . PMID  4102937.
  9. ^ Collen D, Schetz J, de Cock F, Holmer E, Verstraete M (февраль 1977). «Метаболизм антитромбина III (кофактора гепарина) у человека: эффекты венозного тромбоза и введения гепарина». European Journal of Clinical Investigation . 7 (1): 27–35. doi :10.1111/j.1365-2362.1977.tb01566.x. PMID  65284. S2CID  22494710.
  10. ^ Conard J, Brosstad F, Lie Larsen M, Samama M, Abildgaard U (1983). "Молярная концентрация антитромбина в нормальной плазме человека". Гемостаз . 13 (6): 363–368. doi :10.1159/000214823. PMID  6667903.
  11. ^ Jordan RE (декабрь 1983 г.). «Антитромбин у позвоночных: сохранение гепарин-зависимого антикоагулянтного механизма». Архивы биохимии и биофизики . 227 (2): 587–595. doi :10.1016/0003-9861(83)90488-5. PMID  6607710.
  12. ^ abcd Olson ST, Björk I (1994). "Регуляция активности тромбина антитромбином и гепарином". Семинары по тромбозу и гемостазу . 20 (4): 373–409. doi :10.1055/s-2007-1001928. PMID  7899869. S2CID  28872063.
  13. ^ Brennan SO, George PM, Jordan RE (июль 1987). «Физиологический вариант антитромбина-III не имеет углеводной боковой цепи в положении Asn 135». FEBS Letters . 219 (2): 431–436. Bibcode : 1987FEBSL.219..431B. doi : 10.1016/0014-5793(87)80266-1. PMID  3609301. S2CID  35438503.
  14. ^ Stephens AW, Siddiqui A, Hirs CH (июнь 1987 г.). «Экспрессия функционально активного человеческого антитромбина III». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 84 (11): 3886–3890. Bibcode : 1987PNAS...84.3886S. doi : 10.1073/pnas.84.11.3886 . PMC 304981. PMID  3473488 . 
  15. ^ Zettlmeissl G, Conradt HS, Nimtz M, Karges HE (декабрь 1989 г.). «Характеристика рекомбинантного человеческого антитромбина III, синтезированного в клетках яичников китайского хомячка». Журнал биологической химии . 264 (35): 21153–21159. doi : 10.1016/S0021-9258(19)30060-2 . PMID  2592368.
  16. ^ Gillespie LS, Hillesland KK, Knauer DJ (февраль 1991 г.). «Экспрессия биологически активного человеческого антитромбина III рекомбинантным бакуловирусом в клетках Spodoptera frugiperda». Журнал биологической химии . 266 (6): 3995–4001. doi : 10.1016/S0021-9258(19)67892-0 . PMID  1995647.
  17. ^ Ersdal-Badju E, Lu A, Peng X, Picard V, Zendehrouh P, Turk B и др. (август 1995 г.). «Устранение гетерогенности гликозилирования, влияющей на сродство к гепарину рекомбинантного человеческого антитромбина III путем экспрессии бета-подобного варианта в клетках насекомых, инфицированных бакуловирусом». The Biochemical Journal . 310 (Pt 1) (Pt 1): 323–330. doi :10.1042/bj3100323. PMC 1135891 . PMID  7646463. 
  18. ^ ab Whisstock JC, Pike RN, Jin L, Skinner R, Pei XY, Carrell RW и др. (сентябрь 2000 г.). «Конформационные изменения в серпинах: II. Механизм активации антитромбина гепарином». Журнал молекулярной биологии . 301 (5): 1287–1305. doi :10.1006/jmbi.2000.3982. PMID  10966821.
  19. ^ Шехтер И, Бергер А (апрель 1967). «О размере активного центра в протеазах. I. Папаин». Biochemical and Biophysical Research Communications . 27 (2): 157–162. doi :10.1016/S0006-291X(67)80055-X. PMID  6035483.
  20. ^ Persson E, Bak H, Olsen OH (август 2001 г.). «Замена валина на лейцин 305 в факторе VIIa увеличивает внутреннюю ферментативную активность». Журнал биологической химии . 276 (31): 29195–29199. doi : 10.1074/jbc.M102187200 . PMID  11389142.
  21. ^ Ogston D, Murray J, Crawford GP (сентябрь 1976 г.). «Ингибирование активированной субъединицы Cls первого компонента комплемента антитромбином III в присутствии гепарина». Thrombosis Research . 9 (3): 217–222. doi :10.1016/0049-3848(76)90210-3. PMID  982345.
  22. ^ Danielsson A, Björk I (октябрь 1980 г.). «Медленная, спонтанная диссоциация комплекса антитромбин-тромбин производит протеолитически модифицированную форму ингибитора». FEBS Letters . 119 (2): 241–244. Bibcode : 1980FEBSL.119..241D. doi : 10.1016/0014-5793(80)80262-6. PMID  7428936. S2CID  40067251.
  23. ^ ab Chang WS, Wardell MR, Lomas DA, Carrell RW (март 1996 г.). «Исследование конформаций реактивной петли серпина с помощью протеолитического расщепления». The Biochemical Journal . 314 ( Pt 2) (Pt 2): 647–653. doi :10.1042/bj3140647. PMC 1217096 . PMID  8670081. 
  24. ^ ab Bedsted T, Swanson R, Chuang YJ, Bock PE, Björk I, Olson ST (июль 2003 г.). «Ионы гепарина и кальция значительно усиливают реактивность антитромбина с фактором IXa, создавая новые экзосайты взаимодействия». Биохимия . 42 (27): 8143–8152. doi :10.1021/bi034363y. PMID  12846563.
  25. ^ ab Jordan RE, Oosta GM, Gardner WT, Rosenberg RD (ноябрь 1980 г.). «Кинетика взаимодействий гемостатических ферментов и антитромбина в присутствии низкомолекулярного гепарина». Журнал биологической химии . 255 (21): 10081–10090. doi : 10.1016/S0021-9258(19)70431-1 . PMID  6448846.
  26. ^ Гриффит М.Дж. (июль 1982 г.). «Кинетика усиленной гепарином реакции антитромбина III/тромбина. Доказательства шаблонной модели механизма действия гепарина». Журнал биологической химии . 257 (13): 7360–7365. doi : 10.1016/S0021-9258(18)34385-0 . PMID  7085630.
  27. ^ Olson ST, Björk I (апрель 1991 г.). «Преобладающий вклад поверхностного приближения в механизм ускорения гепарином реакции антитромбин-тромбин. Выяснение эффектов концентрации соли». Журнал биологической химии . 266 (10): 6353–6364. doi : 10.1016/S0021-9258(18)38125-0 . PMID  2007588.
  28. ^ ab Olson ST, Björk I, Sheffer R, Craig PA, Shore JD, Choay J (июнь 1992 г.). «Роль связывающего антитромбин пентасахарида в ускорении гепарином реакций антитромбин-протеиназа. Разрешение вклада конформационных изменений антитромбина в повышение скорости гепарина». Журнал биологической химии . 267 (18): 12528–12538. doi : 10.1016/S0021-9258(18)42309-5 . PMID  1618758.
  29. ^ Johnson DJ, Langdown J, Li W, Luis SA, Baglin TP, Huntington JA (ноябрь 2006 г.). «Кристаллическая структура мономерного нативного антитромбина обнаруживает новую реактивную центральную петлевую конформацию». Журнал биологической химии . 281 (46): 35478–35486. doi : 10.1074/jbc.M607204200 . PMC 2679979. PMID  16973611 . 
  30. ^ abcd Langdown J, Johnson DJ, Baglin TP, Huntington JA (ноябрь 2004 г.). «Аллостерическая активация антитромбина критически зависит от расширения шарнирной области». Журнал биологической химии . 279 (45): 47288–47297. doi : 10.1074/jbc.M408961200 . PMID  15326167.
  31. ^ ab Schreuder HA, de Boer B, Dijkema R, Mulders J, Theunissen HJ, Grootenhuis PD, et al. (Январь 1994). «Интактный и расщепленный комплекс человеческого антитромбина III как модель взаимодействий серпин-протеиназа». Nature Structural Biology . 1 (1): 48–54. doi :10.1038/nsb0194-48. PMID  7656006. S2CID  39110624.
  32. ^ ab Carrell RW, Stein PE, Fermi G, Wardell MR (апрель 1994 г.). "Биологические последствия структуры 3 A димерного антитромбина". Structure . 2 (4): 257–270. doi : 10.1016/S0969-2126(00)00028-9 . PMID  8087553.
  33. ^ Petitou M, Hérault JP, Bernat A, Driguez PA, Duchaussoy P, Lormeau JC и др. (апрель 1999 г.). «Синтез миметиков гепарина, ингибирующих тромбин, без побочных эффектов». Nature . 398 (6726): 417–422. Bibcode :1999Natur.398..417P. doi :10.1038/18877. PMID  10201371. S2CID  4339441.
  34. ^ abc Li W, Johnson DJ, Esmon CT, Huntington JA (сентябрь 2004 г.). «Структура тройного комплекса антитромбин-тромбин-гепарин раскрывает антитромботический механизм гепарина». Nature Structural & Molecular Biology . 11 (9): 857–862. doi :10.1038/nsmb811. PMID  15311269. S2CID  28790576.
  35. ^ ab McCoy AJ, Pei XY, Skinner R, Abrahams JP, Carrell RW (февраль 2003 г.). «Структура бета-антитромбина и влияние гликозилирования на сродство и активность гепарина к антитромбину». Журнал молекулярной биологии . 326 (3): 823–833. doi :10.1016/S0022-2836(02)01382-7. hdl : 1887/3620879 . PMID  12581643.
  36. ^ Turk B, Brieditis I, Bock SC, Olson ST, Björk I (июнь 1997 г.). «Боковая цепь олигосахарида на Asn-135 альфа-антитромбина, отсутствующая в бета-антитромбине, снижает сродство ингибитора к гепарину, влияя на конформационные изменения, вызванные гепарином». Biochemistry . 36 (22): 6682–6691. doi :10.1021/bi9702492. PMID  9184148.
  37. ^ Frebelius S, Isaksson S, Swedenborg J (октябрь 1996 г.). «Ингибирование тромбина антитромбином III на субэндотелии объясняется изоформой AT бета». Артериосклероз, тромбоз и сосудистая биология . 16 (10): 1292–1297. doi :10.1161/01.ATV.16.10.1292. PMID  8857927.
  38. ^ van Boven HH, Lane DA (июль 1997). «Антитромбин и его наследственные дефицитные состояния». Семинары по гематологии . 34 (3): 188–204. PMID  9241705.
  39. ^ Maclean PS, Tait RC (2007). «Наследственный и приобретенный дефицит антитромбина: эпидемиология, патогенез и варианты лечения». Drugs . 67 (10): 1429–1440. doi :10.2165/00003495-200767100-00005. PMID  17600391. S2CID  46971091.
  40. ^ Lane DA, Kunz G, Olds RJ, Thein SL (июнь 1996 г.). «Молекулярная генетика дефицита антитромбина». Blood Reviews . 10 (2): 59–74. doi :10.1016/S0268-960X(96)90034-X. PMID  8813337.
  41. ^ Эгеберг О (июнь 1965 г.). «Наследственный дефицит антитромбина, вызывающий тромбофилию». Thrombosis et Diathesis Haemorrhagica . 13 (2): 516–530. doi :10.1055/s-0038-1656297. PMID  14347873. S2CID  42594050.
  42. ^ Сас Г, Пето I, Банхедьи Д, Бласко Г, Домьян Г (июнь 1980 г.). «Гетерогенность «классического» дефицита антитромбина III». Тромбоз и гемостаз . 43 (2): 133–136. дои : 10.1055/s-0038-1650034. PMID  7455972. S2CID  38459609.
  43. ^ Lane DA, Olds RJ, Conard J, Boisclair M, Bock SC, Hultin M и др. (декабрь 1992 г.). «Плейотропные эффекты мутаций замены антитромбиновой цепи 1C». Журнал клинических исследований . 90 (6): 2422–2433. doi :10.1172/JCI116133. PMC 443398. PMID  1469094 . 
  44. ^ Lane DA, Olds RJ, Thein SL (сентябрь 1994 г.). «Антитромбин III: резюме первого обновления базы данных». Nucleic Acids Research . 22 (17): 3556–3559. PMC 308318. PMID  7937056 . 
  45. ^ ab Sas G (1984). «Наследственный дефицит антитромбина III: биохимические аспекты». Гематология . 17 (1): 81–86. PMID  6724355.
  46. ^ ab Lane DA, Olds RJ, Boisclair M, Chowdhury V, Thein SL, Cooper DN и др. (август 1993 г.). «База данных мутаций антитромбина III: первое обновление. Для подкомитета по тромбину и его ингибиторам Научного и стандартизационного комитета Международного общества по тромбозу и гемостазу». Тромбоз и гемостаз . 70 (2): 361–369. doi :10.1055/s-0038-1649581. PMID  8236149. S2CID  43884122.
  47. ^ Olds RJ, Lane DA, Beresford CH, Abildgaard U, Hughes PM, Thein SL (апрель 1993 г.). «Рецидивирующая делеция в гене антитромбина, AT106-108(-6 пн), выявленная с помощью обнаружения гетеродуплекса ДНК». Genomics . 16 (1): 298–299. doi :10.1006/geno.1993.1184. PMID  8486379.
  48. ^ Olds RJ, Lane DA, Ireland H, Finazzi G, Barbui T, Abildgaard U и др. (декабрь 1991 г.). «Распространенная точечная мутация, вызывающая дефицит антитромбина III типа 1A: AT129 CGA в TGA (Arg в Stop)». Thrombosis Research . 64 (5): 621–625. doi :10.1016/S0049-3848(05)80011-8. PMID  1808766.
  49. ^ ab Имперский колледж Лондона, Медицинский факультет, База данных мутаций антитромбина. Получено 16 августа 2008 г.
  50. ^ Blajchman MA, Austin RC, Fernandez-Rachubinski F, Sheffield WP (ноябрь 1992 г.). «Молекулярная основа наследственного дефицита антитромбина у человека». Blood . 80 (9): 2159–2171. doi : 10.1182/blood.V80.9.2159.2159 . PMID  1421387.
  51. ^ ab "Thrombate III label" (PDF) . Архивировано из оригинала (PDF) 2012-11-15 . Получено 2013-02-23 .
  52. ^ Сайт FDA для ATryn (BL 125284)
  53. ^ ab Антитромбин (рекомбинантный) Вкладыш в упаковку препарата ATryn для инъекций в США 3 февраля 2009 г.
  54. ^ Allingstrup M, Wetterslev J, Ravn FB, Møller AM, Afshari A (апрель 2016 г.). «Антитромбин III для пациентов в критическом состоянии: систематический обзор с метаанализом и последовательным анализом испытаний». Intensive Care Medicine . 42 (4): 505–520. doi :10.1007/s00134-016-4225-7. PMC 2137061 . PMID  26862016. 
  55. ^ Mottonen J, Strand A, Symersky J, Sweet RM, Danley DE, Geoghegan KF и др. (январь 1992 г.). «Структурная основа латентности ингибитора активатора плазминогена-1». Nature . 355 (6357): 270–273. Bibcode :1992Natur.355..270M. doi :10.1038/355270a0. PMID  1731226. S2CID  4365370.
  56. ^ Chang WS, Harper PL (февраль 1997 г.). «Коммерческий концентрат антитромбина содержит неактивные L-формы антитромбина». Тромбоз и гемостаз . 77 (2): 323–328. doi :10.1055/s-0038-1655962. PMID  9157590. S2CID  21583152.
  57. ^ Wardell MR, Chang WS, Bruce D, Skinner R, Lesk AM, Carrell RW (октябрь 1997 г.). «Препаративная индукция и характеристика L-антитромбина: структурного гомолога латентного ингибитора активатора плазминогена-1». Биохимия . 36 (42): 13133–13142. doi :10.1021/bi970664u. PMID  9335576.
  58. ^ Carrell RW, Huntington JA, Mushunje A, Zhou A (июль 2001 г.). «Конформационная основа тромбоза». Тромбоз и гемостаз . 86 (1): 14–22. doi :10.1055/s-0037-1616196. PMID  11487000. S2CID  21452323.
  59. ^ abc Zhou A, Huntington JA, Carrell RW (ноябрь 1999). «Формирование гетеродимера антитромбина in vivo и начало тромбоза». Blood . 94 (10): 3388–3396. doi :10.1182/blood.V94.10.3388.422k20_3388_3396. PMID  10552948.
  60. ^ Larsson H, Akerud P, Nordling K, Raub-Segall E, Claesson-Welsh L, Björk I (апрель 2001 г.). «Новая антиангиогенная форма антитромбина с сохраненной способностью связывания протеиназы и сродством к гепарину». Журнал биологической химии . 276 (15): 11996–12002. doi : 10.1074/jbc.M010170200 . PMID  11278631.
  61. ^ O'Reilly MS (октябрь 2007 г.). «Антиангиогенный антитромбин». Семинары по тромбозу и гемостазу . 33 (7): 660–666. doi :10.1055/s-2007-991533. PMID  18000792. S2CID  260321466.
  62. ^ O'Reilly MS, Pirie-Shepherd S, Lane WS, Folkman J (сентябрь 1999 г.). «Антиангиогенная активность расщепленной конформации серпинового антитромбина». Science . 285 (5435): 1926–1928. doi :10.1126/science.285.5435.1926. PMID  10489375.

Дальнейшее чтение

Внешние ссылки