stringtranslate.com

Колориметрический анализ

Колориметрический анализ — это метод определения концентрации химического элемента или химического соединения в растворе с помощью цветного реагента . Он применим как к органическим, так и к неорганическим соединениям и может использоваться с ферментативной стадией или без нее. Метод широко используется в медицинских лабораториях и в промышленных целях, например, для анализа проб воды в связи с промышленной очисткой воды .

Оборудование

Необходимое оборудование — это колориметр , несколько кювет и подходящий цветной реагент. Процесс может быть автоматизирован, например, с помощью AutoAnalyzer или анализа с помощью впрыскивания потока . Недавно колориметрические анализы, разработанные для колориметров, были адаптированы для использования с планшетными ридерами для ускорения анализа и сокращения потока отходов. [1]

Неферментативные методы

Примеры

Кальций

Кальций + о-крезолфталеин комплексон → окрашенный комплекс [2]

Медь

Медь + батокупроин дисульфонат → окрашенный комплекс [3]

Креатинин

Креатинин + пикрат → окрашенный комплекс [4]

Железо

Железо + батофенантролин дисульфонат → окрашенный комплекс [5]

Фосфат (неорганический)

Фосфат + молибдат аммония + аскорбиновая кислота → комплекс синего цвета [6]

Ферментативные методы

В ферментативном анализе (широко применяемом в медицинских лабораториях ) цветной реакции предшествует реакция , катализируемая ферментом . Поскольку фермент специфичен к определенному субстрату , можно получить более точные результаты. Ферментативный анализ всегда проводится в буферном растворе при определенной температуре (обычно 37°C), чтобы обеспечить оптимальные условия для действия ферментов. Ниже приведены примеры.

Примеры

Холестерин (метод CHOD-PAP)

  1. Холестерин + кислород --(фермент холестериноксидаза )--> холестенон + перекись водорода
  2. Перекись водорода + 4- аминофеназон + фенол --(фермент пероксидаза )--> окрашенный комплекс + вода [7]

Глюкоза (метод GOD-Perid)

  1. Глюкоза + кислород + вода --(фермент глюкозооксидаза )--> глюконат + перекись водорода
  2. Перекись водорода + ABTS --(фермент пероксидаза )--> окрашенный комплекс [8]

В этом случае обе стадии реакции катализируются ферментами.

Триглицериды (метод GPO-PAP)

  1. Триглицериды + вода --(фермент эстераза )--> глицерин + карбоновая кислота
  2. Глицерин + АТФ --(фермент глицеролкиназа )--> глицерол-3-фосфат + АДФ
  3. Глицерол-3-фосфат + кислород --(фермент глицерол-3-фосфатоксидаза ) --> дигидроксиацетонфосфат + перекись водорода
  4. Перекись водорода + 4- аминофеназон + 4- хлорфенол --(фермент пероксидаза )--> окрашенный комплекс [9]

Мочевина

  1. Мочевина + вода --(фермент уреаза )--> карбонат аммония
  2. Карбонат аммония + фенол + гипохлорит ----> окрашенный комплекс [10]

В этом случае только первая стадия реакции катализируется ферментом, вторая стадия является неферментативной.

Сокращения

Ультрафиолетовые методы

В ультрафиолетовых (УФ) методах нет видимого изменения цвета, но принцип тот же самый, то есть измерение изменения поглощения раствора. УФ-методы обычно измеряют разницу в поглощении на длине волны 340 нм между никотинамидадениндинуклеотидом (НАД) и его восстановленной формой (НАДН).

Примеры

Пируват

Пируват + НАДН --(фермент лактатдегидрогеназа )--> L-лактат + НАД [11]

Смотрите также

Ссылки

  1. ^ Гринан, Н. С., Р. Л. Малвани и Г. К. Симс. 1995. «Микромасштабный метод колориметрического определения мочевины в почвенных экстрактах». Commun. Soil Sci. Plant Anal. 26:2519-2529.
  2. ^ Рэй Саркар и Чаухан (1967) Anal. Biochem. 20:155
  3. ^ Зак, Б. (1958) Клин. Хим. Акта. 3:328
  4. ^ Хок, Озер и Саммерсон, Практическая физиологическая химия , Черчилль, Лондон, 1947, стр. 839-844
  5. ^ Ссылка для дальнейшего использования
  6. ^ Хейдари-Бафруи, Ходжат; Рибейро, Бренно; Чарбаджи, Амер; Анагностопулос, Константин; Фагри, Мохаммад (16.10.2020). «Портативный инфракрасный лайтбокс для улучшения пределов обнаружения бумажных фосфатных устройств». Измерение . 173 : 108607. doi : 10.1016/j.measurement.2020.108607 . ISSN  0263-2241. S2CID  225140011.
  7. ^ Ссылка для дальнейшего использования
  8. ^ Рей и Вилингер (1970) З. аналитик. хим. 252:224
  9. ^ Ссылка для дальнейшего использования
  10. ^ Фосетт и Скотт (1960) J. Clin. Pathol. 13:156
  11. ^ Ссылка для дальнейшего использования