Переключение класса иммуноглобулинов , также известное как переключение изотипа , изотипическая коммутация или рекомбинация с переключением класса ( CSR ), представляет собой биологический механизм, который изменяет продукцию иммуноглобулина В -клеткой с одного типа на другой, например, с изотипа IgM на изотип IgG . [1] Во время этого процесса изменяется часть константной области тяжелой цепи антитела , но вариабельная область тяжелой цепи остается прежней (термины вариабельная и константная относятся к изменениям или отсутствию таковых между антителами, нацеленными на разные эпитопы ). Поскольку вариабельная область не меняется, переключение класса не влияет на специфичность антигена. Вместо этого антитело сохраняет сродство к тем же антигенам, но может взаимодействовать с разными эффекторными молекулами.
Переключение классов происходит после активации зрелой В-клетки через связанную с мембраной молекулу антитела (или рецептор В-клетки ) для генерации различных классов антител, все с теми же вариабельными доменами, что и исходное антитело, сгенерированное в незрелой В-клетке в процессе рекомбинации V(D)J , но обладающее различными константными доменами в своих тяжелых цепях . [2]
Наивные зрелые В-клетки продуцируют как IgM , так и IgD , которые являются первыми двумя сегментами тяжелой цепи в локусе иммуноглобулина . После активации антигеном эти В-клетки размножаются. Если эти активированные В-клетки сталкиваются со специфическими сигнальными молекулами через свои рецепторы CD40 и цитокинов (оба модулируются Т-хелперными клетками ), они подвергаются переключению класса антител для выработки антител IgG, IgA или IgE. Во время переключения класса константная область тяжелой цепи иммуноглобулина изменяется, но вариабельные области не изменяются, и, следовательно, антигенная специфичность остается прежней. Это позволяет различным дочерним клеткам из одной и той же активированной В-клетки вырабатывать антитела разных изотипов или подтипов (например, IgG1, IgG2 и т. д.). [3]
У человека порядок экзонов тяжелой цепи следующий:
Переключение классов происходит с помощью механизма, называемого связыванием с переключением классов (CSR). Рекомбинация с переключением классов — это биологический механизм, который позволяет классу антител, вырабатываемых активированной В-клеткой, изменяться во время процесса, известного как переключение изотипа или класса. Во время CSR части локуса тяжелой цепи антитела удаляются из хромосомы , а сегменты гена, окружающие удаленную часть, воссоединяются, чтобы сохранить функциональный ген антитела, который производит антитело другого изотипа . Двухцепочечные разрывы образуются в ДНК в консервативных нуклеотидных мотивах, называемых областями переключения (S), которые находятся выше сегментов гена , кодирующих константные области тяжелых цепей антител ; они возникают рядом со всеми генами константной области тяжелой цепи, за исключением δ-цепи. ДНК разрезается и разрывается в двух выбранных S-областях под действием ряда ферментов , включая активационно-индуцированную (цитидин) дезаминазу (AID), урацил- ДНК-гликозилазу и апиримидиновые/апуриновые (AP)-эндонуклеазы . [5] [6] AID начинает процесс переключения классов путем дезаминирования (удаления аминогруппы) цитозинов в S-областях, превращая исходные основания C в дезоксиуридин и позволяя урацил-гликозилазе вырезать основание. Это позволяет AP-эндонуклеазам разрезать новообразованный абазический сайт, создавая начальные SSB, которые спонтанно образуют DSB. [7] Промежуточная ДНК между S-областями впоследствии удаляется из хромосомы, удаляя нежелательные экзоны константной области тяжелой цепи μ или δ и позволяя заменить сегмент гена константной области γ, α или ε. Свободные концы ДНК воссоединяются с помощью процесса, называемого негомологичным соединением концов (NHEJ), для соединения экзона вариабельного домена с желаемым экзоном константного домена нижестоящей тяжелой цепи антитела. [8] При отсутствии негомологичного соединения концов свободные концы ДНК могут быть воссоединены альтернативным путем, смещенным в сторону микрогомологических соединений. [9] За исключением генов μ и δ, только один класс антител экспрессируется B-клеткой в любой момент времени. Хотя рекомбинация переключения класса в основном является процессом делеции, перестраивая хромосому в «цис», она также может происходить (в 10–20% случаев, в зависимости от класса Ig) как межхромосомная транслокация, смешивающая гены тяжелой цепи иммуноглобулина из обоих аллелей. [10] [11]
Цитокины Т-клеток модулируют переключение классов у мышей (таблица 1) и людей (таблица 2). [12] [13] Эти цитокины могут оказывать подавляющее действие на выработку IgM.
В дополнение к высокоповторяющейся структуре целевых S-регионов, процесс переключения классов требует, чтобы S-регионы были сначала транскрибированы и вырезаны из транскриптов тяжелой цепи иммуноглобулина (где они лежат внутри интронов). Ремоделирование хроматина, доступность для транскрипции и для AID, а также синапсис разорванных S-регионов находятся под контролем большого суперэнхансера, расположенного ниже по течению более дистального гена Calpha, 3'-регуляторной области (3'RR). [17] В некоторых случаях суперэнхансер 3'RR сам может быть нацелен на AID и подвергаться разрывам ДНК и соединению с Sμ, что затем удаляет локус тяжелой цепи Ig и определяет рекомбинацию самоубийства локуса (LSR). [18]