Противоточная хроматография ( CCC , также противоточная хроматография ) — это форма жидкостно-жидкостной хроматографии , которая использует жидкую неподвижную фазу , удерживаемую на месте инерцией молекул, составляющих неподвижную фазу, ускоряющихся к центру центрифуги из-за центростремительной силы [1], и используется для разделения, идентификации и количественного определения химических компонентов смеси . В самом широком смысле противоточная хроматография охватывает набор связанных методов жидкостной хроматографии , которые используют две несмешивающиеся жидкие фазы без твердой подложки. [1] [2] Две жидкие фазы контактируют друг с другом, когда по крайней мере одна фаза прокачивается через колонку , полую трубку или ряд камер, соединенных каналами, которые содержат обе фазы. Результирующее динамическое смешивание и осаждение позволяют разделять компоненты по их соответствующим растворимостям в двух фазах. Для обеспечения надлежащей селективности для желаемого разделения может использоваться широкий спектр двухфазных систем растворителей, состоящих по крайней мере из двух несмешивающихся жидкостей. [3] [4]
Некоторые типы противоточной хроматографии, такие как двухпоточная CCC, характеризуются настоящим противоточным процессом, в котором две несмешивающиеся фазы протекают мимо друг друга и выходят на противоположных концах колонки. [5] Однако чаще одна жидкость действует как неподвижная фаза и удерживается в колонке, в то время как подвижная фаза прокачивается через нее. Жидкая неподвижная фаза удерживается на месте гравитацией или инерцией молекул, составляющих неподвижную фазу, ускоряющихся к центру центрифуги из-за центростремительной силы . Примером гравитационного метода является капельная противоточная хроматография (DCCC). [6] Существует два режима, с помощью которых неподвижная фаза удерживается центростремительной силой: гидростатический и гидродинамический . В гидростатическом методе колонка вращается вокруг центральной оси. [7] Гидростатические приборы продаются под названием центробежная распределительная хроматография (CPC). [8] Гидродинамические приборы часто позиционируются как приборы для высокоскоростной или высокопроизводительной противоточной хроматографии (HSCCC и HPCCC соответственно), которые используют силу Архимеда в спиральной катушке для удержания неподвижной фазы в колонке. [9]
Компоненты системы CCC аналогичны большинству конфигураций жидкостной хроматографии, таких как высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ). Один или несколько насосов подают фазы в колонку, которая сама является инструментом CCC. Образцы вводятся в колонку через петлю для образцов, заполненную автоматическим или ручным шприцем. Выходящий поток контролируется различными детекторами, такими как ультрафиолетовая–видимая спектроскопия или масс-спектрометрия . Работа насосов, инструмента CCC, ввод образца и детектирование могут контролироваться вручную или с помощью микропроцессора.
Предшественником современной теории и практики противоточной хроматографии было противоточное распределение (ПЗС). Теория ПЗС была описана в 1930-х годах Рэндаллом и Лонгтином. [10] Арчер Мартин и Ричард Лоуренс Миллингтон Синг далее развили методологию в 1940-х годах. [11] Наконец, Лайман К. Крейг представил аппарат противоточного распределения Крейга в 1944 году, который сделал ПЗС практичным для лабораторных работ. [12] ПЗС использовалась для разделения широкого спектра полезных соединений в течение нескольких десятилетий. [13]
Стандартная колоночная хроматография состоит из твердой неподвижной фазы и жидкой подвижной фазы, в то время как газовая хроматография (ГХ) использует твердую или жидкую неподвижную фазу на твердом носителе и газообразную подвижную фазу. Напротив, в жидкостно-жидкостной хроматографии как подвижная, так и неподвижная фазы являются жидкими. Однако контраст не такой разительный, как кажется на первый взгляд. Например, в обращенно-фазовой хроматографии неподвижную фазу можно рассматривать как жидкость, которая иммобилизована путем химической связи с микропористым твердым носителем из силикагеля . В противоточной хроматографии центростремительные или гравитационные силы иммобилизуют неподвижный жидкий слой. Устраняя твердые носители, избегается постоянная адсорбция аналита на колонке, и может быть достигнуто высокое извлечение аналита. [14] Инструмент для противоточной хроматографии легко переключается между нормально-фазовой хроматографией и обращенно-фазовой хроматографией, просто меняя подвижную и неподвижную фазы. При колоночной хроматографии потенциал разделения ограничивается коммерчески доступными средами неподвижной фазы и их особыми характеристиками. В противоточной хроматографии можно использовать практически любую пару несмешивающихся растворов при условии, что неподвижная фаза будет успешно сохранена.
Расходы на растворители также обычно ниже, чем для ВЭЖХ. По сравнению с колоночной хроматографией потоки и общее использование растворителя в большинстве разделений противоточной хроматографии могут быть уменьшены вдвое и даже до одной десятой. [15] Кроме того, исключаются расходы на покупку и утилизацию неподвижной фазовой среды. Еще одним преимуществом противоточной хроматографии является то, что эксперименты, проводимые в лаборатории, можно масштабировать до промышленных объемов. Когда газовая хроматография или ВЭЖХ проводятся с большими объемами, разрешение теряется из-за проблем с соотношением поверхности к объему и динамикой потока; этого можно избежать, когда обе фазы жидкие. [16]
Процесс разделения CCC можно рассматривать как происходящий в три этапа: смешивание, отстаивание и разделение двух фаз (хотя они часто происходят непрерывно). Интенсивное перемешивание фаз имеет решающее значение для максимизации площади поверхности раздела между ними и улучшения массопереноса . Аналит будет распределяться между фазами в соответствии со своим коэффициентом распределения , который также называется коэффициентом распределения, константой распределения или отношением распределения и представлен как P, K, D, K c или K D . [17] Коэффициент распределения для аналита в конкретной двухфазной системе растворителей не зависит от объема прибора, скорости потока, отношения объема удерживания неподвижной фазы и g-силы, необходимой для иммобилизации неподвижной фазы. Степень удерживания неподвижной фазы является решающим параметром. Общими факторами, которые влияют на удерживание неподвижной фазы, являются скорость потока, состав растворителя двухфазной системы растворителей и g-сила . Удержание неподвижной фазы представлено отношением удерживания объема неподвижной фазы (Sf), которое представляет собой объем неподвижной фазы, деленный на общий объем прибора. Время осаждения является свойством системы растворителя и матрицы образца , оба из которых в значительной степени влияют на удержание неподвижной фазы. [18]
Для большинства химиков-технологов термин «противоток» подразумевает две несмешивающиеся жидкости, движущиеся в противоположных направлениях, как это обычно происходит в больших центробежных экстракторах . За исключением двухпоточного (см. ниже) CCC, большинство режимов работы противоточной хроматографии имеют неподвижную фазу и подвижную фазу. Даже в этой ситуации противоточные потоки происходят внутри колонны прибора. [19] Несколько исследователей предложили переименовать CCC и CPC в жидкостно-жидкостную хроматографию, [20] но другие считают, что сам термин «противоток» является неправильным. [21]
В отличие от колоночной хроматографии и ВЭЖХ, операторы противоточной хроматографии могут вводить большие объемы относительно объема колонки. [22] Обычно можно вводить от 5 до 10% объема спирали. В некоторых случаях это может быть увеличено до 15–20% объема спирали. [23] Обычно большинство современных коммерческих CCC и CPC могут вводить емкость от 5 до 40 г/л. Диапазон настолько велик, даже для конкретного прибора, не говоря уже обо всех параметрах прибора, поскольку тип мишени, матрицы и доступного двухфазного растворителя сильно различаются. Примерно 10 г/л было бы более типичным значением, которое большинство приложений могли бы использовать в качестве базового значения.
Разделение противотоком начинается с выбора подходящей двухфазной системы растворителей для желаемого разделения. Практикующему специалисту по КХЦ доступен широкий спектр двухфазных смесей растворителей, включая комбинацию н-гексана (или гептана ), этилацетата , метанола и воды в различных пропорциях. [24] Эту базовую систему растворителей иногда называют системой растворителей HEMWat. [ необходима цитата ] Выбор системы растворителей может быть обусловлен прочтением литературы по КХЦ. Знакомая техника тонкослойной хроматографии также может быть использована для определения оптимальной системы растворителей. [25] Организация систем растворителей в «семейства» также значительно облегчила выбор систем растворителей. [26] Систему растворителей можно протестировать с помощью эксперимента по разделению в одной колбе. Измеренный коэффициент разделения в эксперименте по разделению покажет поведение элюирования соединения. Обычно желательно выбирать систему растворителей, в которой целевое соединение(я) имеет коэффициент распределения от 0,25 до 8. [27] Исторически считалось, что ни один коммерческий противоточный хроматограф не может справиться с высокой вязкостью ионных жидкостей . Однако стали доступны современные приборы, которые могут работать с 30–70+ % ионных жидкостей (и потенциально со 100% ионной жидкостью, если обе фазы представляют собой соответствующим образом настроенные ионные жидкости). [28] Ионные жидкости можно настраивать для полярных/неполярных органических, ахиральных и хиральных соединений, биомолекул и неорганических разделений, поскольку ионные жидкости можно настраивать для получения исключительной растворяющей способности и специфичности. [29]
После выбора двухфазной системы растворителей партия формируется и уравновешивается в делительной воронке . Этот шаг называется предварительным уравновешиванием системы растворителей. Две фазы разделяются. Затем колонка заполняется неподвижной с помощью насоса. Затем в колонке задаются условия уравновешивания, такие как желаемая скорость вращения, и подвижная фаза прокачивается через колонку. Подвижная фаза вытесняет часть неподвижной фазы до тех пор, пока не будет достигнуто уравновешивание колонки, и подвижная фаза не элюируется из колонки. Образец может быть введен в колонку в любое время на этапе уравновешивания колонки или после достижения уравновешивания. После того, как объем элюента превысит объем подвижной фазы в колонке, компоненты образца начнут элюироваться. Соединения с коэффициентом распределения, равным единице, будут элюироваться, когда один объем колонки подвижной фазы пройдет через колонку с момента инъекции. Затем соединение можно ввести в другую неподвижную фазу, чтобы повысить разрешение результатов . [30] Поток останавливается после элюирования целевого соединения(ий) или выдавливания колонки путем прокачки неподвижной фазы через колонку. Примером основного применения противоточной хроматографии является взятие чрезвычайно сложной матрицы, такой как растительный экстракт, выполнение противоточного хроматографического разделения с тщательно подобранной системой растворителей и выдавливание колонки для извлечения всего образца. Исходная сложная матрица будет фракционирована на дискретные узкие полосы полярности , которые затем могут быть проанализированы на химический состав или биологическую активность. Выполнение одного или нескольких разделений противоточной хроматографии в сочетании с другими хроматографическими и нехроматографическими методами имеет потенциал для быстрого прогресса в распознавании состава чрезвычайно сложных матриц. [31] [32]
Капельная противоточная хроматография (DCCC) была представлена в 1970 году Танимурой, Пизано, Ито и Боуманом. [33] DCCC использует только гравитацию для перемещения подвижной фазы через неподвижную фазу, которая удерживается в длинных вертикальных трубках, соединенных последовательно. В нисходящем режиме капли более плотной подвижной фазы и образец падают через колонки более легкой неподвижной фазы, используя только гравитацию. Если используется менее плотная подвижная фаза, она будет подниматься через неподвижную фазу; это называется восходящим режимом. Элюент из одной колонки переносится в другую; чем больше колонок используется, тем больше теоретических тарелок можно достичь. DCCC добился определенного успеха при разделении природных продуктов, но был в значительной степени затмён быстрым развитием высокоскоростной противоточной хроматографии. [34] Основным ограничением DCCC является то, что скорости потока низкие, и для большинства бинарных систем растворителей достигается плохое смешивание.
Современная эра CCC началась с разработки планетарной центрифуги доктором Йоитиро Ито, которая была впервые представлена в 1966 году как закрытая спиральная трубка, которая вращалась на «планетарной» оси, как и на «солнечной» оси. [35] Впоследствии была разработана проточная модель, и в 1970 году новый метод был назван противоточной хроматографией. [2] Метод был дополнительно развит путем использования тестовых смесей аминокислот DNP в системе растворителей хлороформ : ледяная уксусная кислота : 0,1 М водная соляная кислота (2:2:1 об./об.). [36] Потребовалось много разработок для проектирования прибора, чтобы требуемое планетарное движение могло поддерживаться, пока фазы прокачиваются через катушку(и). [37] Были исследованы такие параметры, как относительное вращение двух осей (синхронное или несинхронное), направление потока через катушку и углы ротора. [38] [39]
К 1982 году технология была достаточно развита, чтобы назвать ее «высокоскоростной» противоточной хроматографией (HSCCC). [40] [41] Питер Кармечи изначально коммерциализировал многослойный катушечный сепаратор/экстрактор PC Inc. Ito, в котором использовалась одна катушка (на которую наматывалась катушка) и противовес, а также набор «летучих выводов», которые представляли собой трубки, соединяющие катушки. [42] Доктор Уолтер Конвей и другие позже усовершенствовали конструкцию катушки таким образом, что на одну катушку можно было поместить несколько катушек, даже катушек с разными размерами трубок. [43] Эдвард Чоу позже усовершенствовал и коммерциализировал конструкцию с тремя катушками как Pharmatech CCC, в которой был механизм раскручивания выводов между тремя катушками. [44] Quattro CCC, выпущенный в 1993 году, еще больше усовершенствовал коммерчески доступные инструменты, используя новую конструкцию с зеркальным отображением и двумя катушками, которая не нуждалась в механизме раскручивания Pharmatech между несколькими катушками, поэтому могла по-прежнему вмещать несколько катушек на одном инструменте. [45] Гидродинамические CCC теперь доступны с 4 катушками на инструмент. Эти катушки могут быть из PTFE , PEEK , PVDF или трубки из нержавеющей стали. 2, 3 или 4 катушки могут иметь одинаковое отверстие для облегчения «2D» CCC (см. ниже). Катушки могут быть соединены последовательно для удлинения катушки и увеличения емкости, или катушки могут быть соединены параллельно, так что 2, 3 или 4 разделения могут быть выполнены одновременно. Катушки также могут быть разных размеров на одном инструменте, в диапазоне от 1 до 6 мм на одном инструменте, что позволяет одному инструменту оптимизировать от мг до килограммов в день. Совсем недавно производные приборы предлагались с вращающимися уплотнениями для различных гидродинамических конструкций CCC вместо свободных выводов, как в качестве индивидуальных, так и в качестве стандартных опций. [46] [47] [48] [49] [50]
Принцип работы оборудования CCC требует колонки, состоящей из трубки, намотанной на бобину. Бобина вращается в двухосном гирационном движении (кардиоида ) , что вызывает воздействие переменной силы g на колонку во время каждого вращения. Это движение заставляет колонку видеть один шаг разделения за оборот, и компоненты образца разделяются в колонке из-за их коэффициента разделения между двумя несмешивающимися жидкими фазами. «Высокопроизводительная» противоточная хроматография (HPCCC) работает во многом так же, как HSCCC. Семилетний процесс исследований и разработок привел к созданию приборов HPCCC, которые генерировали 240 g по сравнению с 80 g машин HSCCC. Это увеличение силы g и большего отверстия колонки позволило увеличить пропускную способность в десять раз за счет улучшенных скоростей потока подвижной фазы и более высокого удержания неподвижной фазы. [51] Противоточная хроматография является методом препаративной жидкостной хроматографии, однако с появлением приборов HPCCC с более высоким g теперь стало возможным работать с приборами с загрузкой образцов всего в несколько миллиграммов, тогда как в прошлом требовались сотни миллиграммов. Основные области применения этого метода включают очистку натуральных продуктов и разработку лекарств. [52]
Гидростатическая CCC или центробежная распределительная хроматография (CPC) была изобретена в 1980-х годах японской компанией Sanki Engineering Ltd, президентом которой был Канити Нуногаки. [8] [53] CPC широко разрабатывалась во Франции, начиная с конца 1990-х годов. Во Франции изначально оптимизировали концепцию штабелированных дисков, инициированную Sanki. Совсем недавно во Франции и Великобритании были разработаны конфигурации CPC без штабелированных дисков с роторами из ПТФЭ , нержавеющей стали или титана . Они были разработаны для устранения возможных утечек между штабелированными дисками оригинальной концепции и для обеспечения возможности паровой очистки в соответствии с надлежащей производственной практикой . Объемы от 100 мл до 12 литров доступны в различных материалах ротора. 25-литровый ротор CPC имеет титановый ротор. [54] Эта технология иногда продается под названием «быстрый» CPC или «высокопроизводительный» CPC.
Инструмент центробежного разделительного хроматографа состоит из уникального ротора, который содержит колонку. Этот ротор вращается на своей центральной оси (в то время как колонка HSCCC вращается на своей планетарной оси и одновременно вращается эксцентрично вокруг другой солнечной оси). При меньших вибрациях и шуме CPC предлагает типичный диапазон скорости вращения от 500 до 2000 об/мин. В отличие от гидродинамического CCC, скорость вращения не прямо пропорциональна объемному соотношению удерживаемой фазы неподвижной фазы. Как и DCCC, CPC может работать как в нисходящем, так и в восходящем режиме, где направление относительно силы, создаваемой ротором, а не силы тяжести. Модернизированная колонка CPC с большими камерами и каналами была названа центробежной разделительной экстракцией (CPE). [55] В конструкции CPE можно достичь более высоких скоростей потока и увеличенной загрузки колонки.
CPC предлагает прямое масштабирование от аналитических аппаратов (несколько миллилитров) до промышленных аппаратов (несколько литров) для быстрого серийного производства. CPC, по-видимому, особенно подходит для размещения водных двухфазных систем растворителей. [56] Как правило, приборы CPC могут удерживать системы растворителей, которые плохо удерживаются в гидродинамическом приборе из-за небольших различий в плотности между фазами. [57] Для разработки приборов CPC было очень полезно визуализировать закономерности течения, которые приводят к смешиванию и осаждению в камере CPC, с помощью асинхронной камеры и стробоскопа, запускаемого ротором CPC. [58]
Вышеупомянутые гидродинамические и гидростатические приборы могут использоваться различными способами или режимами работы, чтобы удовлетворить особые потребности ученого в разделении. Было разработано много режимов работы, чтобы воспользоваться преимуществами и возможностями метода противоточной хроматографии. Как правило, следующие режимы могут быть реализованы с помощью коммерчески доступных приборов.
Нормальное фазовое элюирование достигается путем прокачки неводной или двухфазной системы растворителей через колонку в качестве подвижной фазы, при этом более полярная неподвижная фаза удерживается в колонке. Причина первоначальной номенклатуры имеет значение. Поскольку оригинальные неподвижные фазы бумажной хроматографии были заменены более эффективными материалами, такими как диатомиты (природный микропористый кремнезем), а затем современным силикагелем , неподвижная фаза тонкослойной хроматографии была полярной (гидроксильные группы прикреплены к кремнезему), и максимальное удерживание достигалось с неполярными растворителями, такими как н-гексан . Затем для перемещения полярных соединений вверх по пластине постепенно использовались более полярные элюенты. Были опробованы различные фазы, связанные с алканами , причем наиболее популярной стала C18. Алкановые цепи были химически связаны с кремнеземом, и произошел разворот тенденции элюирования. Таким образом, полярная неподвижная фаза стала «нормальной» фазовой хроматографией , а неполярная неподвижная фаза стала «обратной» фазовой хроматографией .
При элюировании с обращенной фазой (например, водной подвижной фазой) водная фаза используется в качестве подвижной фазы с менее полярной неподвижной фазой. В противоточной хроматографии одна и та же система растворителей может использоваться как в режиме нормальной, так и обращенной фазы, просто переключая направление потока подвижной фазы через колонку.
Выдавливание неподвижной фазы из колонки в конце эксперимента по разделению путем остановки вращения и прокачки растворителя или газа через колонку использовалось специалистами по ККК до того, как был предложен термин EECCC. [59] В режиме элюирования-экструзии (EECCC) подвижная фаза выдавливается после определенной точки путем переключения фазы, закачиваемой в систему, при сохранении вращения. [60] Например, если разделение было инициировано с водной фазой в качестве подвижной фазы, в определенной точке органическая фаза прокачивается через колонку, что эффективно выталкивает обе фазы, которые присутствовали в колонке во время переключения. Весь образец элюируется в порядке полярности (либо нормальной, либо обратной) без потери разрешения из-за диффузии. Для этого требуется только один объем колонки фазы растворителя, и колонка остается полной свежей неподвижной фазы для последующего разделения. [61]
Использование градиента растворителя очень хорошо развито в колоночной хроматографии, но менее распространено в CCC. Градиент растворителя создается путем увеличения (или уменьшения) полярности подвижной фазы во время разделения для достижения оптимального разрешения в более широком диапазоне полярностей . Например, градиент подвижной фазы метанол -вода может использоваться с использованием гептана в качестве неподвижной фазы. Это невозможно со всеми двухфазными системами растворителей из-за чрезмерной потери неподвижной фазы, создаваемой нарушением условий равновесия внутри колонки. Градиенты могут создаваться либо поэтапно, [62] , либо непрерывно. [63]
В двухрежимном режиме подвижная и неподвижная фазы меняются местами на полпути через эксперимент по разделению. Это требует изменения фазы, прокачиваемой через колонку, а также направления потока. [64] Двухрежимный режим работы, скорее всего, вымывает весь образец из колонки, но порядок элюирования нарушается переключением фазы и направления потока.
Двухпоточная, также известная как двойная, противоточная хроматография происходит, когда обе фазы текут в противоположных направлениях внутри колонки. Существуют приборы для работы с двойным потоком как для гидродинамического, так и для гидростатического КХК. Двухпоточная противоточная хроматография была впервые описана Йоитиро Ито в 1985 году для пенного КХК, где выполнялось разделение газ-жидкость. [65] Вскоре последовало разделение жидкость-жидкость. [66] Прибор для противоточной хроматографии должен быть модифицирован таким образом, чтобы оба конца колонки имели как входные, так и выходные возможности. Этот режим может обеспечивать непрерывное или последовательное разделение с образцом, вводимым в середину колонки или между двумя катушками в гидродинамическом приборе. [67] Метод, называемый прерывистой противоточной экстракцией (ICcE), является квазинепрерывным методом, при котором поток фаз чередуется «прерывисто» между нормальным и обращенно-фазовым элюированием, так что неподвижная фаза также чередуется. [68]
Рециркуляционная хроматография практикуется как в ВЭЖХ [69], так и в КХЦ. [70] В рециркуляционной хроматографии целевые соединения повторно вводятся в колонку после того, как они элюируются. Каждое прохождение через колонку увеличивает число теоретических тарелок, которые испытывают соединения, и улучшает хроматографическое разрешение. Прямая рециркуляция должна выполняться с изократической системой растворителей. В этом режиме элюент может быть селективно повторно хроматографирован на той же или другой колонке, чтобы облегчить разделение. [71] Этот процесс селективной рециркуляции был назван «сердечным разрезом» и особенно эффективен для очистки выбранных целевых соединений с некоторой жертвенной потерей извлечения. [72] Процесс повторного разделения выбранных фракций из одного хроматографического эксперимента с другим хроматографическим методом давно практикуется учеными. Рециркуляция и последовательная хроматография являются упрощенной версией этого процесса. В КХЦ характеристики разделения колонки могут быть изменены просто путем изменения состава двухфазной системы растворителей. [73]
В обычном эксперименте CCC двухфазная система растворителей предварительно уравновешивается до того, как прибор заполняется неподвижной фазой и уравновешивается подвижной фазой. Режим ионного обмена был создан путем модификации обеих фаз после предварительного уравновешивания. [74] Обычно в подвижную фазу добавляется ионный вытеснитель (или элюент), а в неподвижную фазу — ионный фиксатор. Например, водная подвижная фаза может содержать NaI в качестве вытеснителя, а органическая неподвижная фаза может быть модифицирована четвертичной аммониевой солью, называемой Aliquat 336, в качестве фиксатора. [75] Режим, известный как очистка зоны pH, представляет собой тип режима ионного обмена, в котором в качестве модификаторов растворителя используются кислоты и/или основания. [76] Обычно аналиты элюируются в порядке, определяемом их значениями pKa . Например, 6 оксиндольных алкалоидов были выделены из 4,5 г образца экстракта стебля Gelsemium elegans с двухфазной системой растворителей, состоящей из гексана–этилацетата–метанола–воды (3:7:1:9, об./об.), где 10 мМ триэтиламина (TEA) было добавлено к верхней органической неподвижной фазе в качестве фиксатора и 10 мМ соляной кислоты (HCl) к водной подвижной фазе в качестве элюента. [77] Ионообменные режимы, такие как очистка в зоне pH, имеют огромный потенциал, поскольку могут быть достигнуты высокие нагрузки образца без ущерба для разделительной способности. Лучше всего он работает с ионизированными соединениями, такими как азотсодержащие алкалоиды или карбоновые кислоты, содержащие жирные кислоты. [78]
Противоточная хроматография и связанные с ней методы разделения жидкость-жидкость использовались как в промышленных, так и в лабораторных масштабах для очистки широкого спектра химических веществ. Реализации разделения включают белки, [79] ДНК, [80] каннабидиол (КБД) из Cannabis Sativa [81] антибиотики, [82] витамины, [83] натуральные продукты , [31] фармацевтические препараты, [52] ионы металлов, [84] пестициды, [85] энантиомеры , [86] полиароматические углеводороды из образцов окружающей среды, [87] активные ферменты, [88] и углеродные нанотрубки . [89] Противоточная хроматография известна своим высоким динамическим диапазоном масштабируемости: с помощью этой техники можно получать очищенные химические компоненты в количествах от миллиграмма до килограмма. [90] Она также имеет преимущество в том, что позволяет работать с химически сложными образцами с нерастворенными частицами.
{{cite journal}}
: CS1 maint: числовые имена: список авторов ( ссылка )