Периодическая кислота-Шиффа ( PAS ) — это метод окрашивания, используемый для обнаружения полисахаридов , таких как гликоген , и слизистых веществ, таких как гликопротеины , гликолипиды и муцины, в тканях. Реакция периодной кислоты окисляет вицинальные диолы в этих сахарах , обычно разрывая связь между двумя соседними атомами углерода, не участвующими в гликозидной связи или замыкании кольца в кольце моносахаридных единиц, входящих в состав длинных полисахаридов, и создавая пару альдегидов на двух свободных концах каждого разорванного моносахаридного кольца. Условия окисления должны быть в достаточной степени отрегулированы, чтобы не допустить дальнейшего окисления альдегидов. Эти альдегиды затем реагируют с реагентом Шиффа, давая пурпурно-пурпурный цвет. Подходящее основное пятно часто используется в качестве контрастного пятна .
• Окрашивание PAS-диастазой (PAS-D) – это окрашивание PAS, используемое в сочетании с диастазой , ферментом , расщепляющим гликоген.
• Альциановый синий/периодная кислота – Шифф (AB/PAS или AB-PAS) использует альциановый синий перед этапом PAS.
Окрашивание PAS в основном используется для окрашивания структур, содержащих высокую долю углеводных макромолекул ( гликоген , гликопротеин , протеогликаны ), обычно встречающихся, например, в соединительных тканях , слизи , гликокаликсе и базальных пластинках .
Окрашивание PAS можно использовать для диагностики нескольких заболеваний:
Присутствие гликогена можно подтвердить на срезе ткани, используя диастазу для переваривания гликогена из среза, а затем сравнивая расщепленный диастазой срез PAS с нормальным срезом PAS. На диастазо-отрицательном слайде будет наблюдаться пурпурное окрашивание там, где в срезе ткани присутствует гликоген. На предметном стекле, обработанном диастазой, не будет положительного окрашивания PAS в этих местах.
Окрашивание PAS также используется для окрашивания целлюлозы . Одним из примеров может быть поиск имплантированных медицинских устройств, состоящих из неокисленной целлюлозы.
Если окрашивание PAS будет проводиться на ткани, рекомендуемым фиксатором является 10% формалин с нейтральным буфером или раствор Буэна . Для мазков крови рекомендуемым фиксатором является метанол . Глутаральдегид не рекомендуется использовать, поскольку свободные альдегидные группы могут вступать в реакцию с реагентом Шиффа , что может привести к ложноположительному окрашиванию. [4]