stringtranslate.com

Фенилаланингидроксилаза

Фенилаланингидроксилаза ( PAH ) ( EC 1.14.16.1) — фермент , катализирующий гидроксилирование ароматической боковой цепи фенилаланина для получения тирозина . PAH — один из трех членов биоптерин -зависимых ароматических аминокислотных гидроксилаз , класса монооксигеназ , которые используют тетрагидробиоптерин (BH 4 , птеридиновый кофактор) и негемовое железо для катализа. В ходе реакции молекулярный кислород гетеролитически расщепляется с последовательным включением одного атома кислорода в BH 4 и субстрат фенилаланина. [5] [6] У людей мутации в кодирующем его гене PAH могут привести к метаболическому расстройству фенилкетонурии .

Механизм фермента

Предполагается, что реакция протекает в следующие стадии:

  1. образование мостика Fe(II)-OO-BH 4 .
  2. Гетеролитическое расщепление связи OO с образованием феррил оксогидроксилирующего интермедиата Fe(IV)=O
  3. атака на Fe(IV)=O с целью гидроксилирования фенилаланинового субстрата до тирозина. [7]
Образование и разрыв мостика Fe(II)-OO-BH4.
Механизм ПАУ, часть I

Образование и расщепление мостика железо-пероксиптерин. Хотя доказательства убедительно подтверждают Fe(IV)=O как гидроксилирующий промежуточный продукт, [8] механистические детали, лежащие в основе образования мостика Fe(II)-OO-BH 4 до гетеролитического расщепления, остаются спорными. Были предложены два пути на основе моделей, которые различаются близостью железа к кофактору птерина и числом молекул воды, предположительно координируемых железом во время катализа. Согласно одной модели, комплекс дикислорода железа изначально образуется и стабилизируется как резонансный гибрид Fe 2+ O 2 и Fe 3+ O 2 − . Затем активированный O 2 атакует BH 4 , образуя переходное состояние , характеризующееся разделением заряда между электронодефицитным птериновым кольцом и богатыми электронами дикислородными видами. [9] Затем образуется мостик Fe(II)-OO-BH 4 . С другой стороны, образование этого мостика было смоделировано, предполагая, что BH4 находится в первой координационной оболочке железа и что железо не координируется ни с одной молекулой воды. Эта модель предсказывает другой механизм, включающий радикал птерина и супероксид в качестве критических промежуточных продуктов. [10] После образования мостик Fe(II)-OO-BH4 разрушается посредством гетеролитического расщепления связи OO до Fe(IV)=O и 4a-гидрокситетрагидробиоптерина; таким образом, молекулярный кислород является источником как атомов кислорода, используемых для гидроксилирования кольца птерина, так и фенилаланина.

Гидроксилирование фенилаланина в тирозин.
Механизм ПАУ, часть II

Гидроксилирование фенилаланина ферриловым оксо-промежуточным соединением. Поскольку механизм включает гидроксилирующий промежуточный продукт Fe(IV)=O (в отличие от пероксиптерина), окисление кофактора BH 4 и гидроксилирование фенилаланина могут быть разделены, что приводит к непродуктивному потреблению BH 4 и образованию H 2 O 2 . [7] Однако при продуктивном процессе промежуточный продукт Fe(IV)=O добавляется к фенилаланину в реакции электрофильного ароматического замещения, которая восстанавливает железо из феррила в железное состояние. [7] Хотя изначально предполагалось оксид арена или радикальное промежуточное соединение, анализы родственных триптофан- и тирозингидроксилаз показали, что реакция вместо этого протекает через катионное промежуточное соединение, которое требует координации Fe(IV)=O с водным лигандом, а не с гидроксогруппой. [7] [11] Этот катионный промежуточный продукт впоследствии подвергается сдвигу NIH 1,2-гидрида, давая диеноновый промежуточный продукт, который затем таутомеризуется с образованием тирозинового продукта. [12] Кофактор птерина регенерируется путем гидратации карбиноламинового продукта PAH до хиноидного дигидробиоптерина (qBH 2 ), который затем восстанавливается до BH 4 . [13]

Регуляция ферментов

PAH предлагается использовать модель аллостерической регуляции морфеина . [14] [15]

PAH млекопитающих существует в равновесии, состоящем из тетрамеров двух различных архитектур, с одной или несколькими димерными формами как частью равновесия. Такое поведение согласуется с диссоциативным аллостерическим механизмом. [15]

Многие исследования показывают, что ПАУ млекопитающих демонстрирует поведение, сопоставимое с порфобилиногенсинтазой (ПБГС), при этом сообщается, что на активность фермента и стабильность белка влияют различные факторы, такие как pH и связывание лиганда. [15]

Структура

Мономер PAH (51,9 кДа) состоит из трех отдельных доменов: регуляторного N-концевого домена (остатки 1–117), который содержит субдомен связывания Phe ACT, каталитического домена (остатки 118–427) и C-концевого домена (остатки 428–453), отвечающего за олигомеризацию идентичных мономеров. Был проведен обширный кристаллографический анализ, особенно на координированном птерином и железом каталитическом домене для изучения активного центра. Структура N-концевого регуляторного домена также была определена, и вместе с решенной структурой гомологичного домена тетрамеризации C-конца тирозингидроксилазы была предложена структурная модель тетрамерного PAH. [13] С помощью рентгеновской кристаллографии была экспериментально определена структура полноразмерного крысиного PAH и показана автоингибированная или покоящаяся форма фермента. [16] Форма в состоянии покоя (RS-PAH) архитектурно отличается от активированной формы (A-PAH). [17] Полная структура A-PAH в настоящее время отсутствует, но был определен стабилизированный Phe интерфейс ACT-ACT, характерный для A-PAH, и была предложена структурная модель A-PAH, основанная на анализе SAXS. [18] [19]

Модель активного участка для ПАУ.
Модель активного центра ПАУ, связанного с BH4, железом и аналогом фенилаланина. (из PDB 1KW0) Аналог фенилаланина , BH4 , железо , Fe(II)-координированные остатки His и Glu

Каталитический домен

Решенные кристаллические структуры каталитического домена указывают на то, что активный сайт состоит из открытого и просторного кармана, выстланного в основном гидрофобными остатками, хотя три остатка глутаминовой кислоты, два гистидина и тирозин также присутствуют и связывают железо. [13] Существуют противоречивые данные о координационном состоянии атома железа и его близости к BH4 в активном сайте. Согласно кристаллографическому анализу, Fe(II) координируется водой, His285, His290 и Glu330 (2-гис-1-карбоксилатное лицевое триадное расположение) с октаэдрической геометрией. [20] Включение аналога Phe в кристаллическую структуру изменяет как железо с шести- на пятикоординированное состояние, включающее одну молекулу воды и бидентатную координацию с Glu330, и открывает сайт для связывания кислорода. BH4 одновременно смещается к атому железа, хотя кофактор птерина остается во второй координационной сфере. [21] С другой стороны, конкурирующая модель, основанная на анализе ЯМР и молекулярном моделировании, предполагает, что все координированные молекулы воды вытесняются из активного центра во время каталитического цикла, в то время как BH4 становится непосредственно координированным с железом. [22] Как обсуждалось выше, разрешение этого несоответствия будет важно для определения точного механизма катализа ПАУ.

N-концевой регуляторный домен

Регуляторная природа N-концевого домена (остатки 1–117) обусловлена ​​его структурной гибкостью. [23] Анализ обмена водорода/дейтерия показывает, что аллостерическое связывание Phe глобально изменяет конформацию PAH таким образом, что активный сайт становится менее закрытым, поскольку интерфейс между регуляторным и каталитическим доменами все больше подвергается воздействию растворителя. [23] [24] [25] Это наблюдение согласуется с кинетическими исследованиями, которые показывают изначально низкую скорость образования тирозина для полноразмерного PAH. Однако это время задержки не наблюдается для укороченного PAH, лишенного N-концевого домена, или если полноразмерный фермент предварительно инкубируют с Phe. Удаление N-концевого домена также устраняет время задержки, одновременно увеличивая сродство к Phe почти в два раза; не наблюдается разницы в V max или K m для кофактора тетрагидробиоптерина. [26] Дополнительная регуляция обеспечивается Ser16; фосфорилирование этого остатка не изменяет конформацию фермента, но снижает концентрацию Phe, необходимую для аллостерической активации. [25] Этот N-концевой регуляторный домен не наблюдается в бактериальных ПАУ, но демонстрирует значительную структурную гомологию с регуляторным доменом фосфоглицератдегидрогеназы, фермента в пути биосинтеза серина. [25]

Домен тетрамеризации

Прокариотический ПАУ является мономерным, тогда как эукариотический ПАУ существует в равновесии между гомотетрамерной и гомодимерной формами. [7] [13] Интерфейс димеризации состоит из связанных с симметрией петель, которые связывают идентичные мономеры, в то время как перекрывающийся домен тетрамеризации С-конца опосредует ассоциацию конформационно различных димеров, которые характеризуются различной относительной ориентацией каталитического и тетрамеризационного доменов (Флатмарк, Эрландсен). Результирующее искажение симметрии тетрамера очевидно в дифференциальной площади поверхности интерфейсов димеризации и отличает ПАУ от тетрамерно симметричной тирозингидроксилазы. [13] Был предложен механизм обмена доменами для опосредования образования тетрамера из димеров, в котором альфа-спирали С-конца взаимно изменяют свою конформацию вокруг гибкой шарнирной области из пяти остатков С-конца, образуя спирально-спиральную структуру, смещая равновесие в сторону тетрамерной формы. [7] [13] [27] Хотя и гомодимерная, и гомотетрамерная формы PAH каталитически активны, они демонстрируют различную кинетику и регуляцию. В дополнение к сниженной каталитической эффективности, димер не проявляет положительной кооперативности по отношению к L-Phe (который при высоких концентрациях активирует фермент), что предполагает, что L-Phe аллостерически регулирует PAH, влияя на взаимодействие димер-димер. [27]

Биологическая функция

PAH является критическим ферментом в метаболизме фенилаланина и катализирует этап, ограничивающий скорость его полного катаболизма до углекислого газа и воды. [13] [28] Регулирование потока через пути, связанные с фенилаланином, имеет решающее значение в метаболизме млекопитающих, о чем свидетельствует токсичность высоких уровней этой аминокислоты в плазме, наблюдаемая при фенилкетонурии (см. ниже). Основным источником фенилаланина являются потребляемые белки, но относительно небольшая часть этого пула используется для синтеза белка. [28] Вместо этого большая часть потребляемого фенилаланина катаболизируется через PAH с образованием тирозина ; добавление гидроксильной группы позволяет разрушить бензольное кольцо на последующих катаболических этапах. Трансаминирование в фенилпируват , метаболиты которого выводятся с мочой, представляет собой другой путь оборота фенилаланина, но катаболизм через PAH преобладает. [28]

У людей этот фермент экспрессируется как в печени, так и в почках, и есть некоторые указания на то, что он может по-разному регулироваться в этих тканях. [29] PAH необычен среди гидроксилаз ароматических аминокислот своей вовлеченностью в катаболизм; с другой стороны, тирозин- и триптофангидроксилазы в первую очередь экспрессируются в центральной нервной системе и катализируют этапы, ограничивающие скорость, в биосинтезе нейротрансмиттеров/гормонов. [13]

Актуальность заболевания

Дефицит активности PAH из-за мутаций в PAH вызывает гиперфенилаланинемию (HPA), а когда уровень фенилаланина в крови повышается более чем в 20 раз по сравнению с нормальной концентрацией, возникает метаболическое заболевание фенилкетонурия (ФКУ). [28] ФКУ является как генотипически, так и фенотипически гетерогенной: было идентифицировано более 300 различных патогенных вариантов, большинство из которых соответствуют миссенс-мутациям, которые сопоставляются с каталитическим доменом. [13] [20] Когда когорта идентифицированных мутантов ФАГ была экспрессирована в рекомбинантных системах, ферменты продемонстрировали измененное кинетическое поведение и/или сниженную стабильность, что согласуется со структурным картированием этих мутаций как в каталитическом, так и в тетрамеризационном доменах фермента. [13] BH4 4 назначался в качестве фармакологического лечения и, как было показано, снижал уровень фенилаланина в крови у части пациентов с ФКУ, генотипы которых приводят к некоторой остаточной активности PAH, но не имеют дефекта в синтезе или регенерации BH4 4. Последующие исследования показывают, что в случае определенных мутантов PAH избыток BH4 4 действует как фармакологический шаперон для стабилизации мутантных ферментов с нарушенной сборкой тетрамера и повышенной чувствительностью к протеолитическому расщеплению и агрегации. [30] Мутации, которые были идентифицированы в локусе PAH, задокументированы в базе знаний локуса фенилаланингидроксилазы (PAHdb, https://web.archive.org/web/20130718162051/http://www.pahdb.mcgill.ca/).

Поскольку фенилкетонурия может вызвать необратимые повреждения, крайне важно, чтобы дефицит фенилаланингидроксилазы определялся на ранних стадиях развития. Первоначально это делалось с помощью анализа бактериального ингибирования, известного как тест Гатри . Теперь ФКУ является частью скрининга новорожденных во многих странах, и повышенные уровни фенилаланина определяются вскоре после рождения путем измерения с помощью тандемной масс-спектрометрии . Размещение человека на диете с низким содержанием фенилаланина и высоким содержанием тирозина может помочь предотвратить любые долгосрочные повреждения его развития.

Модель выбивания ПАУ

Первая попытка создания мышиной модели Pah -KO была описана в исследовательской статье, опубликованной в 2021 году. [31] Эта нокаутная мышь была создана гомозиготной посредством ее развития в штамме C57BL/6 J с использованием CRISPR / Cas9 . [32] Кодон 7, GAG, в гене Pah был изменен на стоп-кодон TAG, что представляет собой преднамеренную точечную мутацию . Гомозиготные мыши-самцы в возрасте от двух до шести месяцев изучались с помощью научных методов, таких как поведенческие и биохимические анализы, МРТ и гистопатология. Гомозиготных мышей регулярно сравнивали с контрольными мышами, гетерозиготными мышами Pah -KO соответствующего возраста и пола, которые проявляли достаточную активность фермента PAH для обеспечения уровней фенилаланина и тирозина, аналогичных мышам дикого типа .

Модель мышей Pah -KO показала высокий уровень фенилаланина в крови и низкий уровень тирозина, гипохолестеринемию , высокий уровень фенилаланина и низкий уровень нейротрансмиттеров и тирозина в мозге, гипомиелинизацию, низкий вес мозга и тела, высокую степень глазной патологии, гипопигментацию и прогрессирующий поведенческий дефицит по сравнению с гетерозиготными мышами. [31] После прекращения лечения гомозиготных мышей анализ вестерн-блоттинга не выявил никаких печеночных белков PAH . [33] Повышенное количество фенилаланина в гомогенатах всего мозга гомозиготных мышей было похоже на пациентов с ФКУ. Цвет шерсти обеих мышей зависел от количества пигмента меланина в волосяных стержнях; таким образом, гомозиготные мыши были склонны быть более светло-коричневыми на основе меньшего количества меланина. Поведение мышей проверялось с помощью анализа строительства гнезда. [31]

Эта модель открывает возможности для обширного исследования биологии ФКУ, сходной с таковой у пациентов с ФКУ, а также для оценки современных терапевтических стратегий лечения ФКУ.

Родственные ферменты

Фенилаланингидроксилаза тесно связана с двумя другими ферментами:

Все три фермента гомологичны, то есть считается, что они произошли от одной и той же древней гидроксилазы.

Ссылки

  1. ^ abc GRCh38: Ensembl выпуск 89: ENSG00000171759 – Ensembl , май 2017 г.
  2. ^ abc GRCm38: Ensembl выпуск 89: ENSMUSG00000020051 – Ensembl , май 2017 г.
  3. ^ "Human PubMed Reference:". Национальный центр биотехнологической информации, Национальная медицинская библиотека США .
  4. ^ "Mouse PubMed Reference:". Национальный центр биотехнологической информации, Национальная медицинская библиотека США .
  5. ^ Фицпатрик ПФ (1999). «Тетрагидроптерин-зависимые аминокислотные гидроксилазы». Annual Review of Biochemistry . 68 : 355–81. doi :10.1146/annurev.biochem.68.1.355. PMID  10872454.
  6. ^ Кауфман С. (февраль 1958 г.). «Новый кофактор, необходимый для ферментативного превращения фенилаланина в тирозин». Журнал биологической химии . 230 (2): 931–9. doi : 10.1016/S0021-9258(18)70516-4 . PMID  13525410.
  7. ^ abcdef Fitzpatrick PF (декабрь 2003 г.). «Механизм гидроксилирования ароматических аминокислот». Биохимия . 42 (48): 14083–91. doi :10.1021/bi035656u. PMC 1635487. PMID  14640675 . 
  8. ^ Panay AJ, Lee M, Krebs C, Bollinger JM, Fitzpatrick PF (март 2011 г.). «Доказательства наличия высокоспиновых видов Fe(IV) в каталитическом цикле бактериальной фенилаланингидроксилазы». Биохимия . 50 (11): 1928–33. doi :10.1021/bi1019868. PMC 3059337. PMID  21261288 . 
  9. ^ Bassan A, Blomberg MR, Siegbahn PE (январь 2003 г.). «Механизм расщепления дикислорода в тетрагидробиоптерин-зависимых аминокислотных гидроксилазах». Химия: Европейский журнал . 9 (1): 106–15. doi : 10.1002/chem.200390006 . PMID  12506369.
  10. ^ Olsson E, Martinez A, Teigen K, Jensen VR (март 2011). «Формирование железо-оксогидроксилирующих видов в каталитическом цикле гидроксилаз ароматических аминокислот». Химия: Европейский журнал . 17 (13): 3746–58. doi :10.1002/chem.201002910. PMID  21351297.
  11. ^ Bassan A, Blomberg MR, Siegbahn PE (сентябрь 2003 г.). «Механизм ароматического гидроксилирования активированным ядром FeIV=O в тетрагидробиоптерин-зависимых гидроксилазах». Химия: Европейский журнал . 9 (17): 4055–67. doi :10.1002/chem.200304768. PMID  12953191.
  12. ^ Pavon JA, Fitzpatrick PF (сентябрь 2006 г.). «Взгляд на каталитические механизмы фенилаланина и триптофангидроксилазы с помощью кинетических изотопных эффектов при ароматическом гидроксилировании». Биохимия . 45 (36): 11030–7. doi :10.1021/bi0607554. PMC 1945167. PMID  16953590 . 
  13. ^ abcdefghij Flatmark T, Stevens RC (август 1999). «Структурный анализ гидроксилаз ароматических аминокислот и их мутантных форм, связанных с заболеваниями». Chemical Reviews . 99 (8): 2137–2160. doi :10.1021/cr980450y. PMID  11849022.
  14. ^ Selwood T, Jaffe EK (март 2012). «Динамические диссоциирующие гомоолигомеры и контроль функции белка». Архивы биохимии и биофизики . 519 (2): 131–43. doi :10.1016/j.abb.2011.11.020. PMC 3298769. PMID 22182754  . 
  15. ^ abc Jaffe EK, Stith L, Lawrence SH, Andrake M, Dunbrack RL (февраль 2013 г.). «Новая модель аллостерической регуляции фенилаланингидроксилазы: последствия для болезней и терапии». Архивы биохимии и биофизики . 530 (2): 73–82. doi :10.1016/j.abb.2012.12.017. PMC 3580015. PMID 23296088  . 
  16. ^ Arturo EC, Gupta K, Héroux A, Stith L, Cross PJ, Parker EJ и др. (март 2016 г.). «Первая структура полноразмерной фенилаланингидроксилазы млекопитающих раскрывает архитектуру аутоингибируемого тетрамера». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 113 (9): 2394–9. Bibcode : 2016PNAS..113.2394A. doi : 10.1073 /pnas.1516967113 . PMC 4780608. PMID  26884182. 
  17. ^ Jaffe EK (август 2017 г.). «Новые структуры белков обеспечивают обновленное понимание фенилкетонурии». Молекулярная генетика и метаболизм . 121 (4): 289–296. doi :10.1016/j.ymgme.2017.06.005. PMC 5549558. PMID 28645531  . 
  18. ^ Patel D, Kopec J, Fitzpatrick F, McCorvie TJ, Yue WW (апрель 2016 г.). "Структурная основа лиганд-зависимой димеризации регуляторного домена фенилаланингидроксилазы". Scientific Reports . 6 (1): 23748. Bibcode :2016NatSR...623748P. doi :10.1038/srep23748. PMC 4822156 . PMID  27049649. 
  19. ^ Meisburger SP, Taylor AB, Khan CA, Zhang S, Fitzpatrick PF, Ando N (май 2016 г.). «Движения доменов при активации фенилаланингидроксилазы, характеризуемые кристаллографией и хроматографически-связанным малоугловым рентгеновским рассеянием». Журнал Американского химического общества . 138 (20): 6506–16. doi :10.1021/jacs.6b01563. PMC 4896396. PMID  27145334 . 
  20. ^ ab Erlandsen H, Fusetti F, Martinez A, Hough E, Flatmark T, Stevens RC (декабрь 1997 г.). «Кристаллическая структура каталитического домена человеческой фенилаланингидроксилазы раскрывает структурную основу фенилкетонурии». Nature Structural Biology . 4 (12): 995–1000. doi :10.1038/nsb1297-995. PMID  9406548. S2CID  6293946.
  21. ^ Andersen OA, Flatmark T, Hough E (июль 2002 г.). «Кристаллическая структура тройного комплекса каталитического домена человеческой фенилаланингидроксилазы с тетрагидробиоптерином и 3-(2-тиенил)-L-аланином и ее влияние на механизм катализа и активации субстрата». Журнал молекулярной биологии . 320 (5): 1095–108. doi :10.1016/S0022-2836(02)00560-0. PMID  12126628.
  22. ^ Teigen K, Frøystein NA, Martínez A (декабрь 1999 г.). «Структурная основа распознавания кофакторов фенилаланина и птерина фенилаланингидроксилазой: последствия для каталитического механизма». Журнал молекулярной биологии . 294 (3): 807–23. doi :10.1006/jmbi.1999.3288. PMID  10610798.
  23. ^ ab Li J, Dangott LJ, Fitzpatrick PF (апрель 2010 г.). «Регулирование фенилаланингидроксилазы: конформационные изменения при связывании фенилаланина, обнаруженные с помощью обмена водорода/дейтерия и масс-спектрометрии». Биохимия . 49 (15): 3327–35. doi :10.1021/bi1001294. PMC 2855537. PMID  20307070 . 
  24. ^ Li J, Ilangovan U, Daubner SC, Hinck AP, Fitzpatrick PF (январь 2011 г.). «Прямое доказательство наличия сайта фенилаланина в регуляторном домене фенилаланингидроксилазы». Архивы биохимии и биофизики . 505 (2): 250–5. doi :10.1016/j.abb.2010.10.009. PMC 3019263. PMID  20951114 . 
  25. ^ abc Kobe B, Jennings IG, House CM, Michell BJ, Goodwill KE, Santarsiero BD и др. (май 1999 г.). «Структурная основа ауторегуляции фенилаланингидроксилазы». Nature Structural Biology . 6 (5): 442–8. ​​doi :10.1038/8247. PMID  10331871. S2CID  11709986.
  26. ^ Daubner SC, Hillas PJ, Fitzpatrick PF (декабрь 1997 г.). «Экспрессия и характеристика каталитического домена человеческой фенилаланингидроксилазы». Архивы биохимии и биофизики . 348 (2): 295–302. doi :10.1006/abbi.1997.0435. PMID  9434741.
  27. ^ ab Bjørgo E, de Carvalho RM, Flatmark T (февраль 2001 г.). "Сравнение кинетических и регуляторных свойств тетрамерных и димерных форм дикого типа и мутантной человеческой фенилаланингидроксилазы Thr427→Pro: вклад гибкой шарнирной области Asp425-Gln429 в тетрамеризацию и кооперативное связывание субстрата". European Journal of Biochemistry . 268 (4): 997–1005. doi :10.1046/j.1432-1327.2001.01958.x. PMID  11179966.
  28. ^ abcd Кауфман С (март 1999). "Модель метаболизма фенилаланина у человека у нормальных субъектов и у пациентов с фенилкетонурией". Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 96 (6): 3160–4. Bibcode : 1999PNAS...96.3160K. doi : 10.1073 /pnas.96.6.3160 . PMC 15912. PMID  10077654. 
  29. ^ Lichter-Konecki U, Hipke CM, Konecki DS (август 1999). «Экспрессия гена фенилаланингидроксилазы человека в почках и других негепатических тканях». Молекулярная генетика и метаболизм . 67 (4): 308–16. doi :10.1006/mgme.1999.2880. PMID  10444341.
  30. ^ Muntau AC, Gersting SW (декабрь 2010 г.). «Фенилкетонурия как модель для заболеваний, связанных с неправильным сворачиванием белков, и для разработки орфанных препаратов следующего поколения для пациентов с врожденными нарушениями метаболизма». Журнал наследственных метаболических заболеваний . 33 (6): 649–58. doi :10.1007/s10545-010-9185-4. PMID  20824346. S2CID  20843095.
  31. ^ abc Singh K, Cornell CS, Jackson R, Kabiri M, Phipps M, Desai M и др. (март 2021 г.). «CRISPR/Cas9 сгенерировал нокаутных мышей с отсутствием белка фенилаланингидроксилазы как новую доклиническую модель фенилкетонурии у человека». Scientific Reports . 11 (1): 7254. doi :10.1038/s41598-021-86663-8. PMC 8012645 . PMID  33790381. 
  32. ^ «Информационный бюллетень о мышах с нокаутом». Genome.gov .
  33. ^ "PAH фенилаланингидроксилаза [Homo sapiens (человек)] - Ген - NCBI". www.ncbi.nlm.nih.gov .

Дальнейшее чтение

Дальнейшее чтение

Внешние ссылки