Третичная структура белка — это трехмерная форма белка . Третичная структура будет иметь одну полипептидную цепь «остов» с одной или несколькими вторичными структурами белка , доменами белка . Боковые цепи аминокислот и остов могут взаимодействовать и связываться несколькими способами. Взаимодействия и связи боковых цепей внутри конкретного белка определяют его третичную структуру. Третичная структура белка определяется его атомными координатами. Эти координаты могут относиться либо к домену белка, либо ко всей третичной структуре. [1] [2] Несколько этих структур могут связываться друг с другом, образуя четвертичную структуру . [3]
Наука о третичной структуре белков прошла путь от гипотез до детального определения. Хотя Эмиль Фишер предположил, что белки состоят из полипептидных цепей и боковых цепей аминокислот, именно Дороти Мод Вринч включила геометрию в предсказание структур белков . Вринч продемонстрировала это с помощью модели Cyclol , первого предсказания структуры глобулярного белка . [4] Современные методы способны определять без предсказания третичные структуры с точностью до 5 Å (0,5 нм) для небольших белков (<120 остатков) и, при благоприятных условиях, уверенно предсказывать вторичную структуру .
Белок, свернутый в свое нативное состояние или нативную конформацию, обычно имеет более низкую свободную энергию Гиббса (комбинацию энтальпии и энтропии ), чем развернутая конформация. Белок будет стремиться к низкоэнергетическим конформациям, которые будут определять сворачивание белка в клеточной среде. Поскольку многие похожие конформации будут иметь похожие энергии, структуры белка являются динамичными , флуктуирующими между этими похожими структурами.
Глобулярные белки имеют ядро из гидрофобных аминокислотных остатков и поверхностную область из открытых для воды , заряженных, гидрофильных остатков. Такое расположение может стабилизировать взаимодействия внутри третичной структуры. Например, в секретируемых белках, которые не омываются цитоплазмой , дисульфидные связи между остатками цистеина помогают поддерживать третичную структуру. Существует общность стабильных третичных структур, наблюдаемых в белках с разнообразной функцией и разнообразной эволюцией . Например, бочка TIM , названная в честь фермента триозофосфатизомеразы , является распространенной третичной структурой, как и высокостабильная, димерная , спиральная структура. Следовательно, белки можно классифицировать по структурам, которые они содержат. Базы данных белков, которые используют такую классификацию, включают SCOP и CATH .
Кинетика фолдинга может запереть белок в высокоэнергетической конформации , то есть высокоэнергетическая промежуточная конформация блокирует доступ к конформации с самой низкой энергией. Высокоэнергетическая конформация может способствовать функционированию белка. Например, белок гемагглютинина гриппа представляет собой одну полипептидную цепь, которая при активации протеолитически расщепляется с образованием двух полипептидных цепей. Две цепи удерживаются в высокоэнергетической конформации. Когда локальный pH падает, белок претерпевает энергетически выгодную конформационную перестройку, которая позволяет ему проникать через мембрану клетки- хозяина .
Некоторые третичные структуры белков могут существовать в долгоживущих состояниях, которые не являются ожидаемо наиболее стабильным состоянием. Например, многие серпины (ингибиторы сериновой протеазы) демонстрируют эту метастабильность . Они претерпевают конформационные изменения , когда петля белка разрезается протеазой . [ 5] [6] [7]
Обычно предполагается, что нативное состояние белка также является наиболее термодинамически стабильным и что белок достигнет своего нативного состояния, учитывая его химическую кинетику , до того, как он будет транслирован . Белковые шапероны в цитоплазме клетки помогают вновь синтезированному полипептиду достичь своего нативного состояния. Некоторые белки-шапероны высокоспецифичны в своей функции, например, протеиндисульфидизомераза ; другие являются общими в своей функции и могут помогать большинству глобулярных белков, например, прокариотической системе белков GroEL / GroES и гомологичным эукариотическим белкам теплового шока (система Hsp60 / Hsp10).
Прогнозирование третичной структуры белка основано на знании первичной структуры белка и сравнении возможной предсказанной третичной структуры с известными третичными структурами в банках данных белков . Это учитывает цитоплазматическую среду, присутствующую во время синтеза белка , только в той степени, в которой подобная цитоплазматическая среда могла также повлиять на структуру белков, записанных в банке данных белков.
Структура белка, такого как фермент , может изменяться при связывании его природных лигандов, например кофактора . В этом случае структура белка, связанного с лигандом, известна как холоструктура, в то время как несвязанный белок имеет апоструктуру. [8]
Структура стабилизируется за счет образования слабых связей между боковыми цепями аминокислот. - Определяется складыванием полипептидной цепи сама на себя (неполярные остатки расположены внутри белка, тогда как полярные остатки в основном расположены снаружи). - Обертывание белка сближает белок и связывает а-с расположенными в отдаленных областях последовательности. - Приобретение третичной структуры приводит к образованию карманов и участков, подходящих для распознавания и связывания специфических молекул (биоспецифичность).
Знания о третичной структуре растворимых глобулярных белков более продвинуты, чем знания о мембранных белках , поскольку первые легче изучать с помощью имеющихся технологий.
Рентгеновская кристаллография является наиболее распространенным инструментом, используемым для определения структуры белка . Она обеспечивает высокое разрешение структуры, но не дает информации о конформационной гибкости белка .
Белковый ЯМР дает сравнительно низкое разрешение структуры белка. Он ограничен более мелкими белками. Однако он может предоставить информацию о конформационных изменениях белка в растворе.
Криогенная электронная микроскопия (крио-ЭМ) может дать информацию как о третичной, так и о четвертичной структуре белка. Она особенно хорошо подходит для больших белков и симметричных комплексов белковых субъединиц .
Двойная поляризационная интерферометрия обеспечивает дополнительную информацию о белках, захваченных поверхностью. Она помогает определить изменения структуры и конформации с течением времени.
Проект Folding@home в Университете Пенсильвании представляет собой исследовательскую работу по распределенным вычислениям , которая использует около 5 петафлопс (≈10 x86 петафлопс) доступных вычислений. Он направлен на поиск алгоритма , который будет последовательно предсказывать третичные и четвертичные структуры белка, учитывая аминокислотную последовательность белка и его клеточные состояния. [9] [10]
Список программного обеспечения для прогнозирования третичной структуры белка можно найти на странице Список программного обеспечения для прогнозирования структуры белка .
Заболевания агрегации белков , такие как болезнь Альцгеймера и болезнь Хантингтона , а также прионные заболевания, такие как губчатая энцефалопатия крупного рогатого скота, можно лучше понять, построив (и реконструировав) модели заболеваний . Это делается путем вызова заболевания у лабораторных животных, например, путем введения токсина , такого как MPTP , чтобы вызвать болезнь Паркинсона, или посредством генетической манипуляции . [11] [12] Прогнозирование структуры белка — это новый способ создания моделей заболеваний, который может избежать использования животных. [13]
Сопоставление образцов третичной структуры данного белка с огромным количеством известных третичных структур белков и извлечение наиболее похожих из них в ранжированном порядке лежит в основе многих областей исследований, таких как прогнозирование функций новых белков, изучение эволюции, диагностика заболеваний, открытие лекарств, разработка антител и т. д. Проект CoMOGrad в BUET представляет собой исследовательскую работу по созданию чрезвычайно быстрого и точного метода извлечения третичной структуры белка и разработке онлайн-инструмента на основе результатов исследований. [14] [15]