stringtranslate.com

Уреаза

Уреазы ( EC 3.5.1.5) функционально относятся к суперсемейству амидогидролаз и фосфотриэстераз . [2] Уреазы встречаются во многих бактериях , грибах , водорослях , растениях и некоторых беспозвоночных , а также в почвах в качестве почвенного фермента . Они представляют собой никельсодержащие металлоферменты с высокой молекулярной массой. [3]

Эти ферменты катализируют гидролиз мочевины до углекислого газа и аммиака : ​

( NH2 ) 2CO + H2O​уреаза→CO2 + 2NH3​

Гидролиз мочевины происходит в два этапа. На первом этапе образуются аммиак и карбаминовая кислота . Карбамат спонтанно и быстро гидролизуется до аммиака и угольной кислоты . Активность уреазы повышает pH ее среды, поскольку образуется аммиак, который является основным.

История

Его активность была впервые идентифицирована в 1876 году Фредериком Альфонсом Мускулюсом как растворимый фермент. [4] В 1926 году Джеймс Б. Самнер показал, что уреаза является белком, исследуя его кристаллизованную форму. [5] Работа Самнера была первой демонстрацией того, что белок может функционировать как фермент, и в конечном итоге привела к признанию того, что большинство ферментов на самом деле являются белками. Уреаза была первым кристаллизованным ферментом. За эту работу Самнер был удостоен Нобелевской премии по химии в 1946 году . [6] Кристаллическая структура уреазы была впервые решена П. А. Карплюсом в 1995 году. [5]

Структура

Исследование 1984 года, посвященное уреазе из бобов, показало, что активный участок содержит пару никелевых центров. [7] Активация in vitro также была достигнута с использованием марганца и кобальта вместо никеля. [8] Соли свинца являются ингибирующими .

Молекулярная масса уреазы бобов составляет либо 480 кДа , либо 545 кДа (масса рассчитана на основе аминокислотной последовательности). 840 аминокислот на молекулу, из которых 90 являются остатками цистеина. [9]

Оптимальный pH — 7,4, а оптимальная температура — 60 °C. Субстраты включают мочевину и гидроксимочевину .

Бактериальные уреазы состоят из трех отдельных субъединиц, одной большой каталитической (α 60–76 кДа) и двух маленьких (β 8–21 кДа, γ 6–14 кДа), обычно образующих (αβγ) 3 тримера стехиометрии с 2-кратной симметричной структурой (обратите внимание, что изображение выше дает структуру асимметричной единицы, одной трети истинной биологической сборки), они являются ферментами, богатыми цистеином, в результате чего молярные массы ферментов составляют от 190 до 300 кДа. [9]

Исключительная уреаза получена из Helicobacter sp. Они состоят из двух субъединиц, α(26–31 кДа)-β(61–66 кДа). Эти субъединицы образуют супрамолекулярный (αβ) 12- додекамерный комплекс. [10] повторяющихся субъединиц α-β, каждая связанная пара субъединиц имеет активный сайт, всего 12 активных сайтов. [10] Он играет важную функцию для выживания, нейтрализуя желудочную кислоту , позволяя мочевине проникать в периплазму через протон-зависимый мочевинный канал . [11] Наличие уреазы используется в диагностике видов Helicobacter .

Все бактериальные уреазы являются исключительно цитоплазматическими, за исключением тех, что находятся в Helicobacter pylori , которые наряду с цитоплазматической активностью имеют внешнюю активность с клетками-хозяевами. Напротив, все растительные уреазы являются цитоплазматическими. [9]

Грибковые и растительные уреазы состоят из идентичных субъединиц (~90 кДа каждая), чаще всего собранных в виде тримеров и гексамеров. Например, уреаза бобов имеет две структурные и одну каталитическую субъединицу. Субъединица α содержит активный центр, она состоит из 840 аминокислот на молекулу (90 цистеинов), ее молекулярная масса без ионов Ni(II) составляет 90,77 кДа. Масса гексамера с 12 ионами никеля составляет 545,34 кДа. Другими примерами гомогексамерных структур растительных уреаз являются ферменты сои, голубиного гороха и семян хлопка. [9]

Важно отметить, что, хотя уреазы из разных источников, от бактерий до растений и грибов, состоят из разных типов субъединиц, они демонстрируют высокую гомологию аминокислотных последовательностей. Одна растительная уреазная цепь эквивалентна слитой γ-β-α организации. Helicobacter " α" эквивалентна слиянию нормальных бактериальных γ-β субъединиц, в то время как ее "β" субъединица эквивалентна нормальной бактериальной α. [9] Организация из трех цепей, вероятно, является предковой. [12]

Активность

K cat / K m уреазы при переработке мочевины в 10 14 раз больше, чем скорость некатализируемой реакции элиминации мочевины . [5] В природе существует множество причин для этого наблюдения. Близость мочевины к активным группам в активном центре вместе с правильной ориентацией мочевины позволяют гидролизу происходить быстро. Мочевина сама по себе очень стабильна из-за резонансных форм, которые она может принимать. Стабильность мочевины, как предполагается, обусловлена ​​ее резонансной энергией, которая оценивается в 30–40 ккал/моль. [5] Это происходит потому, что все цвиттер-ионные резонансные формы отдают электроны карбонильному углероду, делая его менее электрофильным , делая его менее реактивным к нуклеофильной атаке. [5]

Активный сайт

Активный центр уреаз расположен в субъединицах α (альфа) . Это бис-μ-гидроксодимерный никелевый центр с межатомным расстоянием ~3,5 Å. [5] > Пара Ni(II) слабо антиферромагнитно связана. [13] Исследования рентгеновской абсорбционной спектроскопии (XAS) Canavalia ensiformis (фасоль), Klebsiella aerogenes и Sporosarcina pasteurii (ранее известной как Bacillus pasteurii ) [14] подтверждают 5–6-координационные ионы никеля с исключительно O/N-связыванием, включая два имидазольных лиганда на никель. [8] Предполагается, что субстрат мочевины вытесняет лиганды aqua .

Молекулы воды, расположенные по направлению к отверстию активного центра, образуют тетраэдрический кластер, который заполняет полость сайта посредством водородных связей . Предполагается, что некоторые аминокислотные остатки образуют подвижный лоскут сайта, который является воротами для субстрата. [3] Остатки цистеина часто встречаются в области лоскута ферментов, которые, как было определено, не являются необходимыми для катализа, хотя и участвуют в правильном позиционировании других ключевых остатков в активном центре. [15] В уреазе Sporosarcina pasteurii лоскут был обнаружен в открытой конформации, в то время как его закрытая конформация, по-видимому, необходима для реакции. [14]

При сравнении α-субъединицы уреазы Helicobacter pylori и других бактериальных уреаз совпадают с уреазами фасоли. [15]

Связывание мочевины с активным центром уреазы не наблюдалось. [9]

Предлагаемые механизмы

Блейкли/Зернер

Один из механизмов катализа этой реакции уреазой был предложен Блейкли и Зернером. [16] Он начинается с нуклеофильной атаки карбонильного кислорода молекулы мочевины на 5-координированный Ni (Ni-1). Слабо координированный водный лиганд вытесняется на его место. Неподеленная пара электронов от одного из атомов азота молекулы мочевины создает двойную связь с центральным углеродом, и полученный NH 2 − координированного субстрата взаимодействует с близлежащей положительно заряженной группой. Блейкли и Зернер предположили, что эта близлежащая группа является ионом карбоксилата , хотя депротонированные карбоксилаты заряжены отрицательно.

Гидроксидный лиганд на шестикоординированном Ni депротонируется основанием. Карбонильный углерод затем атакуется электроотрицательным кислородом. Пара электронов из двойной связи азот-углерод возвращается к азоту и нейтрализует заряд на нем, в то время как теперь 4-координированный углерод принимает промежуточную тетраэдрическую ориентацию.

Затем расщеплению этого промежуточного продукта способствует сульфгидрильная группа цистеина , расположенная вблизи активного центра. Водород связывается с одним из атомов азота, разрывая его связь с углеродом и высвобождая молекулу NH 3. Одновременно разрывается связь между кислородом и никелем с 6-координацией. Это оставляет ион карбамата, координированный с никелем с 5-координацией, который затем вытесняется молекулой воды, восстанавливая фермент.

Образовавшийся карбамат затем самопроизвольно распадается , образуя еще один аммиак и угольную кислоту . [17]

Хаузингер/Карплюс

Механизм, предложенный Хаузингером и Карплюсом, пытается пересмотреть некоторые проблемы, очевидные в пути Блейкли и Цернера, и фокусируется на положениях боковых цепей, составляющих карман связывания мочевины. [5] Из кристаллических структур уреазы K. aerogenes было высказано предположение, что общее основание, используемое в механизме Блейкли, His 320 , находится слишком далеко от связанной с Ni2 воды, чтобы депротонироваться для образования атакующего гидроксидного фрагмента. Кроме того, общий кислотный лиганд, необходимый для протонирования азота мочевины, не был идентифицирован. [18] Хаузингер и Карплюс предлагают схему обратного протонирования, где протонированная форма лиганда His 320 играет роль общей кислоты, а связанная с Ni2 вода уже находится в депротонированном состоянии. [5] Механизм следует тому же пути, с опущенным общим основанием (поскольку в нем больше нет необходимости) и His 320, отдающим свой протон для образования молекулы аммиака, которая затем высвобождается из фермента. Хотя большинство лигандов His 320 и связанной воды не будут находиться в своих активных формах (протонированных и депротонированных соответственно), было подсчитано, что приблизительно 0,3% от общего фермента уреазы будут активны в любой момент времени. [5] Хотя логически это означало бы, что фермент не очень эффективен, вопреки устоявшимся знаниям, использование схемы обратного протонирования обеспечивает преимущество в повышенной реактивности для активной формы, уравновешивая недостаток. [5] Размещение лиганда His 320 в качестве существенного компонента в механизме также учитывает подвижную область лоскута фермента. Поскольку этот гистидиновый лиганд является частью подвижного лоскута, связывание субстрата мочевины для катализа закрывает этот лоскут над активным сайтом, а с добавлением паттерна водородных связей с мочевиной от других лигандов в кармане, это говорит об селективности фермента уреазы к мочевине. [5]

Чиурли/Мангани

Механизм, предложенный Ciurli и Mangani [19], является одним из последних и в настоящее время принятых взглядов на механизм уреазы и основан в первую очередь на различных ролях двух ионов никеля в активном центре. [14] Один из которых связывает и активирует мочевину, другой ион никеля связывает и активирует нуклеофильную молекулу воды. [14] Что касается этого предложения, мочевина попадает в полость активного центра, когда открыт подвижный «заслон» (который позволяет мочевине попадать в активный центр). Стабильность связывания мочевины с активным центром достигается с помощью сети водородных связей , ориентирующей субстрат в каталитическую полость. [14] Мочевина связывается с пятикоординированным никелем (Ni1) с помощью карбонильного атома кислорода . Она приближается к шестикоординированному никелю (Ni2) с помощью одной из его аминогрупп и впоследствии соединяет два никелевых центра. [14] Связывание атома кислорода карбонила мочевины с Ni1 стабилизируется через состояние протонирования His α222 Nԑ. Кроме того, конформационное изменение из открытого в закрытое состояние подвижного лоскута генерирует перестройку карбонильной группы Ala α222 таким образом, что ее атом кислорода указывает на Ni2. [14] Ala α170 и Ala α366 теперь ориентированы таким образом, что их карбонильные группы действуют как акцепторы водородных связей по отношению к группе NH 2 мочевины, тем самым способствуя ее связыванию с Ni2. [14] Мочевина является очень плохим хелатирующим лигандом из-за низкого характера основания Льюиса ее групп NH 2. Однако карбонильные кислороды Ala α170 и Ala α366 усиливают основность групп NH 2 и позволяют связываться с Ni2. [14] Таким образом, в этом предложенном механизме расположение мочевины в активном центре обусловлено структурными особенностями остатков активного центра, которые расположены так, чтобы действовать как доноры водородных связей вблизи Ni1 и как акцепторы вблизи Ni2. [14] Основное структурное отличие между механизмом Чиурли/Мангани и двумя другими заключается в том, что он включает азот -кислородную мостиковую мочевину, которая подвергается атаке мостикового гидроксида . [17]

Действие в патогенезе

Бактериальные уреазы часто являются способом патогенеза многих медицинских состояний. Они связаны с печеночной энцефалопатией / печеночной комой , инфекционными камнями и пептической язвой. [20]

Инфекционные камни

Инфекционные мочевые камни представляют собой смесь струвита (MgNH 4 PO 4 • 6H 2 O) и карбонатного апатита [Ca 10 (PO 4 )6 • CO 3 ]. [20] Эти поливалентные ионы растворимы, но становятся нерастворимыми, когда аммиак вырабатывается из микробной уреазы во время гидролиза мочевины , так как это увеличивает pH окружающей среды примерно с 6,5 до 9. [20] Полученное в результате подщелачивание приводит к кристаллизации камня . [20] У людей микробная уреаза, Proteus mirabilis , является наиболее распространенной в мочевых камнях, вызванных инфекцией. [21]

Уреаза при печеночной энцефалопатии/печеночной коме

Исследования показали, что Helicobacter pylori вместе с циррозом печени вызывают печеночную энцефалопатию и печеночную кому . [22] Helicobacter pylori выделяет микробные уреазы в желудок. Уреаза гидролизует мочевину , образуя аммиак и угольную кислоту . Поскольку бактерии локализуются в желудке, вырабатываемый аммиак легко поглощается кровеносной системой из просвета желудка . [22] Это приводит к повышению уровня аммиака в крови, состоянию, известному как гипераммониемия ; эрадикация Helicobacter pylori показывает заметное снижение уровня аммиака . [22]

Уреаза при язвенной болезни

Helicobacter pylori также является причиной язвенной болезни, ее проявление составляет 55–68% зарегистрированных случаев. [23] Это было подтверждено снижением язвенного кровотечения и рецидива язвы после эрадикации возбудителя . [ 23] В желудке происходит повышение pH слизистой оболочки в результате гидролиза мочевины , что предотвращает перемещение ионов водорода между желудочными железами и просветом желудка . [20] Кроме того, высокие концентрации аммиака оказывают влияние на межклеточные плотные соединения, увеличивая проницаемость, а также разрушая слизистую оболочку желудка. [20] [24]

Распространение и применение в сельском хозяйстве

Мочевина встречается в природе в окружающей среде, а также вводится искусственно, составляя более половины всех синтетических азотных удобрений, используемых в мире. [25] Считается, что интенсивное использование мочевины способствует эвтрофикации , несмотря на наблюдение, что мочевина быстро трансформируется микробными уреазами и, таким образом, обычно не сохраняется. [26] Активность уреазы в окружающей среде часто измеряется как индикатор здоровья микробных сообществ. При отсутствии растений активность уреазы в почве обычно приписывается гетеротрофным микроорганизмам, хотя было продемонстрировано, что некоторые хемоавтотрофные бактерии, окисляющие аммоний, способны расти на мочевине как единственном источнике углерода, азота и энергии. [27]

Ингибирование в удобрениях

Ингибирование уреазы является важной целью в сельском хозяйстве, поскольку быстрое разложение удобрений на основе мочевины является расточительным и наносит вред окружающей среде. [28] Фенилфосфородиамидат и N- ( н -бутил)тиофосфорный триамид являются двумя такими ингибиторами. [29]

Биоминерализация

Способствуя образованию карбоната кальция , уреазы потенциально полезны для процессов, вдохновленных биоминерализацией . [30] В частности, микробиологически индуцированное образование карбоната кальция может быть использовано при изготовлении биобетона . [31]

Неферментативное действие

Помимо действия в качестве фермента, некоторые уреазы (особенно растительные) обладают дополнительными эффектами, которые сохраняются даже при отключении каталитической функции. К ним относятся энтомотоксичность, ингибирование грибков, нейротоксичность у млекопитающих, стимулирование эндоцитоза и воспалительной продукции эйкозаноидов у млекопитающих, а также индукция хемотаксиса у бактерий. Эти действия могут быть частью защитного механизма. [12]

Токсичность уреазы для насекомых была первоначально отмечена в канатоксине, ортологичной изоформе уреазы бобов джек. Расщепление пептида выявило часть 10 кДа, наиболее ответственную за этот эффект, названную джабуретокс. Аналогичная часть из уреазы сои называется союретокс. Исследования на насекомых показывают, что весь белок токсичен, не требуя никакого переваривания. Тем не менее, пептиды «уретокс», будучи более концентрированными в токсичности, показывают перспективность в качестве биопестицидов . [12]

В качестве диагностического теста

Многие патогены желудочно-кишечного тракта и мочевыводящих путей вырабатывают уреазу, что позволяет использовать ее обнаружение в качестве диагностического метода для выявления наличия патогенов.

К уреаза-положительным патогенам относятся:

Лиганды

Ингибиторы

Известен широкий спектр ингибиторов уреазы различных структурных семейств. Ингибирование уреазы представляет интерес не только для сельского хозяйства, но и для медицины, поскольку патогены, такие как H. pylori , вырабатывают уреазу в качестве механизма выживания. Известные структурные классы ингибиторов включают: [33] [34]

Извлечение

Впервые выделен в виде кристалла в 1926 году Самнером с использованием ацетоновой сольватации и центрифугирования. [36] Современная биохимия увеличила спрос на уреазу. Мука из бобов Джека , [37] семена арбуза , [38] и семена гороха [39] — все это доказали свою полезность в качестве источников уреазы.

Смотрите также

Ссылки

  1. ^ PDB : 2KAU ; Jabri E, Carr MB, Hausinger RP, Karplus PA (май 1995). «Кристаллическая структура уреазы из Klebsiella aerogenes». Science . 268 (5213): 998–1004. Bibcode : 1995Sci...268..998J. doi : 10.1126/science.7754395. PMID  7754395.
  2. ^ Холм Л., Сандер К. (1997). «Эволюционное сокровище: объединение широкого набора амидогидролаз, связанных с уреазой». Белки . 28 (1): 72–82. CiteSeerX 10.1.1.621.2752 . doi :10.1002/(SICI)1097-0134(199705)28:1<72::AID-PROT7>3.0.CO;2-L. PMID  9144792. S2CID  38845090. 
  3. ^ ab Krajewska B, van Eldik R, Brindell M (13 августа 2012 г.). «Исследования кинетики остановленного потока, зависящие от температуры и давления, для уреазы бобов. Последствия для каталитического механизма». Журнал биологической неорганической химии . 17 (7): 1123–1134. doi :10.1007/s00775-012-0926-8. PMC 3442171. PMID  22890689 . 
  4. ^ Musculus, «Sur le Ferment de l'urée», Comptes rendus de l'Académie des Sciences, vol. 82, 1876, стр. 333–336, доступно в Галлике.
  5. ^ abcdefghijk Karplus PA, Pearson MA, Hausinger RP (1997). «70 лет кристаллической уреазы: чему мы научились?». Accounts of Chemical Research . 30 (8): 330–337. doi :10.1021/ar960022j.
  6. ↑ Нобелевская премия по химии 1946 г.
  7. ^ Anke M, Groppel B, Kronemann H, Grün M (1984). «Никель — необходимый элемент». IARC Sci. Publ. (53): 339–65. PMID  6398286.
  8. ^ ab Carter EL, Flugga N, Boer JL, Mulrooney SB, Hausinger RP (1 января 2009 г.). «Взаимодействие ионов металлов и уреазы». Metallomics . 1 (3): 207–21. doi :10.1039/b903311d. PMC 2745169 . PMID  20046957. 
  9. ^ abcdef Krajewska B (30 июня 2009 г.). «Уреазы I. Функциональные, каталитические и кинетические свойства: обзор». Журнал молекулярного катализа B: Enzymatic . 59 (1–3): 9–21. doi :10.1016/j.molcatb.2009.01.003.
  10. ^ ab Ha NC, Oh ST, Sung JY, Cha KA, Lee MH, Oh BH (31 мая 2001 г.). «Супрамолекулярная сборка и кислотоустойчивость уреазы Helicobacter pylori». Nature Structural Biology . 8 (6): 505–509. doi :10.1038/88563. PMID  11373617. S2CID  26548257.
  11. ^ Стругацкий Д., МакНалти Р., Мансон К., Чен К.К., Солтис С.М., Сакс Г., Люкке Х. (8 декабря 2012 г.). «Структура протон-управляемого мочевинного канала желудочного патогена Helicobacter pylori». Nature . 493 (7431): 255–258. doi :10.1038/nature11684. PMC 3974264 . PMID  23222544. 
  12. ^ abc Kappaun, K; Piovesan, AR; Carlini, CR; Ligabue-Braun, R (сентябрь 2018 г.). «Уреазы: исторические аспекты, каталитические и некаталитические свойства — обзор». Journal of Advanced Research . 13 : 3–17. doi : 10.1016/j.jare.2018.05.010 . PMC 6077230. PMID  30094078 . 
  13. ^ Ciurli S, Benini S, Rypniewski WR, Wilson KS, Miletti S, Mangani S (1999). «Структурные свойства ионов никеля в уреазе: новые взгляды на каталитические и ингибирующие механизмы». Coordination Chemistry Reviews . 190–192: 331–355. doi :10.1016/S0010-8545(99)00093-4.
  14. ^ abcdefghij Benini S, Rypniewski WR, Wilson KS, Miletti S, Ciurli S, Mangani S (31 января 1999 г.). «Новое предложение по механизму уреазы на основе кристаллических структур нативного и ингибированного фермента из Bacillus pasteurii: почему гидролиз мочевины стоит два никеля». Структура . 7 (2): 205–216. doi : 10.1016/S0969-2126(99)80026-4 . PMID  10368287.
  15. ^ ab Martin PR, Hausinger RP (5 октября 1992 г.). «Сайт-направленный мутагенез активного сайта цистеина в уреазе Klebsiella aerogenes». Журнал биологической химии . 267 (28): 20024–7. doi : 10.1016/S0021-9258(19)88659-3 . PMID  1400317.
  16. ^ Dixon NE, Riddles PW, Gazzola C, Blakeley RL, Zerner B (1979). "Уреаза бобов Джека Джека (EC3.5.1.5). V. О механизме действия уреазы на мочевину, формамид, ацетамид, N-метилмочевину и родственные соединения". Canadian Journal of Biochemistry . 58 (12): 1335–1344. doi :10.1139/o80-181. PMID  6788353.
  17. ^ ab Zimmer M (апрель 2000 г.). «Молекулярно-механическая оценка предлагаемых механизмов деградации мочевины уреазой». J Biomol Struct Dyn . 17 (5): 787–97. doi :10.1080/07391102.2000.10506568. PMID  10798524. S2CID  41497756.
  18. ^ Jabri E, Carr MB, Hausinger RP, Karplus PA (19 мая 1995 г.). «Кристаллическая структура уреазы из Klebsiella aerogenes». Science . 268 (5213): 998–1004. Bibcode :1995Sci...268..998J. doi :10.1126/science.7754395. PMID  7754395.
  19. ^ Zambelli B, Musiani F, Benini S, Ciurli S (19 июля 2011 г.). «Химия Ni2+ в уреазе: обнаружение, транспортировка и катализ». Accounts of Chemical Research . 44 (7): 520–530. doi :10.1021/ar200041k. PMID  21542631.
  20. ^ abcdef Mobley HL, Hausinger RP (март 1989). «Микробные уреазы: значение, регуляция и молекулярная характеристика». Microbiological Reviews . 53 (1): 85–108. doi :10.1128/MMBR.53.1.85-108.1989. PMC 372718 . PMID  2651866. 
  21. ^ Rosenstein IJ (1 января 1986 г.). «Мочевые камни: микробиологические и кристаллографические исследования». Критические обзоры в клинических лабораторных науках . 23 (3): 245–277. doi :10.3109/10408368609165802. PMID  3524996.
  22. ^ abc Агравал А, Гупта А, Чандра М, Кувар С (17 марта 2011 г.). «Роль инфекции Helicobacter pylori в патогенезе минимальной печеночной энцефалопатии и эффект ее ликвидации». Индийский журнал гастроэнтерологии . 30 (1): 29–32. doi :10.1007/s12664-011-0087-7. PMID  21416318. S2CID  25452909.
  23. ^ ab Tang JH, Liu NJ, Cheng HT, Lee CS, Chu YY, Sung KF, Lin CH, Tsou YK, Lien JM, Cheng CL (февраль 2009 г.). «Эндоскопическая диагностика инфекции Helicobacter pylori с помощью быстрого уреазного теста при кровотечении из пептических язв: проспективное исследование случай-контроль». Журнал клинической гастроэнтерологии . 43 (2): 133–9. doi :10.1097/MCG.0b013e31816466ec. PMID  19230239. S2CID  27784917.
  24. ^ Caron TJ, Scott KE, Fox JG, Hagen SJ (октябрь 2015 г.). «Нарушение плотного соединения: Helicobacter pylori и нарушение регуляции барьера слизистой оболочки желудка». World Journal of Gastroenterology . 21 (40): 11411–27. doi : 10.3748/wjg.v21.i40.11411 . PMC 4616217. PMID  26523106 . 
  25. ^ Glibert P, Harrison J, Heil C, Seitzinger S (2006). «Растущее мировое использование мочевины – глобальное изменение, способствующее прибрежной эвтрофикации». Биогеохимия . 77 (3): 441–463. doi :10.1007/s10533-005-3070-5. S2CID  2209850.
  26. ^ Daigh AL, Savin MC, Brye K, Norman R, Miller D (2014). «Устойчивость мочевины в паводковых водах и почве, используемой для производства затопленного риса». Soil Use and Management . 30 (4): 463–470. doi :10.1111/sum.12142. S2CID  97961385.
  27. ^ Marsh KL, Sims GK, Mulvaney RL (ноябрь 2005 г.). «Доступность мочевины для автотрофных аммиакокисляющих бактерий в связи с судьбой мочевины, меченной 14 C и 15 N, добавленной в почву». Биология и плодородие почв . 42 (2): 137–145. doi :10.1007/s00374-005-0004-2. S2CID  6245255.
  28. ^ Pan B, Lam SK, Mosier A, Luo Y, Chen D (2016). «Испарение аммиака из синтетических удобрений и стратегии его смягчения: глобальный синтез». Сельское хозяйство, экосистемы и окружающая среда . 232 : 283–289. doi :10.1016/j.agee.2016.08.019.
  29. ^ Gholivand K, Pooyan M, Mohammadpanah F, Pirastefar F, Junk PC, Wang J, et al. (Май 2019). «Синтез, кристаллическая структура и биологическая оценка новых производных фосфорамида в качестве ингибиторов уреазы с использованием стыковки, QSAR и кинетических исследований». Биоорганическая химия . 86 : 482–493. doi : 10.1016/j.bioorg.2019.01.064. PMID  30772649. S2CID  73460771.
  30. ^ Anbu P, Kang CH, Shin YJ, So JS (1 марта 2016 г.). «Формирование минералов карбоната кальция бактериями и их множественное применение». SpringerPlus . 5 : 250. doi : 10.1186/s40064-016-1869-2 . PMC 4771655 . PMID  27026942. 
  31. ^ Moneo S (11 сентября 2015 г.). «Голландский ученый изобрел самовосстанавливающийся бетон с бактериями». Journal Of Commerce . Получено 23 марта 2018 г.
  32. ^ Zhou C, Bhinderwala F, Lehman MK, Thomas VC, Chaudhari SS, Yamada KJ и др. (январь 2019 г.). «Уреаза является важным компонентом сети кислотного ответа Staphylococcus aureus и необходима для персистирующей мышиной почечной инфекции». PLOS Pathogens . 15 (1): e1007538. doi : 10.1371/journal.ppat.1007538 . PMC 6343930. PMID  30608981 . 
  33. ^ Modolo, LV; da-Silva, CJ; Brandão, DS; Chaves, IS (сентябрь 2018 г.). «Мини-обзор того, что мы узнали об ингибиторах уреазы, представляющих интерес для сельского хозяйства, с середины 2000-х годов». Journal of Advanced Research . 13 : 29–37. doi : 10.1016/j.jare.2018.04.001 . PMC 6077229. PMID  30094080 . 
  34. ^ Кафарски, П.; Тальма, М. (сентябрь 2018 г.). «Последние достижения в разработке новых ингибиторов уреазы: обзор». Журнал передовых исследований . 13 : 101–112. doi : 10.1016/j.jare.2018.01.007 . PMC 6077125. PMID  30094085 . 
  35. ^ Ee Huey, Choo; Zaireen Nisa Yahya, Wan; Mansor, Nurlidia (2019). «Включение аллицина в качестве ингибитора уреазы в биополимер на основе хитозана/крахмала для внесения удобрений». Materials Today: Proceedings . 16 : 2187–2196. doi :10.1016/j.matpr.2019.06.109. S2CID  202073615.
  36. ^ Gorin G, Butler MF, Katyal JM, Buckley JE (1959). "Выделение кристаллической уреазы" (PDF) . Труды Академии наук Оклахомы . 40 : 62–70 . Получено 7 декабря 2014 г.
  37. ^ Sung HY, Lee WM, Chiou MJ, Chang CT (октябрь 1989 г.). «Процедура очистки уреазы бобов для клинического использования». Труды Национального научного совета Китайской Республики. Часть B, Науки о жизни . 13 (4): 250–7. PMID  2517764.
  38. ^ Prakash O, Bhushan G (январь 1997). «Выделение, очистка и частичная характеристика уреазы из семян арбуза ( Citrullus vulgaris )». Журнал биохимии растений и биотехнологии . 6 : 45–47. doi :10.1007/BF03263009. S2CID  41143649.
  39. ^ El-Hefnawy ME, Sakran M, Ismail AI, Aboelfetoh EF (июль 2014 г.). «Извлечение, очистка, кинетические и термодинамические свойства уреазы из прорастающих семян Pisum sativum L.». BMC Biochemistry . 15 (1): 15. doi : 10.1186/1471-2091-15-15 . PMC 4121304. PMID  25065975 . 

Внешние ссылки