stringtranslate.com

Генетически модифицированный вирус

Генетически модифицированный вирус — это вирус , который был изменен или создан с использованием методов биотехнологии и сохраняет способность к заражению . Генетическая модификация включает в себя направленную вставку , удаление , искусственный синтез или изменение нуклеотидных оснований в вирусных геномах. Генетически модифицированные вирусы в основном создаются путем вставки чужеродных генов в вирусные геномы в целях биомедицинского , сельскохозяйственного, биоконтроля или технологических целей. Термины генетически модифицированный вирус и генетически сконструированный вирус используются как синонимы.

Общее использование

Генетически модифицированные вирусы создаются путем генетической модификации, которая включает направленную вставку, делецию, искусственный синтез или изменение нуклеотидных последовательностей в вирусных геномах с использованием биотехнологических методов. В то время как большинство вирусов dsDNA имеют одиночные моночастные геномы, многие вирусы РНК имеют многочастные геномы, не обязательно, чтобы все части вирусного генома были генетически модифицированы, чтобы вирус считался генетически модифицированным вирусом. Инфекционные вирусы, способные к заражению, которые создаются путем искусственного синтеза генов всех или части их геномов (например, на основе предполагаемых исторических последовательностей), также могут рассматриваться как генетически модифицированные вирусы. Вирусы, которые изменяются исключительно под действием спонтанных мутаций, рекомбинации или реассортации событий (даже в экспериментальных условиях), как правило, не считаются генетически модифицированными вирусами.

Вирусы обычно модифицируются, чтобы их можно было использовать в качестве векторов для вставки новой генетической информации в организм хозяина или изменения его уже существующего генетического материала. Это может быть достигнуто по крайней мере тремя способами:

  1. Интеграция всего или частей вирусного генома в геном хозяина (например, в его хромосомы). Когда весь генетически модифицированный вирусный геном интегрирован, его называют генетически модифицированным провирусом . Когда ДНК или РНК, упакованные как часть вирусной частицы, но не обязательно содержащие вирусные гены, интегрируются в геном хозяина, этот процесс называется трансдукцией .
  2. Поддержание вирусного генома в клетках хозяина, но не в качестве неотъемлемой части генома хозяина.
  3. Если необходимые для редактирования генома гены были помещены в вирусный геном с использованием методов биотехнологии , [1] редактирование генома хозяина возможно. Этот процесс не требует интеграции вирусных геномов в геном хозяина.

Ни один из этих трех процессов не является взаимоисключающим. Когда происходит только процесс 2. и он приводит к экспрессии генетически модифицированного гена, это часто будет называться подходом транзиентной экспрессии .

Способность инфицировать клетки или ткани хозяина является необходимым требованием для всех прикладных применений генетически модифицированных вирусов. Однако способность к вирусной передаче (перенос инфекций между индивидуумами-хозяевами) либо не требуется, либо считается нежелательной для большинства применений. Только в небольшом меньшинстве предлагаемых применений вирусная передача считается необходимой или желательной, примером являются трансмиссивные вакцины. [2] [3] Это связано с тем, что трансмиссивность значительно усложняет усилия по мониторингу, контролю или сдерживанию распространения вирусов. [4]

История

В 1972 году был опубликован самый ранний отчет о вставке чужеродной последовательности в вирусный геном, когда Пол Берг использовал фермент рестрикции EcoRI и ДНК-лигазы для создания первых в истории рекомбинантных молекул ДНК. [5] Это было достигнуто путем соединения ДНК вируса обезьяны SV40 с ДНК вируса лямбда. Однако не было установлено, что какой-либо из двух вирусов был способен к инфицированию или репликации.

В 1974 году Норин Мюррей и Кеннет Мюррей представили для публикации первый отчет о генетически модифицированном вирусе, который также мог размножаться и заражать . [6] Всего два месяца спустя, в августе 1974 года, Марджори Томас, Джон Кэмерон и Рональд У. Дэвис представили для публикации отчет о подобном достижении. [7]

В совокупности эти эксперименты положили начало развитию того, что в конечном итоге стало известно как биотехнология или методы рекомбинантной ДНК .

Приложения для здравоохранения

генная терапия

Генная терапия [8] использует генетически модифицированные вирусы для доставки генов, которые могут лечить заболевания в клетках человека. Эти вирусы могут доставлять генетический материал ДНК или РНК в целевые клетки. Генная терапия также используется для инактивации мутировавших генов, которые вызывают заболевание, с помощью вирусов. [9]

Вирусы, которые использовались для генной терапии, — это аденовирус , лентивирус , ретровирус и вирус простого герпеса . [10] Наиболее распространенным вирусом, используемым для доставки генов, являются аденовирусы, поскольку они могут переносить до 7,5 кб чужеродной ДНК и заражать относительно широкий спектр клеток-хозяев, хотя известно, что они вызывают иммунные ответы у хозяина и обеспечивают только краткосрочную экспрессию. Другими распространенными векторами являются аденоассоциированные вирусы , которые обладают меньшей токсичностью и более долгосрочной экспрессией, но могут переносить только около 4 кб ДНК. [11] Вирусы простого герпеса являются многообещающим вектором, имеют несущую способность более 30 кб и обеспечивают долгосрочную экспрессию, хотя они менее эффективны при доставке генов, чем другие векторы. [12] Лучшими векторами для долгосрочной интеграции гена в геном хозяина являются ретровирусы, но их склонность к случайной интеграции проблематична. Лентивирусы являются частью того же семейства, что и ретровирусы, с преимуществом инфицирования как делящихся, так и неделящихся клеток, тогда как ретровирусы нацелены только на делящиеся клетки. Другие вирусы, которые использовались в качестве векторов, включают альфавирусы , флавивирусы , вирусы кори , рабдовирусы , вирус болезни Ньюкасла , поксвирусы и пикорнавирусы . [11]

Хотя в основном он все еще находится на стадии испытаний, [13] он имел некоторые успехи. Он использовался для лечения наследственных генетических заболеваний, таких как тяжелый комбинированный иммунодефицит [14], возникающий из-за дефицита аденозиндезаминазы (ADA-SCID), [15] хотя развитие лейкемии у некоторых пациентов с ADA-SCID [11] вместе со смертью Джесси Гелсингера в другом испытании отбросили развитие этого подхода на многие годы. [16] В 2009 году был достигнут еще один прорыв, когда восьмилетний мальчик с врожденным амаврозом Лебера восстановил нормальное зрение [16], а в 2016 году GlaxoSmithKline получила одобрение на коммерциализацию генотерапевтического лечения ADA-SCID. [15] По состоянию на 2018 год проводится значительное количество клинических испытаний , включая лечение гемофилии , глиобластомы , хронической гранулематозной болезни , муковисцидоза и различных видов рака . [11] Несмотря на некоторые успехи, генная терапия по-прежнему считается рискованным методом, и все еще проводятся исследования для обеспечения ее безопасности и эффективности. [9]

Лечение рака

Другое потенциальное применение генетически модифицированных вирусов — изменить их так, чтобы они могли напрямую лечить болезни. Это может быть сделано посредством экспрессии защитных белков или путем прямого воздействия на инфицированные клетки. В 2004 году исследователи сообщили, что генетически модифицированный вирус, который использует эгоистичное поведение раковых клеток, может предложить альтернативный способ уничтожения опухолей. [17] [18] С тех пор несколько исследователей разработали генетически модифицированные онколитические вирусы , которые обещают быть методами лечения различных типов рака . [19] [20] [21] [22] [23]

Вакцина 

Большинство вакцин состоят из вирусов, которые были ослаблены , аттенуированы, отключены, дезактивированы или убиты каким-либо образом, так что их вирулентные свойства больше не эффективны. Генная инженерия теоретически может быть использована для создания вирусов с удаленными вирулентными генами. В 2001 году сообщалось, что генетически модифицированные вирусы, возможно, могут быть использованы для разработки вакцин [24] против таких заболеваний, как СПИД, герпес, лихорадка денге и вирусный гепатит, используя проверенный безопасный вакцинный вирус, такой как аденовирус , и модифицируя его геном так, чтобы иметь гены, которые кодируют иммуногенные белки, которые могут усиливать реакцию иммунной системы, чтобы затем иметь возможность бороться с вирусом. Генетически модифицированные вирусы не должны иметь сниженную инфекционность , вызывать естественный иммунный ответ, и нет никаких шансов, что они восстановят свою функцию вирулентности, что может произойти с некоторыми другими вакцинами. Как таковые, они, как правило, считаются более безопасными и эффективными, чем обычные вакцины, хотя остаются опасения по поводу нецелевого заражения, потенциальных побочных эффектов и горизонтального переноса генов на другие вирусы. [25] Другой подход заключается в использовании векторов для создания новых вакцин от болезней, от которых нет вакцин или которые неэффективны, например, СПИД , малярия и туберкулез . Вакцины на основе векторов уже одобрены, и разрабатываются многие другие. [26]

Кардиостимулятор

В 2012 году американские исследователи сообщили, что они ввели генетически модифицированный вирус в сердце свиней. Этот вирус внедрил в сердечную мышцу ген Tbx18 , который активировал сердцебиение. Исследователи предсказывают, что однажды этот метод можно будет использовать для восстановления сердцебиения у людей, которым в противном случае понадобились бы электронные кардиостимуляторы . [27] [28]

Генетически модифицированные вирусы, предназначенные для использования в окружающей среде

Животные

В Испании и Португалии к 2005 году популяция кроликов сократилась на 95% за 50 лет из-за таких болезней, как миксоматоз , геморрагическая болезнь кроликов и других причин. Это, в свою очередь, вызвало сокращение численности хищников, таких как иберийская рысь , вид, находящийся под угрозой исчезновения. [29] [30] В 2000 году испанские исследователи исследовали генетически модифицированный вирус, который мог бы защитить кроликов в дикой природе от миксоматоза и геморрагической болезни кроликов. [31] Однако существовали опасения, что такой вирус может проникнуть в дикие популяции в таких областях, как Австралия, и вызвать бум популяции. [29] [4] Кролики в Австралии считаются таким вредителем, что владельцы земель обязаны по закону контролировать их. [32]

Были созданы генетически модифицированные вирусы, которые делают целевых животных бесплодными посредством иммуноконтрацепции [33], а также другие, которые нацелены на стадию развития животного. [34] Существуют опасения по поводу сдерживания вируса [33] и перекрестного заражения видами. [35]

Деревья

С 2009 года генетически модифицированные вирусы, экспрессирующие белки дефензина шпината , проходят полевые испытания во Флориде (США). [36] Вирусная инфекция апельсиновых деревьев направлена ​​на борьбу с болезнью позеленения цитрусовых , которая сократила производство апельсинов во Флориде на 70% с 2005 года. [37] Заявка на получение разрешения находится на рассмотрении с 13 февраля 2017 года (USDA 17-044-101r) на расширение экспериментального использования до площади в 513 500 акров, что сделает это разрешение крупнейшим разрешением такого рода, когда-либо выданным Службой регулирования биотехнологий Министерства сельского хозяйства США.

Программа «Союзники насекомых»

В 2016 году DARPA , агентство Министерства обороны США , объявило тендер на контракты по разработке генетически модифицированных вирусов растений для подхода, включающего их распространение в окружающей среде с использованием насекомых. [38] [39] В плане работы говорилось:

«Растительные вирусы имеют большие перспективы в качестве носителей схем редактирования генов и являются естественным партнером для платформы доставки, передаваемой насекомыми». [38]

Целью программы является обеспечение продовольственной стабильности путем защиты сельскохозяйственных поставок продовольствия и товарных культур:

«Используя естественную способность насекомых-переносчиков доставлять вирусы с высокой специфичностью к растению-хозяину и объединяя эту способность с достижениями в области редактирования генов, можно добиться быстрого улучшения зрелых растений в полевых условиях на больших площадях и без необходимости в промышленной инфраструктуре». [38]

Несмотря на свое название, программа «Союзники насекомых» в значительной степени является вирусной программой, разрабатывающей вирусы, которые по сути будут выполнять генное редактирование сельскохозяйственных культур на уже засаженных полях. [40] [41] [42] [43] Генетически модифицированные вирусы, описанные в рабочем плане и других публичных документах, относятся к классу генетически модифицированных вирусов, впоследствии названных HEGAA (агенты горизонтального изменения генов окружающей среды). Программа «Союзники насекомых» запланирована на период с 2017 по 2021 год, контракты будут выполняться тремя консорциумами. Планов по выпуску генетически модифицированных вирусов в окружающую среду нет, а тестирование полной системы распространения насекомых происходит в теплицах ( упоминались объекты уровня биологической безопасности 3 ). [44]

Выражались опасения относительно того, как эта программа и любые данные, которые она генерирует, повлияют на контроль над биологическим оружием и сельскохозяйственное сосуществование, [45] [46] [47] хотя ее заявленные цели также получили поддержку. [48]

Технологические приложения

Литий-ионные аккумуляторы

В 2009 году ученые Массачусетского технологического института создали генетически модифицированный вирус, который был использован для создания более экологически чистой литий-ионной батареи . [49] [50] [51] Батарея была создана путем генной инженерии различных вирусов, таких как бактериофаг E4 и бактериофаг M13 , для использования в качестве катода. Это было сделано путем редактирования генов вируса, которые кодируют белковую оболочку. Белковая оболочка отредактирована так, чтобы покрыть себя фосфатом железа , чтобы иметь возможность прилипать к высокопроводящим углеродным нанотрубкам . Вирусы, которые были модифицированы для получения многофункциональной белковой оболочки, могут использоваться в качестве наноструктурированного катода , вызывающего ионные взаимодействия с катионами. Это позволяет использовать вирус в качестве небольшой батареи. Анджела Блечер , ученый, возглавлявшая исследовательскую группу Массачусетского технологического института в этом проекте, говорит, что батарея достаточно мощная, чтобы ее можно было использовать в качестве перезаряжаемой батареи, питания гибридных электромобилей и ряда персональных электронных устройств. [52] Хотя вирусы E4 и M13 могут инфицировать и размножаться внутри своего бактериального хозяина, неясно, сохраняют ли они эту способность после того, как стали частью батареи.

Проблемы безопасности и регулирование

Ограничения исследований биологической опасности

Национальный институт здравоохранения объявил мораторий на финансирование исследований по отдельным исследованиям вирусов с приобретением функции в январе 2015 года. [53] [54] В январе 2017 года правительство США опубликовало окончательное руководство по политике обзора и надзора за исследованиями, которые, как ожидается, будут создавать, передавать или использовать улучшенные потенциальные пандемические патогены (PPP). [55] Вопросы о потенциальной утечке модифицированного вируса из лаборатории биологической безопасности и полезности технологий двойного назначения , исследований двойного назначения, вызывающих озабоченность (DURC), побудили NIH пересмотреть политику финансирования. [56] [57] [58]

Инцидент с ГМО-лентивирусом

Ученый утверждает, что она была инфицирована генетически модифицированным вирусом во время работы в Pfizer. В своем федеральном иске она утверждает, что ее периодически парализовывал вирус, разработанный Pfizer. «Макклейн из Дип-Ривер подозревает, что она была непреднамеренно подвергнута воздействию, через работу бывшего коллеги Pfizer в 2002 или 2003 году, сконструированной формы лентивируса , вируса, похожего на тот, который может привести к синдрому приобретенного иммунодефицита, или СПИДу». [59] Суд установил, что Макклейн не смогла доказать, что ее болезнь была вызвана воздействием лентивируса, [60] но также и то, что Pfizer нарушила законы о защите осведомителей . [61]

Ссылки

  1. ^ Ran FA, Cong L, Yan WX, Scott DA, Gootenberg JS, Kriz AJ, Zetsche B, Shalem O, Wu X, Makarova KS, Koonin EV, Sharp PA, Zhang F (апрель 2015 г.). «Редактирование генома in vivo с использованием Staphylococcus aureus Cas9». Nature . 520 (7546): 186–91. Bibcode :2015Natur.520..186R. doi :10.1038/nature14299. PMC  4393360 . PMID  25830891.
  2. ^ Торрес Х.М., Санчес С., Рамирес М.А., Моралес М., Барсена Дж., Феррер Дж., Эспуна Э., Пажес-Манте А., Санчес-Вискайно Х.М. (август 2001 г.). «Первое полевое испытание трансмиссивной рекомбинантной вакцины против миксоматоза и геморрагической болезни кроликов». Вакцина . 19 (31): 4536–43. дои : 10.1016/S0264-410X(01)00184-0. hdl : 20.500.12792/4539 . ПМИД  11483281.
  3. ^ Bull JJ, Smithson MW, Nuismer SL (январь 2018 г.). «Трансмиссивные вирусные вакцины». Тенденции в микробиологии . 26 (1): 6–15. doi :10.1016/j.tim.2017.09.007. PMC 5777272. PMID  29033339 . 
  4. ^ ab Angulo E, Gilna B (март 2008 г.). «Когда биотехнологии пересекают границы». Nature Biotechnology . 26 (3): 277–82. doi : 10.1038/nbt0308-277. hdl : 10261/45524 . PMID  18327233. S2CID  205266187.
  5. ^ Джексон ДА, Саймонс РХ, Берг П (октябрь 1972 г.). «Биохимический метод вставки новой генетической информации в ДНК вируса обезьян 40: кольцевые молекулы ДНК SV40, содержащие гены фага лямбда и оперон галактозы Escherichia coli». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 69 (10): 2904–9. Bibcode : 1972PNAS...69.2904J. doi : 10.1073 /pnas.69.10.2904 . PMC 389671. PMID  4342968. 
  6. ^ Мюррей NE, Мюррей K (октябрь 1974). «Манипуляция рестрикционными целями в фаге лямбда для формирования рецепторных хромосом для фрагментов ДНК». Nature . 251 (5475): 476–81. Bibcode :1974Natur.251..476M. doi :10.1038/251476a0. PMID  4608939. S2CID  4203507.
  7. ^ Thomas M, Cameron JR, Davis RW (ноябрь 1974 г.). «Жизнеспособные молекулярные гибриды бактериофага лямбда и эукариотической ДНК». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 71 (11): 4579–83. Bibcode :1974PNAS...71.4579T. doi : 10.1073/pnas.71.11.4579 . PMC 433931 . PMID  4216019. 
  8. ^ Selkirk SM (октябрь 2004 г.). «Генная терапия в клинической медицине». Postgraduate Medical Journal . 80 (948): 560–70. doi :10.1136/pgmj.2003.017764. PMC 1743106. PMID  15466989 . 
  9. ^ ab Ссылка GH. "Что такое генная терапия?". Genetics Home Reference . Получено 2017-12-08 .
  10. ^ Хассан МХ, Отман ЭЭ, Хорнунг Д, Аль-Хенди А (август 2009). «Генная терапия доброкачественных гинекологических заболеваний». Advanced Drug Delivery Reviews . 61 (10): 822–35. doi :10.1016/j.addr.2009.04.023. PMC 4477532. PMID  19446586 . 
  11. ^ abcd Lundstrom K (май 2018). "Вирусные векторы в генной терапии". Diseases . 6 (2): 42. doi : 10.3390/diseases6020042 . PMC 6023384 . PMID  29883422. 
  12. ^ Manservigi R, Epstein AL, Argnani R, Marconi P (2013). HSV как вектор в разработке вакцин и генной терапии. Landes Bioscience.
  13. ^ «Доступна ли генная терапия для лечения моего расстройства?». Genetics Home Reference . Получено 2018-12-14 .
  14. ^ Каваццана-Кальво М., Фишер А. (июнь 2007 г.). «Генная терапия тяжелого комбинированного иммунодефицита: мы уже там?». Журнал клинических исследований . 117 (6): 1456–65. doi :10.1172/JCI30953. PMC 1878528. PMID  17549248 . 
  15. ^ ab Aiuti A, Roncarolo MG, Naldini L (июнь 2017 г.). «генная терапия ex vivo в Европе: прокладывание дороги для следующего поколения передовых терапевтических лекарственных средств». EMBO Molecular Medicine . 9 (6): 737–740. doi :10.15252/emmm.201707573. PMC 5452047. PMID  28396566 . 
  16. ^ ab Sheridan C (февраль 2011 г.). «Генная терапия находит свою нишу». Nature Biotechnology . 29 (2): 121–8. doi :10.1038/nbt.1769. PMID  21301435. S2CID  5063701.
  17. ^ Генетически модифицированный вирус взрывает раковые клетки
  18. ^ ГМ-вирус уменьшает раковые опухоли у людей
  19. ^ Лея Дж, Ю Д, Нильссон Б, Гедда Л, Зиеба А, Хаккарайнен Т, Окерстрем Г, Оберг К, Джандоменико В, Эссанд М (ноябрь 2011 г.). «Онколитический аденовирус, модифицированный соматостатиновыми мотивами для селективной инфекции нейроэндокринных опухолевых клеток». Генная терапия . 18 (11): 1052–62. дои : 10.1038/gt.2011.54 . ПМИД  21490682.
  20. ^ Перетт, Линда (30 июня 2011 г.) Генетически модифицированные вирусы кори для лечения рака яичников Национальный институт рака, Критерии, Получено 5 сентября 2012 г.
  21. ^ Breitbach CJ, Thorne SH, Bell JC, Kirn DH (июль 2012 г.). «Целевые и вооруженные онколитические поксвирусы для лечения рака: главный пример JX-594». Current Pharmaceutical Biotechnology . 13 (9): 1768–72. doi :10.2174/138920112800958922. PMID  21740365.
  22. ^ Бисли Д. (31 августа 2011 г.). «Показано, что вирус, борющийся с раком, воздействует только на опухоли». Reuters Science . Получено 5 сентября 2012 г.
  23. ^ Гарбер К (март 2006 г.). «Китай одобряет первую в мире онколитическую вирусную терапию для лечения рака». Журнал Национального института рака . 98 (5): 298–300. doi : 10.1093/jnci/djj111 . PMID  16507823.
  24. ^ Stephenson JR (март 2001 г.). «Генетически модифицированные вирусы: вакцины по замыслу». Current Pharmaceutical Biotechnology . 2 (1): 47–76. doi :10.2174/1389201013378815. PMID  11482348.
  25. ^ Чан В.С. (ноябрь 2006 г.). «Использование генетически модифицированных вирусов и генетически сконструированных вирусно-векторных вакцин: воздействие на окружающую среду». Журнал токсикологии и охраны окружающей среды. Часть A. 69 ( 21): 1971–7. Bibcode : 2006JTEHA..69.1971C. doi : 10.1080/15287390600751405. PMID  16982535. S2CID  41198650.
  26. ^ Ramezanpour B, Haan I, Osterhaus A, Claassen E (декабрь 2016 г.). «Векторные генетически модифицированные вакцины: использование наследия Дженнера». Vaccine . 34 (50): 6436–6448. doi : 10.1016/j.vaccine.2016.06.059 . PMC 7115478 . PMID  28029542. 
  27. ^ Галлахер, Джеймс (16 декабря 2012 г.) Вирус восстанавливает собственный водитель ритма сердца в испытаниях на животных BBC News Health, Получено 5 января 2013 г.
  28. ^ Kapoor N, Liang W, Marbán E, Cho HC (январь 2013 г.). «Прямое преобразование покоящихся кардиомиоцитов в клетки водителя ритма путем экспрессии Tbx18». Nature Biotechnology . 31 (1): 54–62. doi :10.1038/nbt.2465. PMC 3775583 . PMID  23242162. 
  29. ^ ab Ward, Dan (2005) Обращение вспять сокращения популяции кроликов. Одна из самых больших проблем в деле сохранения природы в Испании и Португалии [ постоянная неработающая ссылка ] Университет Альберты, Канада, Получено 30 августа 2012 г.
  30. ↑ Уорд Д (декабрь 2008 г.). "LynxBrief" (PDF) .
  31. ^ Барсена Дж., Моралес М., Васкес Б., Бога Х.А., Парра Ф., Люсьентес Дж., Пажес-Манте А., Санчес-Вискайно Х.М., Бласко Р., Торрес Х.М. (февраль 2000 г.). «Горизонтальная трансмиссивная защита от миксоматоза и геморрагической болезни кроликов с использованием рекомбинантного вируса миксомы». Журнал вирусологии . 74 (3): 1114–23. doi :10.1128/JVI.74.3.1114-1123.2000. ПМЦ 111445 . ПМИД  10627521. 
  32. ^ Катализатор: ГМ-вирус - ABC TV Science
  33. ^ ab Jelley J (2002-08-07). "ГМ-вирус сдерживает кроликов" . Получено 2018-12-16 .
  34. ^ O'Riordan B (2005-02-26). "Вирус, планируемый для борьбы с тростниковой жабой". The Guardian . ISSN  0261-3077 . Получено 16.12.2018 .
  35. ^ Mildura GO. «Вирус может стерилизовать австралийских кроликов». New Scientist . Получено 16.12.2018 .
  36. ^ "Southern Gardens Citrus Nursery, LLC; Уведомление о намерении подготовить заявление о воздействии на окружающую среду для получения разрешения на высвобождение генетически модифицированного вируса Citrus tristeza". www.regulations.gov . Получено 10 июня 2019 г.
  37. ^ Molteni M (2017-04-12). «Апельсиновые деревья Флориды умирают, но вирус, превращенный в оружие, может их спасти». Wired . Получено 2017-04-17 .
  38. ^ abc "Широкое объявление агентства Insect Allies, Biological Technologies Office, HR001117S0002 1 ноября 2016 г.". FedBizOpps.gov .
  39. ^ «День сторонников идеи «Союзников насекомых» — возможности для федерального бизнеса: возможности». www.fbo.gov . Получено 10 июня 2019 г.
  40. ^ «Союзники-насекомые: как враги кукурузы могут когда-нибудь ее спасти». 2017-10-17 . Получено 2019-06-10 .
  41. ^ Картрайт С. (20 декабря 2017 г.). «Ученые из Университета штата Огайо заставят систему вирусов растений «перевернуться с ног на голову» с помощью исследований насекомых». The Lantern . Получено 10 июня 2019 г.
  42. ^ "Команда Университета штата Пенсильвания получает награду в размере 7 миллионов долларов за привлечение насекомых в качестве союзников для обеспечения продовольственной безопасности | Университет штата Пенсильвания". news.psu.edu . Получено 10 июня 2019 г.
  43. ^ "BTI получает награду DARPA 'Insect Allies' Award". EurekAlert! . Получено 10.06.2019 .
  44. ^ «Профили объединения насекомых-союзников» (PDF) . 2016.
  45. ^ Kuiken T (2017-05-03). «Как инициативы синтетической биологии вооруженных сил США могут изменить всю область исследований». Журнал Slate . Получено 10 июня 2019 г.
  46. ^ Reeves RG, Voeneky S, Caetano-Anollés D, Beck F, Boëte C (2018-10-05). «Сельскохозяйственные исследования или новая система биологического оружия?». Science . 362 (6410): 35–37. Bibcode :2018Sci...362...35R. doi :10.1126/science.aat7664. hdl : 21.11116/0000-0002-4F53-9 . ISSN  0036-8075. PMID  30287653. S2CID  52921548.
  47. ^ Голдстоун Эльза Партан, Хизер. «Программа «Союзники насекомых» привлекает критику». www.capeandislands.org . Получено 10 июня 2019 г.{{cite web}}: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )
  48. ^ "Мнение | Программа Пентагона, связанная с насекомыми, сопряжена с рисками — и огромным потенциалом". Washington Post . Получено 10 июня 2019 г.
  49. ^ Lee YJ, Yi H, Kim WJ, Kang K, Yun DS, Strano MS, Ceder G, Belcher AM (май 2009). «Изготовление генетически модифицированных высокомощных литий-ионных аккумуляторов с использованием нескольких вирусных генов». Science . 324 (5930): 1051–5. Bibcode :2009Sci...324.1051L. doi : 10.1126/science.1171541 . PMID  19342549. S2CID  32017913.
  50. ^ http://web.mit.edu/newsoffice/2009/virus-battery-0402.html Новая батарея, созданная на основе вируса, может питать автомобили и электронные устройства
  51. ^ Скрытый ингредиент в новой, более экологичной батарее: вирус
  52. ^ "Новая батарея, созданная на основе вируса, может питать автомобили и электронные устройства". MIT News . Получено 11 декабря 2017 г.
  53. ↑ Правительство США (17 октября 2014 г.). «Процесс обсуждения правительством США вопроса о приобретении функций и приостановка финансирования исследований по отдельным вопросам приобретения функций, связанным с вирусами гриппа, MERS и SARS» (PDF) .
  54. ^ Menachery VD, Yount Jr BL, Debbink K, Agnihothram S, Gralinski LE, Plante JA, Graham RL, Scobey T, Ge XY, Donaldson EF, Randell SH, Lanzavecchia A, Marasco WA, Shi ZL, Baric RS (2015). «Похожий на SARS кластер циркулирующих коронавирусов летучих мышей демонстрирует потенциал для появления у человека». Nature Medicine . 21 (12): 1508–1513. doi :10.1038/nm.3985. PMC 4797993 . PMID  26552008. 
  55. ^ «Рекомендации по оценке и надзору за предлагаемыми исследованиями по приобретению функций» (PDF) . Май 2016 г.
  56. ^ Берг П. (сентябрь 2012 г.). «Загадка двойного назначения». Science . 337 (6100): 1273. Bibcode :2012Sci...337.1273B. doi : 10.1126/science.1229789 . PMID  22984033.
  57. ^ "Биобезопасность - Исследования двойного назначения, вызывающие озабоченность". Офис научной политики NIH (OSP) . Архивировано из оригинала 2017-06-01 . Получено 2016-01-20 .
  58. ^ Kilianski A, Nuzzo JB, Modjarrad K (15 октября 2016 г.). «Ответ Липсичу». Журнал инфекционных заболеваний . 214 (8): 1285–1286. doi :10.1093/infdis/jiw349. PMC 7107386. PMID  27503366 . 
  59. ^ «Бывший работник Pfizer ссылается на генетически модифицированный вирус в иске об увольнении». Hartford Courant . Courant.com. 14 марта 2010 г. Архивировано из оригинала 28 июля 2012 г. Получено 8 ноября 2021 г.
  60. ^ "McClain v. PFIZER, INC., 692 F. Supp. 2d 229" . Получено 13 сентября 2012 г.
  61. ^ "Разоблачитель компании Pfizer награжден 1,4 миллиона долларов". The New York Times . 2 апреля 2010 г. Получено 13 сентября 2012 г.