Криоконсервация спермы (обычно называемая банком спермы или заморозкой спермы ) — это процедура сохранения сперматозоидов. Сперму можно успешно использовать неограниченное время [ требуется ссылка ] после криоконсервации . Ее можно использовать для донорства спермы , когда реципиент хочет пройти лечение в другое время или в другом месте, или как средство сохранения фертильности у мужчин, перенесших вазэктомию или процедуры, которые могут поставить под угрозу их фертильность, такие как химиотерапия , лучевая терапия или хирургия. Ее также часто используют трансгендерные женщины перед медицинским переходом способами, которые влияют на фертильность, такими как феминизирующая гормональная терапия и орхиэктомия .
Наиболее распространенным криопротектором, используемым для спермы, является глицерин (10% в питательной среде). Часто в раствор глицерина добавляют сахарозу или другие ди- , трисахариды . Криопротекторные среды могут быть дополнены либо яичным желтком, либо соевым лецитином, причем эти два вещества не имеют статистически значимых различий по сравнению друг с другом в отношении подвижности, морфологии, способности связываться с гиалуронатом in vitro или целостности ДНК после размораживания. [1]
Дополнительные криопротекторы могут использоваться для повышения жизнеспособности сперматозоидов и показателей фертильности после замораживания. Обработка спермы гепаринсвязывающими белками перед криоконсервацией показала снижение криоповреждения и образования ROS. [2] Добавление фактора роста нервов в качестве криопротектора снижает показатели смертности сперматозоидов и увеличивает подвижность после размораживания. [3] Включение холестерина в мембраны сперматозоидов с использованием циклодекстринов перед замораживанием также повышает жизнеспособность сперматозоидов. [4]
Сперма замораживается с использованием либо метода контролируемой скорости, медленного охлаждения ( медленное программируемое замораживание или SPF), либо более нового процесса мгновенного замораживания, известного как витрификация . Витрификация обеспечивает превосходную подвижность после размораживания и криовыживаемость, чем медленное программируемое замораживание . [5] Эта современная технология, изобретенная японцами, используется в лучших центрах по всему миру. Она чрезвычайно быстра (-23000°C/мин), поэтому в результате она позволяет избежать появления мелких кристаллов льда, предотвращая эффект «ножа».
Размораживание при 40 °C (104 °F) по-видимому приводит к оптимальной подвижности сперматозоидов. С другой стороны, точная температура размораживания, по-видимому, оказывает лишь незначительное влияние на жизнеспособность сперматозоидов, акросомный статус, содержание АТФ и ДНК. [6] Как и в случае с замораживанием, для процесса размораживания были разработаны различные методы, оба из которых обсуждались Ди Санто и др. [7]
Что касается уровня фрагментации ДНК сперматозоидов , можно проводить до трех циклов замораживания и размораживания, не вызывая при этом уровень риска, значительно превышающий риск после одного цикла замораживания и размораживания. Это при условии, что образцы повторно замораживаются в исходном криопротекторе и не подвергаются промывке спермы или другим изменениям между ними, а также при условии, что они разделяются центрифугированием в градиенте плотности или всплытием перед использованием в технологии вспомогательной репродукции . [8]
Некоторые данные свидетельствуют об увеличении одноцепочечных разрывов , конденсации и фрагментации ДНК в сперме после криоконсервации. Это может потенциально увеличить риск мутаций в ДНК потомства. Антиоксиданты и использование хорошо контролируемых режимов охлаждения могут потенциально улучшить результаты. [9]
В ходе долгосрочных исследований не было обнаружено никаких доказательств увеличения врожденных дефектов или хромосомных аномалий у людей, зачатых с помощью криоконсервированной спермы, по сравнению с общей популяцией. [9]