В клеточной биологии фокальные адгезии (также клеточно-матриксные адгезии или FA ) представляют собой крупные макромолекулярные сборки , посредством которых механическая сила и регуляторные сигналы передаются между внеклеточным матриксом (ECM) и взаимодействующей клеткой . Точнее, фокальные адгезии представляют собой субклеточные структуры, которые опосредуют регуляторные эффекты (т. е. сигнальные события) клетки в ответ на адгезию ECM. [1]
Фокальные адгезии служат механическими связями с ВКМ, а также биохимическим сигнальным узлом для концентрации и направления многочисленных сигнальных белков в места связывания и кластеризации интегринов .
Фокальные адгезии представляют собой содержащие интегрин мультибелковые структуры, которые образуют механические связи между внутриклеточными актиновыми пучками и внеклеточным субстратом во многих типах клеток. Фокальные адгезии представляют собой крупные динамические белковые комплексы , посредством которых цитоскелет клетки соединяется с ECM. Они ограничены четко определенными диапазонами клетки, в которых плазматическая мембрана закрывается на расстоянии 15 нм от субстрата ECM. [2] Фокальные адгезии находятся в состоянии постоянного потока: белки постоянно ассоциируются и диссоциируют с ней, поскольку сигналы передаются в другие части клетки, касающиеся чего угодно, от подвижности клеток до клеточного цикла . Фокальные адгезии могут содержать более 100 различных белков, что предполагает значительное функциональное разнообразие. [3] Они не только закрепляют клетку, но и выполняют функцию носителей сигналов (сенсоров), которые информируют клетку о состоянии ECM и, таким образом, влияют на ее поведение. [4] В сидячих клетках фокальные спайки довольно стабильны в нормальных условиях, тогда как в движущихся клетках их стабильность снижается: это происходит потому, что в подвижных клетках фокальные спайки постоянно собираются и разбираются, поскольку клетка устанавливает новые контакты на переднем крае и разрывает старые контакты на заднем крае клетки. Одним из примеров их важной роли является иммунная система , в которой белые кровяные клетки мигрируют вдоль соединительного эндотелия, следуя клеточным сигналам к поврежденной биологической ткани .
Связь между фокальными адгезиями и белками внеклеточного матрикса обычно включает интегрины . Интегрины связываются с внеклеточными белками через короткие аминокислотные последовательности, такие как мотив RGD (встречается в таких белках, как фибронектин , ламинин или витронектин ), или мотивы DGEA и GFOGER, обнаруженные в коллагене . Интегрины представляют собой гетеродимеры , которые образованы из одной бета- и одной альфа-субъединицы. Эти субъединицы присутствуют в разных формах, их соответствующие лиганды классифицируют эти рецепторы на четыре группы: рецепторы RGD, рецепторы ламинина, лейкоцитарно-специфические рецепторы и коллагеновые рецепторы. Внутри клетки внутриклеточный домен интегрина связывается с цитоскелетом через адаптерные белки, такие как талин , α-актинин , филамин , винкулин и тензин . Многие другие внутриклеточные сигнальные белки, такие как киназа фокальной адгезии , связываются и ассоциируются с этим комплексом интегрин-адаптерный белок-цитоскелет, и это формирует основу фокальной адгезии.
Динамическая сборка и разборка фокальных адгезий играет центральную роль в миграции клеток . Во время миграции клеток изменяются как состав, так и морфология фокальной адгезии. Первоначально небольшие (0,25 мкм2 ) фокальные адгезии, называемые фокальными комплексами (ФК), образуются на переднем крае клетки в ламеллоподиях : они состоят из интегрина и некоторых адаптерных белков, таких как талин , паксиллин и тензин . Многие из этих фокальных комплексов не созревают и разбираются по мере удаления ламеллоподий. Однако некоторые фокальные комплексы созревают в более крупные и стабильные фокальные адгезии и рекрутируют гораздо больше белков, таких как зиксин . Рекрутирование компонентов в фокальную адгезию происходит упорядоченным, последовательным образом. [5] Оказавшись на месте, фокальная адгезия остается неподвижной по отношению к внеклеточному матриксу, и клетка использует это как якорь, на котором она может толкать или тянуть себя через ВКМ. По мере продвижения клетки по выбранному пути заданная фокальная адгезия перемещается все ближе и ближе к заднему краю клетки. На заднем крае клетки фокальная адгезия должна раствориться. Механизм этого плохо изучен и, вероятно, инициируется различными методами в зависимости от обстоятельств клетки. Одна из возможностей заключается в том, что задействована кальций-зависимая протеаза кальпаин : было показано, что ингибирование кальпаина приводит к ингибированию разделения фокальной адгезии и ВКМ. Компоненты фокальной адгезии входят в число известных субстратов кальпаина, и возможно, что кальпаин разрушает эти компоненты, способствуя разборке фокальной адгезии [6]
Сборка зарождающихся фокальных адгезий в значительной степени зависит от процесса ретроградного потока актина. Это явление в мигрирующей клетке, где актиновые нити полимеризуются на переднем крае и текут обратно к телу клетки. Это источник тяги, необходимой для миграции; фокальная адгезия действует как молекулярная муфта, когда она привязывается к ВКМ и препятствует ретроградному движению актина, тем самым создавая тяговую (тяговую) силу в месте адгезии, которая необходима для движения клетки вперед. Эту тягу можно визуализировать с помощью микроскопии тяговой силы . Распространенной метафорой для объяснения ретроградного потока актина является большое количество людей, которых смывает течением реки, и при этом некоторые из них цепляются за камни и ветки вдоль берега, чтобы остановить свое движение вниз по течению. Таким образом, на камень или ветку, на которых они висят, создается тяговая сила. Эти силы необходимы для успешной сборки, роста и созревания фокальных адгезий. [7]
Внеклеточные механические силы, которые оказываются через фокальные спайки, могут активировать Src-киназу и стимулировать рост спаек. Это указывает на то, что фокальные спайки могут функционировать как механические датчики, и предполагает, что сила, генерируемая миозиновыми волокнами, может способствовать созреванию фокальных комплексов. [8] Это получает дополнительную поддержку из того факта, что ингибирование сил, генерируемых миозином, приводит к медленному разбору фокальных спайков, изменяя кинетику оборота белков фокальной адгезии. [9]
Однако связь между силами, действующими на фокальные спайки, и их композиционным созреванием остается неясной. Например, предотвращение созревания фокальных спайков путем ингибирования активности миозина или сборки стрессовых волокон не предотвращает силы, поддерживаемые фокальными спайками, и не препятствует миграции клеток. [10] [11] Таким образом, распространение силы через фокальные спайки может не ощущаться клетками напрямую во все времена и при всех масштабах силы.
Их роль в механосенсорике важна для дуротаксиса .