stringtranslate.com

Кристаллический фиолетовый

Кристаллический фиолетовый или генциановый фиолетовый , также известный как метиловый фиолетовый 10B или гексаметилпарарозанилинхлорид , является триарилметановым красителем, используемым в качестве гистологического красителя и в методе классификации бактерий по Граму . Кристаллический фиолетовый обладает антибактериальными , противогрибковыми и антигельминтными ( вермицидными ) свойствами и ранее был важен как местный антисептик . Медицинское использование красителя было в значительной степени вытеснено более современными препаратами, хотя он по-прежнему включен в список Всемирной организации здравоохранения .

Название генциановый фиолетовый первоначально использовалось для смеси метилпарарозанилиновых красителей ( метиловый фиолетовый ), но теперь часто считается синонимом кристаллического фиолетового . Название относится к его цвету, похожему на цвет лепестков некоторых цветов горечавки ; он не сделан из горечавок или фиалок .

Производство

Для получения кристаллического фиолетового можно использовать ряд возможных путей. [3] [4] Первоначальная процедура, разработанная немецкими химиками Керном и Каро , включала реакцию диметиланилина с фосгеном с получением 4,4′-бис(диметиламино) бензофенона ( кетона Михлера ) в качестве промежуточного продукта. [5] Затем он реагировал с дополнительным диметиланилином в присутствии оксихлорида фосфора и соляной кислоты . [6]

Краситель также можно получить путем конденсации формальдегида и диметиланилина с получением лейкокрасителя : [ 3 ] [4] [7]

СН2О + 3С6Н5N ( СН3 ) 2 → СН ( С6Н4N ( СН3 ) 2 ) 3 + Н2О​​​​

Во-вторых, это бесцветное соединение окисляется до окрашенной катионной формы (далее кислородом , но типичным окислителем является диоксид марганца , MnO2 ) :

CH ( C6H4N ( CH3 ) 2 ) 3 +  HCl + 1⁄2O2 → [ C ( C6H4N ( CH3 ) 2 ) 3 ] Cl + H2O​

Цвет красителя

При растворении в воде краситель имеет сине-фиолетовый цвет с максимумом поглощения при 590 нм и коэффициентом экстинкции 87 000 М −1  см −1 . [8] Цвет красителя зависит от кислотности раствора. При pH +1,0 краситель зеленый с максимумами поглощения при 420 нм и 620 нм, тогда как в сильнокислом растворе (pH −1,0) краситель желтый с максимумом поглощения при 420 нм. [ необходима цитата ]

Различные цвета являются результатом различных заряженных состояний молекулы красителя. В желтой форме все три атома азота несут положительный заряд, из которых два протонированы , в то время как зеленый цвет соответствует форме красителя с двумя атомами азота, заряженными положительно. При нейтральном pH оба дополнительных протона теряются в растворе, оставляя только один из атомов азота с положительным зарядом. Значения p K a для потери двух протонов составляют приблизительно 1,15 и 1,8. [8]

В щелочных растворах нуклеофильные гидроксильные ионы атакуют электрофильный центральный углерод, образуя бесцветную трифенилметаноловую или карбинольную форму красителя. [ необходима цитата ] Некоторое количество трифенилметанола также образуется в очень кислых условиях, когда положительные заряды на атомах азота приводят к усилению электрофильного характера центрального углерода, что позволяет молекулам воды осуществлять нуклеофильную атаку . Этот эффект приводит к небольшому выцветанию желтого цвета. [ необходима цитата ]

Приложения

Промышленность

Бактерии, окрашенные кристаллическим фиолетовым
Тестовые документы, продублированные на машине Ditto , окрашены кристаллическим фиолетовым.

Кристаллический фиолетовый используется в качестве текстильного и бумажного красителя, а также является компонентом темно-синих и черных чернил для печати, шариковых ручек и струйных принтеров. Исторически это был самый распространенный краситель, используемый в ранних копировальных машинах, таких как мимеограф и машина дитто . [9] Иногда его используют для окрашивания различных продуктов, таких как удобрения , антифриз , моющие средства и кожа . [ необходима ссылка ] Маркировочный синий , используемый для маркировки деталей в металлообработке , состоит из метилированных спиртов , шеллака и генцианового фиолетового. [10]

Наука

При проведении электрофореза ДНК в геле кристаллический фиолетовый может использоваться в качестве нетоксичного красителя ДНК в качестве альтернативы флуоресцентным интеркалирующим красителям, таким как бромистый этидий . При таком использовании его можно либо включить в агарозный гель, либо применить после завершения процесса электрофореза. При использовании в концентрации 0,001% и окрашивании геля после электрофореза в течение 30 минут он может обнаружить всего 16  нг ДНК. Благодаря использованию контрастного красителя метилоранжа и более сложного метода окрашивания чувствительность может быть дополнительно улучшена до 8 нг ДНК. [11] Когда кристаллический фиолетовый используется в качестве альтернативы флуоресцентным красителям , нет необходимости использовать ультрафиолетовое освещение; это сделало кристаллический фиолетовый популярным как средство предотвращения разрушения ДНК под действием УФ-излучения при выполнении клонирования ДНК in vitro . [ требуется цитата ]

В биомедицинских исследованиях кристаллический фиолетовый может использоваться для окрашивания ядер адгезивных клеток. [12] В этом применении кристаллический фиолетовый работает как интеркалирующий краситель и позволяет количественно определять ДНК, которая пропорциональна количеству клеток. [ необходима цитата ]

Краситель используется в качестве гистологического красителя , в частности, при окрашивании по Граму для классификации бактерий . [13]

В криминалистике кристаллический фиолетовый использовался для проявления отпечатков пальцев . [14]

Кристаллический фиолетовый также используется в качестве тканевого красителя при подготовке срезов для световой микроскопии . [15] В лаборатории растворы, содержащие кристаллический фиолетовый и формалин, часто используются для одновременной фиксации и окрашивания клеток, выращенных в тканевой культуре , чтобы сохранить их и сделать их легко видимыми, поскольку большинство клеток бесцветны. Иногда его также используют как дешевый способ нанесения идентификационных меток на лабораторных мышей ; поскольку многие штаммы лабораторных мышей являются альбиносами , фиолетовый цвет сохраняется на их шерсти в течение нескольких недель. [16]

Кристаллический фиолетовый может использоваться в качестве альтернативы Кумасси бриллиантовому синему (CBB) при окрашивании белков, разделенных методом SDS-PAGE , демонстрируя, как сообщается, в 5 раз лучшую чувствительность по сравнению с CBB. [17]

Медицинский

Генциановый фиолетовый обладает антибактериальными , противогрибковыми , противоглистными , противотрипаносомными , антиангиогенными и противоопухолевыми свойствами. [18] [19] Он используется в медицине из-за этих свойств, в частности в стоматологии , и также известен как «пиоктанин» (или «пиоктанин»). [20] Он обычно используется для:

В условиях ограниченных ресурсов генцианвиолет используется для лечения ожоговых ран, [21] воспаления пуповинного остатка ( омфалита ) в неонатальном периоде, [22] кандидоза полости рта у ВИЧ -инфицированных пациентов [23] и язв во рту у детей, больных корью . [24]

В пирсинге тела генцианвиолет обычно используется для обозначения места для пирсинга, включая поверхностный пирсинг . [ необходима ссылка ]

Ветеринарный

Из-за своей антимикробной активности он используется для лечения ихтиофтириоза у рыб. Однако его обычно незаконно использовать в рыбе, предназначенной для потребления человеком. [25]

История

Альфред Керн (около 1890 г.)

Синтез

Кристаллический фиолетовый является одним из компонентов метилового фиолетового , красителя, впервые синтезированного Чарльзом Лаутом в 1861 году. [26] С 1866 года метиловый фиолетовый производился фирмой Poirrier et Chappat из Сен-Дени и продавался под названием «Парижская фиалка». Это была смесь тетра-, пента- и гексаметилированных парарозанилинов . [27]

Кристаллический фиолетовый сам по себе был впервые синтезирован в 1883 году Альфредом Керном (1850–1893), работавшим в Базеле на фирме Bindschedler and Busch. [6] Чтобы оптимизировать сложный синтез, в котором использовался высокотоксичный фосген , Керн начал сотрудничать с немецким химиком Генрихом Каро из BASF . [5] Керн также обнаружил, что, начав с диэтиланилина, а не с диметиланилина , он может синтезировать близкородственный фиолетовый краситель, теперь известный как CI 42600 или CI Basic violet 4. [28]

горечавка фиолетовая

Название «генциановый фиолетовый» (или Gentianaviolett на немецком языке) предположительно было введено немецким фармацевтом Георгом Грюблером, который в 1880 году основал в Лейпциге компанию , специализирующуюся на продаже реагентов для окрашивания гистологии . [29] [30] Окраска генциановым фиолетовым, продаваемая Грюблером, вероятно, содержала смесь метилированных парарозанилиновых красителей. [31] Окраска оказалась популярной и в 1884 году была использована Гансом Христианом Грамом для окрашивания бактерий. Он приписал Паулю Эрлиху смесь анилина и генцианового фиолетового. [32] Генциановый фиолетовый Грюблера, вероятно, был очень похож, если не идентичен, метиловому фиолетовому Лаута, который использовался в качестве красителя Виктором Андре Корнилем в 1875 году. [33]

Хотя название генцианвиолет продолжало использоваться для гистологического окрашивания, оно не использовалось в красильной и текстильной промышленности. [34] Состав красителя не был определен, и разные поставщики использовали разные смеси. В 1922 году Комиссия по биологическим окрашиваниям назначила комитет под председательством Гарольда Конна для изучения пригодности различных коммерческих продуктов. [29] В своей книге «Биологические окрашивания » Конн описывает генцианвиолет как «плохо определенную смесь фиолетовых розанилинов ». [34]

Немецкому офтальмологу Якобу Штиллингу приписывают открытие антисептических свойств генцианвиолета. [35] В 1890 году он опубликовал монографию о бактерицидном действии раствора, который он окрестил « пиоктанином », который, вероятно, представлял собой смесь анилиновых красителей, похожих на генцианвиолет. [36] Он организовал сотрудничество с E. Merck & Co. для продажи «Pyoktanin caeruleum» в качестве антисептика. [37]

В 1902 году Дригальский и Конради обнаружили, что, хотя кристаллический фиолетовый подавляет рост многих бактерий, он мало влияет на Bacillus coli ( Escherichia coli ) и Bacillus typhi ( Salmonella typhi ), которые являются грамотрицательными бактериями . [38] Гораздо более подробное исследование воздействия генцианвиолета Грюблера на различные штаммы бактерий было опубликовано Джоном Черчманом в 1912 году. [39] Он обнаружил, что большинство грамположительных бактерий (заражённых) были чувствительны к красителю, в то время как большинство грамотрицательных бактерий (незаражённых) были нечувствительны, и заметил, что краситель, как правило, действует как бактериостатический агент , а не бактерицид . [ требуется ссылка ]

Меры предосторожности

Одно исследование на мышах продемонстрировало дозозависимый канцерогенный потенциал в нескольких различных органах. [40] [41] Управление по контролю за продуктами и лекарствами США (FDA) определило, что генцианвиолет не был подтвержден достаточными научными данными как безопасный для использования в кормах для животных. Использование генцианвиолета в кормах для животных приводит к фальсификации корма и является нарушением Федерального закона о пищевых продуктах, лекарствах и косметических средствах в США. 28 июня 2007 года FDA выпустило «предупреждение об импорте» выращенных на фермах морепродуктов из Китая, поскольку в продуктах постоянно обнаруживались неутвержденные противомикробные препараты, включая генцианвиолет. В отчете FDA говорится:

«Как и MG ( малахитовый зеленый ), CV (кристаллический фиолетовый) легко всасывается в ткани рыб при контакте с водой и метаболически восстанавливается рыбой до лейко-фрагмента, лейкокристаллического фиолетового (LCV). Несколько исследований Национальной токсикологической программы сообщили о канцерогенных и мутагенных эффектах кристаллического фиолетового у грызунов. Лейко-форма вызывает опухоли почек, печени и легких у мышей». [42] [43]

В 2019 году Министерство здравоохранения Канады признало медицинские устройства, в которых используется генцианвиолет, безопасными для использования, но рекомендовало прекратить использование всех лекарственных препаратов, содержащих генцианвиолет, в том числе на животных, что заставило канадские инженерные школы пересмотреть использование этого красителя во время ориентации. [44] [45]

Смотрите также

Ссылки

  1. ^ Грин, Флойд Дж. (1990). Справочник Sigma-Aldrich по красителям, красителям и индикаторам. Милуоки, Висконсин: Sigma-Aldrich Corp., стр. 239–240. ISBN 978-0-941633-22-2. OCLC  911335305.
  2. ^ Hodge, HC; Indra, J.; Drobeck, HP; Duprey, LP; Tainter, ML (1972). «Острая пероральная токсичность метилрозанилина хлорида». Токсикология и прикладная фармакология . 22 (1): 1–5. Bibcode :1972ToxAP..22....1H. doi :10.1016/0041-008X(72)90219-0. PMID  5034986.
  3. ^ ab Colour Index 3rd Edition Volume 4 (PDF) , Брэдфорд: Общество красильщиков и колористов, 1971, стр. 4391, архивировано из оригинала (PDF) 2011-07-19
  4. ^ ab Gessner, T.; Mayer, U. (2002), "Триарилметановые и диарилметановые красители", Энциклопедия промышленной химии Ульмана, 6-е издание , Weinheim: Wiley-VCH, doi :10.1002/14356007.a27_179, ISBN 978-3-527-30385-4
  5. ^ ab Reinhardt, C.; Travis, AS (2000), Генрих Каро и создание современной химической промышленности, Дордрехт, Нидерланды: Kluwer Academic, стр. 208–209, ISBN 0-7923-6602-6, заархивировано из оригинала 2022-02-28 , извлечено 2020-10-30
  6. ^ ab US 290856, Caro, H. & Kern, A., «Производство красителей», выдан в 1883 г. US 290891, Kern, A., «Производство красителей или красящих веществ», выдан в 1883 г. US 290892, Kern, A., «Производство пурпурных красителей», выдан в 1883 г. 
     
     
  7. ^ Thetner, D. (2000), «Трифенилметан и родственные красители», Kirk-Othmer Encyclopedia of Chemical Technology, Wiley, doi :10.1002/0471238961, ISBN 978-0-471-48494-3, архивировано из оригинала 5 января 2013 г.. Также доступно в Scribd Архивировано 2012-11-04 на Wayback Machine .
  8. ^ ab Адамс, Э. К.; Розенштейн, Л. (1914). «Цвет и ионизация кристаллического фиолетового». J. Am. Chem. Soc . 36 (7): 1452–1473. doi :10.1021/ja02184a014. hdl : 2027/uc1.b3762873 .
  9. ^ US2838994A, Лебл, Ричард К.; Джозеф, Сэвит и Флоренс, Роберт Т., «Элементы для использования в практике процесса копирования духа», выпущено 1958-06-17 
  10. ^ Бринк, К.; Макнамара, Б. (2008), Инженерное производство и котлостроение, Pearson South Africa, стр. 44, ISBN 978-1-77025-374-2, заархивировано из оригинала 2021-07-14 , извлечено 2021-07-14.
  11. ^ Yang, Y.; Jung, DW; Bai, DG; Yoo, GS; Choi, JK (2001). «Метод окрашивания ДНК в агарозных гелях противоионным красителем с использованием кристаллического фиолетового и метилового оранжевого». Электрофорез . 22 (5): 855–859. doi :10.1002/1522-2683()22:5<855::AID-ELPS855>3.0.CO;2-Y. PMID  11332752. S2CID  28700868.
  12. ^ Клингенберг, Марсель; Беккер, Юрген; Эберт, Соня; Кубе, Дитер; Вилтинг, Йорг (2014-04-06). «Ингибитор НАДФН-оксидазы имипрамин-+синий в лечении лимфомы Беркитта». Molecular Cancer Therapeutics . 13 (4): 833–841. doi : 10.1158/1535-7163.mct-13-0688 . PMID  24482381.
  13. ^ G, Barbolini; AC, Pessina (1977). «Неспецифичность окрашивания кристаллическим фиолетовым гранул ренина». Acta Histochemica . 58 (2). Acta Histochem: 191–193. doi :10.1016/S0065-1281(77)80127-X. ISSN  0065-1281. PMID  70939.
  14. ^ Фельдман, MA; Мелоан, CE; Ламберт, JL (1982-10-27). «Новый метод восстановления скрытых отпечатков пальцев с кожи». Журнал судебной экспертизы . 27 (4): 806–811. doi :10.1520/JFS12196J. ISSN  0022-1198. PMID  7175462.
  15. ^ Хеннеман, Шейла А.; Кон, Фрэнк С. (июнь 1975 г.). «Окрашивание монослоев тканевой культуры метиленовым синим». Руководство Ассоциации по культуре тканей . Методы в клеточной науке. 1 (2): 103–104. doi :10.1007/BF01352624. ISSN  0361-0268.
  16. ^ AN Assal: Обзор методов идентификации лабораторных мышей, крыс, кроликов и морских свинок. В: Scandinavian Journal of Laboratory Animal Sciences. 15.1, 2019, стр. 19–31, doi:10.23675/SJLAS.V15I1.697.
  17. ^ Krause, Robert GE; Goldring, JP Dean (2019). «Кристаллический фиолетовый окрашивает белки в гелях и зимограммах SDS-PAGE». Аналитическая биохимия . 566. Elsevier BV: 107–115. doi :10.1016/j.ab.2018.11.015. ISSN  0003-2697. PMID  30458124. S2CID  53944873.
  18. ^ Докампо, Р.; Морено, С. Н. (1990), «Метаболизм и способ действия горечавки фиолетовой», Drug Metab. Rev. , т. 22, № 2–3, стр. 161–178, doi :10.3109/03602539009041083, PMID  2272286
  19. ^ Maley, Alexander M.; Arbiser, Jack L. (декабрь 2013 г.). «Gentian Violet: лекарство 19-го века вновь появляется в 21-м веке». Experimental Dermatology . 22 (12): 775–780. doi :10.1111/exd.12257. PMC 4396813 . PMID  24118276. 
  20. ^ Горгас, Фердинанд Дж. С. (1901), «Пиоктанин – Метил-фиолетовый – Пиоктанин», Стоматология. Руководство по стоматологическим материалам и терапии, 7-е издание , chestofbooks.com, архивировано из оригинала 08.07.2011 , извлечено 15.03.2011 .
  21. ^ Чоудхари, КН; Сони, ПП; Сао, ДК; Мурти, Р; Дешкар, А.М.; Нанда, БР (апрель 2013 г.). «Роль краски генцианвиолета в лечении ожоговых ран: перспективное рандомизированное контролируемое исследование». J Indian Med Assoc . 111 (4): 248–50. PMID  24475556.
  22. ^ Камар, ФН; Тикмани, СС; Мир, Ф; Заиди, АК (ноябрь 2013 г.). «Ведение на уровне сообщества и исход омфалита у новорожденных в Карачи, Пакистан». Журнал Пакистанской медицинской ассоциации . 63 (11): 1364–9. ПМИД  24392520.
  23. ^ Jurevic, RJ; Traboulsi, RS; Mukherjee, PK; Salata, RA; Ghannoum, MA; Группа Oral HIV/AIDS Research Alliance Mycology Focus (май 2011 г.). «Определение концентрации генцианвиолета, которая не окрашивает слизистую оболочку полости рта, обладает противокандидозной активностью и хорошо переносится». European Journal of Clinical Microbiology & Infectious Diseases . 30 (5): 629–33. doi :10.1007/s10096-010-1131-8. PMC 3076549 . PMID  21210170.  {{cite journal}}: |first6=имеет общее название ( помощь )
  24. ^ Берман, Стивен; Найквист, Кристин; Линч, Джулия А.; Джентиле, Анхела. Модуль 5. Лечение распространенных инфекций у детей после катастрофы (PDF) . Американская ассоциация педиатрии. стр. 22. Архивировано (PDF) из оригинала 8 августа 2014 г. Получено 24 июля 2014 г.
  25. ^ Эрдели, Холли; Сандерс, Паскаль. "5. Горечавка фиалка – Продовольственная и сельскохозяйственная организация" (PDF) . Продовольственная и сельскохозяйственная организация . Архивировано (PDF) из оригинала 2017-08-30 . Получено 2017-08-30 . Остатки в пищевых продуктах и ​​их оценка – Условия использования
  26. ^ Лаут, К. (1867), «О новом анилиновом красителе «Парижская фиалка»», Лаборатория , т. 1, стр. 138–139
  27. ^ Гарднер, В. М., ред. (1915), Британская каменноугольная промышленность: ее происхождение, развитие и упадок, Филадельфия: Липпинкотт, стр. 173
  28. ^ US 290893, Керн, А., «Производство красителей или красящих веществ», выдан в 1883 году ; также доступно в Google. 
  29. ^ ab Conn, HJ (1922), «Исследование американских горечавок: Отчет Комитета по бактериологической технике» (PDF) , J. Bacteriol. , т. 7, № 5, стр. 529–536, doi : 10.1128/JB.7.5.529-536.1922 , архивировано из оригинала 28.02.2022 , извлечено 13.02.2022
  30. ^ Титфорд, М. (1993), «Джордж Грюблер и Карл Холлборн: два основателя индустрии биологических красителей», J. Histotechnol. , т. 16, № 2, стр. 155–158, doi :10.1179/his.1993.16.2.155, PMID  11615369
  31. ^ Титфорд, М. (2007), «Сравнение исторических красителей Грюблера с современными аналогами с использованием тонкослойной хроматографии», Biotech. Histochem. , т. 82, № 4–5, стр. 227–234, doi :10.1080/10520290701714005, PMID  18074269, S2CID  29539186
  32. ^ Кларк, Г.; Кастен, Ф. Х. (1983), История окрашивания (3-е изд.), Балтимор: Уильямс и Уилкинс, стр. 95–97, ISBN 0-683-01705-5(Автором более ранних изданий был Х. Дж. Конн)
  33. ^ Корнил, В. (1875), «Диссоциация фиолетового метиланилина и разделение двух цветов под влиянием некоторых нормальных и патологических тканей, в частности по тканям и дегенерации амилоида», Comptes Rendus de l'Académie des Sciences (на французском языке), vol. 80, стр. 1288–1291, заархивировано из оригинала 15 февраля 2022 г. , получено 13 февраля 2022 г.
  34. ^ ab Conn, HJ (1925), Биологические красители: справочник по природе и использованию красителей, используемых в биологической лаборатории, Женева, Нью-Йорк: Комиссия по стандартизации биологических красителей, стр. 68–69
  35. ↑ Совет по фармации и химии (1937), Новые и неофициальные средства правовой защиты, Чикаго: Американская медицинская ассоциация, стр. 210–211.
  36. ^ Стиллинг, Дж. (1890), Anilin Farbstoffe als Antiseptica und ihre Anwendung in der Praxis (на немецком языке), Страсбург: Mittheilung, заархивировано из оригинала 13 февраля 2022 г. , получено 13 февраля 2022 г.
  37. ^ RL Berrios, JL Arbiser: Новые антиангиогенные агенты в дерматологии. В: Архивы биохимии и биофизики . 508.2, 2011, стр. 222–226, doi:10.1016/j.abb.2010.12.016.
  38. ^ Дригальский, В.; Конради, Х. (1902), «Ueber ein Verfahren zum Nachweis der Typhusbacillen», Zeitschrift für Hygiene , vol. 39, нет. 1, стр. 283–300, номер документа : 10.1007/BF02140310, S2CID  22908909.
  39. ^ Чёрчмен, Дж. У. (1912), «Избирательное бактерицидное действие горечавки фиолетовой», Журнал экспериментальной медицины , 16 (2): 221–247, пластины 21–31, doi :10.1084/jem.16.2.221, PMC 2125249 , PMID  19867569 
  40. ^ Littlefield, NA; Blackwell, BN; Hewitt, CC; Gaylor, DW (1985), «Исследования хронической токсичности и канцерогенности генцианвиолета у мышей», Fundam. Appl. Toxicol. , т. 5, № 5, стр. 902–912, doi :10.1016/0272-0590(85)90172-1, PMID  4065463, архивировано из оригинала 28.02.2022 , извлечено 30.06.2019
  41. ^ "База данных канцерогенной активности (CPDB)". Архивировано из оригинала 2020-06-08 . Получено 2022-02-13 .
  42. ^ Вопросы и ответы по предупреждению FDA об импорте выращенных на фермах морепродуктов из Китая: какие есть доказательства того, что малахитовый зеленый, генциановый фиолетовый и нитрофуран вызывают рак?, Управление по контролю за продуктами и лекарствами США, 2009, архивировано из оригинала 28.05.2010 , извлечено 18.08.2010
  43. ^ Как FDA регулирует морепродукты (PDF) , Управление по контролю за продуктами и лекарствами США, 2007, архив (PDF) из оригинала 2015-09-24 , извлечено 2014-10-27
  44. ^ "Health Canada предупреждает канадцев о потенциальном риске рака, связанном с горечавкой фиолетовой". Правительство Канады. 2019-06-11. Архивировано из оригинала 2019-07-13 . Получено 12 июля 2019 г.
  45. ^ Szklarski, Cassandra (10 июля 2019 г.). «Популярная практика «фиолетового» окрашивания кампуса рассматривается в связи с предупреждением Министерства здравоохранения Канады». CityNews . Canadian Press . Архивировано из оригинала 11 июля 2019 г. . Получено 12 июля 2019 г. .

Дальнейшее чтение

Внешние ссылки

На Викискладе есть медиафайлы по теме «Кристаллический фиолетовый» .