Кодирующая область гена , также известная как кодирующая последовательность ДНК ( CDS ), представляет собой часть ДНК или РНК гена , которая кодирует белок . [1] Изучение длины, состава, регуляции, сплайсинга, структур и функций кодирующих областей по сравнению с некодирующими областями у разных видов и в разные периоды времени может предоставить значительный объем важной информации относительно организации генов и эволюции прокариот и эукариот . [2] Это может дополнительно помочь в картировании генома человека и разработке генной терапии. [3]
Хотя этот термин иногда используется взаимозаменяемо с экзоном , это не совсем одно и то же: экзон состоит из кодирующей области, а также 3' и 5' нетранслируемых областей РНК, и поэтому экзон будет частично состоять из кодирующих областей. 3' и 5' нетранслируемые области РНК, которые не кодируют белок, называются некодирующими областями и не обсуждаются на этой странице. [4]
Часто возникает путаница между кодирующими областями и экзомами , и между этими терминами существует четкое различие. В то время как экзом относится ко всем экзонам в геноме, кодирующий регион относится к единственному участку ДНК или РНК, который кодирует определенный вид белка.
В 1978 году Уолтер Гилберт опубликовал статью «Почему гены по частям», в которой впервые начала изучаться идея о том, что ген представляет собой мозаику — что каждая полная цепочка нуклеиновой кислоты не кодируется непрерывно, а прерывается «молчаливыми» некодирующими областями. Это было первым указанием на необходимость проведения различия между частями генома, которые кодируют белок, теперь называемыми кодирующими областями, и теми, которые этого не делают. [5]
Данные свидетельствуют о том, что существует общая взаимозависимость между моделями состава оснований и доступностью кодирующей области. [6] Предполагается, что кодирующая область содержит более высокое содержание GC , чем некодирующие области. Существуют дополнительные исследования, которые обнаружили, что чем длиннее кодирующая цепь, тем выше содержание GC. Короткие кодирующие цепи сравнительно бедны GC, подобно низкому содержанию GC в трансляционных стоп-кодонах состава оснований, таких как TAG, TAA и TGA. [7]
Области, богатые GC, также являются местами, где тип точечных мутаций немного изменен: больше переходов , которые являются изменениями с пурина на пурин или с пиримидина на пиримидин, по сравнению с трансверсиями , которые являются изменениями с пурина на пиримидин или с пиримидина на пурин. Переходы с меньшей вероятностью изменят кодируемую аминокислоту и останутся молчаливой мутацией (особенно если они происходят в третьем нуклеотиде кодона), что обычно полезно для организма во время трансляции и образования белка. [8]
Это указывает на то, что основные кодирующие регионы (богатые генами) имеют более высокое содержание GC и более стабильны и устойчивы к мутациям по сравнению с дополнительными и неосновными регионами (бедными генами). [9] Однако до сих пор неясно, произошло ли это посредством нейтральной и случайной мутации или посредством модели отбора . [10] Также ведутся споры о том, являются ли методы, используемые для установления связи между содержанием GC и кодирующей областью, точными и беспристрастными. [11]
В ДНК кодирующая область фланкирована последовательностью промотора на 5'-конце цепи матрицы и последовательностью терминации на 3'-конце. Во время транскрипции РНК -полимераза (РНКП) связывается с последовательностью промотора и перемещается вдоль цепи матрицы к кодирующей области. Затем РНКП добавляет нуклеотиды РНК , комплементарные кодирующей области, для формирования мРНК , заменяя урацил на тимин . [12] Это продолжается до тех пор, пока РНКП не достигнет последовательности терминации. [12]
После транскрипции и созревания образовавшаяся зрелая мРНК включает в себя несколько частей, важных для ее конечной трансляции в белок . Кодирующая область в мРНК фланкирована 5'-нетранслируемой областью (5'-UTR) и 3'-нетранслируемой областью (3'-UTR), [1] 5' -кэпом и поли-А-хвостом . Во время трансляции рибосома облегчает присоединение тРНК к кодирующей области, по 3 нуклеотида за раз ( кодоны ). [13] ТРНК переносят связанные с ними аминокислоты в растущую полипептидную цепь, в конечном итоге образуя белок, определенный в исходной кодирующей области ДНК.
Кодирующую область можно модифицировать с целью регулирования экспрессии генов.
Алкилирование является одной из форм регуляции кодирующей области. [15] Ген, который должен был быть транскрибирован, может быть заглушен путем нацеливания на определенную последовательность. Основания в этой последовательности будут заблокированы с помощью алкильных групп , которые создают эффект заглушения . [16]
В то время как регуляция экспрессии генов управляет обилием РНК или белка, производимых в клетке, регуляция этих механизмов может контролироваться регуляторной последовательностью, обнаруженной до начала открытой рамки считывания в цепи ДНК. Регуляторная последовательность затем определит место и время, когда экспрессия будет происходить для области кодирования белка. [17]
Сплайсинг РНК в конечном итоге определяет, какая часть последовательности будет транслироваться и экспрессироваться, и этот процесс включает вырезание интронов и сборку экзонов. Однако то, где РНК- сплайсосома разрезает, определяется распознаванием сайтов сплайсинга , в частности сайта сплайсинга 5', который является одним из субстратов для первого шага сплайсинга. [18] Кодирующие области находятся внутри экзонов, которые ковалентно соединяются вместе, образуя зрелую информационную РНК .
Мутации в кодирующей области могут иметь самые разные эффекты на фенотип организма. В то время как некоторые мутации в этой области ДНК/РНК могут приводить к полезным изменениям, другие могут быть вредными и иногда даже смертельными для выживания организма. Напротив, изменения в некодирующей области не всегда могут приводить к обнаруживаемым изменениям в фенотипе.
Существуют различные формы мутаций, которые могут происходить в кодирующих областях. Одна из форм — молчаливые мутации , при которых изменение нуклеотидов не приводит к изменению аминокислоты после транскрипции и трансляции. [20] Существуют также бессмысленные мутации , при которых изменения оснований в кодирующей области кодируют преждевременный стоп-кодон, производя более короткий конечный белок. Точечные мутации , или изменения одной пары оснований в кодирующей области, которые кодируют различные аминокислоты во время трансляции, называются миссенс-мутациями . Другие типы мутаций включают мутации со сдвигом рамки считывания, такие как вставки или делеции . [20]
Некоторые формы мутаций являются наследственными ( мутации зародышевой линии ) или передаются от родителя к потомству. [21] Такие мутировавшие кодирующие области присутствуют во всех клетках организма. Другие формы мутаций приобретаются ( соматические мутации ) в течение жизни организма и могут не быть постоянными от клетки к клетке. [21] Эти изменения могут быть вызваны мутагенами , канцерогенами или другими агентами окружающей среды (например, УФ ). Приобретенные мутации также могут быть результатом ошибок копирования во время репликации ДНК и не передаются потомству. Изменения в кодирующей области также могут быть de novo (новыми); считается, что такие изменения происходят вскоре после оплодотворения , в результате чего мутация присутствует в ДНК потомства, но отсутствует как в сперматозоидах, так и в яйцеклетках. [21]
Существуют множественные механизмы транскрипции и трансляции для предотвращения летальности из-за вредных мутаций в кодирующей области. Такие меры включают в себя проверку некоторыми ДНК-полимеразами во время репликации, исправление несоответствий после репликации [22] и « гипотезу колебания », которая описывает вырождение третьего основания в кодоне мРНК. [23]
Хотя хорошо известно, что геном одного человека может иметь значительные различия по сравнению с геномом другого, недавние исследования показали, что некоторые кодирующие регионы сильно ограничены или устойчивы к мутациям между особями одного вида. Это похоже на концепцию межвидового ограничения в консервативных последовательностях . Исследователи назвали эти сильно ограниченные последовательности ограниченными кодирующими регионами (CCR), и также обнаружили, что такие регионы могут быть вовлечены в высокоочищающий отбор . В среднем на каждые 7 кодирующих оснований приходится приблизительно 1 мутация, изменяющая белок, но некоторые CCR могут иметь более 100 оснований в последовательности без наблюдаемых мутаций, изменяющих белок, некоторые даже без синонимичных мутаций. [24] Эти модели ограничений между геномами могут дать подсказки об источниках редких заболеваний развития или потенциально даже эмбриональной летальности. Клинически подтвержденные варианты и мутации de novo в CCR ранее были связаны с такими расстройствами, как детская эпилептическая энцефалопатия , задержка развития и тяжелые заболевания сердца. [24]
В то время как идентификация открытых рамок считывания в последовательности ДНК проста, идентификация кодирующих последовательностей не так проста, поскольку клетка транслирует только подмножество всех открытых рамок считывания в белки. [26] В настоящее время прогнозирование CDS использует отбор проб и секвенирование мРНК из клеток, хотя все еще существует проблема определения того, какие части данной мРНК фактически транслируются в белок. Прогнозирование CDS является подмножеством прогнозирования генов , причем последнее также включает прогнозирование последовательностей ДНК, которые кодируют не только белок, но и другие функциональные элементы, такие как гены РНК и регуляторные последовательности.
Как у прокариот , так и у эукариот перекрытие генов происходит относительно часто как у ДНК-, так и у РНК-вирусов как эволюционное преимущество для уменьшения размера генома при сохранении способности производить различные белки из доступных кодирующих областей. [27] [28] Как для ДНК, так и для РНК парное выравнивание может обнаружить перекрывающиеся кодирующие области, включая короткие открытые рамки считывания в вирусах, но для сравнения потенциально перекрывающейся кодирующей цепи с известной кодирующей цепью потребуется известная кодирующая цепь. [29] Альтернативный метод, использующий последовательности одного генома, не потребует нескольких геномных последовательностей для выполнения сравнений, но для обеспечения чувствительности потребуется перекрытие не менее 50 нуклеотидов. [30]
{{cite book}}
: |journal=
проигнорировано ( помощь ){{citation}}
: CS1 maint: числовые имена: список авторов ( ссылка )