stringtranslate.com

Элюция

Принцип элюирования колоночной хроматографии

В аналитической и органической химии элюирование представляет собой процесс извлечения одного материала из другого путем промывки растворителем: промывка загруженных ионообменных смол для удаления захваченных ионов или элюирование белков или других биополимеров из гель -электрофореза или хроматографической колонки .

Например, в эксперименте по жидкостной хроматографии аналит обычно адсорбируется («связывается») адсорбентом в колонке для жидкостной хроматографии. Адсорбент, твердая фаза, называемая «стационарной фазой», представляет собой порошок, нанесенный на твердый носитель. В зависимости от состава адсорбента он может иметь различное сродство к «удержанию» других молекул, образуя тонкую пленку на поверхности своих частиц. Элюирование представляет собой процесс удаления аналитов из адсорбента путем пропускания растворителя, называемого «элюентом», мимо комплекса адсорбент-аналит. Когда молекулы растворителя «элюируют» или перемещаются вниз по хроматографической колонке, они могут либо пройти мимо комплекса адсорбент-аналит, либо вытеснить аналит, связавшись с адсорбентом на его месте. После того, как молекулы растворителя вытеснят аналит, аналит можно вынести из колонки для анализа. Вот почему, когда подвижная фаза, называемая «элюатом», выходит из колонки, она обычно поступает в детектор или собирается коллектором фракций для анализа состава.

Прогнозирование и контроль порядка элюирования является ключевым аспектом методов колоночной хроматографии и колоночной электрофореза .

Элюотропный ряд

Элюотропный ряд — это список различных соединений в порядке элюирующей способности для данного адсорбента . «Элюирующая способность» растворителя в значительной степени является мерой того, насколько хорошо растворитель может «вытягивать» аналит из адсорбента, к которому он прикреплен. Это часто происходит, когда элюент адсорбируется на неподвижной фазе, вытесняя аналит. Такие ряды полезны для определения необходимых растворителей, необходимых для хроматографии химических соединений. Обычно такой ряд прогрессирует от неполярных растворителей, таких как н-гексан , к полярным растворителям, таким как метанол или вода . Порядок растворителей в элюотропном ряду зависит как от неподвижной фазы , так и от соединения, используемого для определения порядка.

Элюент

Элюент или элюент — это «носитель» подвижной фазы. Он перемещает аналиты через хроматограф . В жидкостной хроматографии элюент — это жидкий растворитель; в газовой хроматографии — это газ-носитель. [1]

Элюат

Элюат содержит аналитическое вещество , которое выходит из хроматографа . Он включает в себя как аналиты, так и коэлюирующие растворенные вещества, проходящие через колонку, в то время как элюент является только носителем.

Время элюирования и объем элюирования

« Время элюирования» растворенного вещества — это время между началом разделения (время, в которое растворенное вещество попадает в колонку) и временем, в которое растворенное вещество элюируется. Аналогичным образом, объем элюирования — это объем элюента, необходимый для элюирования. При стандартных условиях для известной смеси растворенных веществ в определенной методике объем элюирования может быть достаточной информацией для идентификации растворенных веществ. Например, смесь аминокислот может быть разделена с помощью ионообменной хроматографии . При определенном наборе условий аминокислоты будут элюироваться в том же порядке и при том же объеме элюирования.

Элюция антител

Элюирование антител — это процесс удаления антител, которые прикреплены к своим мишеням, таким как поверхность эритроцитов . Методы включают использование тепла, цикла замораживания-оттаивания, ультразвука, кислот или органических растворителей. Ни один метод не является лучшим во всех ситуациях. [2]

Смотрите также

Ссылки

  1. ^ "IUPAC Gold Book: eluent". Международный союз теоретической и прикладной химии. doi : 10.1351/goldbook.E02040 . Получено 28.09.2008 . {{cite journal}}: Цитировать журнал требует |journal=( помощь )
  2. ^ Джордж Х. Робертс (2006). "Методы элюирования в банке крови" (PDF) . Американские медицинские технологи (AMT) . Архивировано из оригинала (PDF) 2019-07-11 . Получено 2020-07-22 .

Внешние ссылки