stringtranslate.com

SNARE белок

Молекулярный механизм, управляющий слиянием пузырьков и высвобождением нейромедиаторов. Основной комплекс SNARE образован четырьмя α-спиралями, вносимыми синаптобревином, синтаксином и SNAP-25, синаптотагмин служит сенсором кальция и тесно регулирует застегивание SNARE. [1]

Белки SNARE – « рецепторы SNA P RE » – представляют собой большое семейство белков , состоящее как минимум из 24 членов в дрожжах , более 60 членов в клетках млекопитающих [2] [3] и некоторого числа в растениях. [4] Основная роль белков SNARE заключается в обеспечении слияния везикул с целевой мембраной ; это в частности опосредует экзоцитоз , но может также опосредовать слияние везикул с мембраносвязанными компартментами (такими как лизосома ) . Наиболее изученными SNARE являются те, которые опосредуют высвобождение синаптических везикул , содержащих нейротрансмиттеры в нейронах . Эти нейрональные SNARE являются мишенью нейротоксинов, ответственных за ботулизм и столбняк, продуцируемых некоторыми бактериями .

Типы

SNARE можно разделить на две категории: везикулы или v-SNARE , которые встраиваются в мембраны транспортных везикул во время отпочкования, и мишени или t-SNARE , которые связаны с мембранами нервных окончаний. Имеющиеся данные свидетельствуют о том, что t-SNARE образуют стабильные субкомплексы, которые служат проводниками для v-SNARE, встроенного в мембрану покрытой белком везикулы, связываясь для завершения формирования комплекса SNARE. [5] Несколько белков SNARE расположены как на везикулах, так и на мембранах-мишенях, поэтому более поздняя схема классификации учитывает структурные особенности SNARE, разделяя их на R-SNARE и Q-SNARE. Часто R-SNARE действуют как v-SNARE, а Q-SNARE действуют как t-SNARE. R-SNARE — это белки, которые участвуют в формировании нулевого ионного слоя в собранном ядре комплекса SNARE с помощью остатка аргинина (R) . Одним из конкретных R-SNARE является синаптобревин, который расположен в синаптических пузырьках. Q-SNARE — это белки, которые участвуют в формировании нулевого ионного слоя в собранном ядре комплекса SNARE с помощью остатка глутамина (Q). Q-SNARE включают синтаксин и SNAP-25. Q-SNARE далее классифицируются как Qa-, Qb- или Qc-SNARE в зависимости от их местоположения в пучке четырех спиралей.

Вхождение

Варианты известны от дрожжей, [6] млекопитающих , [2] [3] Drosophila и Caenorhabditis elegans . [6]

Состав

SNARE представляют собой небольшие, многочисленные, иногда закрепленные в хвосте белки, которые часто посттрансляционно встраиваются в мембраны через С-концевой трансмембранный домен . Семь из 38 известных SNARE, включая SNAP-25 , не имеют трансмембранного домена и вместо этого прикрепляются к мембране посредством модификаций липидов, таких как пальмитоилирование . [7] Белки, закрепленные на хвосте, могут быть вставлены в плазматическую мембрану , эндоплазматический ретикулум , митохондрии и пероксисомы , а также в другие мембраны, хотя любой конкретный SNARE нацелен на уникальную мембрану. Нацеливание на SNARE осуществляется путем изменения либо состава С-концевых фланкирующих аминокислотных остатков, либо длины трансмембранного домена. Замена трансмембранного домена липидными якорями приводит к промежуточной стадии слияния мембран, где сливаются только два контактирующих листка, а не два дистальных листка двух мембранных бислоев. [8]

Хотя SNARE значительно различаются по структуре и размеру, все они имеют общий сегмент в своем цитозольном домене, называемый мотивом SNARE , который состоит из 60-70 аминокислот и содержит гептадные повторы , которые обладают способностью образовывать спирально-спиральные структуры. V- и t-SNARE способны обратимо собираться в плотные четырехспиральные пучки, называемые «транс»-SNARE-комплексами. В синаптических везикулах легко образующиеся метастабильные «транс»-комплексы состоят из трех SNARE: синтаксина 1 и SNAP-25, находящихся в клеточной мембране, и синаптобревина (также называемого мембранным белком, ассоциированным с везикулами или VAMP), закрепленного в мембране везикул.

При нейрональном экзоцитозе синтаксин и синаптобревин закрепляются в соответствующих мембранах своими С-концевыми доменами, тогда как SNAP-25 прикрепляется к плазматической мембране через несколько связанных с цистеином пальмитоильных цепей. Центральный транс -SNARE-комплекс представляет собой пучок из четырех спиралей, где одна -спираль представлена ​​синтаксином 1, одна -спираль - синаптобревином, а две -спирали - SNAP-25. [9]

Было показано, что резидентные SNARE в плазматической мембране присутствуют в отдельных микродоменах или кластерах, целостность которых важна для экзоцитотической компетентности клетки.

Слияние мембран

Наложение основного комплекса SNARE. В центре находится нулевой гидрофильный ионный слой, окруженный гидрофобными слоями лейциновой молнии.

Во время слияния мембран белки v-SNARE и t-SNARE на отдельных мембранах объединяются, образуя комплекс транс-SNARE, также известный как «SNAREpin». В зависимости от стадии слияния мембран эти комплексы могут называться по-разному.

Во время слияния комплексов транс -SNARE мембраны сливаются, и белки SNARE, участвующие в образовании комплекса после слияния, затем называются комплексом « цис »-SNARE, поскольку теперь они располагаются в одной (или цис ) образующейся мембране. После слияния комплекс цис -SNARE связывается и разбирается белком-адаптером альфа-SNAP . Затем гексамерная АТФаза (типа ААА ), называемая NSF, катализирует АТФ -зависимое разворачивание белков SNARE и высвобождает их в цитозоль для рециркуляции.

Считается, что SNARE являются основными необходимыми компонентами механизма слияния и могут функционировать независимо от дополнительных цитозольных вспомогательных белков. Это было продемонстрировано с помощью создания «перевернутых» SNARE, где домены SNARE обращены во внеклеточное пространство, а не в цитозоль. Когда клетки, содержащие v-SNARE, контактируют с клетками, содержащими t-SNARE, образуются комплексы транс -SNARE и происходит слияние клеток. [10]

Компоненты

Основной комплекс SNARE представляет собой пучок из 4 спиралей. [11] Синаптобревин и синтаксин вносят по одной -спирали каждый, тогда как SNAP-25 участвует двумя -спиралями (сокращенно Sn1 и Sn2). Взаимодействующие аминокислотные остатки, образующие комплекс SNARE, могут быть сгруппированы в слои. Каждый слой имеет 4 аминокислотных остатка – по одному остатку на каждую из 4 -спиралей. В центре комплекса находится нулевой ионный слой , состоящий из одного остатка аргинина (R) и трех остатков глутамина (Q), и по бокам он окружен лейциновой застежкой . Слои «-1», «+1» и «+2» в центре комплекса наиболее точно соответствуют идеальной геометрии лейциновой застежки и аминокислотному составу. [12]

Нулевой ионный слой состоит из R56 из VAMP-2, Q226 из синтаксина-1A, Q53 из Sn1 и Q174 из Sn2 и полностью скрыт внутри слоев лейциновой застежки. Положительно заряженная гуанидиногруппа остатка аргинина (R) взаимодействует с карбоксильными группами каждого из трех остатков глутамина (Q).

Боковые слои лейциновой застежки действуют как водонепроницаемое уплотнение, защищающее ионные взаимодействия от окружающего растворителя . Воздействие нулевого ионного слоя водным растворителем путем разрыва фланкирующей лейциновой застежки приводит к нестабильности комплекса SNARE и является предполагаемым механизмом, с помощью которого -SNAP и NSF рециркулируют комплексы SNARE после завершения экзоцитоза синаптических везикул .

Механизм слияния мембран

Сборка

Изображение образования транс -SNARE-комплекса. Показывает, как Munc18 взаимодействует с белками SNARE во время образования комплекса.

Белки SNARE должны собираться в транс -SNARE-комплексы, чтобы обеспечить силу, необходимую для слияния пузырьков . Четыре домена α-спирали (по одному из синаптобревина и синтаксина и два из SNAP-25 ) объединяются, образуя мотив спиральной спирали . Ограничивающим скорость этапом процесса сборки является ассоциация синтаксинового домена SNARE, поскольку он обычно находится в «закрытом» состоянии, когда он неспособен взаимодействовать с другими белками SNARE. [13] Когда синтаксин находится в открытом состоянии, образование комплекса транс -SNARE начинается с ассоциации четырех доменов SNARE на их N-концах . Домены SNARE продолжают формировать спиральный мотив в направлении С-концов своих соответствующих доменов. SNAP и NSF также связываются с комплексом, образованным SNARE на этом этапе, и участвуют в более поздних событиях прайминга и разборки.

Считается, что белок SM Munc18 играет роль в сборке комплекса SNARE, хотя точный механизм его действия все еще обсуждается. Известно, что застежка Munc18 фиксирует синтаксин в закрытой конформации путем связывания с его α-спиральными доменами SNARE, что ингибирует вход синтаксина в комплексы SNARE (тем самым ингибируя слияние ). [13] Однако застежка также способна связывать весь четырехспиральный пучок транс - SNARE комплекса. Одна из гипотез предполагает, что во время сборки SNARE-комплекса застежка Munc18 высвобождает закрытый синтаксин, остается связанным с N-концевым пептидом синтаксина (что позволяет ассоциировать домен SNARE синтаксина с другими белками SNARE), а затем повторно прикрепляется к вновь образовавшимся четырем белкам. -спиральный комплекс SNARE. [14] Этот возможный механизм диссоциации и последующей реассоциации с доменами SNARE может быть кальций-зависимым. [15] Это подтверждает идею о том, что Munc18 играет ключевую регуляторную роль в слиянии пузырьков ; в нормальных условиях Munc18 предотвращает образование комплекса SNARE, но при его активации Munc18 фактически помогает в сборке SNARE-комплекса и тем самым действует как катализатор слияния . [14]

Застежка-молния и открытие пор слияния

На этом рисунке представлен простой обзор взаимодействия белков SNARE с везикулами во время экзоцитоза. Показывает сложную сборку, застегивание и разборку SNARE.

Слияние мембран — это энергозатратная серия событий, которая требует транслокации белков в мембране и разрушения липидного бислоя с последующим преобразованием сильно изогнутой мембранной структуры. Процесс соединения двух мембран требует затрат энергии для преодоления электростатических сил отталкивания между мембранами. Механизм, который регулирует движение связанных с мембраной белков от зоны контакта с мембраной перед слиянием, неизвестен, но считается, что локальное увеличение кривизны мембраны вносит свой вклад в этот процесс. SNARE генерируют энергию посредством белок-липидных и белок-белковых взаимодействий, которые действуют как движущая сила слияния мембран.

Одна модель предполагает, что сила, необходимая для соединения двух мембран во время слияния , возникает из-за конформационных изменений в комплексах транс -SNARE с образованием комплексов цис -SNARE. Текущая гипотеза, описывающая этот процесс, называется «застегиванием молнии» SNARE. [16]

Когда образуется комплекс транс -SNARE, белки SNARE все еще находятся на противоположных мембранах. Поскольку домены SNARE продолжают скручиваться в спонтанном процессе , они образуют гораздо более плотный и стабильный пучок из четырех спиралей. Считается, что во время этого «застегивания» комплекса SNARE часть высвобождаемой энергии от связывания сохраняется в виде напряжения молекулярного изгиба в отдельных мотивах SNARE. Предполагается, что это механическое напряжение сохраняется в полужестких линкерных областях между трансмембранными доменами и спиральным пучком SNARE. [17] [18] Энергетически невыгодный изгиб сводится к минимуму, когда комплекс перемещается периферически к месту слияния мембран. В результате снятие стресса преодолевает силы отталкивания между пузырьком и клеточной мембраной и сжимает две мембраны вместе. [19]

Было предложено несколько моделей, объясняющих последующий этап – образование ножки и поры слияния. Однако точная природа этих процессов остается дискуссионной. В соответствии с гипотезой «молнии», когда формируется комплекс SNARE, стягивающийся пучок спирали оказывает скручивающее усилие на трансмембранные (ТМ) домены синаптобревина и синтаксина . [20] Это приводит к тому, что домены ТМ наклоняются внутри отдельных мембран, поскольку белки скручиваются более плотно. Нестабильная конфигурация доменов TM в конечном итоге приводит к слиянию двух мембран, и белки SNARE объединяются внутри одной мембраны, которая называется комплексом « цис »-SNARE. [21] В результате перестройки липидов открывается пора слияния и позволяет химическому содержимому пузырька просачиваться во внешнюю среду.

Континуальное объяснение формирования стебля предполагает, что слияние мембран начинается с бесконечно малого радиуса, пока оно не расширяется радиально в структуру, похожую на стебель. Однако такое описание не учитывает молекулярную динамику мембранных липидов. Недавнее молекулярное моделирование показывает, что непосредственная близость мембран позволяет липидам распространяться, когда популяция липидов вставляет свои гидрофобные хвосты в соседнюю мембрану, эффективно удерживая «ногу» в каждой мембране. Разрешение расширенного липидного состояния происходит спонтанно с образованием структуры стебля. С этой молекулярной точки зрения промежуточное состояние расширенного липида является барьером, определяющим скорость, а не образованием стебля, который теперь становится минимумом свободной энергии. Энергетический барьер установления конформации расширенного липида прямо пропорционален межмембранному расстоянию. Таким образом, комплексы SNARE и их сжатие двух мембран вместе могут обеспечить свободную энергию, необходимую для преодоления барьера. [22]

Разборка

Затраты энергии, необходимые для осуществления SNARE-опосредованного слияния, происходят в результате разборки SNARE-комплекса. Предполагаемым источником энергии является N-этилмалеимид-чувствительный фактор (NSF) , АТФаза , которая участвует в слиянии мембран . Гомогексамеры NSF вместе с кофактором NSF α-SNAP связывают и диссоциируют комплекс SNARE, сочетая этот процесс с гидролизом АТФ . [23] Этот процесс позволяет осуществить обратный захват синаптобревина для дальнейшего использования в везикулах , тогда как другие белки SNARE остаются связанными с клеточной мембраной .

Диссоциированные белки SNARE имеют более высокое энергетическое состояние, чем более стабильный цис -SNARE-комплекс. Считается, что энергия, которая управляет синтезом , возникает в результате перехода к более низкоэнергетическому цис -SNARE-комплексу. Диссоциация комплексов SNARE, связанная с гидролизом АТФ, представляет собой затрату энергии, которую можно сравнить со «взведением пистолета», так что, как только начинается слияние пузырьков , процесс происходит спонтанно и с оптимальной скоростью. Аналогичный процесс происходит в мышцах, в которых головки миозина должны сначала гидролизовать АТФ , чтобы адаптировать необходимую конформацию для взаимодействия с актином и последующего силового удара.

Регуляторное воздействие на экзоцитоз

Регуляция посредством пальмитоилирования SNAP-25

Белок Q-SNARE Синаптосомально-ассоциированный белок 25 ( SNAP-25 ) состоит из двух α-спиральных доменов, соединенных случайным спиральным линкером. Область линкера случайной катушки наиболее примечательна наличием четырех остатков цистеина . [24] α-спиральные домены объединяются с таковыми как синтаксина , так и синаптобревина (также известного как мембранный белок, ассоциированный с везикулами или VAMP), образуя 4-α-спиральный комплекс SNARE, критически важный для эффективного экзоцитоза .

В то время как синтаксин и синаптобревин содержат трансмембранные домены , которые позволяют стыковаться с мембранами -мишенями и везикулами соответственно, SNAP-25 основан на пальмитоилировании остатков цистеина , обнаруженных в его области случайного клубка, для стыковки с мембраной-мишенью. Некоторые исследования предположили, что ассоциация с синтаксином посредством взаимодействий SNARE исключает необходимость в таких механизмах стыковки. Однако исследования по нокдауну синтаксина не показали снижения количества связанного с мембраной SNAP-25, что позволяет предположить, что существуют альтернативные способы стыковки. [25] Таким образом, ковалентное связывание цепей жирных кислот с SNAP-25 через тиоэфирные связи с одним или несколькими остатками цистеина обеспечивает регуляцию стыковки и, в конечном итоге, SNARE-опосредованного экзоцитоза . Этот процесс опосредуется специализированным ферментом под названием DHHC пальмитоилтрансфераза. [26] Также было показано, что богатый цистеином домен SNAP-25 слабо связывается с плазматической мембраной , что , возможно, позволяет ему локализоваться рядом с ферментом для последующего пальмитоилирования . Обратный процесс осуществляется другим ферментом, называемым пальмитоилпротеинтиоэстеразой (см. рисунок).

Упрощенное изображение пальмитоилирования остатка цистеина в белке.

Также предполагается, что доступность SNAP-25 в комплексе SNARE может пространственно регулироваться посредством локализации липидных микродоменов в мембране-мишени. Пальмитоилированные остатки цистеина могут быть локализованы в желаемой области мембраны-мишени через благоприятное липидное окружение (возможно, богатое холестерином ), комплементарное цепям жирных кислот , связанным с остатками цистеина SNAP-25. [25]

Регуляция SNAP-25 потенциалзависимых Ca2+-каналов в окончаниях аксонов нейронов

Когда потенциал действия достигает окончания аксона , события деполяризации стимулируют открытие потенциалзависимых кальциевых каналов (VGCC) , обеспечивая быстрый приток кальция вниз по его электрохимическому градиенту . Кальций продолжает стимулировать экзоцитоз посредством связывания с синаптотагмином 1 . Однако было показано, что SNAP-25 отрицательно регулирует функцию VGCC в глутаматергических нейрональных клетках. SNAP-25 приводит к снижению плотности тока через VGCC и, следовательно, к уменьшению количества кальция , связывающего синаптотагмин , вызывая уменьшение нейронального глутаматергического экзоцитоза . И наоборот, недостаточная экспрессия SNAP-25 позволяет увеличить плотность тока VGCC и увеличить экзоцитоз. [27]

Дальнейшие исследования показали возможную связь между чрезмерной/недостаточной экспрессией SNAP-25 и различными заболеваниями головного мозга . При синдроме дефицита внимания/гиперактивности или СДВГ полиморфизмы в локусе гена SNAP-25 у людей связаны с заболеванием, что позволяет предположить потенциальную роль в его проявлении. [28] Это также подтверждается гетерогенными исследованиями нокаута SNAP-25, проведенными на мышах-мутантах колобомы , которые привели к фенотипическим характеристикам СДВГ. [29] Исследования также показали корреляцию чрезмерной/недостаточной экспрессии SNAP-25 и возникновения шизофрении . [30] [31]

Синтаксин и домен Habc

Синтаксин состоит из трансмембранного домена (TMD), альфа-спирального домена SNARE, короткой линкерной области и домена Habc, который состоит из трех альфа-спиральных областей. Домен SNARE в синтаксине служит местом-мишенью для стыковки SNAP-25 и синаптобревина с целью формирования четырехспирального пучка, необходимого для комплекса SNARE, и последующего слияния . Однако домен Habc служит автоингибирующим доменом в синтаксине. Было показано, что он сворачивается и связывается с доменом SNARE синтаксина, индуцируя «закрытое» состояние, создавая физический барьер для формирования мотива SNARE . И наоборот, домен Habc может снова диссоциировать с доменом SNARE, оставляя синтаксин свободным для связи как с SNAP-25 , так и с синаптобревином . [32]

Синтаксин 1B и пул легковысвобождаемых везикул

Существует огромное разнообразие подтипов синтаксинов : в геноме человека их насчитывается 15 разновидностей. [33] Было высказано предположение, что синтаксин 1B играет роль в регулировании количества синаптических везикул, готовых к экзоцитозу в окончаниях аксонов. Это также называют легковысвобождаемым пулом везикул (RRP) . Нокаут -исследование , проведенное в 2014 году, показало, что отсутствие синтаксина 1B привело к значительному уменьшению размера RRP. [34]

Токсины

Многие нейротоксины напрямую влияют на комплексы SNARE. Такие токсины, как ботулинический и столбнячный токсины, воздействуют на компоненты SNARE. Эти токсины препятствуют правильной рециркуляции пузырьков и приводят к ухудшению мышечного контроля, спазмам, параличу и даже смерти.

Ботулинический нейротоксин

Ботулинический токсин (BoNT) — один из самых сильных токсинов, когда-либо обнаруженных. [35] Это протеолитический фермент, который расщепляет белки SNARE в нейронах . Его белковая структура состоит из двух пептидных субъединиц: тяжелой цепи (100 кДа) и легкой цепи (50 кДа), которые удерживаются вместе дисульфидной связью . Действие BoNT происходит по четырехэтапному механизму, включающему связывание с мембраной нейрона, эндоцитоз , мембранную транслокацию и протеолиз белков SNARE. [36]

Нацеленные белки SNARE ботулинического нейротоксина (BoNT) и столбнячного нейротоксина (TeNT) внутри окончания аксона . [37]

По механизму действия тяжелая цепь BoNT сначала используется для поиска нейрональных мишеней и связывания с ганглиозидами и мембранными белками пресинаптических нейронов. Затем токсин эндоцитозируется в клеточную мембрану. Тяжелая цепь претерпевает конформационные изменения, важные для перемещения легкой цепи в цитозоль нейрона. Наконец, после того как легкая цепь BoNT попадает в цитозоль целевого нейрона, она высвобождается из тяжелой цепи и может достичь своих активных сайтов расщепления на белках SNARE. [36] Легкая цепь высвобождается из тяжелой цепи за счет восстановления дисульфидной связи, удерживающей их вместе. Восстановление этой дисульфидной связи опосредовано системой НАДФН- тиоредоксинредуктаза – тиоредоксин . [38] Легкая цепь BoNT действует как металлопротеаза на белки SNARE, которые зависят от ионов Zn(II), [39] расщепляя их и устраняя их функцию при экзоцитозе .

Существует 8 известных изотипов BoNT, BoNT/A – BoNT/H, каждый из которых имеет разные специфические сайты расщепления на белках SNARE. SNAP25 , член семейства белков SNARE, расположенных в мембране клеток, расщепляется изотипами A, C и E BoNT. Расщепление SNAP-25 этими изотипами BoNT значительно ингибирует их функцию в формировании комплекса SNARE для слияния. везикул к синаптической мембране. BoNT/C также нацелен на синтаксин -1, еще один белок SNARE, расположенный в синаптической мембране. Он дегенерирует эти белки-синтаксины с таким же результатом, как и в случае с SNAP-25. Третий белок SNARE, синаптобревин (VAMP), расположен на клеточных везикулах . VAMP2 нацеливается и расщепляется изотипами B, D и F BoNT в синаптических нейронах. [35] Мишени этих различных изотипов BoNT, а также столбнячного нейротоксина (TeNT) показаны на рисунке справа.

В каждом из этих случаев ботулинический нейротоксин вызывает функциональное повреждение белков SNARE, что имеет серьезные физиологические и медицинские последствия. Повреждая белки SNARE, токсин предотвращает слияние синаптических везикул с синаптической мембраной и высвобождение их нейротрансмиттеров в синаптическую щель . При ингибировании высвобождения нейромедиатора в синаптическую щель потенциалы действия не могут распространяться для стимуляции мышечных клеток. Это приводит к параличу инфицированных, а в серьезных случаях может привести к смерти. Хотя действие ботулинического нейротоксина может быть смертельным, его также используют в качестве терапевтического средства в медицинских и косметических процедурах. [40] [41]

Столбнячный нейротоксин

Распределение функций и механизмов тяжелой (HC) и легкой цепи (LC) столбнячного нейротоксина: HC помогает связывать TeNT как с ганглиозидным рецептором, так и с конечным рецептором. Как только TeNT оказывается в везикуле в тормозном пространстве межнейронов, HC способствует транслокации LC в цитоплазму. Затем ЦК, характеризующийся активностью цинк-эндопептидазы, ингибирует нейротрансмиссию путем расщепления синаптобревина 1.

Столбнячный токсин , или TeNT, состоит из тяжелой цепи (100 кДа) и легкой цепи (50 кДа), соединенных дисульфидной связью . Тяжелая цепь отвечает за нейроспецифическое связывание TeNT с мембраной нервного окончания, эндоцитоз токсина и транслокацию легкой цепи в цитозоль. Легкая цепь обладает цинк-зависимой эндопептидазной или, более конкретно, матриксной металлопротеиназной (ММП) активностью, посредством которой осуществляется расщепление синаптобревина или ВАМП. [42]

Для активации легкой цепи TeNT один атом цинка должен быть связан с каждой молекулой токсина. [43] Когда цинк связан, восстановление дисульфидной связи будет осуществляться в первую очередь через окислительно- восстановительную систему НАДФН-тиоредоксинредуктаза-тиоредоксин . [44] Затем легкая цепь может свободно расщеплять связь Gln76-Phe77 синаптобревина. [42] Расщепление синаптобревина влияет на стабильность ядра SNARE, не позволяя ему войти в низкоэнергетическую конформацию, которая является мишенью для связывания NSF . [45] Это расщепление синаптобревина является конечной мишенью TeNT, и даже в низких дозах нейротоксин будет ингибировать экзоцитоз нейромедиатора .

Роль в высвобождении нейромедиаторов

Нейромедиаторы хранятся в легко высвобождаемых пулах везикул , локализованных в пресинаптическом терминале . Во время нейросекреции / экзоцитоза SNARE играют решающую роль в стыковке, прайминге, слиянии и синхронизации высвобождения нейромедиаторов в синаптическую щель .

Первым шагом в слиянии синаптических пузырьков является привязывание, при котором везикулы перемещаются из резервного пула в физический контакт с мембраной. На мембране Munc-18 изначально связан с синтаксином 1А в закрытой структуре. Предполагается, что диссоциация Munc-18 из комплекса освобождает синтаксин 1A для связывания с белками v-SNARE. [46] Следующим шагом в высвобождении является стыковка везикул, при которой белки v- и t-SNARE временно связываются кальций-независимым образом. Затем везикулы праймируются, при этом мотивы SNARE образуют стабильное взаимодействие между везикулой и мембраной. Комплексины стабилизируют праймированный SNARE-комплекс, делая везикулы готовыми к быстрому экзоцитозу.

Участок пресинаптической мембраны, содержащий праймированные везикулы и плотное скопление белков SNARE, называется активной зоной . Потенциал-управляемые кальциевые каналы сильно сконцентрированы вокруг активных зон и открываются в ответ на деполяризацию мембраны в синапсе. Приток кальция воспринимается синаптотагмином 1 , который, в свою очередь, вытесняет белок-комплексин и позволяет пузырьку сливаться с пресинаптической мембраной, высвобождая нейромедиатор. Также было показано, что потенциалзависимые кальциевые каналы напрямую взаимодействуют с синтаксином t-SNARE 1A и SNAP-25, а также с синаптотагмином 1. Эти взаимодействия способны ингибировать активность кальциевых каналов, а также плотно агрегировать молекулы вокруг сайт релиза. [47]

Было много клинических случаев, связывающих гены SNARE с нервными расстройствами. Дефицит мРНК SNAP-25 наблюдался в тканях гиппокампа у некоторых пациентов с шизофренией , однонуклеотидный полиморфизм SNAP-25 связан с гиперактивностью при расстройствах аутистического спектра , а сверхэкспрессия SNAP-25B приводит к раннему началу биполярного расстройства . [47]

Роль в аутофагии

Макроаутофагия — это катаболический процесс , включающий образование связанных с двойной мембраной органелл , называемых аутофагосомами , которые способствуют деградации клеточных компонентов посредством слияния с лизосомами . Во время аутофагии части цитоплазмы поглощаются чашеобразной двойной мембранной структурой, называемой фагофором, и в конечном итоге становятся содержимым полностью собранной аутофагосомы. Биогенез аутофагосом требует инициации и роста фагофоров - процесса, который, как когда-то считалось, происходит за счет добавления липидов de novo. Однако недавние данные свидетельствуют о том, что липиды, которые способствуют росту фагофоров, происходят из многочисленных источников мембран, включая эндоплазматический ретикулум , аппарат Гольджи , плазматическую мембрану и митохондрии . [48] ​​SNAREs играют важную роль в обеспечении слияния пузырьков во время инициации и расширения фагофоров, а также слияния аутофагосом-лизосом на более поздних стадиях аутофагии.

Хотя механизм инициации фагофоров у млекопитающих неизвестен, SNARE участвуют в формировании фагофоров путем гомотипического слияния небольших, покрытых клатрином , одномембранных везикул, содержащих Atg16L, v-SNARE VAMP7 и его партнерских t-SNARE: синтаксин- 7 , Синтаксин-8 и VTI1B . [49] У дрожжей t-SNAREs Sec9p и Sso2p необходимы для экзоцитоза и способствуют тубуловезикулярному отпочкованию Atg9-положительных везикул, которые также необходимы для биогенеза аутофагосом. [50] [51] Выключение любого из этих SNARE приводит к накоплению небольших везикул, содержащих Atg9, которые не сливаются, тем самым предотвращая образование пре-аутофагосомной структуры. [51]

Помимо сборки фагофоров, SNARE также важны для обеспечения слияния аутофагосом и лизосом. У млекопитающих SNAREs VAMP7 , VAMP8 и VTI1B необходимы для слияния аутофагосом и лизосом, и этот процесс нарушается при лизосомальных нарушениях накопления, когда холестерин накапливается в лизосомах и изолирует SNARE в богатых холестерином областях мембраны, предотвращая их рециркуляцию. [52] Недавно синтаксин 17 ( STX17 ) был идентифицирован как связанный с аутофагосомой SNARE, который взаимодействует с VAMP8 и SNAP29 и необходим для слияния с лизосомой. [53] STX17 локализуется на внешней мембране аутофагосом, но не на фагофорах или других предшественниках аутофагосом, что предотвращает их преждевременное слияние с лизосомой. [53] У дрожжей слияние аутофагосом с вакуолями (дрожжевой эквивалент лизосом) требует SNARE и родственных белков, таких как гомолог синтаксина Vam3, гомолог SNAP-25 Vam7, Ras-подобная ГТФаза Ypt7 и ортолог NSF, Sec18. [48]

Гибкая замена компонентов

Известно, что несколько комплексов гибко заменяют один белок другим: два Qa-SNARE у дрожжей могут в некоторой степени заменять друг друга. Дрожжи, которые теряют R-SNARE (Sec22p), автоматически повышают уровень гомолога ( Ykt6p) и используют его таким же образом. Хотя дрозофилы не могут пережить потерю компонента SNAP-25 , SNAP-24 может полностью его заменить. А также у дрозофилы R-SNARE, обычно не обнаруживаемый в синапсах , может заменять синаптобревин . [6]

В растениях

SNARE также встречаются в растениях, и достигнуто некоторое понимание их возникновения и роли. Часто оказывается, что они необходимы для транспорта везикул , в том числе данные Zheng et al 1999 о транспортировке вакуолей Гольджи . Большая часть этого исследования была проведена на Arabidopsis . [4]

Рекомендации

  1. ^ Георгиев Д.Д., Глейзбрук Дж.Ф. (2007). «Субнейронная обработка информации уединенными волнами и случайными процессами». В Лышевском С.Е. (ред.). Справочник по нано- и молекулярной электронике (PDF) . Серия «Нано и микроинженерия». ЦРК Пресс. стр. 17–1–17–41. дои : 10.1201/9781315221670. ISBN 978-0-8493-8528-5.
  2. ^ аб Бурри Л., Литгоу Т. (январь 2004 г.). «Полный набор SNARE в дрожжах». Трафик . 5 (1): 45–52. дои : 10.1046/j.1600-0854.2003.00151.x . PMID  14675424. S2CID  45480417.
  3. ^ AB Джеральд К. (2002). Клеточная и молекулярная биология (4-е изд.). Джон Уайли и сыновья.
  4. ^ Аб Райхель, Наташа В. (28 апреля 2017 г.). «Твердо посажено, всегда в движении». Ежегодный обзор биологии растений . Ежегодные обзоры . 68 (1): 1–27. doi : 10.1146/annurev-arplant-042916-040829 . ISSN  1543-5008. ПМИД  27860488.
  5. ^ Мальсам Дж., Зёльнер TH (1 октября 2011 г.). «Организация SNARE в стеке Гольджи». Перспективы Колд-Спринг-Харбор в биологии . 3 (10): а005249. doi : 10.1101/cshperspect.a005249. ПМК 3179334 . ПМИД  21768609. 
  6. ^ abc Унгар Д., Хьюсон FM (2003). «Структура и функция белка SNARE». Ежегодный обзор клеточной биологии и биологии развития . Ежегодные обзоры . 19 (1): 493–517. doi : 10.1146/annurev.cellbio.19.110701.155609. ПМИД  14570579.
  7. ^ Хонг В., Лев С. (январь 2014 г.). «Привязка сборки комплексов SNARE». Тенденции в клеточной биологии . 24 (1): 35–43. дои : 10.1016/j.tcb.2013.09.006. ПМИД  24119662.
  8. ^ Мартенс С., МакМахон HT (21 мая 2008 г.). «Механизмы слияния мембран: разные игроки и общие принципы». Nature Reviews Молекулярно-клеточная биология . 9 (7): 543–556. дои : 10.1038/nrm2417. PMID  18496517. S2CID  706741.
  9. ^ Чжоу QJ, Лай Ю, Бакай Т, Чжао МЛ, Любимов А.Ю., Уервиройнангкорн М, Зельдин О.Б., Брюстер А.С., Саутер Н.К., Коэн А.Е., Солтис С.М., Алонсо-Мори Р., Чолле М., Лемке Х.Т., Пфуецнер Р.А., Чой У.Б. , Вайс В.Т., Диао Дж.Дж., Зюдхоф Т.К., Брунгер А.Т. (17 августа 2015 г.). «Архитектура механизма синаптотагмин-SNARE для нейронального экзоцитоза». Природа . 525 (7567): 62–67. дои : 10.1038/nature14975. ПМК 4607316 . ПМИД  26280336. 
  10. ↑ Ху С., Ахмед М., Мелиа Т.Дж., Зёлльнер Т.Х., Майер Т., Ротман Дж.Э. (13 июня 2003 г.). «Слияние клеток с помощью перевернутых ловушек». Наука . 300 (5626): 1745–1749. Бибкод : 2003Sci...300.1745H. дои : 10.1126/science.1084909. PMID  12805548. S2CID  18243885.
  11. ^ Саттон Р.Б., Фассауэр Д., Ян Р., Брунгер А.Т. (1998). «Кристаллическая структура комплекса SNARE, участвующего в синаптическом экзоцитозе, с разрешением 2,4 Å». Природа . 395 (6700): 347–353. Бибкод : 1998Natur.395..347S. дои : 10.1038/26412. PMID  9759724. S2CID  1815214. Архивировано из оригинала 10 сентября 2006 г. Проверено 6 октября 2006 г.
  12. ^ Фассауэр Д., Саттон Р.Б., Брунгер А.Т., Ян Р. (1998). «Консервативные структурные особенности синаптического слитого комплекса: белки SNARE, переклассифицированные как Q- и R-SNARE». Труды Национальной академии наук . 95 (26): 15781–15786. Бибкод : 1998PNAS...9515781F. дои : 10.1073/pnas.95.26.15781 . ПМК 28121 . ПМИД  9861047. 
  13. ^ аб Буркхардт П., Хаттендорф Д.А., Вайс В.И., Фассхауэр Д. (2008). «Munc18a контролирует сборку SNARE посредством взаимодействия с N-пептидом синтаксина». ЭМБО Дж . 27 (7): 923–33. дои : 10.1038/emboj.2008.37. ПМЦ 2323264 . ПМИД  18337752. 
  14. ^ ab Südhof TC, Ротман Дж. Э. (январь 2009 г.). «Слияние мембран: борьба с белками SNARE и SM». Наука . 323 (5913): 474–7. Бибкод : 2009Sci...323..474S. дои : 10.1126/science.1161748. ПМЦ 3736821 . ПМИД  19164740. 
  15. ^ Ян Р., Фассауэр Д. (2012). «Молекулярные машины, управляющие экзоцитозом синаптических везикул». Природа . 490 (7419): 201–7. Бибкод : 2012Natur.490..201J. дои : 10.1038/nature11320. ПМЦ 4461657 . ПМИД  23060190. 
  16. ^ Чен Ю.А., Шеллер Р.Х. (2001). «SNARE-опосредованное слияние мембран». Нат. Преподобный мол. Клеточная Биол . 2 (2): 98–106. дои : 10.1038/35052017. PMID  11252968. S2CID  205012830.
  17. ^ Ван Ю, Дулубова И, Ризо Дж, Зюдхоф TC (2001). «Функциональный анализ консервативных структурных элементов дрожжевого синтаксина Vam3p». Ж. Биол. Хим . 276 (30): 28598–605. дои : 10.1074/jbc.M101644200 . ПМИД  11349128.
  18. ^ Кисслинг В., Тамм Л.К. (январь 2003 г.). «Измерение расстояний в поддерживаемых бислоях с помощью флуоресцентной интерференционно-контрастной микроскопии: полимерные подложки и белки SNARE». Биофизический журнал . 84 (1): 408–18. Бибкод : 2003BpJ....84..408K. дои : 10.1016/s0006-3495(03)74861-9. ПМЦ 1302622 . ПМИД  12524294. 
  19. ↑ Рисселада HJ, Куцнер С., Грубмюллер Х (2 мая 2011 г.). «Пойманы с поличным: визуализация событий слияния, опосредованных SNARE, в молекулярных деталях». ХимБиоХим . 12 (7): 1049–55. дои : 10.1002/cbic.201100020. hdl : 11858/00-001M-0000-0027-C8EA-9 . PMID  21433241. S2CID  14140718.
  20. ^ Фанг Кью, Линдау М (июль 2014 г.). «Как белки SNARE могут открыть пору слияния?». Физиология . 29 (4): 278–85. doi :10.1152/physol.00026.2013. ПМК 4103061 . ПМИД  24985331. 
  21. ^ Цукер Р.С., Куллманн Д.М., Кезер П.С. (август 2014 г.). «Глава 15: Высвобождение нейротрансмиттеров». В Бирне Дж. Х., Гейдельбергере Р., Ваксхэме М. Н. (ред.). От молекул к сетям: введение в клеточную и молекулярную нейронауку. Академическая пресса. стр. 443–488. ISBN 9780123982674.
  22. ^ Рисселада HJ, Грубмюллер H (апрель 2012 г.). «Как молекулы SNARE опосредуют слияние мембран: последние данные молекулярного моделирования». Современное мнение в области структурной биологии . 22 (2): 187–96. doi :10.1016/j.sbi.2012.01.007. hdl : 11858/00-001M-0000-000F-9AF7-9 . ПМИД  22365575.
  23. ^ Зёлльнер Т., Беннетт М.К., Уайтхарт С.В., Шеллер Р.Х., Ротман Дж.Э. (1993). «Путь сборки-разборки белка in vitro, который может соответствовать последовательным этапам стыковки, активации и слияния синаптических пузырьков». Клетка . 75 (3): 409–18. дои : 10.1016/0092-8674(93)90376-2. PMID  8221884. S2CID  26906457.
  24. ^ Бок Л.В., Хатчингс Б., Грубмюллер Х., ди-джей Вудбери (август 2010 г.). «Хемомеханическая регуляция белков SNARE, изученная с помощью молекулярно-динамического моделирования». Биофизический журнал . 99 (4): 1221–30. Бибкод : 2010BpJ....99.1221B. дои : 10.1016/j.bpj.2010.06.019. ПМЦ 2920728 . ПМИД  20713006. 
  25. ^ ab Гривз Дж., Прескотт Г.Р., Горлеку О.А., Чемберлен Л.Х. (февраль 2010 г.). «Регулирование оборота и функции SNAP-25 путем пальмитоилирования». Труды Биохимического общества . 38 (Часть 1): 163–6. дои : 10.1042/BST0380163. PMID  20074052. S2CID  17636112.
  26. ^ Гривз Дж., Горлеку О.А., Салаун С., Чемберлен Л.Х. (август 2010 г.). «Пальмитоилирование семейства белков SNAP25: специфичность и регуляция пальмитоилтрансферазами DHHC». Журнал биологической химии . 285 (32): 24629–38. дои : 10.1074/jbc.M110.119289 . ПМЦ 2915699 . ПМИД  20519516. 
  27. ^ Кондлифф С.Б., Коррадини I, Поцци Д., Вердерио С., Маттеоли М. (август 2010 г.). «Эндогенный SNAP-25 регулирует нативные потенциалзависимые кальциевые каналы в глутаматергических нейронах». Журнал биологической химии . 285 (32): 24968–76. дои : 10.1074/jbc.M110.145813 . ПМЦ 2915732 . ПМИД  20522554. 
  28. ^ Коррадини I, Вердерио С, Сала М, Уилсон MC, Маттеоли М (январь 2009 г.). «SNAP-25 при нервно-психических расстройствах». Анналы Нью-Йоркской академии наук . 1152 (1): 93–9. Бибкод : 2009NYASA1152...93C. дои : 10.1111/j.1749-6632.2008.03995.x. ПМК 2706123 . ПМИД  19161380. 
  29. ^ Хесс Э.Дж., Джинна Х.А., Козак Калифорния, Уилсон MC (июль 1992 г.). «Спонтанная локомоторная гиперактивность у мыши-мутанта с делецией, включая ген Snap на хромосоме 2». Журнал неврологии . 12 (7): 2865–74. doi : 10.1523/JNEUROSCI.12-07-02865.1992. ПМК 6575838 . ПМИД  1613559. 
  30. ^ Томпсон П.М., Сауэр AC, Перроне-Биццозеро Н.И. (февраль 1998 г.). «Измененные уровни синаптосомально-ассоциированного белка SNAP-25 при шизофрении». Биологическая психиатрия . 43 (4): 239–43. дои : 10.1016/s0006-3223(97)00204-7. PMID  9513732. S2CID  20347660.
  31. ^ Габриэль С.М., Арутюнян В., Повчик П., Хонер В.Г., Дэвидсон М., Дэвис П., Дэвис К.Л. (июнь 1997 г.). «Повышение концентрации пресинаптических белков в поясной коре головного мозга больных шизофренией». Архив общей психиатрии . 54 (6): 559–66. doi : 10.1001/archpsyc.1997.01830180077010. ПМИД  9193197.
  32. ^ Макдональд С., Мансон М., Брайант, штат Нью-Джерси (февраль 2010 г.). «Аутоингибирование сборки комплекса SNARE с помощью конформационного переключателя представляет собой консервативную особенность синтаксинов». Труды Биохимического общества . 38 (Часть 1): 209–12. дои : 10.1042/BST0380209. ПМЦ 5242387 . ПМИД  20074061. 
  33. ↑ Тенг Ф.Ю., Ван Ю, Тан Б.Л. (24 октября 2001 г.). «Синтактины». Геномная биология . 2 (11): ОБЗОРЫ3012. doi : 10.1186/gb-2001-2-11-reviews3012 . ПМК 138984 . ПМИД  11737951. 
  34. ↑ Мисима Т., Фудзивара Т., Санада М., Кофудзи Т., Канаи-Адзума М., Акагава К. (28 февраля 2014 г.). «Синтаксин 1B, но не синтаксин 1A, необходим для регуляции экзоцитоза синаптических пузырьков и легковысвобождаемого пула в центральных синапсах». ПЛОС ОДИН . 9 (2): e90004. Бибкод : 2014PLoSO...990004M. дои : 10.1371/journal.pone.0090004 . ПМЦ 3938564 . ПМИД  24587181. 
  35. ^ ab Peng L, Лю H, Руан H, Тепп WH, Stoothoff WH, Браун Р.Х., Джонсон EA, Яо WD, Чжан SC, Донг М (12 февраля 2013 г.). «Цитотоксичность ботулинических нейротоксинов демонстрирует прямую роль синтаксина 1 и SNAP-25 в выживании нейронов». Природные коммуникации . 4 : 1472. Бибкод : 2013NatCo...4.1472P. doi : 10.1038/ncomms2462. ПМК 4052923 . ПМИД  23403573. 
  36. ^ ab Россетто О, Пираццини М, Болоньезе П, Ригони М, Монтекукко С (декабрь 2011 г.). «Обновленная информация о механизме действия нейротоксинов столбняка и ботулина» (PDF) . Акта Чим Слов . 58 (4): 702–7. PMID  24061118. Архивировано из оригинала (PDF) 12 августа 2012 г. Проверено 22 ноября 2014 г.
  37. ^ Барр-младший, Моура Х., Бойер А.Э., Вулфитт А.Р., Калб С.Р., Павлопулос А., Маквильямс Л.Г., Шмидт Дж.Г., Мартинес Р.А., Эшли Д.Л. (2005). «Обнаружение и дифференциация ботулинического нейротоксина методом масс-спектрометрии». Возникающая инфекция. Дис . 11 (10): 1578–83. дои : 10.3201/eid1110.041279. ПМЦ 3366733 . ПМИД  16318699. 
  38. ^ Пираццини М, Бордин Ф, Россетто О, Шон CC, Бинц Т, Монтекукко С (январь 2013 г.). «Система тиоредоксинредуктаза-тиоредоксин участвует в поступлении столбнячных и ботулинических нейротоксинов в цитозоль нервных окончаний». Письма ФЭБС . 587 (2): 150–155. doi :10.1016/j.febslet.2012.11.007. PMID  23178719. S2CID  207713815.
  39. ^ Сильваджи Н.Р., Уилсон Д., Ципори С., Аллен К.Н. (май 2008 г.). «Каталитические свойства легкой цепи ботулинического нейротоксина А, выявленные с помощью структуры ингибирующего пептидного комплекса с высоким разрешением». Биохимия . 47 (21): 5736–5745. дои : 10.1021/bi8001067. ПМИД  18457419.
  40. ^ Уиллер А.Х. (1998). «Ботулинический токсин А, дополнительная терапия рефрактерных головных болей, связанных с напряжением перикраниальных мышц». Головная боль . 38 (6): 468–71. дои : 10.1046/j.1526-4610.1998.3806468.x. PMID  9664753. S2CID  12581048.
  41. ^ Гарсия А., Фултон Дж. Э. (1996). «Косметическая денервация мимики лица ботулотоксином. Исследование зависимости доза-эффект». Дерматол Сург . 22 (1): 39–43. doi :10.1111/j.1524-4725.1996.tb00569.x. PMID  8556256. S2CID  7703818.
  42. ^ ab Скьяво Г, Бенфенати Ф, Пулен Б, Россетто О, Полверино де Лаурето П, ДасГупта БР, Монтекукко С (29 октября 1992 г.). «Нейротоксины столбняка и ботулина-B блокируют высвобождение нейромедиаторов путем протеолитического расщепления синаптобревина». Природа . 359 (6398): 832–5. Бибкод : 1992Natur.359..832S. дои : 10.1038/359832a0. PMID  1331807. S2CID  4241066.
  43. ^ Скьяво Г, Пулен Б, Россетто О, Бенфенати Ф, Таук Л, Монтекукко С (октябрь 1992 г.). «Столбнячный токсин представляет собой белок цинка, и его ингибирование высвобождения нейромедиаторов и активности протеазы зависит от цинка». Журнал ЭМБО . 11 (10): 3577–83. doi :10.1002/j.1460-2075.1992.tb05441.x. ПМК 556816 . ПМИД  1396558. 
  44. ^ Пираццини М, Бордин Ф, Россетто О, Шон CC, Бинц Т, Монтекукко С (2013). «Система тиоредоксинредуктаза-тиоредоксин участвует в поступлении столбнячных и ботулинических нейротоксинов в цитозоль нервных окончаний». ФЭБС Летт . 587 (2): 150–5. doi :10.1016/j.febslet.2012.11.007. PMID  23178719. S2CID  207713815.
  45. ^ Пеллегрини Л.Л., О'Коннор В., Лотспайх Ф., Бетц Х. (2 октября 1995 г.). «Клостридиальные нейротоксины нарушают стабильность низкоэнергетического комплекса SNARE, опосредующего активацию NSF слияния синаптических пузырьков». Журнал ЭМБО . 14 (19): 4705–13. doi :10.1002/j.1460-2075.1995.tb00152.x. ПМЦ 394567 . ПМИД  7588600. 
  46. ^ Ши Л., Кюммель Д., Коулман Дж., Мелия Т.Дж., Жиродо К.Г. (ноябрь 2011 г.). «Двойная роль Munc18-1 основана на различных способах связывания центральной полости с комплексом Stx1A и SNARE». Молекулярная биология клетки . 22 (21): 4150–60. doi : 10.1091/mbc.e11-02-0150. ПМК 3204075 . ПМИД  21900493. 
  47. ^ аб Рамакришнан Н.А., Дрешер М.Дж., Дрешер Д.Г. (май 2012 г.). «Комплекс SNARE в нейрональных и сенсорных клетках». Молекулярная и клеточная нейронауки . 50 (1): 58–69. дои : 10.1016/j.mcn.2012.03.009. ПМК 3570063 . ПМИД  22498053. 
  48. ^ аб Моро К., Равикумар Б., Ренна М., Пури С., Рубинштейн, округ Колумбия (июль 2011 г.). «Созревание предшественников аутофагосом требует гомотипического слияния». Клетка . 146 (2): 303–317. дои : 10.1016/j.cell.2011.06.023. ПМК 3171170 . ПМИД  21784250. 
  49. ^ Равикумар Б., Моро К., Ярайсс Л., Пури С., Рубинштейн, округ Колумбия (август 2010 г.). «Плазматическая мембрана способствует образованию преаутофагосомных структур». Природная клеточная биология . 12 (8): 747–57. дои : 10.1038/ncb2078. ПМК 2923063 . ПМИД  20639872. 
  50. ^ Абелиович Х., Дарсов Т., Эмр С.Д. (ноябрь 1999 г.). «Перенос аминопептидазы I из цитоплазмы в вакуоли требует комплекса t-SNARE-Sec1p, состоящего из Tlg2p и Vps45p». Журнал ЭМБО . 18 (21): 6005–16. дои : 10.1093/emboj/18.21.6005. ПМЦ 1171666 . ПМИД  10545112. 
  51. ^ Аб Наир У, Джотвани А, Гэн Дж, Гаммо Н, Ричерсон Д, Йен ВЛ и др. (июль 2011 г.). «Белки SNARE необходимы для макроаутофагии». Клетка . 146 (2): 290–302. дои : 10.1016/j.cell.2011.06.022. ПМК 3143362 . ПМИД  21784249. 
  52. ^ Фральди А., Аннунциата Ф., Ломбарди А., Кайзер Х.Дж., Медина Д.Л., Спампанато С., Феделе А.О., Полищук Р., Соррентино Н.С., Симонс К., Баллабио А. (24 сентября 2010 г.). «Слияние лизосом и функция SNARE нарушаются из-за накопления холестерина при лизосомальных нарушениях накопления». Журнал ЭМБО . 29 (21): 3607–3620. дои : 10.1038/emboj.2010.237. ПМЦ 2982760 . ПМИД  20871593. 
  53. ^ аб Итакура Э, Киши-Итакура С, Мизушима Н (декабрь 2012 г.). «Синтаксин SNARE 17, закрепленный на хвосте шпильки, нацелен на аутофагосомы для слияния с эндосомами / лизосомами». Клетка . 151 (6): 1256–1269. дои : 10.1016/j.cell.2012.11.001 . ПМИД  23217709.

Внешние ссылки