stringtranslate.com

Полный анализ крови

Общий анализ крови ( ОАК ), также известный как общий анализ крови ( ОАК ), представляет собой набор медицинских лабораторных исследований, которые предоставляют информацию о клетках в крови человека . Общий анализ крови показывает количество лейкоцитов , эритроцитов и тромбоцитов , концентрацию гемоглобина и гематокрит (объемный процент эритроцитов). Также сообщаются индексы эритроцитов , которые указывают средний размер и содержание гемоглобина в эритроцитах, а также может быть включен дифференциал лейкоцитов , который подсчитывает различные типы лейкоцитов.

ОАК часто проводится в рамках медицинского обследования и может использоваться для мониторинга здоровья или диагностики заболеваний. Результаты интерпретируются путем сравнения их с референтными диапазонами , которые варьируются в зависимости от пола и возраста. Такие состояния, как анемия и тромбоцитопения , определяются аномальными результатами общего анализа крови. Показатели эритроцитов могут предоставить информацию о причине анемии человека, такой как дефицит железа и дефицит витамина B12 , а результаты дифференциального анализа лейкоцитов могут помочь диагностировать вирусные , бактериальные и паразитарные инфекции и заболевания крови, такие как лейкемия . Не все результаты, выходящие за пределы референтного диапазона, требуют медицинского вмешательства.

Общий анализ крови обычно выполняется автоматическим гематологическим анализатором , который подсчитывает клетки и собирает информацию об их размере и структуре. Измеряют концентрацию гемоглобина и рассчитывают индексы эритроцитов на основе измерений эритроцитов и гемоглобина. Ручные тесты можно использовать для независимого подтверждения аномальных результатов. Примерно 10–25% образцов требуют ручного анализа мазков крови [5] , при котором кровь окрашивают и просматривают под микроскопом , чтобы убедиться, что результаты анализатора соответствуют внешнему виду клеток, и выявить аномалии. Гематокрит можно определить вручную путем центрифугирования образца и измерения доли эритроцитов, а в лабораториях, где нет доступа к автоматизированным приборам, подсчет клеток крови проводят под микроскопом с помощью гемоцитометра .

В 1852 году Карл Вьерордт опубликовал первую процедуру анализа крови, которая заключалась в нанесении известного объема крови на предметное стекло микроскопа и подсчете каждой клетки. Изобретение Луи-Шарлем Малассе в 1874 году гемоцитометра упростило микроскопический анализ клеток крови, а в конце 19 века Пауль Эрлих и Дмитрий Леонидович Романовский разработали методы окрашивания лейкоцитов и эритроцитов, которые до сих пор используются для исследования мазков крови. . Автоматизированные методы измерения гемоглобина были разработаны в 1920-х годах, а Максвелл Винтроб в 1929 году представил метод гематокрита Винтроба, который, в свою очередь, позволил ему определять показатели эритроцитов. Вехой в автоматизации подсчета клеток крови стал принцип Коултера , запатентованный Уоллесом Х. Коултером в 1953 году. Принцип Коултера использует измерения электрического импеданса для подсчета клеток крови и определения их размеров; эта технология до сих пор используется во многих автоматических анализаторах. Дальнейшие исследования 1970-х годов включали использование оптических измерений для подсчета и идентификации клеток, что позволило автоматизировать дифференциальный анализ лейкоцитов.

Цель

См. подпись.
Клетки и тромбоциты в крови человека . Красные кровяные тельца , которые переносят кислород, преобладают и определяют цвет крови. Лейкоциты являются частью иммунной системы . Тромбоциты необходимы для образования сгустков , которые предотвращают чрезмерное кровотечение.

Кровь состоит из жидкой части, называемой плазмой , и клеточной части, содержащей эритроциты , лейкоциты и тромбоциты . [примечание 1] [7] Общий анализ крови оценивает три клеточных компонента крови. Некоторые заболевания, такие как анемия или тромбоцитопения , характеризуются заметным увеличением или уменьшением количества клеток крови. [8] Изменения во многих системах органов могут повлиять на кровь, поэтому результаты общего анализа крови полезны для исследования широкого спектра состояний. Из-за объема информации, который он предоставляет, общий анализ крови является одним из наиболее часто выполняемых медицинских лабораторных исследований. [9] [10] [11]

ОАК часто используется для выявления заболеваний в рамках медицинского обследования. [12] Это также требуется, когда медицинский работник подозревает, что у человека есть заболевание, поражающее клетки крови, например, инфекция , нарушение свертываемости крови или некоторые виды рака . Людям, у которых были диагностированы расстройства, которые могут вызвать аномальные результаты общего анализа крови, или которые получают лечение, которое может повлиять на количество клеток крови, может проводиться регулярный общий анализ крови для мониторинга их здоровья [4] [12] , и тест часто проводится каждый день люди, находящиеся в больнице. [13] Результаты могут указывать на необходимость переливания крови или тромбоцитов . [14]

Общий анализ крови имеет конкретные применения во многих медицинских специальностях . Его часто проводят перед операцией, чтобы выявить анемию, убедиться в достаточном уровне тромбоцитов и провести скрининг на инфекции [15] [16] , а также после операции, чтобы можно было контролировать кровопотерю . [12] [17] В неотложной медицине общий анализ крови используется для исследования многочисленных симптомов, таких как лихорадка , боль в животе и одышка , [18] [19] [20] , а также для оценки кровотечения и травмы . [21] [22] У людей, проходящих химиотерапию или лучевую терапию по поводу рака, тщательно контролируются показатели крови , поскольку эти методы лечения подавляют выработку клеток крови в костном мозге и могут привести к очень низкому уровню лейкоцитов, тромбоцитов и гемоглобина . [23] Регулярные анализы крови необходимы людям, принимающим некоторые психиатрические препараты , такие как клозапин и карбамазепин , которые в редких случаях могут вызвать опасное для жизни падение количества лейкоцитов ( агранулоцитоз ). [24] [25] Поскольку анемия во время беременности может привести к ухудшению исходов для матери и ее ребенка, общий анализ крови является обычной частью дородового ухода ; [26] и у новорожденных детей общий анализ крови может потребоваться для выявления желтухи или для подсчета количества незрелых клеток в дифференциале лейкоцитов , что может быть индикатором сепсиса . [27] [28]

Общий анализ крови является важным инструментом гематологии , которая занимается изучением причин, прогноза, лечения и профилактики заболеваний, связанных с кровью. [29] Результаты общего анализа крови и мазка отражают функционирование кроветворной системы — органов и тканей , участвующих в производстве и развитии клеток крови, в частности костного мозга . [9] [30] Например, низкое количество всех трех типов клеток ( панцитопения ) может указывать на то, что на выработку клеток крови влияет заболевание костного мозга, а исследование костного мозга может дополнительно выяснить причину. [31] Аномальные клетки в мазке крови могут указывать на острый лейкоз или лимфому , [30] в то время как аномально высокое количество нейтрофилов или лимфоцитов в сочетании с характерными симптомами и результатами мазка крови может вызвать подозрение на миелопролиферативное или лимфопролиферативное заболевание . Исследование результатов общего анализа крови и мазка крови может помочь различить причины анемии, такие как дефицит питательных веществ , заболевания костного мозга , приобретенные гемолитические анемии и наследственные заболевания, такие как серповидноклеточная анемия и талассемия . [32] [33]

Референтные диапазоны общего анализа крови представляют собой диапазон результатов, обнаруженных у 95% практически здоровых людей. [примечание 2] [35] По определению, 5% результатов всегда будут выходить за пределы этого диапазона, поэтому некоторые аномальные результаты могут отражать естественные отклонения, а не указывать на медицинскую проблему. [36] Это особенно вероятно, если такие результаты лишь незначительно выходят за пределы референсного диапазона, если они согласуются с предыдущими результатами или если нет других связанных отклонений, выявленных общим анализом крови. [37] Когда тест проводится на относительно здоровой популяции, количество клинически незначимых отклонений может превышать количество результатов, свидетельствующих о заболевании. [38] По этой причине профессиональные организации в США, Великобритании и Канаде не рекомендуют проводить предоперационный анализ крови при операциях низкого риска у лиц без соответствующих заболеваний. [15] [39] [40] Повторные заборы крови для гематологических исследований у госпитализированных пациентов могут способствовать развитию внутрибольничной анемии и могут привести к ненужным переливаниям крови. [38]

Процедура

Общий анализ крови, выполненный методом из пальца , с использованием автоматического анализатора Abbott Cell-Dyn 1700.

Образец собирается путем забора крови в пробирку, содержащую антикоагулянт (обычно ЭДТА) , чтобы остановить ее естественное свертывание . [41] Кровь обычно берут из вены , но если это затруднительно, ее можно взять из капилляров с помощью пальца или укола в пятку у младенцев. [42] [43] Тестирование обычно проводится на автоматическом анализаторе, но для выявления аномальных результатов можно использовать ручные методы, такие как исследование мазка крови или ручной тест на гематокрит. [44] Подсчет клеток и измерение уровня гемоглобина проводятся вручную в лабораториях, не имеющих доступа к автоматизированным приборам. [45]

Автоматизированный

На борту анализатора образец перемешивается для равномерного распределения клеток, затем разбавляется и разделяется как минимум на два канала, один из которых используется для подсчета эритроцитов и тромбоцитов, другой — для подсчета лейкоцитов и определения концентрации гемоглобина. . Некоторые приборы измеряют гемоглобин в отдельном канале, а дополнительные каналы могут использоваться для дифференциального подсчета лейкоцитов, подсчета ретикулоцитов и специализированных измерений тромбоцитов. [46] [47] [48] Клетки суспендируют в потоке жидкости, и их свойства измеряются по мере прохождения мимо датчиков с помощью метода, известного как проточная цитометрия . [примечание 3] [49] [52] Гидродинамическое фокусирование можно использовать для выделения отдельных клеток и получения более точных результатов: разбавленный образец впрыскивается в поток жидкости под низким давлением, что заставляет клетки в образце выстроиться в одну гуську через ламинарный поток . [53] [54]

Образцы анализа крови в стойке в ожидании анализа на настольном анализаторе.
Автоматический гематологический анализатор Sysmex XT-4000i
Схема принципа Коултера. Частица, взвешенная в проводящей среде, проходит через отверстие, вызывая увеличение импеданса.
Принцип Коултера: падение переходного тока пропорционально объему частицы.

Для измерения концентрации гемоглобина к образцу добавляется химический реагент , который разрушает ( лизирует ) эритроциты в канале, отдельном от того, который используется для подсчета эритроцитов. На анализаторах, которые выполняют подсчет лейкоцитов в том же канале, что и измерение гемоглобина, это упрощает подсчет лейкоцитов. [55] Гематологические анализаторы измеряют гемоглобин с помощью спектрофотометрии и основаны на линейной зависимости между поглощением света и количеством присутствующего гемоглобина. Химические вещества используются для преобразования различных форм гемоглобина, таких как оксигемоглобин и карбоксигемоглобин , в одну стабильную форму, обычно цианметгемоглобин , и для создания постоянного изменения цвета. Поглощение полученного цвета при измерении на определенной длине волны — обычно 540 нанометров — соответствует концентрации гемоглобина. [56] [57]

Датчики подсчитывают и идентифицируют клетки в образце, используя два основных принципа: электрический импеданс и светорассеяние . [58] Подсчет клеток на основе импеданса работает по принципу Коултера : клетки подвешиваются в жидкости, несущей электрический ток , и, проходя через небольшое отверстие (отверстие), они вызывают уменьшение тока из-за своей плохой электропроводности . Амплитуда импульса напряжения , генерируемого при пересечении клеткой апертуры, коррелирует с количеством жидкости, вытесненной клеткой, и, следовательно, с объемом клетки [ 59] [60] , в то время как общее количество импульсов коррелирует с количеством клеток в ячейке. образец. Распределение объемов клеток отображается на гистограмме , и, установив пороговые значения объема на основе типичных размеров каждого типа клеток, можно идентифицировать и подсчитать различные популяции клеток. [61]

В методах светорассеяния свет лазера или вольфрамо -галогенной лампы направляется на поток клеток для сбора информации об их размере и структуре. Клетки рассеивают свет под разными углами, когда они проходят через луч, который обнаруживается с помощью фотометров . [62] Рассеяние вперед, которое относится к количеству света, рассеянного вдоль оси луча, в основном вызвано дифракцией света и коррелирует с размером клетки, тогда как боковое рассеяние (свет, рассеянный под углом 90 градусов) вызвано отражением и рефракции и предоставляет информацию о клеточной сложности. [62] [63]

Радиочастотные методы могут использоваться в сочетании с импедансным методом. Эти методы работают по тому же принципу измерения прерывания тока, когда клетки проходят через апертуру, но поскольку высокочастотный радиочастотный ток проникает в клетки, амплитуда результирующего импульса зависит от таких факторов, как относительный размер ядра , строение ядра и количество гранул в цитоплазме . [64] [65] Маленькие эритроциты и клеточный мусор, которые по размеру схожи с тромбоцитами, могут мешать подсчету тромбоцитов, а большие тромбоциты могут быть подсчитаны неточно, поэтому некоторые анализаторы используют дополнительные методы измерения тромбоцитов, такие как флуоресцентный анализ . окрашивание, многоугольное рассеяние света и мечение моноклональных антител . [48]

Большинство анализаторов напрямую измеряют средний размер эритроцитов, который называется средним объемом клетки (MCV), и рассчитывают гематокрит путем умножения количества эритроцитов на MCV. Некоторые измеряют гематокрит, сравнивая общий объем эритроцитов с объемом взятой пробы крови, и получают MCV на основе гематокрита и количества эритроцитов. [66] Концентрация гемоглобина, количество эритроцитов и гематокрит используются для расчета среднего количества гемоглобина в каждом эритроците, среднего корпускулярного гемоглобина (MCH); и его концентрация - средняя концентрация эритроцитного гемоглобина (MCHC). [67] Другой расчет, ширина распределения эритроцитов (RDW), выводится из стандартного отклонения среднего объема клеток и отражает изменение размера клеток. [68]

Диаграмма рассеяния, показывающая множество кластеров разного цвета, помеченных типом лейкоцитов, которым они соответствуют.
Пример дифференциальной диаграммы рассеяния лейкоцитов: кластеры разного цвета указывают на разные популяции клеток.

После обработки реагентами лейкоциты образуют три отчетливых пика, когда их объемы наносятся на гистограмму. Эти пики примерно соответствуют популяциям гранулоцитов , лимфоцитов и других мононуклеарных клеток , что позволяет провести трехчастную дифференциацию на основе только объема клеток. [69] [70] Более продвинутые анализаторы используют дополнительные методы для получения дифференциала от пяти до семи частей, такие как светорассеяние или радиочастотный анализ, [70] или использование красителей для окрашивания определенных химических веществ внутри клеток, например, нуклеиновых кислот . которые обнаруживаются в более высоких концентрациях в незрелых клетках [71] или миелопероксидаза , фермент , обнаруженный в клетках миелоидного ряда . [72] [73] Базофилы можно подсчитывать в отдельном канале, где реагент разрушает другие лейкоциты и оставляет базофилы нетронутыми. Данные, собранные в результате этих измерений, анализируются и наносятся на диаграмму рассеяния , где они образуют кластеры, которые коррелируют с каждым типом лейкоцитов. [70] [72] Другим подходом к автоматизации дифференциального подсчета является использование программного обеспечения для цифровой микроскопии, [74] которое использует искусственный интеллект для классификации лейкоцитов по микрофотографиям мазка крови. Изображения ячеек отображаются оператору-человеку, который при необходимости может вручную переклассифицировать клетки. [75]

Большинству анализаторов требуется меньше минуты, чтобы выполнить все анализы по общему анализу крови. [58] Поскольку анализаторы отбирают и подсчитывают множество отдельных клеток, результаты очень точны. [76] Однако некоторые аномальные клетки могут быть идентифицированы неправильно, что требует ручного просмотра результатов прибора и идентификации другими способами аномальных клеток, которые прибор не смог классифицировать. [5] [77]

Тестирование на месте оказания медицинской помощи

Тестирование на месте оказания медицинской помощи — это тесты, проводимые за пределами лаборатории, например, у постели больного или в клинике. [78] [79] Этот метод тестирования быстрее и использует меньше крови, чем традиционные методы, и не требует специально обученного персонала, поэтому он полезен в чрезвычайных ситуациях и в районах с ограниченным доступом к ресурсам. Обычно используемые устройства для гематологического тестирования на месте оказания медицинской помощи включают HemoCue , портативный анализатор, который использует спектрофотометрию для измерения концентрации гемоглобина в образце, и i-STAT , который получает показания гемоглобина путем оценки концентрации эритроцитов из проводимость крови. [79] Гемоглобин и гематокрит можно измерить с помощью устройств, предназначенных для тестирования газов крови , но эти измерения иногда плохо коррелируют с результатами, полученными стандартными методами. [78] Существуют упрощенные версии гематологических анализаторов, предназначенные для использования в клиниках, которые могут обеспечить общий анализ крови и дифференциальный анализ. [80]

Руководство

Схема ручного теста гематокрита, показывающая долю эритроцитов, измеренную как 0,46.
Ручное определение гематокрита. Кровь центрифугировали, разделяя ее на эритроциты и плазму.

Тесты можно проводить вручную, когда автоматизированное оборудование недоступно или когда результаты анализатора указывают на необходимость дальнейшего исследования. [45] Автоматизированные результаты помечаются для ручного анализа мазков крови в 10–25% случаев, что может быть связано с аномальными популяциями клеток, которые анализатор не может правильно подсчитать. [5] Внутренние флаги, генерируемые анализатором, которые предполагают, что результаты могут быть неточные [81] или численные результаты, выходящие за установленные пороговые значения. [77] Для исследования этих проблем кровь наносят на предметное стекло микроскопа, окрашивают пятном Романовского и исследуют под микроскопом . [82] Оценивается внешний вид красных и белых кровяных телец и тромбоцитов, и при их наличии сообщается о качественных отклонениях. [83] Изменения внешнего вида эритроцитов могут иметь значительное диагностическое значение — например, наличие серповидноклеточных клеток указывает на серповидноклеточную анемию , а большое количество фрагментированных эритроцитов ( шистоцитов ) требует срочного исследования, поскольку может предполагают микроангиопатическую гемолитическую анемию . [84] При некоторых воспалительных состояниях и парапротеиновых заболеваниях, таких как множественная миелома , высокий уровень белка в крови может привести к тому, что эритроциты будут выглядеть слипшимися в мазке, что называется «руло» . [85] Некоторые паразитарные заболевания , такие как малярия и бабезиоз , можно обнаружить путем обнаружения возбудителей в мазке крови, [86] а количество тромбоцитов можно оценить по мазку крови, что полезно, если автоматический подсчет тромбоцитов неточный. [77]

Чтобы провести дифференциальный анализ лейкоцитов вручную, микроскопист подсчитывает 100 клеток в мазке крови и классифицирует их по внешнему виду; иногда подсчитывают 200 клеток. [87] Это дает процентное содержание каждого типа лейкоцитов, и умножая эти проценты на общее количество лейкоцитов, можно получить абсолютное количество каждого типа лейкоцитов. [88] Ручной подсчет подвержен ошибкам выборки , поскольку подсчитывается так мало клеток по сравнению с автоматическим анализом, [76] но он может идентифицировать аномальные клетки, которые не могут анализаторы, [72] [77] например, бластные клетки, наблюдаемые при остром лейкозе. [89] Клинически значимые признаки, такие как токсическая грануляция и вакуолизация , также могут быть установлены при микроскопическом исследовании лейкоцитов. [90]

Гематокрит можно определить вручную, наполнив капилляр кровью, центрифугировав ее и измерив процент крови, состоящей из эритроцитов. [66] Это полезно в некоторых состояниях, которые могут привести к тому, что автоматические результаты гематокрита будут неверными, например, при полицитемии (высокое повышение количества эритроцитов) [66] или тяжелом лейкоцитозе (высокое повышение количества лейкоцитов, которое мешает измерения клеток крови, заставляя лейкоциты считаться эритроцитами). [91]

Слева: модифицированный гемоцитометр Фукса-Розенталя . Справа: вид через микроскоп гемоцитометра. Встроенная сетка помогает отслеживать, какие ячейки были подсчитаны.

Красные и белые кровяные тельца и тромбоциты можно подсчитать с помощью гемоцитометра — предметного стекла микроскопа, содержащего камеру, содержащую определенный объем разбавленной крови. В камере гемоцитометра выгравирована калиброванная сетка для облегчения подсчета клеток. Клетки, видимые в сетке, подсчитываются и делятся на объем исследуемой крови, который определяется по количеству квадратов, подсчитанных в сетке, для получения концентрации клеток в образце. [45] [92] Ручной подсчет клеток является трудоемким и неточным по сравнению с автоматизированными методами, поэтому он используется редко, за исключением лабораторий, которые не имеют доступа к автоматическим анализаторам. [45] [92] Для подсчета лейкоцитов образец разбавляют жидкостью, содержащей соединения, лизирующие эритроциты, такие как оксалат аммония , уксусная кислота или соляная кислота . [93] Иногда к разбавителю добавляют краситель, который выделяет ядра лейкоцитов, что облегчает их идентификацию. Ручной подсчет тромбоцитов проводится аналогичным образом, хотя некоторые методы оставляют эритроциты нетронутыми. Использование фазово-контрастного микроскопа вместо светового микроскопа может облегчить идентификацию тромбоцитов. [94] Ручной подсчет эритроцитов проводится редко, поскольку он неточен, и для оценки эритроцитов доступны другие методы, такие как гемоглобинометрия и ручной гематокрит; но если это необходимо, эритроциты можно подсчитать в крови, разведенной физиологическим раствором. [95]

Гемоглобин можно измерить вручную с помощью спектрофотометра или колориметра . При ручном измерении гемоглобина образец разбавляют реагентами, которые разрушают эритроциты и высвобождают гемоглобин. Другие химические вещества используются для преобразования различных типов гемоглобина в одну форму, что позволяет легко измерить его. Затем раствор помещают в измерительную кювету и измеряют поглощение при определенной длине волны, которая зависит от типа используемого реагента. Эталонный стандарт, содержащий известное количество гемоглобина, используется для определения взаимосвязи между оптической плотностью и концентрацией гемоглобина, что позволяет измерить уровень гемоглобина в образце. [96]

В сельских и экономически неблагополучных районах доступность тестирования ограничена доступом к оборудованию и персоналу. В учреждениях первичной медико-санитарной помощи в этих регионах тестирование может быть ограничено исследованием морфологии эритроцитов и ручным измерением гемоглобина, в то время как более сложные методы, такие как ручной подсчет клеток и дифференциация, а иногда и автоматический подсчет клеток, выполняются в районных лабораториях. Региональные и провинциальные больницы и академические центры обычно имеют доступ к автоматическим анализаторам. При отсутствии лабораторного оборудования оценку концентрации гемоглобина можно получить, поместив каплю крови на впитывающую бумагу стандартного типа и сравнив ее с цветовой шкалой. [97]

Контроль качества

Автоматизированные анализаторы необходимо регулярно калибровать . Большинство производителей предоставляют консервированную кровь с определенными параметрами, и анализаторы настраиваются, если результаты выходят за установленные пороговые значения. [98] Чтобы гарантировать точность результатов, образцы для контроля качества, которые обычно предоставляются производителем прибора, проверяются не реже одного раза в день. Образцы составляются для получения конкретных результатов, и лаборатории сравнивают их результаты с известными значениями, чтобы убедиться в правильной работе прибора. [99] [100] Для лабораторий, не имеющих доступа к коммерческим материалам для контроля качества, индийская регулирующая организация рекомендует анализировать образцы пациентов в двух экземплярах и сравнивать результаты. [101] Измерение скользящего среднего , при котором средние результаты для образцов пациентов измеряются через заданные интервалы времени, может использоваться в качестве дополнительного метода контроля качества. Если предположить, что характеристики популяции пациентов со временем остаются примерно одинаковыми, среднее значение должно оставаться постоянным; большие сдвиги среднего значения могут указывать на проблемы с прибором. [99] [100] Значения MCHC особенно полезны в этом отношении. [102]

Помимо анализа проб внутреннего контроля качества с известными результатами, лаборатории могут получать образцы внешней оценки качества от регулирующих организаций. В то время как целью внутреннего контроля качества является обеспечение воспроизводимости результатов анализатора в пределах конкретной лаборатории, внешняя оценка качества проверяет, что результаты различных лабораторий соответствуют друг другу и целевым значениям. [103] Ожидаемые результаты для образцов внешней оценки качества не разглашаются лаборатории. [104] Программы внешней оценки качества получили широкое распространение в Северной Америке и Западной Европе, [99] и лабораториям часто требуется участвовать в этих программах для поддержания аккредитации . [105] Проблемы с логистикой могут затруднить внедрение схем внешней оценки качества лабораториями в регионах с ограниченными ресурсами. [106]

Включенные тесты

Общий анализ крови измеряет количество тромбоцитов, эритроцитов и лейкоцитов, а также значения гемоглобина и гематокрита. Индексы эритроцитов — MCV, MCH и MCHC, которые описывают размер эритроцитов и содержание в них гемоглобина, сообщаются вместе с шириной распределения эритроцитов (RDW), которая измеряет степень изменения размеров эритроцитов. клетки. Может быть проведен дифференциальный анализ лейкоцитов, который подсчитывает различные типы лейкоцитов, а также иногда включается подсчет незрелых эритроцитов (ретикулоцитов). [4] [107]

Эритроциты, гемоглобин и гематокрит

Пример результатов общего анализа крови, показывающий низкий уровень гемоглобина, MCV, MCH и MCHC. У человека была анемия. Причиной может быть дефицит железа или гемоглобинопатия . [108]

Эритроциты доставляют кислород из легких в ткани и по возвращении переносят углекислый газ обратно в легкие, где он выдыхается. Эти функции опосредуются гемоглобином клеток. [109] Анализатор подсчитывает эритроциты, сообщая результат в единицах 10 6 клеток на микролитр крови (× 10 6 /мкл) или 10 12 клеток на литр (× 10 12 /л), и измеряет их средний размер, который называется средним объемом клетки и выражается в фемтолитрах или кубических микрометрах. [4] Умножая средний объем клеток на количество эритроцитов, можно получить гематокрит (HCT) или объем упакованных клеток (PCV), показатель процентного содержания эритроцитов в крови; [66] и когда гематокрит определяется напрямую, средний объем клеток можно рассчитать на основе гематокрита и количества эритроцитов. [110] [111] Гемоглобин, измеряемый после лизиса эритроцитов, обычно измеряется в граммах на литр (г/л) или граммах на децилитр (г/дл). [112] Если предположить, что эритроциты в норме, существует постоянная связь между гемоглобином и гематокритом: процент гематокрита примерно в три раза превышает значение гемоглобина в г/дл, плюс-минус три. Это соотношение, называемое правилом трех , можно использовать для подтверждения правильности результатов анализа крови. [113]

Два других показателя рассчитываются на основе количества эритроцитов, концентрации гемоглобина и гематокрита: среднего эритроцитного гемоглобина и средней концентрации эритроцитного гемоглобина . [114] [115] Эти параметры описывают содержание гемоглобина в каждом эритроците. MCH и MCHC могут сбивать с толку; по сути, MCH является мерой среднего количества гемоглобина на эритроцит. MCHC дает среднюю долю гемоглобина в клетке. MCH не учитывает размер эритроцитов, тогда как MCHC учитывает. [116] В совокупности MCV, MCH и MCHC называются индексами эритроцитов . [114] [115] Изменения этих показателей видны в мазке крови: аномально крупные или мелкие эритроциты можно определить по сравнению с размерами лейкоцитов, а клетки с низкой концентрацией гемоглобина кажутся бледными. [117] Другой параметр рассчитывается на основе первоначальных измерений эритроцитов: ширина распределения эритроцитов или RDW, которая отражает степень изменения размера клеток. [118]

См. подпись.
Мазок крови человека с железодефицитной анемией , демонстрирующий характерную морфологию эритроцитов. Эритроциты аномально малы ( микроцитоз ), имеют большие участки центральной бледности ( гипохромия ) и сильно различаются по размеру ( анизоцитоз ).

Аномально низкий уровень гемоглобина, гематокрита или количества эритроцитов указывает на анемию. [119] Анемия не является диагнозом сама по себе, но она указывает на основное состояние, влияющее на эритроциты человека. [88] Общие причины анемии включают кровопотерю, выработку дефектных эритроцитов (неэффективный эритропоэз ), снижение выработки эритроцитов (недостаточный эритропоэз) и повышенное разрушение эритроцитов ( гемолитическая анемия ). [120] Анемия снижает способность крови переносить кислород, вызывая такие симптомы, как усталость и одышка. [121] Если уровень гемоглобина падает ниже пороговых значений, определяемых клиническим состоянием человека, может потребоваться переливание крови. [122]

Повышенное количество эритроцитов, приводящее к повышению гемоглобина и гематокрита, [примечание 4] называется полицитемией . [126] Обезвоживание или использование диуретиков могут вызвать «относительную» полицитемию за счет уменьшения количества плазмы по сравнению с эритроцитами. Истинное увеличение количества эритроцитов, называемое абсолютной полицитемией, может произойти, когда организм вырабатывает больше эритроцитов, чтобы компенсировать хронически низкий уровень кислорода при таких заболеваниях, как заболевания легких или сердца , или когда у человека аномально высокий уровень эритропоэтина . , гормон, который стимулирует выработку эритроцитов. При истинной полицитемии костный мозг вырабатывает эритроциты и другие клетки крови с чрезмерно высокой скоростью. [127]

Оценка показателей эритроцитов помогает определить причину анемии. Если MCV низкий, анемия называется микроцитарной , а анемия с высоким MCV называется макроцитарной анемией . Анемия с низким уровнем MCHC называется гипохромной анемией . Если имеется анемия, но показатели эритроцитов в норме, анемию считают нормохромной и нормоцитарной . [117] Термин «гиперхромия» , относящийся к высокому уровню MCHC, обычно не используется. Повышение MCHC выше верхнего эталонного значения встречается редко, в основном происходит при таких состояниях, как сфероцитоз , серповидно-клеточная анемия и болезнь гемоглобина С. [115] [128] Повышенный уровень MCHC также может быть ложным результатом таких состояний, как агглютинация эритроцитов (которая вызывает ложное снижение количества эритроцитов, повышая MCHC) [129] [130] или сильно повышенное количество липиды в крови (что вызывает ложное повышение результата гемоглобина). [128] [131]

Микроцитарная анемия обычно связана с дефицитом железа, талассемией и анемией хронических заболеваний , тогда как макроцитарная анемия связана с алкоголизмом , дефицитом фолиевой кислоты и B12 , употреблением некоторых лекарств и некоторыми заболеваниями костного мозга. Острая кровопотеря, гемолитическая анемия, нарушения костного мозга и различные хронические заболевания могут привести к развитию анемии с нормоцитарной картиной крови. [115] [132] MCV служит дополнительной цели в лабораторном контроле качества. Он относительно стабилен во времени по сравнению с другими параметрами общего анализа крови, поэтому большое изменение MCV может указывать на то, что образец был взят не у того пациента. [133]

Низкий уровень RDW не имеет клинического значения, но повышенный RDW указывает на повышенное изменение размера эритроцитов, состояние, известное как анизоцитоз . [118] Анизоцитоз часто встречается при алиментарных анемиях, таких как железодефицитная анемия и анемия, вызванная дефицитом витамина B12 или фолиевой кислоты, в то время как люди с талассемией могут иметь нормальный RDW. [118] На основании результатов общего анализа крови можно предпринять дальнейшие шаги для исследования анемии, такие как тест на ферритин для подтверждения наличия дефицита железа или электрофорез гемоглобина для диагностики гемоглобинопатии , такой как талассемия или серповидно-клеточная анемия. [134]

белые кровяные клетки

Количество лейкоцитов и тромбоцитов заметно увеличено, имеется анемия. Дифференциальный подсчет показывает базофилию и наличие палочкоядерных нейтрофилов , незрелых гранулоцитов и бластных клеток . [135]

Лейкоциты защищают от инфекций и участвуют в воспалительной реакции . [136] Высокое количество лейкоцитов, называемое лейкоцитозом, часто возникает при инфекциях, воспалениях и состояниях физиологического стресса . Это также может быть вызвано заболеваниями, которые связаны с аномальным производством клеток крови, такими как миелопролиферативные и лимфопролиферативные заболевания . [137] Снижение количества лейкоцитов, называемое лейкопенией , может привести к повышенному риску заражения инфекциями, [138] и возникает при таких методах лечения, как химиотерапия и лучевая терапия, а также при многих состояниях, которые подавляют выработку клеток крови. [139] Сепсис связан как с лейкоцитозом, так и с лейкопенией. [140] Общее количество лейкоцитов обычно указывается в клетках на микролитр крови (/мкл) или 10 9 клеток на литр (× 10 9 /л). [4]

При дифференциальном анализе лейкоцитов идентифицируются и подсчитываются различные типы лейкоцитов. Результаты сообщаются в процентах и ​​как абсолютное число на единицу объема. Обычно измеряют пять типов лейкоцитов — нейтрофилы , лимфоциты , моноциты , эозинофилы и базофилы . [141] Некоторые инструменты сообщают о количестве незрелых гранулоцитов, которые представляют собой классификацию, состоящую из предшественников нейтрофилов; в частности, промиелоциты , миелоциты и метамиелоциты . [примечание 5] [144] Другие типы ячеек сообщаются, если они идентифицированы в ручном дифференциале. [145]

Дифференциальные результаты полезны при диагностике и мониторинге многих заболеваний. Например, повышенное количество нейтрофилов ( нейтрофилия ) связано с бактериальной инфекцией, воспалением и миелопролиферативными заболеваниями [146 , 147] , в то время как пониженное количество нейтрофилов ( нейтропения ) может наблюдаться у лиц, проходящих химиотерапию или принимающих определенные лекарства, или у тех, кто есть заболевания, поражающие костный мозг. [148] [149] Нейтропения также может быть вызвана некоторыми врожденными нарушениями и может возникать временно после вирусных или бактериальных инфекций у детей. [150] Людей с тяжелой нейтропенией и клиническими признаками инфекции лечат антибиотиками для предотвращения потенциально опасного для жизни заболевания. [151]

См. подпись.
Мазок крови человека с хроническим миелолейкозом : видно много незрелых и аномальных лейкоцитов.

Увеличение количества палочкоядерных нейтрофилов (молодых нейтрофилов, лишенных сегментированных ядер) или незрелых гранулоцитов называется сдвигом влево и возникает при сепсисе и некоторых заболеваниях крови, но является нормальным явлением при беременности. [152] [153] Повышенное количество лимфоцитов ( лимфоцитоз ) связано с вирусной инфекцией [6] и лимфопролиферативными заболеваниями, такими как хронический лимфоцитарный лейкоз ; [154] повышенное количество моноцитов ( моноцитоз ) связано с хроническими воспалительными состояниями; [155] , а количество эозинофилов часто увеличивается ( эозинофилия ) при паразитарных инфекциях и аллергических состояниях. [156] Повышенное количество базофилов, называемое базофилией , может возникать при миелопролиферативных заболеваниях, таких как хронический миелолейкоз и истинная полицитемия. [147] Наличие некоторых типов аномальных клеток, таких как бластные клетки или лимфоциты с неопластическими признаками, указывает на гематологическое злокачественное новообразование . [89] [157]

Тромбоциты

См. подпись.
Мазок крови при эссенциальной тромбоцитемии . Тромбоциты видны как небольшие фиолетовые структуры.

Тромбоциты играют важную роль в свертывании крови. Когда стенка кровеносного сосуда повреждена, тромбоциты прилипают к открытой поверхности в месте повреждения и закупоривают разрыв. Одновременная активация каскада коагуляции приводит к образованию фибрина , который укрепляет пробку тромбоцитов, образуя стабильный сгусток . [158] Низкое количество тромбоцитов, известное как тромбоцитопения, в тяжелых случаях может вызвать кровотечение. [159] Это может произойти у людей, которые проходят лечение, подавляющее костный мозг, такое как химиотерапия или лучевая терапия, или принимают определенные лекарства, такие как гепарин, которые могут заставить иммунную систему разрушать тромбоциты. Тромбоцитопения является признаком многих заболеваний крови, таких как острый лейкоз и апластическая анемия , а также некоторых аутоиммунных заболеваний . [160] [161] Если количество тромбоцитов чрезвычайно низкое, может быть проведено переливание тромбоцитов. [162] Тромбоцитоз , то есть высокое количество тромбоцитов, может возникать при воспалении или травме, [163] , а также при дефиците железа, [164] и количество тромбоцитов может достигать исключительно высоких уровней у людей с эссенциальной тромбоцитемией , редким заболеванием. болезнь крови. [163] Количество тромбоцитов может быть указано в единицах клеток на микролитр крови (/мкл), [165] 10 3 клеток на микролитр (× 10 3 /мкл) или 10 9 клеток на литр (× 10 9 /л) ). [4]

Средний объем тромбоцитов (MPV) измеряет средний размер тромбоцитов в фемтолитрах. Это может помочь определить причину тромбоцитопении; Повышенное MPV может возникнуть, когда молодые тромбоциты высвобождаются в кровоток для компенсации повышенного разрушения тромбоцитов, тогда как снижение производства тромбоцитов из-за дисфункции костного мозга может привести к низкому MPV. MPV также полезен для дифференциации врожденных заболеваний, вызывающих тромбоцитопению. [118] [166] Некоторые анализаторы сообщают о фракции незрелых тромбоцитов (IPF) или количестве сетчатых тромбоцитов и предоставляют информацию о скорости производства тромбоцитов путем измерения количества незрелых тромбоцитов в крови. [167]

Другие тесты

Количество ретикулоцитов

Микроскопическое изображение эритроцитов, окрашенных в синий цвет.
Эритроциты, окрашенные новым метиленовым синим : клетки, содержащие темно-синие структуры, представляют собой ретикулоциты.

Ретикулоциты — это незрелые эритроциты, которые, в отличие от зрелых клеток, содержат РНК . Подсчет ретикулоцитов иногда проводится в рамках общего анализа крови, обычно для выяснения причины анемии человека или оценки его реакции на лечение. Анемия с высоким количеством ретикулоцитов может указывать на то, что костный мозг вырабатывает эритроциты с более высокой скоростью, чтобы компенсировать кровопотерю или гемолиз, [74] , в то время как анемия с низким количеством ретикулоцитов может указывать на то, что у человека есть состояние, которое снижает способность организма вырабатывать эритроциты. [168] Когда людям с пищевой анемией назначают питательные добавки, увеличение количества ретикулоцитов указывает на то, что их организм реагирует на лечение, производя больше эритроцитов. [169] Гематологические анализаторы выполняют подсчет ретикулоцитов, окрашивая эритроциты красителем, который связывается с РНК, и измеряя количество ретикулоцитов с помощью светорассеяния или флуоресцентного анализа. Тест можно провести вручную, окрасив кровь новым метиленовым синим и подсчитав под микроскопом процент эритроцитов, содержащих РНК. Количество ретикулоцитов выражается в абсолютном количестве [168] или в процентах эритроцитов. [170]

Некоторые приборы измеряют среднее количество гемоглобина в каждом ретикулоците; параметр, который изучался как показатель дефицита железа у людей, у которых есть состояния, мешающие стандартным тестам. [171] Фракция незрелых ретикулоцитов (IRF) — это еще одно измерение, производимое некоторыми анализаторами, которое количественно определяет зрелость ретикулоцитов: менее зрелые клетки содержат больше РНК и, таким образом, производят более сильный флуоресцентный сигнал. Эта информация может быть полезна при диагностике анемии и оценке выработки эритроцитов после лечения анемии или трансплантации костного мозга . [172]

Ядросодержащие эритроциты

См. подпись.
Мазок крови новорожденного ребенка, показывающий несколько ядросодержащих эритроцитов.

При формировании в костном мозге, а также в печени и селезенке у плода [173] эритроциты содержат клеточное ядро, которое обычно отсутствует в зрелых клетках, циркулирующих в кровотоке. Ядерные эритроциты являются нормальными для новорожденных [174] , но их обнаружение у детей и взрослых указывает на повышенную потребность в эритроцитах, что может быть вызвано кровотечением, некоторыми видами рака и анемией. [118] Большинство анализаторов могут обнаружить эти клетки в ходе дифференциального подсчета клеток. Большое количество ядросодержащих эритроцитов может привести к ложно высокому количеству лейкоцитов, что потребует корректировки. [175]

Другие параметры

Усовершенствованные гематологические анализаторы позволяют проводить новые измерения клеток крови, которые показали диагностическую значимость в научных исследованиях, но еще не нашли широкого клинического применения. [171] Например, некоторые типы анализаторов выдают координатные показания, указывающие размер и положение каждого кластера лейкоцитов. Эти параметры (так называемые данные клеточной популяции) [176] изучались как потенциальные маркеры заболеваний крови, бактериальных инфекций и малярии. Анализаторы, использующие окрашивание миелопероксидазой для получения дифференциальных показателей, могут измерять экспрессию фермента лейкоцитами, которая изменяется при различных заболеваниях. [75] Некоторые приборы могут сообщать о проценте гипохромных эритроцитов в дополнение к сообщению среднего значения MCHC или обеспечивать количество фрагментированных эритроцитов ( шистоцитов ), [171] которые встречаются при некоторых типах гемолитической анемии. [177] Поскольку эти параметры часто специфичны для анализаторов определенных марок, лабораториям сложно интерпретировать и сравнивать результаты. [171]

Эталонные диапазоны

Полный анализ крови интерпретируется путем сравнения результатов с референтными диапазонами, которые представляют собой результаты, полученные у 95% практически здоровых людей. [35] Согласно статистическому нормальному распределению , диапазоны протестированных выборок варьируются в зависимости от пола и возраста. [179]

В среднем у взрослых женщин показатели гемоглобина, гематокрита и количества эритроцитов ниже, чем у мужчин; разница уменьшается, но все еще присутствует после менопаузы . [180] Результаты клинического анализа крови у детей и новорожденных отличаются от результатов у взрослых. Гемоглобин, гематокрит и количество эритроцитов у новорожденных чрезвычайно высоки, чтобы компенсировать низкий уровень кислорода в утробе матери и высокую долю фетального гемоглобина , который менее эффективен в доставке кислорода к тканям, чем зрелые формы гемоглобина, в их красной крови. клетки. [181] [182] MCV также увеличивается, а количество лейкоцитов повышено с преобладанием нейтрофилов. [181] [183] ​​Количество эритроцитов и связанные с ними показатели начинают снижаться вскоре после рождения, достигая самой низкой точки примерно в двухмесячном возрасте и затем увеличиваясь. [184] [185] Эритроциты у младенцев и детей старшего возраста меньше по размеру и имеют более низкий MCH, чем у взрослых. При дифференциальном анализе лейкоцитов у детей количество лимфоцитов часто превышает количество нейтрофилов, тогда как у взрослых преобладают нейтрофилы. [181]

Другие различия между популяциями могут повлиять на референтные диапазоны: например, люди, живущие на больших высотах, имеют более высокие показатели гемоглобина, гематокрита и эритроцитов, а люди африканского происхождения имеют в среднем более низкое количество лейкоцитов. [186] Тип анализатора, используемого для проведения общего анализа крови, также влияет на референтные диапазоны. Поэтому референтные диапазоны устанавливаются отдельными лабораториями на основе их собственных групп пациентов и оборудования. [187] [188]

Ограничения

Некоторые заболевания или проблемы с образцом крови могут привести к неточным результатам. Если образец имеет видимые сгустки, что может быть вызвано неправильной техникой флеботомии , он непригоден для анализа, поскольку количество тромбоцитов будет ошибочно снижено, а другие результаты могут быть аномальными. [189] [190] Образцы, хранившиеся при комнатной температуре в течение нескольких часов, могут давать ложно высокие значения MCV ( средний корпускулярный объем ), [191] поскольку эритроциты набухают, поглощая воду из плазмы; а результаты дифференциальной диагностики тромбоцитов и лейкоцитов могут быть неточными в старых образцах, поскольку клетки со временем деградируют. [91]

Микрофотография мазка крови, показывающая сгустки эритроцитов.
Агглютинация эритроцитов : в мазке крови видны сгустки эритроцитов.

Образцы, взятые у лиц с очень высоким уровнем билирубина или липидов в плазме (называемые желтушным образцом или липемическим образцом соответственно) [192] , могут показывать ложно высокие значения гемоглобина, поскольку эти вещества изменяют цвет и непрозрачность плазмы. образец, который мешает измерению гемоглобина. [193] Этот эффект можно смягчить, заменив плазму физиологическим раствором. [91]

У некоторых людей вырабатываются антитела , которые заставляют их тромбоциты образовывать комки, когда их кровь набирают в пробирки, содержащие ЭДТА, антикоагулянт, обычно используемый для сбора образцов общего анализа крови. Сгустки тромбоцитов могут быть подсчитаны автоматическими анализаторами как отдельные тромбоциты, что приводит к ошибочному уменьшению количества тромбоцитов. Этого можно избежать, используя альтернативный антикоагулянт, такой как цитрат натрия или гепарин . [194] [195]

Еще одним антитело-опосредованным заболеванием, которое может повлиять на результаты общего анализа крови, является агглютинация эритроцитов . Это явление приводит к слипанию эритроцитов из-за антител, связанных с поверхностью клетки. [196] Агрегаты эритроцитов считаются анализатором как отдельные клетки, что приводит к заметному снижению количества эритроцитов и гематокрита, а также заметному повышению MCV и MCHC ( средняя концентрация корпускулярного гемоглобина ). [53] Часто эти антитела активны только при комнатной температуре (в этом случае их называют холодными агглютининами ), и агглютинацию можно обратить вспять, нагрев образец до 37 °C (99 °F). В образцах, взятых у людей с теплой аутоиммунной гемолитической анемией, может наблюдаться агглютинация эритроцитов, которая не проходит при нагревании. [130]

Хотя клетки бласта и лимфомы можно идентифицировать с помощью ручного дифференциального теста, микроскопическое исследование не может надежно определить гемопоэтическую линию клеток . Эта информация часто необходима для диагностики рака крови. После идентификации аномальных клеток можно использовать дополнительные методы, такие как иммунофенотипирование с помощью проточной цитометрии, для идентификации маркеров , которые предоставляют дополнительную информацию о клетках. [197] [198]

История

Черный кожаный футляр с содержимым: свеча и цветные карточки.
Ранний гемоглобинометр: образцы крови сравнивались с цветовой шкалой эталонных стандартов для определения уровня гемоглобина. [199]

До внедрения автоматизированных счетчиков клеток полный анализ крови проводился вручную: подсчет лейкоцитов, эритроцитов и тромбоцитов проводился с помощью микроскопов. [200] Первым человеком, опубликовавшим микроскопические наблюдения за клетками крови, был Антони ван Левенгук , [201] который сообщил о появлении эритроцитов в письме 1674 года к Трудам Лондонского королевского общества . [202] Ян Сваммердам описал эритроциты несколькими годами ранее, но тогда не опубликовал свои открытия. На протяжении XVIII и XIX веков усовершенствования в технологии микроскопов, такие как ахроматические линзы, позволили подсчитывать лейкоциты и тромбоциты в неокрашенных образцах. [203]

Физиологу Карлу Вьерордту приписывают проведение первого анализа крови. [8] [204] [205] Его методика, опубликованная в 1852 году, заключалась в аспирации тщательно отмеренного объема крови в капиллярную трубку и нанесении ее на предметное стекло микроскопа, покрытое яичным белком . После того как кровь высохла, он пересчитал каждую клетку на предметном стекле; этот процесс может занять более трех часов. [206] Гемоцитометр, представленный в 1874 году Луи-Шарлем Малассе , упростил микроскопический подсчет клеток крови. [207] Гемоцитометр Малассе представлял собой предметное стекло, содержащее сплющенную капиллярную трубку. Разбавленную кровь вводили в капиллярную камеру с помощью резиновой трубки, прикрепленной к одному концу, а к микроскопу присоединяли окуляр со чешуйчатой ​​сеткой, позволяющий микроскописту подсчитывать количество клеток в объеме крови. В 1877 году Уильям Гауэрс изобрел гемоцитометр со встроенной счетной сеткой, что избавило от необходимости изготавливать специально калиброванные окуляры для каждого микроскопа. [208]

Черно-белый портрет Дмитрия Леонидовича Романовского.
Дмитрий Леонидович Романовский изобрел окрашивание по Романовскому.

В 1870-х годах Пауль Эрлих разработал технику окрашивания с использованием комбинации кислотного и основного красителя, которая могла различать различные типы лейкоцитов и позволяла исследовать морфологию эритроцитов. [203] Дмитрий Леонидович Романовский усовершенствовал эту технику в 1890-х годах, используя смесь эозина и выдержанного метиленового синего для получения широкого спектра оттенков, которых не было при использовании любого из красителей отдельно. Это стало основой для окрашивания по Романовскому — метода, который до сих пор используется для окрашивания мазков крови для ручного анализа. [209]

Первые методы измерения гемоглобина были разработаны в конце 19 века и включали визуальное сравнение цвета разбавленной крови с известным стандартом. [205] Попытки автоматизировать этот процесс с помощью спектрофотометрии и колориметрии были ограничены тем фактом, что гемоглобин присутствует в крови во многих различных формах, а это означает, что его нельзя измерить на одной длине волны . В 1920 году был введен метод преобразования различных форм гемоглобина в одну стабильную форму (цианметгемоглобин или гемиглобинцианид), позволяющий автоматически измерять уровни гемоглобина. Метод цианметгемоглобина остается эталонным методом измерения гемоглобина и до сих пор используется во многих автоматических гематологических анализаторах. [57] [210] [211]

Максвеллу Уинтробу приписывают изобретение гематокритного теста. [66] [212] В 1929 году он предпринял докторский проект в Университете Тулейна по определению нормальных диапазонов параметров эритроцитов и изобрел метод, известный как гематокрит Винтроба. Измерения гематокрита ранее были описаны в литературе, но метод Уинтроба отличался тем, что в нем использовалась большая трубка, которую можно было производить серийно в соответствии с точными спецификациями, со встроенными весами. Фракцию эритроцитов в пробирке измеряли после центрифугирования для определения гематокрита. Изобретение воспроизводимого метода определения значений гематокрита позволило Винтробу определять показатели эритроцитов. [205]

Сложный аппарат для пробирок и колб, прикрепленный к измерительной станции.
Модель A Счетчик сошников

Исследования в области автоматического подсчета клеток начались в начале 20 века. [211] Метод, разработанный в 1928 году, использовал количество света, прошедшего через разбавленный образец крови, измеренное фотометрически, для оценки количества эритроцитов, но это оказалось неточным для образцов с аномальными эритроцитами. [8] Другие безуспешные попытки, предпринятые в 1930-х и 1940-х годах, включали фотоэлектрические детекторы, прикрепленные к микроскопам, которые подсчитывали клетки во время их сканирования. [211] В конце 1940-х годов Уоллес Х. Коултер , движимый необходимостью улучшить методы подсчета эритроцитов после бомбардировки Хиросимы и Нагасаки , [213] попытался улучшить методы подсчета фотоэлектрических клеток. [примечание 7] Его исследованиям помогал его брат Джозеф Р. Коултер в подвальной лаборатории в Чикаго. [60] Их результаты с использованием фотоэлектрических методов были разочаровывающими, и в 1948 году, прочитав статью, связывающую проводимость крови с концентрацией эритроцитов, Уоллес разработал принцип Коултера — теорию, согласно которой клетка, подвешенная в проводящей среде, генерирует каплю ток пропорционален его размеру при прохождении через отверстие. [213]

В октябре того же года Уоллес построил прилавок, чтобы продемонстрировать этот принцип. Из-за финансовых ограничений отверстие было сделано путем прожигания куска целлофана от сигаретной пачки. [60] [213] Уоллес подал патент на эту технику в 1949 году, а в 1951 году обратился в Управление военно-морских исследований с просьбой профинансировать разработку счетчика Коултера . [213] Заявка на патент Уоллеса была удовлетворена в 1953 году, и после усовершенствования апертуры и внедрения ртутного манометра для обеспечения точного контроля размера образца братья основали Coulter Electronics Inc. в 1958 году для продажи своих инструментов. Счетчик Коултера изначально был разработан для подсчета эритроцитов, но с более поздними модификациями он оказался эффективным для подсчета лейкоцитов. [60] Счетчики Коултера получили широкое распространение в медицинских лабораториях. [211]

Первым анализатором, способным производить несколько подсчетов клеток одновременно, был Technicon SMA 4A-7A , выпущенный в 1965 году. Он достиг этого за счет разделения образцов крови на два канала: один для подсчета эритроцитов и лейкоцитов и один для измерения гемоглобина. Однако инструмент был ненадежен и сложен в обслуживании. В 1968 году был выпущен анализатор Coulter Model S, который получил широкое распространение. Как и в приборе Technicon, в нем использовались две разные реакционные камеры, одна из которых использовалась для подсчета эритроцитов, а другая — для подсчета лейкоцитов и определения гемоглобина. Модель S также определяла средний объем клеток с помощью измерений импеданса, что позволило определить индексы эритроцитов и гематокрит. Автоматический подсчет тромбоцитов был введен в 1970 году с помощью прибора Hemalog-8 компании Technicon и был принят в анализаторах серии S Plus компании Coulter в 1980 году. [214]

После того, как базовый подсчет клеток был автоматизирован, дифференциация лейкоцитов оставалась сложной задачей. На протяжении 1970-х годов исследователи изучали два метода автоматизации дифференциального подсчета: цифровую обработку изображений и проточную цитометрию. Используя технологию, разработанную в 1950-х и 60-х годах для автоматизации считывания мазков Папаниколау , было произведено несколько моделей анализаторов обработки изображений. [215] Эти инструменты будут сканировать окрашенный мазок крови, чтобы найти ядра клеток, а затем делать снимок клетки с более высоким разрешением для анализа с помощью денситометрии . [216] Они были дорогими, медленными и мало помогали снизить рабочую нагрузку в лаборатории, поскольку для них по-прежнему требовалось готовить и окрашивать мазки крови, поэтому системы на основе проточной цитометрии стали более популярными, [217] [218] , и к 1990 г. ни один анализатор цифровых изображений не был коммерчески доступен в Соединенных Штатах или Западной Европе. [219] Эти методы возродились в 2000-х годах с появлением более совершенных платформ анализа изображений с использованием искусственных нейронных сетей . [220] [221] [222]

Ранние устройства проточной цитометрии направляли лучи света на клетки с определенными длинами волн и измеряли результирующее поглощение, флуоресценцию или рассеяние света, собирая информацию о характеристиках клеток и позволяя количественно оценивать клеточное содержимое, такое как ДНК . [223] Один из таких инструментов — спектрофотометр Rapid Cell, разработанный Луисом Каменским в 1965 году для автоматизации цитологии шейки матки, — мог генерировать скаттерграммы клеток крови с использованием методов цитохимического окрашивания. Леонард Орнштейн, который помог разработать систему окрашивания на спектрофотометре Rapid Cell, и его коллеги позже создали первый коммерческий проточный цитометрический дифференциальный анализатор лейкоцитов Hemalog D. [224] [225] Представлен в 1974 году, [226] [227] этот анализатор использовал светорассеяние, поглощение и окрашивание клеток для идентификации пяти нормальных типов лейкоцитов в дополнение к «крупным неопознанным клеткам», классификации, которая обычно состояла из атипичных лимфоцитов или бластных клеток. Hemalog D мог подсчитать 10 000 клеток за один проход, что является заметным улучшением по сравнению с ручным дифференциалом. [225] [228] В 1981 году компания Technicon объединила Hemalog D с анализатором Hemalog-8, чтобы создать Technicon H6000, первый комбинированный анализатор общего анализа крови и дифференциальный анализатор. Этот анализатор был непопулярен в гематологических лабораториях, поскольку его эксплуатация была трудоемкой, но в конце 1980-х — начале 1990-х годов аналогичные системы широко производились другими производителями, такими как Sysmex , Abbott , Roche и Beckman Coulter . [229]

Заметки с пояснениями

  1. ^ Хотя тромбоциты обычно называют таковыми, технически они не являются клетками: они представляют собой фрагменты клеток, образующиеся из цитоплазмы мегакариоцитов в костном мозге. [6]
  2. ^ Данные, используемые для построения референсных диапазонов, обычно получают от «нормальных» субъектов, но у этих людей возможно заболевание и бессимптомное. [34]
  3. ^ В самом широком смысле термин « проточная цитометрия» относится к любому измерению свойств отдельных клеток в потоке жидкости, [49] [50] , и в этом отношении все гематологические анализаторы (кроме тех, которые используют цифровую обработку изображений) являются проточными цитометрами. . Однако этот термин обычно используется в отношении методов светорассеяния и флуоресценции, особенно тех, которые включают идентификацию клеток с использованием меченых антител, которые связываются с маркерами клеточной поверхности ( иммунофенотипирование ). [49] [51]
  4. ^ Это не всегда так. Например, при некоторых типах талассемии высокое количество эритроцитов наблюдается наряду с низким или нормальным гемоглобином, поскольку эритроциты очень малы. [123] [124] Индекс Ментцера , который сравнивает MCV с количеством эритроцитов, можно использовать для различения железодефицитной анемии и талассемии. [125]
  5. ^ Автоматизированные инструменты группируют эти три типа клеток вместе по классификации «незрелых гранулоцитов», [142] , но при ручном дифференциале они учитываются отдельно. [143]
  6. ^ RDW сильно повышен при рождении и постепенно снижается примерно до шестимесячного возраста. [178]
  7. ^ Апокрифическая история гласит, что Уоллес изобрел счетчик Коултера для изучения частиц в красках, используемых на кораблях ВМС США ; другие источники утверждают, что изначально он был разработан во время Второй мировой войны для подсчета планктона. Однако Уоллес никогда не работал на военно-морском флоте, и в его самых ранних записях об устройстве говорится, что оно впервые использовалось для анализа крови. История с красками в конечном итоге была изъята из документов, подготовленных Фондом Уоллеса Х. Коултера. [213]

Рекомендации

Цитаты

  1. ^ Теффери, А; Хэнсон, Калифорния; Внутри, диджей (2005). «Как интерпретировать и отслеживать отклонения от нормы общего количества клеток крови у взрослых». Труды клиники Мэйо . 80 (7): 923–936. дои : 10.4065/80.7.923 . ISSN  0025-6196. ПМЦ  7127472 . ПМИД  16212155.
  2. ^ ab HealthDirect (август 2018 г.). «Общий анализ крови». HealthDirect.gov.au . Архивировано из оригинала 2 апреля 2019 года . Проверено 8 сентября 2020 г.
  3. ^ «Анализ крови: хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ)» . Исследования рака Великобритании . 18 сентября 2020 года. Архивировано из оригинала 23 октября 2020 года . Проверено 23 октября 2020 г.
  4. ^ abcdef Американская ассоциация клинической химии (12 августа 2020 г.). «Общий анализ крови (ОАК)». Лабораторные тесты онлайн . Архивировано из оригинала 18 августа 2020 года . Проверено 8 сентября 2020 г.
  5. ^ abc Смок, К.Дж. Глава 1 в Greer, JP et al. , под ред. (2018), с. «Преимущества и источники ошибок автоматизированной гематологии».
  6. ^ аб Турджен, ML (2016). п. 309.
  7. ^ Харменинг, DM (2009). стр. 2–3.
  8. ^ abc Грин, Р; Ваксманн-Хогиу, С (2015). «Развитие, история и будущее автоматизированных счетчиков клеток». Клиники лабораторной медицины . 35 (1): 1–10. дои : 10.1016/j.cll.2014.11.003. ISSN  0272-2712. ПМИД  25676368.
  9. ^ Аб Кеохан, Э и др . (2015). п. 244.
  10. ^ Лич, М (2014). «Интерпретация общего анализа крови при системных заболеваниях – руководство для врача». Журнал Королевского колледжа врачей Эдинбурга . 44 (1): 36–41. дои : 10.4997/JRCPE.2014.109 . ISSN  1478-2715. ПМИД  24995446.
  11. ^ Маршалл, WJ и др . (2014). п. 497.
  12. ^ abc Ван Леувен, AM; Блад, МЛ (2019). п. 377.
  13. ^ Левандровски, К. и др. (2016). п. 96.
  14. ^ Американская ассоциация банков крови (24 апреля 2014 г.). «Пять вопросов, которые должны задать врачи и пациенты». Выбираем мудро : инициатива Фонда ABIM . Американская ассоциация банков крови. Архивировано из оригинала 24 сентября 2014 года . Проверено 12 июля 2020 г.
  15. ^ аб Левандровски, К. и др. (2016). п. 97.
  16. ^ Хартман, CJ; Кавусси, ЛР (2017). стр. 4–5.
  17. ^ Деван, М. (2016). «Сокращение ненужных послеоперационных анализов крови в педиатрическом отделении интенсивной терапии». Журнал «Перманенте» . 21 : 16–051. дои : 10.7812/TPP/16-051. ISSN  1552-5767. ПМЦ 5283785 . ПМИД  28241909. 
  18. ^ Уоллс, Р. и др. (2017). п. 130.
  19. ^ Уоллс, Р. и др . (2017). п. 219.
  20. ^ Уоллс, Р. и др. (2017). п. 199.
  21. ^ Уоллс, Р. и др. (2017). п. 1464.
  22. ^ Мур, Э.Э. и др . (2017). п. 162.
  23. ^ Льюис, С.Л. и др. (2015). п. 280.
  24. ^ Вицинский, М; Венцлевич, ММ (2018). «Клозапин-индуцированный агранулоцитоз/гранулоцитопения». Современное мнение в гематологии . 25 (1): 22–28. doi : 10.1097/MOH.0000000000000391. ISSN  1065-6251. PMID  28984748. S2CID  20375973.
  25. ^ Фатеми, SH; Клейтон, П.Дж. (2016). п. 666.
  26. ^ Дули, ЕК; Ринглер, РЛ. (2012). стр. 20–21.
  27. ^ Кеохан, Э и др . (2015). стр. 834–835.
  28. ^ Шафермейер, RW и др . (2018). стр. 467–468.
  29. ^ Смок, К.Дж. Глава 1 в Greer, JP et al. , под ред. (2018), с. "Введение".
  30. ^ Аб Каушанский, К. и др . (2015). п. 11.
  31. ^ Каушанский, К. и др . (2015). п. 43.
  32. ^ Каушанский, К. и др . (2015). стр. 42–44.
  33. ^ Макферсон, РА; Пинкус, MR (2017). п. 574.
  34. ^ Бейн, Б.Дж. и др . (2017). п. 8.
  35. ^ Аб Бейн, Б.Дж. и др . (2017). п. 10.
  36. ^ Бэйн, Би Джей (2015). п. 213.
  37. ^ Кеохан, Э и др . (2015). п. 245.
  38. ^ аб Левандровски, К. и др. (2016). стр. 96–97.
  39. ^ «Регулярные предоперационные тесты для плановой хирургии (NG45)» . Национальный институт здравоохранения и передового опыта . 5 апреля 2016 г. Архивировано из оригинала 28 июля 2020 г. Проверено 8 сентября 2020 г.
  40. ^ Киркхэм, КР и др . (2016). п. 805.
  41. ^ Смок, К.Дж. Глава 1 в Greer, JP et al. , под ред. (2018), с. «Коллекция образцов».
  42. ^ Кеохан, Э и др . (2015). п. 28.
  43. ^ Бейн, Б.Дж. и др. (2017). п. 1.
  44. ^ Смок, К.Дж. Глава 1 в Greer, JP et al. , под ред. (2018), с. «Количество клеток», «Объем эритроцитов (гематокрит)», «Дифференциал лейкоцитов».
  45. ^ abcd Bain, BJ et al . (2017). стр. 551–555.
  46. ^ Бэйн, Би Джей (2015). п. 29.
  47. ^ Дасгупта, А; Сепульведа, Дж. Л. (2013). п. 305.
  48. ^ аб Д'Суза, C; Бриггс, К; Мачин, С.Дж. (2015). «Тромбоциты: немногие, молодые и активные». Клиники лабораторной медицины . 35 (1): 123–131. дои : 10.1016/j.cll.2014.11.002. ISSN  0272-2712. ПМИД  25676376.
  49. ^ abc Коттке-Марчант, К; Дэвис, Б. (2012). п. 8.
  50. ^ Шапиро, HM (2003). п. 1.
  51. ^ Бакке, AC (2001). «Принципы проточной цитометрии». Лабораторная медицина . 32 (4): 207–211. дои : 10.1309/2H43-5EC2-K22U-YC6T . ISSN  1943-7730.
  52. ^ Каушанский, К. и др . (2015). п. 12.
  53. ^ Аб Бейн, Б.Дж. и др . (2017). стр. 32–33.
  54. ^ Макферсон, РА; Пинкус, MR (2017). п. 44.
  55. ^ Бэйн, Би Джей (2015). стр. 29–30.
  56. ^ Уайтхед, РД; Мэй, З; Мапанго, К; Джеффердс, медицина (август 2019 г.). «Методы и анализаторы измерения гемоглобина в клинических лабораториях и полевых условиях». Анналы Нью-Йоркской академии наук . 1450 (1): 147–171. Бибкод : 2019NYASA1450..147W. дои : 10.1111/nyas.14124. ПМК 6709845 . ПМИД  31162693. 
  57. ^ аб Смок, К.Дж. Глава 1 в Greer, JP et al. , под ред. (2018), с. «Концентрация гемоглобина».
  58. ^ Аб Кеохан, Э и др . (2015). п. 208.
  59. ^ Бэйн, Би Джей (2015). стр. 30–31.
  60. ^ abcd Грэм, доктор медицины (2003). «Принцип Коултера: основа отрасли». Журнал Ассоциации автоматизации лабораторий . 8 (6): 72–81. дои : 10.1016/S1535-5535(03)00023-6 . ISSN  1535-5535. S2CID  113694419.
  61. ^ Кеохан, Э и др . (2015). стр. 208–209.
  62. ^ Аб Бейн, Б.Дж. и др . (2017). п. 32.
  63. ^ Кеохан, Э и др . (2015). стр. 210–211.
  64. ^ Кеохан, Э и др . (2015). п. 210.
  65. ^ Коттке-Марчант, К; Дэвис, Б. (2012). п. 27.
  66. ^ abcde Смок, К.Дж. Глава 1 в Greer, JP et al. , под ред. (2018), с. «Объем упакованных эритроцитов (гематокрит)».
  67. ^ Смок, К.Дж. Глава 1 в Greer JP et al , под ред. (2018), с. «Средний корпускулярный объем»; «Средний корпускулярный гемоглобин»; «Средняя концентрация корпускулярного гемоглобина»; «Ширина распределения эритроцитов».
  68. ^ Кеохан, Э и др . (2015). п. 2.
  69. ^ Кеохан, Э и др . (2015). п. 209.
  70. ^ abc Bain, BJ et al . (2017). п. 37.
  71. ^ Арнет, Б.М.; Менщиковки, М. (2015). п. 3.
  72. ^ abc Смок, К.Дж. Глава 1 в Greer JP et al , под ред. (2018), с. «Лейкоцитарный дифференциал».
  73. ^ Наим, Ф и др . (2009). п. 210.
  74. ^ аб Турджен, ML (2016). п. 318.
  75. ^ Аб Бейн, Б.Дж. и др . (2017). п. 39.
  76. ^ аб Смок, К.Дж. Глава 1 в Greer, JP et al. , под ред. (2018), с. "Введение"; «Счет ячеек».
  77. ^ abcd Гулати, Г; Сонг, Дж; Дулау Флоря, А; Гонг, Дж (2013). «Цель и критерии исследования мазков крови, исследования мазков крови и анализа мазков крови». Анналы лабораторной медицины . 33 (1): 1–7. дои : 10.3343/alm.2013.33.1.1. ISSN  2234-3806. ПМК 3535191 . ПМИД  23301216. 
  78. ^ аб Муни, С; Бирн, М; Капуя, П; Пентони, Л; Де ла Саль, Б; Кембридж, Т; Фоли, Д. (2019). «Тестирование на месте в общей гематологии». Британский журнал гематологии . 187 (3): 296–306. дои : 10.1111/bjh.16208 . ISSN  0007-1048. ПМИД  31578729.
  79. ^ Аб Сиречи, АН (2015). «Гематологическое тестирование в условиях неотложной помощи и в условиях ограниченных ресурсов: обзор мест оказания помощи и сателлитного тестирования». Клиники лабораторной медицины . 35 (1): 197–207. дои : 10.1016/j.cll.2014.10.009. ISSN  0272-2712. ПМИД  25676380.
  80. ^ Бейн, Б.Дж. и др . (2017). п. 43.
  81. ^ Кеохан, Э и др . (2015). п. 225.
  82. ^ Бейн, БиДжей. (2015). стр. 9–11.
  83. ^ Палмер, Л. и др . (2015). стр. 288–289.
  84. ^ Турджен, ML (2016). стр. 325–326.
  85. ^ Бэйн, Би Джей (2015). п. 98.
  86. ^ Бэйн, Би Джей (2015). п. 154.
  87. ^ Ван, SA; Хассерджян, Р.П. (2018). п. 10.
  88. ^ аб Турджен, ML (2016). п. 329.
  89. ^ Аб д'Онофрио, Дж; Зини, Г. (2014). п. 289.
  90. ^ Палмер, Л. и др. (2015). стр. 296–297.
  91. ^ abc Keohane, E et al . (2015). п. 226.
  92. ^ аб Смок, К.Дж. Глава 1 в Greer, JP et al. , под ред. (2018), с. «Счет ячеек».
  93. ^ Кеохан, Э и др . (2017) с. 189.
  94. ^ Бэйн, Би Джей (2015). стр. 22–23.
  95. ^ Кеохан, Э и др. (2017). стр. 190–191.
  96. ^ Бейн, Б.Дж. и др . (2017). стр. 19–22.
  97. ^ Бейн, Б.Дж. и др . (2017). стр. 548–552.
  98. ^ Кеохан, Э и др . (2015). п. 46.
  99. ^ abc Вис, JY; Хейсман, А. (2016). «Поверка и контроль качества рутинных гематологических анализаторов». Международный журнал лабораторной гематологии . 38 : 100–109. дои : 10.1111/ijlh.12503 . ISSN  1751-5521. ПМИД  27161194.
  100. ^ аб Коттке-Марчант, К; Дэвис, Б. (2012). стр. 697–698.
  101. ^ Пай, С; Брат, JL (2019). «Управление качеством и аккредитация в лабораторной гематологии: перспективы Индии». Международный журнал лабораторной гематологии . 41 (С1): 177–183. дои : 10.1111/ijlh.13017 . ISSN  1751-5521. ПМИД  31069974.
  102. ^ Грир, JP (2008). п. 4.
  103. ^ Коттке-Марчант, К; Дэвис, Б. (2012). п. 438.
  104. ^ Бейн, Б.Дж. и др . (2017). стр. 539–540.
  105. ^ Фавалоро, Э.Дж.; Дженнингс, я; Олсон, Дж; Ван Котт, EM; Бонар, Р; Госселин, Р; Мейер, П. (2018). «На пути к гармонизации внешней оценки качества/проверки квалификации в области гемостаза». Клиническая химия и лабораторная медицина . 57 (1): 115–126. дои : 10.1515/cclm-2018-0077 . ISSN  1437-4331. PMID  29668440. S2CID  4978828.
  106. ^ Бейн, Б.Дж. и др . (2017). п. 551.
  107. ^ Кеохан, Э и др . (2015). стр. 4–5.
  108. ^ Бланн, А; Ахмед, Н. (2014). п. 106.
  109. ^ Турджен, ML (2016). п. 293.
  110. ^ Бейн, Б.Дж. и др . (2017). стр. 33–34.
  111. ^ Турджен, ML (2016). стр. 319–320.
  112. ^ Бреретон, М; Маккафферти, Р.; Марсден, К; Каваи, Ю; Этцелл, Дж; Эрменс, А (2016). «Рекомендации по стандартизации гематологических отчетных единиц, используемых при расширенном анализе крови». Международный журнал лабораторной гематологии . 38 (5): 472–482. дои : 10.1111/ijlh.12563 . ISSN  1751-5521. ПМИД  27565952.
  113. ^ Кеохан, Э и др . (2015). п. 195.
  114. ^ Аб Бейн, Би Джей (2015). п. 22.
  115. ^ abcd Кеохан, Э и др . (2015). п. 196.
  116. ^ Шмайер, А.Х.; Лазарь, HM (2012). п. 25.
  117. ^ Аб Бейн, Би Джей (2015). стр. 73–75.
  118. ^ abcde Мэй, JE; Маркес, МБ; Редди, ВВБ; Гангараджу, Р. (2019). «Три забытых числа в CBC: количество RDW, MPV и NRBC». Медицинский журнал Кливлендской клиники . 86 (3): 167–172. дои : 10.3949/ccjm.86a.18072 . ISSN  0891-1150. ПМИД  30849034.
  119. ^ Кеохан, Э и др . (2015). п. 285.
  120. ^ Кеохан, Э и др . (2015). п. 286.
  121. ^ Каушанский, К. и др . (2015). п. 503.
  122. ^ Вит, Дж. Т.; Лейн, ДР (2014). стр. 11-12.
  123. ^ Бэйн, Би Джей (2015). п. 297.
  124. ^ ДиГрегорио, Р.В. и др . (2014). стр. 491–493.
  125. ^ Айзекс, С. и др . (2017). п. 331.
  126. ^ Бэйн, Би Джей (2015). п. 232.
  127. ^ Макферсон, РА; Пинкус, MR (2017). стр. 600–601.
  128. ^ аб Смок, К.Дж. Глава 1 в Greer, JP et al. , под ред. (2018), с. «Средняя концентрация корпускулярного гемоглобина».
  129. ^ Кеохан, Э и др . (2015). п. 197.
  130. ^ аб Коттке-Марчант, К; Дэвис, Б. (2012). п. 88.
  131. ^ Бэйн, Би Джей (2015). п. 193.
  132. ^ Бейн, Б.Дж. и др . (2017). стр. 501–502.
  133. ^ Чесла, Б (2018). п. 26.
  134. ^ Пауэлл, диджей; Ачебе, Миссури. (2016). стр. 530, 537–539.
  135. ^ Харменинг, DM (2009). п. 380.
  136. ^ Пагана, TJ и др. (2014). п. 992.
  137. ^ Уоллс, Р. и др. (2017). стр. 1480–1481.
  138. ^ Террито, М. (январь 2020 г.). «Обзор нарушений лейкоцитов». Руководства Merck, потребительская версия . Архивировано из оригинала 23 июня 2020 года . Проверено 8 сентября 2020 г.
  139. ^ Пагана, TJ и др. (2014). п. 991.
  140. ^ Маккалох, Р.Дж.; Опал, СМ. Глава 42 в Оропелло, Дж. М. и др ., изд. (2016), с. «Количество лейкоцитов и дифференциал».
  141. ^ Американская ассоциация клинической химии (29 июля 2020 г.). «Дифференциал WBC». Лабораторные тесты онлайн . Архивировано из оригинала 19 августа 2020 года . Проверено 8 сентября 2020 г.
  142. ^ Ван, SA; Хассерджян, Р.П. (2018). п. 8.
  143. ^ Палмер, Л. и др . (2015). стр. 294–295.
  144. ^ Шабо-Ричардс, DS; Джордж, TI (2015). п. 10.
  145. ^ Палмер, Л. и др. (2015). п. 294.
  146. ^ Турджен, ML (2016). п. 306.
  147. ^ Аб Каушанский, К. и др . (2015). п. 44.
  148. ^ Хоффман, EJ и др. (2013). п. 644.
  149. ^ Порвит, А и др . (2011). стр. 247–252.
  150. ^ Уоллс, Р. и др. (2017). п. 1483.
  151. ^ Уоллс, Р. и др. (2017). стр. 1497–1498.
  152. ^ Бэйн, Би Джей (2015). п. 99.
  153. ^ Бейн, Б.Дж. и др. (2017). п. 85.
  154. ^ Бейн, Б.Дж. и др . (2017). п. 498.
  155. ^ Бэйн, Би Джей (2015). п. 243.
  156. ^ Порвит, А и др . (2011). п. 256.
  157. ^ Палмер, Л. и др . (2015). п. 298.
  158. ^ Турджен, ML (2016). стр. 358–360.
  159. ^ Каушанский, К. и др. (2015). п. 1993.
  160. ^ Турджен, ML (2016). п. 315.
  161. ^ Уоллс, Р. и др. (2017). стр. 1486–1488.
  162. ^ Кауфман, РМ; Джулбегович, Б; Гернсхаймер, Т; Кляйнман, С; Тинмут, А.Т.; Капочелли, Кентукки; и другие. (2015). «Переливание тромбоцитов: руководство по клинической практике AABB». Анналы внутренней медицины . 162 (3): 205–213. дои : 10.7326/M14-1589 . ISSN  0003-4819. ПМИД  25383671.
  163. ^ Аб Кеохан, Э и др . (2015). п. 4.
  164. ^ Уоллс, Р. и др. (2017). п. 1489.
  165. ↑ Герстен, Т. (25 августа 2020 г.). «Количество тромбоцитов: Медицинская энциклопедия MedlinePlus». МедлайнПлюс . Национальная медицинская библиотека США. Архивировано из оригинала 9 сентября 2020 года . Проверено 9 сентября 2020 г.
  166. ^ Ван, SA; Хассерджян, Р.П. (2018). п. 7.
  167. ^ Каушанский, К. и др . (2015). стр. 18–19.
  168. ^ Аб Каушанский, К. и др . (2015). п. 14.
  169. ^ Турджен, ML (2016). стр. 318–319.
  170. ^ Турджен, ML (2016). п. 319.
  171. ^ abcd Каушанский, К. и др . (2015). п. 16.
  172. ^ Бейн, Б.Дж. и др . (2017). стр. 42–43.
  173. ^ Харменинг, DM (2009). стр. 8–10.
  174. ^ Константино, Б; Когионис, Б (2000). «Ядросодержащие эритроциты - значение в мазке периферической крови». Лабораторная медицина . 31 (4): 223–229. doi : 10.1309/D70F-HCC1-XX1T-4ETE .
  175. ^ Зандеки, М. и др. (2007). стр. 24–25.
  176. ^ Вирк, Х; Варма, Н; Насим, С; Бихана, я; Сухачев, Д (2019). «Полезность данных клеточной популяции (параметры VCS) как инструмента быстрого скрининга острого миелолейкоза (ОМЛ) в лабораториях с ограниченными ресурсами». Журнал клинического лабораторного анализа . 33 (2): e22679. дои : 10.1002/jcla.22679 . ISSN  0887-8013. ПМК 6818587 . ПМИД  30267430. 
  177. ^ Бэйн, Би Джей (2015). п. 90.
  178. ^ Аб Кеохан, Э и др . (2015). Переднее дело.
  179. ^ Бэйн, Би Джей (2015). стр. 211–213.
  180. ^ Бэйн, Би Джей (2015). стр. 211–213.
  181. ^ abc Bain, BJ (2015). п. 143.
  182. ^ Ланцковский, П. и др . (2016). п. 197.
  183. ^ Каушанский, К. и др . (2015). п. 99.
  184. ^ Каушанский, К. и др . (2015). п. 103.
  185. ^ Бэйн, Би Джей (2015). п. 220.
  186. ^ Бэйн, Би Джей (2015). п. 214.
  187. ^ Бейн, Б.Дж. и др . (2017). стр. 8–10.
  188. ^ Палмер, Л. и др . (2015). п. 296.
  189. ^ Бэйн, Би Джей (2015). п. 195.
  190. ^ Коттке-Марчант, К; Дэвис, Б. (2012). п. 67.
  191. ^ Бэйн, Би Джей (2015). п. 194.
  192. ^ Турджен, ML (2016). п. 91.
  193. ^ Коттке-Марчант, К; Дэвис, Б. (2012), стр. 80, 86–87.
  194. ^ Бэйн, Би Джей (2015). стр. 196–197.
  195. ^ Гулати, Г; Уппал, Г; Гонг, Дж (2022). «Ненадежные результаты автоматического общего анализа крови: причины, распознавание и разрешение». Анналы лабораторной медицины . 42 (5): 515–530. дои : 10.3343/alm.2022.42.5.515. ПМК 9057813 . ПМИД  35470271. 
  196. ^ Родак, Б.Ф.; Карр, Дж.Х. (2013). п. 109.
  197. ^ Ван, SA; Хассерджян, Р.П. (2018). п. 9.
  198. ^ Коттке-Марчант, К; Дэвис, Б. (2012). стр. 19–20.
  199. ^ Музей науки, Лондон. «Гемоглобинометр, Великобритания, 1850–1950». Приветственная коллекция . Архивировано из оригинала 29 марта 2020 года . Проверено 29 марта 2020 г.
  200. ^ Кеохан, Э и др . (2015). стр. 1–4.
  201. ^ Коттке-Марчант, К; Дэвис, Б. (2012). п. 1.
  202. ^ Винтроб, ММ. (1985). п. 10.
  203. ^ аб Коттке-Марчант, К; Дэвис, Б. (2012). стр. 3–4.
  204. ^ Версо, ML (май 1962 г.). «Эволюция методов подсчета крови». Читать на заседании секции истории медицины Первого австралийского медицинского конгресса . 8 (2): 149–158. дои : 10.1017/s0025727300029392. ПМЦ 1033366 . ПМИД  14139094. 
  205. ^ abc Means, RT (2011). «Все началось в Новом Орлеане: Уинтроб, гематокрит и определение нормы». Американский журнал медицинских наук . 341 (1): 64–65. doi : 10.1097/MAJ.0b013e3181e2eb09. ISSN  0002-9629. ПМИД  21191263.
  206. ^ Дэвис, JD (1995). п. 167.
  207. ^ Коттке-Марчант, К; Дэвис, Б. (2012). п. 4.
  208. ^ Дэвис, JD (1995). стр. 168–171.
  209. ^ Безруков, А.В. (2017). «Окрашивание Романовского, эффект Романовского и мысли по вопросу о научном приоритете». Биотехника и гистохимия . 92 (1): 29–35. дои : 10.1080/10520295.2016.1250285. ISSN  1052-0295. PMID  28098484. S2CID  37401579.
  210. ^ Кеохан, Э и др . (2015). п. 134.
  211. ^ abcd Коттке-Маршан, К; Дэвис, Б. (2012). п. 5.
  212. ^ Робинсон, JP (2013). «Уоллес Х. Коултер: десятилетия изобретений и открытий». Цитометрия Часть А. 83А (5): 424–438. дои : 10.1002/cyto.a.22296 . ISSN  1552-4922. ПМИД  23596093.
  213. ^ abcde Грэм, доктор медицины (2013). «Принцип Коултера: мнимое происхождение». Цитометрия Часть А. 83 (12): 1057–1061. doi : 10.1002/cyto.a.22398. ISSN  1552-4922. ПМК 4237176 . ПМИД  24151220. 
  214. ^ Коттке-Марчант, К; Дэвис, Б. (2012). п. 6.
  215. ^ Гронер, W (1995). стр. 12–14.
  216. ^ Льюис, С.М. (1981). «Автоматизированный дифференциальный подсчет лейкоцитов: современное состояние и будущие тенденции». Блут . 43 (1): 1–6. дои : 10.1007/BF00319925. ISSN  0006-5242. PMID  7260399. S2CID  31055044.
  217. ^ Да Коста, Л (2015). п. 5.
  218. ^ Гронер, W (1995). стр. 12–15.
  219. ^ Бентли, SA (1990). «Автоматизированный дифференциальный подсчет лейкоцитов: критическая оценка». Клиническая гематология Байера . 3 (4): 851–869. дои : 10.1016/S0950-3536(05)80138-6. ISSN  0950-3536. ПМИД  2271793.
  220. ^ Крац, А; Ли, С; Зини, Г; Ридл, Дж. А.; Гур, М; Мачин, С (2019). «Цифровые морфологические анализаторы в гематологии: обзор и рекомендации ICSH». Международный журнал лабораторной гематологии . 41 (4): 437–447. дои : 10.1111/ijlh.13042 . ISSN  1751-5521. ПМИД  31046197.
  221. ^ Да Коста, Л (2015). стр. 5–6.
  222. ^ Макканн, SR (2016). п. 193.
  223. ^ Меламед, М (2001). стр. 5–6.
  224. ^ Шапиро, HM (2003). стр. 84–85.
  225. ^ аб Меламед, М. (2001). п. 8.
  226. ^ Пико, Дж. и др . (2012). п. 110.
  227. ^ Мансберг, HP; Сондерс, AM; Гронер, В. (1974). «Дифференциальная система лейкоцитов Hemalog D». Журнал гистохимии и цитохимии . 22 (7): 711–724. дои : 10.1177/22.7.711 . ISSN  0022-1554. ПМИД  4137312.
  228. ^ Пьер, Р.В. (2002). п. 281.
  229. ^ Коттке-Марчант, К; Дэвис, Б. (2012). стр. 8–9.

Общая библиография