Везикуловирус Индианы , ранее вирус везикулярного стоматита Индианы ( VSIV или VSV ) — вирус семейства Rhabdoviridae ; известный лиссавирус бешенства принадлежит к тому же семейству. VSIV может поражать насекомых , крупный рогатый скот, лошадей и свиней. Он имеет особое значение для фермеров в некоторых регионах мира, где он поражает крупный рогатый скот. Это связано с тем, что его клиническая картина идентична очень важному вирусу ящура . [2]
Вирус является зоонозным и вызывает у инфицированных людей заболевание, похожее на грипп.
Это также распространенный лабораторный вирус, используемый для изучения свойств вирусов семейства Rhabdoviridae , а также для изучения эволюции вирусов . [3]
Везикуловирус Индианы является прототипическим представителем рода Vesiculovirus семейства Rhabdoviridae . VSIV является арбовирусом , и его репликация происходит в цитоплазме. Естественные инфекции VSIV включают два этапа: цитолитическое инфицирование млекопитающих-хозяев и передачу насекомыми. У насекомых инфекции являются нецитолитическими персистирующими. Одним из подтвержденных векторов вируса является москит-флеботомин Lutzomyia shannoni . [4] Геном VSIV находится на одной молекуле отрицательно-полярной РНК, которая имеет длину 11 161 нуклеотид, [5] которая кодирует пять основных белков: белок G (G), большой белок (L), фосфопротеин (P), матричный белок (M) и нуклеопротеин (N):
Белок VSIV G, также известный как VSVG, обеспечивает проникновение вируса . Он опосредует присоединение вируса к рецептору ЛПНП ( LDLR ) или члену семейства LDLR, присутствующему на клетке-хозяине. [6] После связывания комплекс VSIV-LDLR быстро эндоцитируется . Затем он опосредует слияние вирусной оболочки с эндосомальной мембраной. VSIV проникает в клетку через частично покрытые клатрином везикулы; содержащие вирус везикулы содержат больше клатрина и адаптера клатрина, чем обычные везикулы. Содержащие вирус везикулы привлекают компоненты актинового аппарата для своего взаимодействия, тем самым вызывая его собственное поглощение. VSIV G не следует тем же путем, что и большинство везикул, поскольку транспорт белка G из ЭР в плазматическую мембрану прерывается инкубацией при 15 °C. При этом условии молекулы накапливаются как в ЭР, так и в субклеточной фракции везикул низкой плотности, называемой фракцией везикул, богатой липидами. Материал в богатой липидами фракции везикул, по-видимому, является пост-ER промежуточным продуктом в процессе транспортировки к плазматической мембране (PM). После заражения ген VSIV G экспрессируется и обычно изучается в качестве модели для N -связанного гликозилирования в эндоплазматическом ретикулуме (ER). Он транслируется в шероховатый ER, где олигосахарид Glc 3 - Man 9 - GlcNac 2 добавляется долихол - содержащим белком к мотиву NXS на VSIV G. Сахара постепенно удаляются по мере того, как белок перемещается в аппарат Гольджи , и он становится устойчивым к эндогликозидазе H. [ 7] При синтезе в поляризованных эпителиальных клетках оболочечный гликопротеин VSV G направляется в базолатеральную PM. VSVG также является распространенным белком оболочки для систем экспрессии лентивирусных векторов, используемых для введения генетического материала в системы in vitro или модели животных, в основном из-за его чрезвычайно широкого тропизма. [ необходима цитата ]
Белок VSIV L кодируется половиной генома и объединяется с фосфопротеином, катализируя репликацию мРНК.
Белок VSIV M кодируется мРНК длиной 831 нуклеотид и транслируется в белок из 229 аминокислот. Предсказанная последовательность белка M не содержит длинных гидрофобных или неполярных доменов, которые могли бы способствовать ассоциации с мембраной. Белок богат основными аминокислотами и содержит высокоосновный аминоконцевой домен. [ необходима цитата ]
Белок VSV N необходим для инициации синтеза генома. [8] [9]
Основным признаком у животных является заболевание полости рта, проявляющееся в виде везикул и язв на слизистой оболочке рта, а также на вымени и вокруг венчика. У животных могут проявляться системные признаки, такие как анорексия, летаргия и пирексия (лихорадка). Болезнь обычно проходит в течение двух недель, и животные обычно полностью выздоравливают. [2]
Были описаны случаи заражения человека вирусом везикулярного стоматита. Большинство из этих случаев были среди лабораторных работников, ветеринаров и скотоводов. В большинстве случаев заражение VSV приводило к короткой болезни продолжительностью от 3 до 5 дней, характеризующейся лихорадкой, головной болью, миалгией , слабостью и иногда везикулярными поражениями полости рта. [10] Серологическое тестирование чаще всего проводится с помощью ИФА или реакции связывания комплемента , также можно попытаться изолировать вирус. [2]
Специфического лечения не существует, но некоторым животным могут потребоваться поддерживающие жидкости или антибиотики для лечения вторичных инфекций. [2]
Контроль осуществляется с помощью протоколов биологической безопасности , карантина, изоляции и дезинфекции, чтобы гарантировать, что вирусное заболевание не проникнет в страну или стадо. [2]
В здоровых клетках человека вирус не может размножаться, вероятно, из-за реакции интерферона , которая позволяет клеткам адекватно реагировать на вирусную инфекцию. Того же самого нельзя сказать о раковых клетках, не реагирующих на интерферон, качество, которое позволяет VSIV расти и лизировать онкогенные клетки преимущественно. [11]
Недавно было обнаружено, что ослабленный VSIV с мутацией в его белке M обладает онколитическими свойствами. Исследования продолжаются и показали, что VSIV уменьшает размер опухоли и ее распространение при меланоме, раке легких, раке толстой кишки и некоторых опухолях мозга в лабораторных моделях рака. [12]
VSIV был модифицирован для атаки ВИЧ -инфицированных Т-клеток. Модифицированный вирус был назван вирусом "троянский конь" Пресс-релиз NIH - Вирус троянский конь контролирует ВИЧ-инфекцию - 09/04/1997
Рекомбинантный VSIV прошел первую фазу испытаний в качестве вакцины против вируса Эбола . [13]
Рекомбинантный VSIV, экспрессирующий гликопротеин вируса Эбола, прошел фазу III испытаний в Африке в качестве вакцины против болезни, вызванной вирусом Эбола . Было показано, что вакцина эффективна на 76–100 % в профилактике болезни, вызванной вирусом Эбола. [14] [15] (см. также вакцину rVSV-ZEBOV ) В декабре 2019 года вакцина rVSV-ZEBOV Ervebo компании Merck & Co. была одобрена Управлением по контролю за продуктами и лекарствами для лечения лиц в возрасте 18 лет и старше. [16]
Также был создан вирус rVSV, способный к репликации и экспрессирующий белки лихорадки Ласса и вируса Марбург . [17]
Белок VSIV G обычно используется в биомедицинских исследованиях для псевдотипирования ретровирусных и лентивирусных векторов , что дает возможность трансдуцировать широкий спектр типов клеток млекопитающих с интересующими генами. [18]
Белок VSIV G также использовался в цитологических исследованиях перемещения в эндомембранной системе . Иммуноэлектронная микроскопия показывает, что белок VSIV G перемещается из цис- в транс- тельца Гольджи без транспортировки между ними в пузырьках, что подтверждает модель цистернального созревания перемещения Гольджи. [19]
VSV часто используется для проведения количественных и вычислительных исследований репликации и транскрипции вирусного генома. [8] [20] Такие исследования помогают лучше понять поведение вируса при наличии и отсутствии врожденного иммунного ответа . [ необходима ссылка ]
В 2020 году на основе модифицированного VSV была разработана возможная вакцина против COVID-19 , заболевания, вызываемого SARS-CoV-2 . Модификация включала замену генов поверхностного белка VSV на гены шиповидных белков SARS-CoV-2. [21] [22]