Специализированные проразрешающие медиаторы ( СПМ , также называемые специализированными проразрешающими медиаторами ) представляют собой большой и растущий класс молекул клеточной сигнализации , образующихся в клетках в результате метаболизма полиненасыщенных жирных кислот (ПНЖК) одним или комбинацией ферментов липоксигеназы , циклооксигеназы и цитохрома P450 монооксигеназы. Доклинические исследования , в первую очередь на животных моделях и человеческих тканях, указывают на участие СПМ в организации разрешения воспаления . [1] [2] [3] Известные члены включают резольвины и протектины .
СПМ присоединяются к длинному списку других физиологических агентов, которые имеют тенденцию ограничивать воспаление (см. Воспаление § Разрешение ), включая глюкокортикоиды , интерлейкин 10 (противовоспалительный цитокин), антагонист рецептора интерлейкина 1 (ингибитор действия провоспалительного цитокина, интерлейкина 1 ), аннексин А1 (ингибитор образования провоспалительных метаболитов полиненасыщенных жирных кислот и газообразных резольвинов, оксида углерода (см. Оксид углерода § Физиология ), оксида азота (см. Оксид азота § Биологические функции ) и сероводорода (см. Сероводород §§ Биосинтез и Сигнальная роль ). [4] [5]
Абсолютная и относительная роль СПМ наряду с другими физиологическими противовоспалительными агентами в разрешении воспалительных реакций человека еще не определена точно. Однако исследования показывают, что синтетические СПМ, устойчивые к метаболической инактивации, обещают быть клинически полезными фармакологическими инструментами для предотвращения и разрешения широкого спектра патологических воспалительных реакций наряду с разрушением тканей и заболеваемостью, которые эти реакции вызывают. На основании исследований на животных моделях, воспалительные заболевания, которые можно лечить такими метаболически резистентными аналогами СПМ, включают не только патологические и повреждающие ткани реакции на вторгающиеся патогены, но и широкий спектр патологических состояний, при которых воспаление является способствующим фактором, такие как аллергические воспалительные заболевания (например, астма , ринит ), аутоиммунные заболевания (например, ревматоидный артрит , системная красная волчанка ), псориаз , атеросклероз , приводящий к сердечным приступам и инсультам , диабет 1-го и 2-го типов , метаболический синдром и некоторые синдромы деменции (например, болезнь Альцгеймера , болезнь Хантингтона ). [1] [2] [3]
Многие из СПМ являются метаболитами жирных кислот омега-3 и, как предполагается, отвечают за противовоспалительное действие, которое приписывается рациону питания, богатому жирными кислотами омега-3. [6]
На протяжении большей части раннего периода изучения острые воспалительные реакции рассматривались как самоограничивающиеся врожденные реакции иммунной системы на вторжение чужеродных организмов, повреждения тканей и другие оскорбления. Эти реакции были организованы различными растворимыми сигнальными агентами, такими как a) N-формилированные олигопептидные хемотаксические факторы, полученные из чужеродных организмов (например, N-формилметионин-лейцил-фенилаланин ); b) компоненты комплемента C5a и C3a , которые являются хемотаксическими факторами, образующимися во время активации системы комплемента крови хозяина вторжением организмов или поврежденными тканями; и c) провоспалительные цитокины, полученные из клеток хозяина (например, интерлейкин 1s ), провоспалительные хемокины, полученные из клеток хозяина (например, CXCL8 , CCL2 , CCL3 , CCL4 , CCL5 , CCL11 , CXCL10 ), фактор активации тромбоцитов и метаболиты ПНЖК, включая, в частности, лейкотриены (например, LTB4 ), гидроксиэйкозатетраеновые кислоты (например, 5-HETE , 12-HETE ), гидроксилированную гептадекатриеновую кислоту, 12-HHT и оксоэйкозаноиды (например, 5-оксо-ETE ). Эти агенты функционировали как провоспалительные сигналы , увеличивая проницаемость местных кровеносных сосудов; активируя провоспалительные клетки, связанные с тканями, такие как тучные клетки и макрофаги ; и привлекая к зарождающимся воспалительным участкам и активируя циркулирующие нейтрофилы , моноциты , эозинофилы , гамма-дельта-Т-клетки и естественные киллерные Т-клетки . Затем указанные клетки нейтрализовали вторгающиеся организмы, ограничивали повреждение тканей и инициировали восстановление тканей. Следовательно, классический воспалительный ответ рассматривался как полностью регулируемый растворимыми сигнальными агентами. То есть агенты формировались, организовывали воспалительный клеточный ответ, но затем рассеивались, позволяя разрешить ответ. [7] Однако в 1974 году Чарльз Н. Серхан , Матс Хамберг и Бенгт Самуэльссон обнаружили, что человеческие нейтрофилы метаболизируют арахидоновую кислоту в два новых продукта, которые содержат 3 гидроксильных остатка и 4 двойные связиа именно, 5,6,15-тригидрокси-7,9,11,13-икозатетраеновая кислота и 5,14,15-тригидрокси-6,8,10,12-икозатетраеновая кислота. [8] [9] Эти продукты теперь называются липоксином А4 и В4 соответственно. Хотя изначально было обнаружено, что они обладают активностью in vitro, предполагающей, что они могут действовать как провоспалительные агенты, Серхан и коллеги, а также другие группы обнаружили, что липоксины, а также большое количество недавно открытых метаболитов других ПНЖК обладают в первую очередь, если не исключительно, противовоспалительной активностью и, следовательно, могут иметь решающее значение для разрешения воспаления. С этой точки зрения, воспалительные реакции не являются самоограничивающимися, а скорее ограничиваются образованием определенной группы метаболитов ПНЖК, которые противодействуют действию провоспалительных сигналов. [10] Позднее эти метаболиты ПНЖК были классифицированы вместе и названы специализированными проразрешающими медиаторами (т. е. СПМ). [11]
Производство и активность SPM предполагают новый взгляд на воспаление, в котором первоначальный ответ на чужеродные организмы, повреждение тканей или другие повреждения включает в себя многочисленные растворимые сигнальные молекулы клеток, которые не только привлекают различные типы клеток для содействия воспалению, но и одновременно заставляют эти клетки производить SPM, которые дают обратную связь своим родительским и другим клеткам, чтобы ослабить их провоспалительную активность и способствовать восстановлению. Разрешение воспалительной реакции, таким образом, является активным, а не самоограничивающимся процессом, который приводится в движение, по крайней мере частично, инициирующими провоспалительными медиаторами (например, простагландином E2 и простагландином D2 ), которые инструктируют соответствующие клетки производить SPM и принимать более противовоспалительный фенотип. Разрешение нормальной воспалительной реакции, таким образом, может включать переключение производства провоспалительных на противовоспалительные метаболиты ПНЖК. Чрезмерные воспалительные реакции на инсульт, а также многие патологические воспалительные реакции, которые способствуют различным заболеваниям, таким как атеросклероз , ожирение , диабет , болезнь Альцгеймера , воспалительное заболевание кишечника и т. д. (см. Воспаление § Расстройства ), могут отчасти отражать сбой в этом переключении классов. Заболевания, вызванные или усугубленные неадаптивными воспалительными реакциями, могут поддаваться лечению с помощью СПМ или синтетических СПМ, которые, в отличие от природных СПМ, устойчивы к метаболической инактивации in vivo. [12] [2] [13] [14] СПМ обладают перекрывающимися видами деятельности, которые работают над устранением воспаления. СПМ (обычно более одного для каждого перечисленного действия) обладают следующими противовоспалительными видами деятельности на указанных типах клеток, как определено в исследованиях на животных и людях: [1] [15] [16] [17]
СПМ также стимулируют противовоспалительные и репаративные типы реакций в эпителиальных клетках, эндотелиальных клетках, фибробластах , гладкомышечных клетках, остеокластах , остеобластах , бокаловидных клетках и почечных подоцитах [1], а также активируют систему гемоксигеназы клеток, тем самым увеличивая выработку защитного для тканей газотрансмиттера — окиси углерода (см. Окись углерода § Физиология ) в воспаленных тканях. [18]
SPM являются метаболитами арахидоновой кислоты (AA), эйкозапентаеновой кислоты (EPA), докозагексаеновой кислоты (DHA) или n −3 DPA (т. е. 7 Z ,10 Z ,13 Z ,16 Z ,19 Z - докозапентаеновая кислота или клупанодоновая кислота); эти метаболиты называются липоксинами (Lx), резольвинами (Rv), протектинами (PD) (также называемыми нейропротектинами [NP]) и марезинами (MaR). EPA, DHA и n −3 DPA являются n −3 жирными кислотами; их превращения в SPM предположительно являются одним из механизмов, посредством которого n −3 жирные кислоты могут облегчать воспалительные заболевания (см. Омега-3 жирные кислоты § Воспаление ). [19] СПМ действуют, по крайней мере частично, либо активируя, либо ингибируя клетки посредством связывания с определенными клеточными рецепторами и, таким образом, активируя или ингибируя их активацию .
Клетки человека синтезируют LxA4 и LxB4 путем последовательного метаболизма арахидоновой кислоты (5 Z ,8 Z ,11 Z ,14 Z -эйкозатетраеновой кислоты) с a) ALOX15 (или, возможно, ALOX15B ) с последующим ALOX5 ; b) ALOX5 с последующим ALOX15 (или, возможно, ALOX15B); или c) ALOX5 с последующим ALOX12 . Клетки и, действительно, люди, обработанные аспирином, образуют 15 R -гидрокси эпимерные липоксины этих двух 15 S -липоксинов, а именно, 15-epi-LXA4 и 15-epi-LXB4, через путь, который включает ALOX5 с последующей обработанной аспирином циклооксигеназой-2 (COX-2). Обработанный аспирином COX-2, хотя и неактивен в метаболизме арахидоновой кислоты в простаноиды , метаболизирует эту ПНЖК в 15 R -гидроперокси-эйкозатетраеновую кислоту, тогда как путь ALOX15 (или ALOX15B) метаболизирует арахидоновую кислоту в 15 S -гидроперокси-эйкозатетраеновую кислоту. Два аспирин-активируемых липоксина (AT-липоксины) или эпи-липоксины структурно отличаются от LxA4 и LxB4 только хиральностью S против R их 15-гидроксильного остатка. Многочисленные исследования показали, что эти метаболиты обладают мощной противовоспалительной активностью in vitro и в животных моделях, а у людей могут стимулировать клетки, связываясь с определенными рецепторами на этих клетках. [13] [20] [21] В следующей таблице перечислены структурные формулы (ETE обозначает эйкозатетраеновую кислоту), основные виды активности и целевые клеточные рецепторы (если известны).
Резолвины являются метаболитами омега-3 жирных кислот , EPA, DHA и 7 Z ,10 Z ,13 Z ,16 Z ,19 Z -докозапентаеновой кислоты ( n -3 DPA). Все три эти омега-3 жирные кислоты в изобилии содержатся в морской рыбе, рыбьем жире и других морепродуктах. [19] n -3 DPA (также называемая клупанодоновой кислотой) следует отличать от ее изомера n -6 DPA, то есть 4 Z ,7 Z ,10 Z ,13 Z ,16 Z -докозапентаеновой кислоты, также называемой осбондовой кислотой.
Клетки метаболизируют ЭПК (5 Z ,8 Z ,11 Z ,14 Z ,17 Z -эйкозапентаеновую кислоту) с помощью цитохрома P450 монооксигеназы (монооксигеназ) (в инфицированных тканях бактериальный цитохром P450 может обеспечивать эту активность) или обработанной аспирином циклооксигеназы-2 до 18 R -гидроперокси-ЭПК, которая затем восстанавливается до 18 R -гидрокси-ЭПК и далее метаболизируется ALOX5 до 5 S -гидроперокси-18 R -гидрокси-ЭПК; последний продукт может восстанавливаться до своего 5,18-дигидрокси продукта, RvE2, или преобразовываться в свой 5,6-эпоксид и затем подвергаться воздействию эпоксидгидролазы с образованием 5,12,18-тригидроксипроизводного, RvE1. In vitro ALOX5 может преобразовывать 18 S -HETE в 18 S аналог RvE1, называемый 18 S -RvE1. 18 R -HETE или 18 S -HETE также могут метаболизироваться ALOX15 до его 17 S -гидроперокси, а затем восстанавливаться до его 17 S -гидрокси продукта, Rv3. Rv3, как обнаружено в исследованиях in vitro, представляет собой дигидроксисмесь 18 S -дигидрокси (т. е. 18 S -RvE3) и 18 R -дигидрокси (т. е. 18 R -RvE3) изомеров, оба из которых, подобно другим вышеупомянутым метаболитам, обладают мощной активностью SPM в in vitro и/или животных моделях. [24] [25] [26] Исследования in vitro показывают, что ALOX5 может преобразовывать 18 S -гидроперокси-EPA в 18 S -гидрокси аналог RvE2, называемый 18 S -RvE2. 18 S -RvE2, однако, имеет небольшую или не имеет никакой активности SPM [26] и поэтому не считается здесь SPM. В следующей таблице перечислены структурные формулы (EPA означает эйкозапентаеновую кислоту), основные виды активности и мишени клеточных рецепторов (где известны).
Клетки метаболизируют DHA (4 Z ,7 Z ,10 Z ,13 Z ,16 Z ,19 Z -докозагексаеновая кислота) либо ALOX15, либо цитохром P450 монооксигеназой(ами) (бактерии могут обеспечивать активность цитохрома P450 в инфицированных тканях) или обработанной аспирином циклооксигеназой-2 до 17 S -гидроперокси-DHA, которая восстанавливается до 17 S -гидрокси-DHA. ALOX5 метаболизирует это промежуточное соединение до a) 7 S -гидроперокси,17 S -гидрокси-DHA, которая затем восстанавливается до своего 7 S ,17 S -дигидрокси-аналога, RvD5; b) 4 S -гидроперокси,17 S -гидрокси-DHA, которая восстанавливается до своего 4 S ,17 S -дигидрокси-аналога, RvD6; c) 7 S ,8 S -эпокси-17 S -DHA, который затем гидролизуется до 7,8,17-тригидрокси и 7,16,17-тригидрокси продуктов, RvD1 и RvD2, соответственно; и d) 4 S ,5 S -эпокси-17 S -DHA, который затем гидролизуется до 4,11,17-тригидрокси и 4,5,17-тригидрокси продуктов, RvD3 и RvD4, соответственно. Эти шесть RvD обладают остатком 17 S -гидрокси; Однако, если аспирин-обработанная циклооксигеназа-2 является инициирующим ферментом, они содержат 17 R -гидрокси остаток и называются 17 R -RvD, аспирин-триггерными RvD или AT-RvD 1 по 6. В некоторых случаях окончательные структуры этих AT-RvD предполагаются по аналогии со структурами их аналогов RvD. Исследования показали, что большинство (и, предположительно, все) из этих метаболитов обладают мощной противовоспалительной активностью in vitro и/или в животных моделях. [23] [24] [25] [30] В следующей таблице перечислены структурные формулы, основные виды активности с цитатами и клеточные рецепторные мишени резольвинов серии D.
n −3 DPA (т.е. 7 Z ,10 Z ,13 Z ,16 Z ,19 Z -докозапентаеновая кислота)-производные резольвины недавно идентифицированы как SPM. В модельной системе, используемой для их идентификации, человеческие тромбоциты, предварительно обработанные аспирином для образования ацетилированного COX-2 или статином , аторвастатином , для образования S -нитрозилированного COX-2, тем самым изменяют активность этого фермента. Модифицированный фермент метаболизирует n −3 DPA в промежуточный продукт 13 R -гидроперокси-n−3 DPA, который передается близлежащим человеческим нейтрофилам ; затем эти клетки метаболизируют промежуточный продукт в четыре полигидроксильных метаболита , называемых резольвином T1 (RvT1), RvT2, RvT3 и RvT4. Эти резольвины серии T также образуются у мышей, подвергающихся экспериментальным воспалительным реакциям, и обладают мощной противовоспалительной активностью in vitro и in vivo; они особенно эффективны в снижении системного воспаления, а также в повышении выживаемости мышей, которым были введены летальные дозы бактерий E. coli . [25] [38] [39] Другой набор недавно описанных n−3 DPA резольвинов, RvD1 n−3 , RvD2 n−3 и RvD5 n−3 , были названы на основе их предполагаемых структурных аналогий с полученными из DHA резольвинами RvD1, RvD2 и RvD5 соответственно. Эти три n −3 DPA резольвина не были определены с точки зрения хиральности их гидроксильных остатков или цис-транс-изомерии их двойных связей, но обладают мощной противовоспалительной активностью в животных моделях и клетках человека; они также оказывают защитное действие, увеличивая выживаемость мышей, подвергшихся сепсису E. coli . [39] В следующей таблице перечислены структурные формулы (DPA означает докозапентаеновую кислоту), основные виды активности и целевые клеточные рецепторы (если известны).
Клетки метаболизируют DHA либо с помощью ALOX15, либо с помощью бактериальной или млекопитающей цитохрома P450 монооксигеназы (Cyp1a1, Cyp1a2 или Cyp1b1 у мышей; см. CYP450 §§ Семейства CYP у людей и P450 у других видов ), либо с помощью обработанной аспирином циклооксигеназы-2 до 17 S -гидроперокси или 17 R -гидроперокси промежуточных продуктов (см. предыдущий подраздел); этот промежуточный продукт затем преобразуется в 16 S ,17 S - эпоксид , который затем гидролизуется (вероятно, растворимой эпоксидгидролазой до протектина D1 (PD1, также называемого нейропротектином D1 [NPD1] при образовании в нервной ткани). [2] PDX образуется в результате метаболизма DHA двумя последовательными липоксигеназами, вероятно, 15-липоксигеназой и ALOX12 . 22-Гидрокси-PD1 (также называемый 22-гидрокси-NPD1) образуется в результате омега-окисления PD1, вероятно, неидентифицированным ферментом цитохрома P450 . Хотя продукты омега-окисления большинства биоактивных метаболитов ПНЖК намного слабее своих предшественников, 22-гидрокси-PD1 столь же эффективен, как PD1 в воспалительных анализах. Аспирин-триггерный-PD1 (AT-PD1 или AP-NPD1) является 17 R -гидроксильный диастереомер PD1, образованный начальным метаболизмом DHA обработанным аспирином COX-2 или, возможно, ферментом цитохрома P450 до 17 R -гидрокси-DHA и его последующего метаболизма, возможно, способом, аналогичным тому, который образует PD1. 10-Epi-PD1 (ent-AT-NPD1), 10 S -гидроксидиастереомер PD1, был обнаружен в небольших количествах в человеческих нейтрофилах . Хотя его синтетический путь in vivo не был определен, 10-epi-PD1 обладает противовоспалительной активностью. [25] [43] В следующей таблице перечислены структурные формулы (DHA означает докозагексаеновую кислоту), основные виды деятельности, целевые клеточные рецепторы (где известны) и страницы Википедии, содержащие дополнительную информацию об активности и синтезах.
Были описаны протектины, полученные из n −3 DPA, имеющие структурное сходство с PD1 и PD2, которые, как было установлено, образуются in vitro и в животных моделях, и названы PD1 n−3 и PD2 n−3 соответственно. Предполагается, что эти продукты образуются у млекопитающих в результате метаболизма n−3 DPA неидентифицированной активностью 15-липоксигеназы до 16,17-эпоксидного промежуточного продукта и последующего преобразования этого промежуточного продукта в дигидроксильные продукты PD1 n−3 и PD2 n−3 . PD1 n−3 обладает противовоспалительной активностью в мышиной модели перитонита ; PD2 n−3 обладает противовоспалительной активностью в модели in vitro. [39] [47] В следующей таблице перечислены структурные формулы (DPA означает докозапентаеновую кислоту), основные виды активности и целевые клеточные рецепторы (где известны).
Клетки метаболизируют DHA с помощью ALOX12 , другой липоксигеназы (12/15-липоксигеназы у мышей) или неустановленного пути до 13 S ,14 S - эпоксид -4 Z ,7 Z ,9 E ,11 E ,16 Z ,19 Z -DHA промежуточного продукта (13 S ,14 S -эпокси-марезин MaR), а затем гидролизуют этот промежуточный продукт с помощью эпоксидгидролазной активности (которой обладают ALOX 12 и мышиная 12/15-липоксигеназа) до MaR1 и MaR2. В ходе этого метаболизма клетки также образуют 7-эпи-Mar1, т. е. 7 S -12 E изомер Mar1, а также 14 S -гидрокси и 14 R -гидрокси метаболиты DHA. Последние гидроксиметаболиты могут быть преобразованы неопознанным ферментом цитохрома P450 в марезин-подобный-1 (Mar-L1) и Mar-L2 путем омега-окисления ; альтернативно, DHA может сначала метаболизироваться в 22-гидрокси-DHA с помощью CYP1A2 , CYP2C8 , CYP2C9 , CYP2D6 , CYP2E1 или CYP3A4 , а затем метаболизироваться через указанные эпоксид-образующие пути в Mar-L1 и MaR-L2. Исследования показали, что эти метаболиты обладают мощной противовоспалительной активностью in vitro и в животных моделях. [14] [24] [25] В следующей таблице перечислены структурные формулы (DHA означает докозагексаеновую кислоту), основные виды активности и целевые клеточные рецепторы (где известны).
Предполагается, что марезины, полученные из n −3 DPA, образуются у млекопитающих в результате метаболизма n −3 DPA неопределенной 12-липоксигеназной активности до 14-гидроперокси-DPA, промежуточного продукта, и последующего преобразования этого промежуточного продукта в дигидроксильные продукты, которые были названы MaR1 n−3 , MaR2 n−3 и MaR3 n−3 на основании их структурных аналогий с MaR1, MaR2 и MaR3 соответственно. Было обнаружено, что MaR1 n−3 и MaR2 n−3 обладают противовоспалительной активностью в анализах in vitro функции нейтрофилов человека. Эти марезины, полученные из n−3 DPA, не были определены в отношении хиральности их гидроксильных остатков или цис-транс-изомерии их двойных связей. [39] В следующей таблице перечислены структурные формулы (DPA означает докозапентаеновую кислоту), основные виды активности и целевые клеточные рецепторы (если известны).
Следующие метаболиты ПНЖК, хотя формально еще не классифицированы как СПМ, были недавно описаны и определены как обладающие противовоспалительной активностью.
10 R ,17 S -дигидрокси-7 Z ,11 E ,13 E ,15 Z ,19 Z -докозапентаеновая кислота (10 R ,17 S -диHDPA EEZ ) была обнаружена в воспаленных экссудатах животных моделей и обладает противовоспалительной активностью in vitro и in vivo почти так же сильно, как PD1. [44]
n −6 DPA (т. е. 4 Z ,7 Z ,10 Z ,13 Z ,16 Z -докозапентаеновая кислота или осбондовая кислота) является изомером n −3 DPA ( клупанодоновой кислоты ), отличающейся от последней жирной кислоты только расположением ее 5 двойных связей. Клетки метаболизируют n −6 DPA в 7-гидрокси-DPA n−6 , 10,17-дигидрокси-DPA n−6 и 7,17-дигидрокси-DPA n−3 ; было показано, что первые два метаболита обладают противовоспалительной активностью в исследованиях in vitro и на животных моделях. [39]
Клетки метаболизируют DHA и n -3 DPA посредством COX-2 в продукты 13-гидрокси-DHA и 13-гидрокси-DPA n-3 и посредством обработанного аспирином COX-2 в продукты 17-гидрокси-DHA и 17-гидрокси-DPA n-3 , а затем могут окислять эти продукты до соответствующих им оксопроизводных (т. е. кетонов ), 13-оксо-DHA (также называемых электрофильными оксопроизводными жирных кислот или EFOX - D6), 13-оксо-DPA n-3 ( EFOX -D5), 17-оксо-DHA (17-EFOX-D6) и 17-оксо-DPA n-3 (17-EFOX-D3). Эти оксо-метаболиты напрямую активируют ядерный рецептор, активируемый пролифератором пероксисом, гамма-рецептор и обладают противовоспалительной активностью, как показывают исследования в системах in vitro. [39]
Этаноламидный эфир DHA (аналог DHA арахидонилэтаноламида (т. е. анандамида ) метаболизируется в 10,17-дигидроксидокозагексаеноилэтаноламид (10,17-diHDHEA) и/или 15-гидрокси-16(17)-эпоксидокозапентаеноилэтаноламид (15-HEDPEA) тканями мозга мышей и человеческими нейтрофилами . Оба соединения обладают противовоспалительной активностью in vitro; 15-HEDPEA также оказывает тканезащитное действие в мышиных моделях повреждения легких и реперфузии тканей. Подобно анандамиду, оба соединения активировали каннабиноидный рецептор . [50] [51]
Производные ПНЖК, содержащие циклопентеноновую структуру, химически реактивны и могут образовывать аддукты с различными тканевыми мишенями, в частности с белками. Некоторые из этих ПНЖК-циклопентенонов связываются с остатками серы в компоненте KEAP1 белкового комплекса KEAP1- NFE2L2 в цитозоле клеток. Это сводит на нет способность KEAP1 связывать NFE2L2; в результате NFE2L2 становится свободным для транслокации в нуклеазу и стимуляции транскрипции генов, кодирующих белки, активные в детоксикации активных форм кислорода ; этот эффект имеет тенденцию уменьшать воспалительные реакции. ПНЖК-циклопентеноны могут также реагировать с компонентом IKK2 цитозольного белкового комплекса IKK2-NFκB, тем самым ингибируя NFκB от стимуляции транскрипции генов, кодирующих различные провоспалительные белки. Один или оба из этих механизмов, по-видимому, способствуют способности некоторых высокореактивных ПНЖК-циклопентанонов проявлять активность SPM. ПНЖК-циклопентаноны включают два простагландина , (PG) Δ12-PGJ2 и 15-дезокси-Δ12,14-PGJ2, и два изопростанова , 5,6-эпоксиизопростан E2 и 5,6-эпоксиизопростан A2. Оба PGJ2 являются метаболитами, полученными из арахидоновой кислоты, вырабатываемыми циклооксигеназами , в первую очередь ЦОГ-2 , которая индуцируется во многих типах клеток во время воспаления. Оба изопростанова образуются неферментативно в результате атаки на связь арахидоновой кислоты с клеточными фосфолипидами реактивными формами кислорода ; затем они высвобождаются из фосфолипидов, чтобы стать свободными для атаки на свои целевые белки. Было показано, что все четыре продукта образуют и обладают активностью SPM в различных исследованиях in vitro тканей человека и животных, а также в исследованиях in vivo животных моделей воспаления; они были названы проразрешающими медиаторами воспаления [52]
Мыши, у которых был дефицит гена 12/15-липоксигеназы (Alox15), демонстрируют длительную воспалительную реакцию наряду с различными другими аспектами патологически усиленной воспалительной реакции в экспериментальных моделях повреждения роговицы , воспаления дыхательных путей и перитонита . Эти мыши также демонстрируют ускоренную скорость прогрессирования атеросклероза, тогда как мыши, у которых была повышена экспрессия 12/15-липоксигеназы, демонстрируют замедленную скорость развития атеросклероза. Кролики с повышенной экспрессией Alox15 продемонстрировали снижение разрушения тканей и потери костной массы в модели пародонтита . [2] Аналогичным образом, мыши с дефицитом Alox5 демонстрируют ухудшение воспалительного компонента, невозможность разрешения и/или снижение выживаемости в экспериментальных моделях респираторно-синцитиального вирусного заболевания, болезни Лайма , заболевания Toxoplasma gondii и повреждения роговицы . [2] Эти исследования показывают, что подавление воспаления является основной функцией 12/15-липоксигеназы и Alox5, а также СПМ, которые они производят, по крайней мере, в некоторых экспериментальных моделях воспаления на грызунах; хотя эти липоксигеназы грызунов отличаются от человеческих ALOX15 и ALOX5 по профилю метаболитов ПНЖК, которые они производят, а также по различным другим параметрам (например, распределению в тканях), эти генетические исследования позволяют предположить, что человеческие ALOX15, ALOX5 и СПМ, которые они производят, могут играть аналогичную противовоспалительную функцию у людей.
Одновременный нокаут трех членов семейства CYP1 ферментов цитохрома P450 у мышей, т. е. Cyp1a1, Cyp1a2 и Cyp1b1, вызвал увеличение набора нейтрофилов в брюшину у мышей, перенесших экспериментальный перитонит; эти мыши с тройным нокаутом также показали увеличение уровня LTB4 в брюшной жидкости и снижение уровней NPD1 в брюшной жидкости, а также предшественников различных SPM, включая 5-гидроксиэйкозатетраеновую кислоту , 15-гидроксиэйкозатетраеновую кислоту , 18-гидроксиэйкозапентаеновую кислоту, 17-гидроксидокозагексаеновую кислоту и 14-гидроксидокозагексаеновую кислоту. Эти результаты подтверждают представление о том, что ферменты Cyp1 способствуют образованию определенных SPM и воспалительных реакций у мышей; поэтому ферменты CYP1 могут играть аналогичную роль у людей. [53]
В рандомизированном контролируемом исследовании AT-LXA4 и сравнительно стабильный аналог LXB4, 15 R/S -метил-LXB4, уменьшили тяжесть экземы в исследовании 60 младенцев. [54] [55] Синтетический аналог ReV1 находится на стадии клинического тестирования III фазы (см. Фазы клинических исследований ) для лечения синдрома сухого глаза , вызванного воспалением ; наряду с этим исследованием проводятся другие клинические испытания (NCT01639846, NCT01675570, NCT00799552 и NCT02329743) с использованием аналога RvE1 для лечения различных глазных заболеваний. [16] RvE1, Mar1 и NPD1 находятся на стадии клинических исследований по лечению нейродегенеративных заболеваний и потери слуха. [2] И, в одном исследовании, вдыхаемый LXA4 уменьшил бронхопровокацию , инициированную LTC4, у пациентов с астмой. [16]