Сигнальный пептид (иногда называемый сигнальной последовательностью , сигналом нацеливания , сигналом локализации , последовательностью локализации , транзитным пептидом , лидерной последовательностью или лидерным пептидом ) представляет собой короткий пептид (обычно длиной 16-30 аминокислот ) [1], присутствующий на N-конце (или иногда неклассически на C-конце [2] или внутри) большинства вновь синтезированных белков , которые направляются к секреторному пути . [3] К этим белкам относятся те, которые находятся либо внутри определенных органелл ( эндоплазматический ретикулум , аппарат Гольджи или эндосомы ), секретируются из клетки или вставляются в большинство клеточных мембран. Хотя большинство мембраносвязанных белков типа I имеют сигнальные пептиды, большинство мембраносвязанных белков типа II и многопроникающих мембраносвязанных белков нацелены на секреторный путь своим первым трансмембранным доменом , который биохимически напоминает сигнальную последовательность, за исключением того, что он не расщепляется. Они являются своего рода целевым пептидом .
Сигнальные пептиды функционируют, чтобы побудить клетку транслоцировать белок, обычно к клеточной мембране. У прокариот сигнальные пептиды направляют вновь синтезированный белок в канал, проводящий белок SecYEG, который присутствует в плазматической мембране . Гомологическая система существует у эукариот , где сигнальный пептид направляет вновь синтезированный белок в канал Sec61, который разделяет структурную и последовательную гомологию с SecYEG, но присутствует в эндоплазматическом ретикулуме. [4] Оба канала SecYEG и Sec61 обычно называют транслоконом , а транзит через этот канал известен как транслокация. В то время как секретируемые белки пронизывают канал, трансмембранные домены могут диффундировать через боковые ворота в транслоконе, чтобы разделиться на окружающую мембрану.
Ядро сигнального пептида содержит длинный участок гидрофобных аминокислот (длиной около 5–16 остатков) [5] , который имеет тенденцию образовывать одну альфа-спираль и также называется «h-областью». Кроме того, многие сигнальные пептиды начинаются с короткого положительно заряженного участка аминокислот, который может помочь обеспечить правильную топологию полипептида во время транслокации с помощью так называемого правила «положительно внутри » . [6] Из-за своего близкого расположения к N-концу он называется «n-областью». В конце сигнального пептида обычно находится участок аминокислот, который распознается и расщепляется сигнальной пептидазой и поэтому называется сайтом расщепления. Этот сайт расщепления отсутствует в трансмембранных доменах, которые служат сигнальными пептидами, которые иногда называют сигнальными якорными последовательностями. Сигнальная пептидаза может расщеплять либо во время, либо после завершения транслокации, чтобы образовать свободный сигнальный пептид и зрелый белок. Свободные сигнальные пептиды затем перевариваются специфическими протеазами. Более того, различные типы сигнальных пептидов нацелены на различные целевые местоположения. Например, структура целевого пептида, нацеленного на митохондриальную среду, отличается по длине и показывает чередующийся рисунок небольших положительно заряженных и гидрофобных участков. Сигнальные пептиды, нацеленные на ядро, могут быть обнаружены как на N-конце, так и на C-конце белка и в большинстве случаев сохраняются в зрелом белке.
Определить аминокислотную последовательность N-концевого сигнального пептида можно с помощью деградации Эдмана , циклической процедуры, которая отщепляет аминокислоты по одной за раз. [7] [8]
Как у прокариот, так и у эукариот сигнальные последовательности могут действовать котрансляционно или посттрансляционно.
Котрансляционный путь инициируется, когда сигнальный пептид выходит из рибосомы и распознается частицей распознавания сигнала (SRP). [9] Затем SRP останавливает дальнейшую трансляцию (трансляционная остановка происходит только у эукариот) и направляет комплекс сигнальная последовательность-рибосома-мРНК к рецептору SRP , который присутствует на поверхности либо плазматической мембраны (у прокариот), либо ЭР (у эукариот). [10] После завершения нацеливания на мембрану сигнальная последовательность вставляется в транслокон. Затем рибосомы физически прикрепляются к цитоплазматической поверхности транслокона, и синтез белка возобновляется. [11]
Посттрансляционный путь инициируется после завершения синтеза белка. У прокариот сигнальная последовательность посттрансляционных субстратов распознается белком -шапероном SecB , который переносит белок в АТФазу SecA , которая, в свою очередь, перекачивает белок через транслокон. Хотя известно, что посттрансляционная транслокация происходит у эукариот, она плохо изучена. Известно, что у дрожжей посттрансляционная транслокация требует транслокона и двух дополнительных мембраносвязанных белков, Sec62 и Sec63 . [12]
Сигнальные пептиды чрезвычайно гетерогенны, многие прокариотические и эукариотические пептиды функционально взаимозаменяемы внутри видов или между ними, и все они определяют эффективность секреции белка. [13] [14] [15]
У позвоночных область мРНК , которая кодирует сигнальный пептид (т. е. область кодирования сигнальной последовательности, или SSCR), может функционировать как элемент РНК со специфическими действиями. SSCR способствуют экспорту ядерной мРНК и правильной локализации на поверхности эндоплазматического ретикулума. Кроме того, SSCR имеют специфические особенности последовательности: они имеют низкое содержание аденина , обогащены определенными мотивами и имеют тенденцию присутствовать в первом экзоне с частотой, которая выше ожидаемой. [16] [17]
Белки без сигнальных пептидов также могут секретироваться нетрадиционными механизмами. Например, интерлейкин, галектин. [18] Процесс, посредством которого такие секреторные белки получают доступ к внешней стороне клетки, называется нетрадиционной секрецией белков (UPS). У растений даже 50% секретируемых белков могут зависеть от UPS. [19]
Сигнальные пептиды обычно располагаются на N-конце белков. Некоторые имеют C-концевые или внутренние сигнальные пептиды (примеры: пероксисомальный сигнал нацеливания и сигнал ядерной локализации). Структура этих неклассических сигнальных пептидов значительно отличается от N-концевых сигнальных пептидов. [2]
Сигнальные пептиды не следует путать с лидерными пептидами, иногда кодируемыми лидерной мРНК, хотя оба иногда двусмысленно называют «лидерными пептидами». Эти другие лидерные пептиды представляют собой короткие полипептиды, которые не участвуют в локализации белка, но вместо этого могут регулировать транскрипцию или трансляцию основного белка и не являются частью конечной последовательности белка. Этот тип лидерного пептида в первую очередь относится к форме регуляции генов, обнаруженной у бактерий, хотя аналогичный механизм используется для регуляции эукариотических генов, которая называется uORF (upstream open reading frames).