Рибофлавин , также известный как витамин B2 , представляет собой витамин , который содержится в продуктах питания и продается в качестве пищевой добавки . [3] Он необходим для образования двух основных коферментов : флавинмононуклеотида и флавинадениндинуклеотида . Эти коферменты участвуют в энергетическом обмене , клеточном дыхании и выработке антител , а также в нормальном росте и развитии. Коэнзимы также необходимы для метаболизма ниацина , витамина B6 и фолиевой кислоты . Рибофлавин назначают для лечения истончения роговицы , а прием внутрь может снизить частоту мигрени у взрослых.
Дефицит рибофлавина встречается редко и обычно сопровождается дефицитом других витаминов и питательных веществ. Его можно предотвратить или вылечить с помощью пероральных добавок или инъекций. Будучи водорастворимым витамином, рибофлавин, потребляемый сверх потребностей в питании, не сохраняется; он либо не всасывается, либо всасывается и быстро выводится с мочой , в результате чего моча приобретает ярко-желтый оттенок. Природные источники рибофлавина включают мясо, рыбу и птицу, яйца, молочные продукты, зеленые овощи, грибы и миндаль. Некоторые страны требуют его добавления в зерновые . [3]
Рибофлавин был открыт в 1920 году, выделен в 1933 году и впервые синтезирован в 1935 году. В очищенной твердой форме он представляет собой водорастворимый кристаллический порошок желто-оранжевого цвета. Помимо своей витаминной функции, он используется в качестве пищевого красителя . Биосинтез происходит у бактерий, грибов и растений, но не у животных. Первоначально промышленный синтез рибофлавина осуществлялся с использованием химического процесса, но в настоящее время коммерческое производство основано на методах ферментации с использованием штаммов грибов и генетически модифицированных бактерий.
Рибофлавин, также известный как витамин B2 , является водорастворимым витамином и одним из витаминов группы B. [3] [4] [5] В отличие от фолиевой кислоты и витамина B 6 , которые встречаются в нескольких химически родственных формах, известных как витамеры , рибофлавин представляет собой всего лишь одно химическое соединение. Это исходное соединение в синтезе коферментов флавинмононуклеотида (FMN, также известного как рибофлавин-5'-фосфат) и флавинадениндинуклеотида (FAD). FAD является более распространенной формой флавина, которая, как сообщается, связывается с 75% числа генов, кодируемых флавин-зависимыми белками, во всевидовом геноме (флавопротеоме) [6] [7] и служит коферментом для 84 % флавопротеинов, кодируемых человеком. [6]
В очищенном твердом виде рибофлавин представляет собой кристаллический порошок желто-оранжевого цвета со слабым запахом и горьким вкусом. Он растворим в полярных растворителях , таких как вода и водные растворы хлорида натрия, и слабо растворим в спиртах. Он не растворяется в неполярных или слабополярных органических растворителях, таких как хлороформ, бензол или ацетон. [8] В растворе или при сухом хранении в виде порошка рибофлавин термостабилен, если не подвергается воздействию света. При нагревании с целью разложения он выделяет токсичные пары, содержащие оксид азота . [8]
Рибофлавин необходим для образования двух основных коферментов: FMN и FAD. [3] [9] Эти коферменты участвуют в энергетическом обмене , клеточном дыхании , выработке антител , росте и развитии. [9] Рибофлавин необходим для метаболизма углеводов , белков и жиров . [3] FAD способствует превращению триптофана в ниацин (витамин B 3 ) [10] , а превращение витамина B 6 в кофермент пиридоксаль-5'-фосфат требует FMN. [10] Рибофлавин участвует в поддержании нормального уровня гомоцистеина в крови ; при дефиците рибофлавина уровень гомоцистеина увеличивается, что повышает риск сердечно-сосудистых заболеваний . [10]
Окислительно-восстановительные реакции – это процессы, включающие перенос электронов . Флавин-коферменты поддерживают функцию примерно 70-80 флавоферментов у людей (и еще сотен во всех организмах, включая те, которые кодируются архейными , бактериальными и грибковыми геномами ), которые отвечают за одно- или двухэлектронные окислительно-восстановительные реакции, которые используют способность флавинов преобразуются между окисленными, полувосстановленными и полностью восстановленными формами. [3] [ 5] FAD также необходим для активности глутатионредуктазы , важного фермента в образовании эндогенного антиоксиданта глутатиона . [10]
Рибофлавин, FMN и FAD участвуют в метаболизме ниацина, витамина B6 и фолата . [4] В синтезе ниацинсодержащих коферментов НАД и НАДФ из триптофана участвует ФАД-зависимый фермент, кинуренин-3-монооксигеназа . Диетический дефицит рибофлавина может снизить выработку НАД и НАДФ, тем самым способствуя дефициту ниацина. [4] Преобразование витамина B6 в его кофермент, пиридоксаль-5'-фосфатсинтазу , включает фермент пиридоксин-5'-фосфатоксидазу , который требует FMN. [4] Фермент, участвующий в метаболизме фолиевой кислоты, 5,10-метилентетрагидрофолатредуктаза , требует FAD для образования аминокислоты метионина из гомоцистеина. [4]
Дефицит рибофлавина, по-видимому, ухудшает метаболизм пищевого минерала железа , который необходим для производства гемоглобина и эритроцитов . Уменьшение дефицита рибофлавина у людей с дефицитом как рибофлавина, так и железа повышает эффективность добавок железа для лечения железодефицитной анемии . [11]
Биосинтез происходит у бактерий, грибов и растений, но не у животных. [5] Биосинтетическими предшественниками рибофлавина являются рибулозо-5-фосфат и гуанозинтрифосфат . Первый превращается в L-3,4-дигидрокси-2-бутанон-4-фосфат, а второй превращается в серии реакций, которые приводят к 5-амино-6-(D-рибитиламино)урацилу. Эти два соединения затем являются субстратами предпоследнего этапа пути, катализируемого ферментом люмазинсинтазой в реакции EC 2.5.1.78. [12] [13] [14]
На заключительном этапе биосинтеза две молекулы 6,7-диметил-8-рибитиллумазина объединяются ферментом рибофлавинсинтазой в реакции дисмутации . При этом образуется одна молекула рибофлавина и одна молекула 5-амино-6-(D-рибитиламино) урацила. Последний возвращается в предыдущую реакцию в последовательности. [12] [13]
Превращение рибофлавина в кофакторы FMN и FAD осуществляются ферментами рибофлавинкиназой и FAD-синтетазой , действующими последовательно. [13] [15]
В промышленном производстве рибофлавина используются различные микроорганизмы, в том числе нитчатые грибы , такие как Ashbya gossypii , Candida famata и Candida flaveri , а также бактерии Corynebacterium ammoniagenes и Bacillus subtilis . B. subtilis , генетически модифицированный для увеличения выработки рибофлавина и введения маркера устойчивости к антибиотику ( ампициллину ), используется в коммерческих масштабах для производства рибофлавина для обогащения кормов и пищевых продуктов. [17] К 2012 году с помощью таких процессов ферментации производилось более 4000 тонн в год. [18]
В присутствии высоких концентраций углеводородов или ароматических соединений некоторые бактерии производят избыточное количество рибофлавина, возможно, в качестве защитного механизма. Одним из таких организмов является Micrococcus luteus ( штамм Американской коллекции типовых культур, номер ATCC 49442), который приобретает желтый цвет из-за выработки рибофлавина при выращивании на пиридине, но не при выращивании на других субстратах, таких как янтарная кислота. [16]
Первый полный синтез рибофлавина был осуществлен группой Ричарда Куна . [18] [19] Замещенный анилин , полученный восстановительным аминированием с использованием D-рибозы , конденсировали с аллоксаном на заключительном этапе:
Кератоконус — наиболее распространенная форма эктазии роговицы , прогрессирующего истончения роговицы. Это заболевание лечится с помощью перекрестного связывания роговичного коллагена , что увеличивает жесткость роговицы. Сшивка достигается путем местного нанесения раствора рибофлавина на роговицу, которая затем подвергается воздействию ультрафиолета А. [20] [21]
В своих рекомендациях 2012 года Американская академия неврологии заявила, что высокие дозы рибофлавина (400 мг) «вероятно эффективны и их следует рассматривать для профилактики мигрени» [22] — рекомендация, также предоставленная Национальным центром мигрени Великобритании. [23] В обзоре 2017 года сообщалось, что ежедневный прием рибофлавина в дозе 400 мг в день в течение как минимум трех месяцев может снизить частоту мигреней у взрослых. [24] Исследования по использованию высоких доз рибофлавина для профилактики или лечения мигрени у детей и подростков не дали окончательных результатов, поэтому добавки не рекомендуются. [1] [3] [25]
Рибофлавин используется в качестве пищевого красителя (желто-оранжевый кристаллический порошок) [8] и обозначается в Европе номером E , E101, для использования в качестве пищевой добавки . [26]
Национальная медицинская академия обновила расчетные средние потребности (EAR) и рекомендуемые диетические нормы (RDA) для рибофлавина в 1998 году. EAR [обновлять]для рибофлавина для женщин и мужчин в возрасте 14 лет и старше составляют 0,9 мг/день и 1,1 мг/день соответственно; рекомендуемые дозы составляют 1,1 и 1,3 мг/день соответственно. RDA выше, чем EAR, чтобы обеспечить адекватный уровень потребления для людей с потребностями выше среднего. Рекомендуемая суточная норма во время беременности составляет 1,4 мг/день, а рекомендуемая суточная норма для кормящих женщин — 1,6 мг/день. Для младенцев в возрасте до 12 месяцев адекватная доза (AI) составляет 0,3–0,4 мг/день, а для детей в возрасте 1–13 лет рекомендуемая суточная норма увеличивается с возрастом от 0,5 до 0,9 мг/день. Что касается безопасности, МОМ устанавливает верхние допустимые уровни потребления (UL) витаминов и минералов, когда есть достаточные доказательства. В случае рибофлавина UL отсутствует, поскольку отсутствуют данные о побочных эффектах высоких доз на людях. В совокупности EAR, RDA, AI и UL называются эталонными диетическими нормами потребления (DRI). [4] [27]
Европейское управление по безопасности пищевых продуктов (EFSA) называет совокупный набор информации эталонными диетическими значениями, с эталонным потреблением для населения (PRI) вместо RDA и средней потребностью вместо EAR. AI и UL определяются так же, как и в США. Для женщин и мужчин в возрасте 15 лет и старше PRI устанавливается на уровне 1,6 мг/день. PRI во время беременности составляет 1,9 мг/день, а PRI для кормящих женщин – 2,0 мг/день. Для детей в возрасте 1–14 лет доза ИПП увеличивается с возрастом от 0,6 до 1,4 мг/день. Эти PRI выше, чем RDA в США. [28] [29] EFSA также рассмотрело максимально безопасное потребление и, как и Национальная медицинская академия США, решило, что информации недостаточно для установления UL. [30]
У людей нет доказательств токсичности рибофлавина, вызванной чрезмерным потреблением, и абсорбция становится менее эффективной по мере увеличения дозы. Избыток рибофлавина выводится через почки в мочу , что приводит к появлению ярко-желтого цвета, известного как флавинурия. [5] [27] [31] Во время клинического исследования эффективности рибофлавина для лечения частоты и тяжести мигрени испытуемым давали до 400 мг рибофлавина перорально в день в течение 3–12 месяцев. Среди побочных эффектов были отмечены боли в животе и диарея . [24]
Для целей маркировки продуктов питания и пищевых добавок в США количество в порции выражается в процентах от дневной нормы (% ДВ). Для целей маркировки рибофлавина 100% дневной нормы составляло 1,7 мг, но по состоянию на 27 мая 2016 г. она была пересмотрена до 1,3 мг, чтобы привести ее в соответствие с рекомендуемой суточной нормой. [32] [33] Таблица старых и новых дневных норм для взрослых представлена в разделе «Справочная суточная норма» .
Служба сельскохозяйственных исследований Министерства сельского хозяйства США ведет базу данных о составе пищевых продуктов, из которой можно осуществлять поиск содержания рибофлавина в сотнях пищевых продуктов. [34]
Помол пшеницы приводит к потере 85% рибофлавина, поэтому в некоторых странах белую муку обогащают. Рибофлавин также добавляют в детское питание , сухие завтраки , макаронные изделия и обогащенные витаминами заменители пищи. [3] Рибофлавин трудно включать в жидкие продукты, поскольку он плохо растворяется в воде, отсюда и потребность в рибофлавин-5'-фосфате (FMN, также называемом E101 при использовании в качестве красителя ), более растворимой форме рибофлавина. [26] Обогащение хлеба и готовых к употреблению хлопьев для завтрака в значительной степени способствует поступлению витамина в рацион. Свободный рибофлавин естественным образом присутствует в продуктах животного происхождения наряду со связанными с белками FMN и FAD. Коровье молоко содержит в основном свободный рибофлавин, но и FMN, и FAD присутствуют в низких концентрациях. [35]
Некоторые страны требуют или рекомендуют обогащение зерновых продуктов. [36] По состоянию на 2021 год 56 стран, в основном в Северной и Южной Америке и юго-восточной Африке, требуют обогащения пищевых продуктов пшеничной муки или кукурузной (кукурузной) муки рибофлавином или рибофлавин-5'-фосфатом натрия. Предусмотренные количества варьируются от 1,3 до 5,75 мг/кг. [37] Еще 16 стран имеют добровольную программу обогащения пищевых продуктов. Например, правительство Индии рекомендует 4,0 мг/кг для муки «майда» (белая) и «атта» (цельнозерновая) . [38]
Более 90% рибофлавина в рационе находится в форме связанных с белками FMN и FAD. [3] Воздействие желудочной кислоты в желудке высвобождает коферменты, которые впоследствии подвергаются ферментативному гидролизу в проксимальном отделе тонкой кишки с высвобождением свободного рибофлавина. [39]
Абсорбция происходит посредством быстрой активной транспортной системы с некоторой дополнительной пассивной диффузией , происходящей при высоких концентрациях. [39] Соли желчных кислот облегчают усвоение, поэтому всасывание улучшается, когда витамин употребляется во время еды. [4] [5] Одно небольшое клиническое исследование на взрослых показало, что максимальное количество рибофлавина, которое может быть поглощено при разовой дозе, составляет 27 мг. [39] Большая часть вновь абсорбированного рибофлавина поглощается печенью при первом проходе, что указывает на то, что постпрандиальное появление рибофлавина в плазме крови может недооценивать абсорбцию. [5] Были идентифицированы три белка-переносчика рибофлавина: RFVT1 присутствует в тонком кишечнике, а также в плаценте; RFVT2 высоко экспрессируется в головном мозге и слюнных железах; а RFVT3 наиболее высоко экспрессируется в тонком кишечнике, семенниках и предстательной железе. [5] [40] Младенцев с мутациями в генах, кодирующих эти транспортные белки, можно лечить пероральным введением рибофлавина. [40]
Рибофлавин обратимо превращается в ФМН, а затем в ФАД. От рибофлавина к FMN - это функция цинк-потребляющей рибофлавинкиназы ; обратное осуществляется фосфатазой. От FMN к FAD — это функция магний-требующей синтазы FAD; обратное осуществляется пирофосфатазой . FAD, по-видимому, является ингибирующим конечным продуктом, который подавляет собственное образование. [5]
Когда избыток рибофлавина всасывается в тонком кишечнике, он быстро выводится из крови и выводится с мочой. [5] Цвет мочи используется в качестве биомаркера состояния гидратации и в нормальных условиях коррелирует с удельным весом и осмоляльностью мочи . [41] Однако прием рибофлавина в значительном количестве, превышающем норму, приводит к тому, что моча становится более желтой, чем обычно. [31] При нормальном потреблении пищи около двух третей выделяемой мочи составляет рибофлавин, остальная часть частично метаболизируется до гидроксиметилрибофлавина в результате окисления внутри клеток и в виде других метаболитов. Когда потребление превышает способность к всасыванию, рибофлавин попадает в толстый кишечник, где катаболизируется бактериями до различных метаболитов, которые можно обнаружить в кале . [5] Существует предположение, что неабсорбированный рибофлавин может повлиять на микробиом толстого кишечника . [42]
Дефицит рибофлавина редко встречается в Соединенных Штатах и в других странах, где действуют программы обогащения пшеничной или кукурузной муки. [37] Согласно данным, собранным в ходе опросов населения США, проводимых два раза в год, в возрасте от 20 лет и старше, 22% женщин и 19% мужчин сообщили о потреблении добавки, содержащей рибофлавин, обычно витаминно-минеральной мультидобавки. Для тех, кто не принимал добавки, потребление взрослых женщин составляло в среднем 1,74 мг/день, а мужчин – 2,44 мг/день. Эти количества превышают рекомендованные дозы для рибофлавина, составляющие 1,1 и 1,3 мг/день соответственно. [43] Для всех возрастных групп в среднем потребление продуктов питания превышало рекомендуемые нормы. [44] Исследование, проведенное в США в 2001–2002 годах, показало, что менее 3% населения потребляют меньше расчетной средней потребности в рибофлавине. [45]
Дефицит рибофлавина (также называемый арибофлавинозом) приводит к стоматиту , симптомы которого включают потрескавшиеся губы, воспаление углов рта ( угловой стоматит ), боль в горле, болезненный красный язык и выпадение волос. [3] Глаза могут стать зудящими, слезящимися, налитыми кровью и чувствительными к свету. [3] Дефицит рибофлавина связан с анемией . [46] Длительная недостаточность рибофлавина может вызвать дегенерацию печени и нервной системы. [3] [4] Дефицит рибофлавина может увеличить риск преэклампсии у беременных женщин. [3] [10] Дефицит рибофлавина во время беременности может привести к врожденным порокам развития плода , включая деформации сердца и конечностей. [47] [48]
В группу риска по снижению уровня рибофлавина входят алкоголики , спортсмены -вегетарианцы и веганцы . [3] Беременные или кормящие женщины и их дети также могут подвергаться риску, если мать избегает мяса и молочных продуктов. [3] [10] Анорексия и непереносимость лактозы повышают риск дефицита рибофлавина. [10] Людям с тяжелыми физическими нагрузками, например спортсменам и рабочим, может потребоваться более высокое потребление рибофлавина. [10] Преобразование рибофлавина в ФАД и ФМН нарушается у людей с гипотиреозом , надпочечниковой недостаточностью и дефицитом транспортера рибофлавина . [10]
Дефицит рибофлавина обычно обнаруживается вместе с дефицитом других питательных веществ, особенно других водорастворимых витаминов . [3] Дефицит рибофлавина может быть первичным (т.е. вызванным плохими источниками витаминов в обычном рационе) или вторичным, что может быть результатом условий, влияющих на всасывание в кишечнике. Вторичный дефицит обычно вызван неспособностью организма использовать витамин или повышенной скоростью выведения витамина. [10] К моделям питания, повышающим риск дефицита, относятся веганство и вегетарианство с низким содержанием молочных продуктов . [5] Такие заболевания, как рак, болезни сердца и диабет , могут вызывать или усугублять дефицит рибофлавина. [4]
Существуют редкие генетические дефекты, которые нарушают всасывание, транспорт, метаболизм или использование рибофлавина флавопротеинами. [40] [49] Одним из них является дефицит переносчика рибофлавина, ранее известный как синдром Брауна-Виалетто-Ван Лаэра . [40] [49] Варианты генов SLC52A2 и SLC52A3 , которые кодируют белки-транспортеры RDVT2 и RDVT3 соответственно, являются дефектными. [40] [49] У младенцев и детей младшего возраста наблюдается мышечная слабость, дефицит черепных нервов , включая потерю слуха, сенсорные симптомы, включая сенсорную атаксию , трудности с кормлением и респираторный дистресс, вызванный сенсомоторной аксональной невропатией и патологией черепных нервов. [49] При отсутствии лечения у младенцев с дефицитом переносчика рибофлавина наблюдается затрудненное дыхание и риск смерти в первое десятилетие жизни. Лечение пероральными добавками большого количества рибофлавина спасает жизнь. [40] [49]
Другие врожденные нарушения метаболизма включают чувствительный к рибофлавину множественный дефицит ацил-КоА-дегидрогеназы , также известный как разновидность глутаровой ацидемии типа 2 , и вариант C677T фермента метилентетрагидрофолатредуктазы , который у взрослых связан с риском высокого кровяного давления. [5]
Оценка статуса рибофлавина необходима для подтверждения случаев с неспецифическими симптомами при подозрении на дефицит. Общая экскреция рибофлавина у здоровых взрослых при нормальном потреблении рибофлавина составляет около 120 мкг в сутки, тогда как экскреция менее 40 мкг в сутки указывает на дефицит. [3] [50] Скорость выделения рибофлавина снижается с возрастом человека, но увеличивается в периоды хронического стресса и использования некоторых рецептурных лекарств . [3]
Индикаторами, используемыми у людей, являются глутатионредуктаза эритроцитов (EGR), концентрация флавина в эритроцитах и экскреция с мочой. [4] [5] Коэффициент активности глутатионредуктазы эритроцитов ( EGRAC) позволяет оценить насыщение тканей и долгосрочный статус рибофлавина. [50] [3] Результаты выражаются в виде соотношения коэффициентов активности, определяемого активностью фермента с добавлением FAD в культуральную среду и без него. EGRAC от 1,0 до 1,2 указывает на наличие достаточного количества рибофлавина; От 1,2 до 1,4 считается низким, более 1,4 указывает на дефицит. [3] [5] Для менее чувствительного «эритроцитарного флавинового метода» значения выше 400 нмоль/л считаются адекватными, а значения ниже 270 нмоль/л считаются недостаточными. [4] [50] Выведение с мочой выражается в нмоль рибофлавина на грамм креатинина . Низкий определяется как находящийся в диапазоне от 50 до 72 нмоль/г. Дефицит ниже 50 нмоль/г. Для определения диетических потребностей использовались нагрузочные тесты с выделением мочи. У взрослых мужчин при увеличении пероральной дозы с 0,5 мг до 1,1 мг наблюдалось умеренное линейное увеличение уровня рибофлавина в моче, достигающее 100 мкг при последующем 24-часовом сборе мочи. [4] При приеме нагрузочной дозы 1,1 мг экскреция с мочой быстро увеличивалась, так что при дозе 2,5 мг диурез составлял 800 микрограмм за 24-часовой сбор мочи. [4]
Название «рибофлавин» происходит от « рибозы » (сахара, восстановленная форма которого, рибитола , является частью его структуры) и « флавина », кольцевой группы, которая придает желтый цвет окисленной молекуле (от латинского flavus , «желтый цвет»). "). [5] Восстановленная форма, которая встречается в обмене веществ вместе с окисленной формой, проявляется в виде оранжево-желтых иголок или кристаллов. [8] Самая ранняя идентификация, предшествовавшая любой концепции витаминов как необходимых питательных веществ, была сделана Александром Винтером Блитом. В 1879 году Блит выделил водорастворимый компонент сыворотки коровьего молока, который он назвал «лактохром», который флуоресцировал желто-зеленым при воздействии света. [2]
В начале 1900-х годов несколько исследовательских лабораторий изучали компоненты пищевых продуктов, необходимые для поддержания роста крыс. Эти компоненты первоначально были разделены на жирорастворимый «витамин» А и водорастворимый «витамин» В. («Е» было исключено в 1920 году. [51] ) Далее считалось, что витамин В состоит из двух компонентов: термолабильного вещество под названием B 1 и термостойкое вещество под названием B 2 . [2] Витамин B2 предварительно был идентифицирован как фактор, необходимый для предотвращения пеллагры , но позже было подтверждено, что это связано с дефицитом ниацина (витамина B3 ) . Путаница возникла из-за того, что дефицит рибофлавина (В 2 ) вызывает симптомы стоматита , аналогичные тем, которые наблюдаются при пеллагре, но без распространенных периферических поражений кожи. По этой причине на ранних этапах истории выявления дефицита рибофлавина у людей это состояние иногда называли «пеллагра без пеллагры» (пеллагра без пеллагры). [52]
В 1935 году Пауль Дьёрдь в сотрудничестве с химиком Рихардом Куном и врачом Т. Вагнер-Яуреггом сообщил, что крысы, содержавшиеся на диете без B 2 , не могли набирать вес. [53] Выделение B 2 из дрожжей выявило наличие яркого желто-зеленого флуоресцентного продукта, который восстанавливал нормальный рост при кормлении крыс. Восстановленный рост был прямо пропорционален интенсивности флуоресценции. Это наблюдение позволило исследователям в 1933 году разработать быстрый химический биоанализ, а затем выделить фактор из яичного белка, назвав его овофлавином. [2] Затем та же группа выделила аналогичный препарат из сыворотки и назвала его лактофлавином. В 1934 году группа Куна определила химическую структуру этих флавинов как идентичную, остановилась на названии «рибофлавин», а также смогла синтезировать витамин. [2]
Примерно в 1937 году рибофлавин также называли «витамином G». [54] В 1938 году Ричард Кун был удостоен Нобелевской премии по химии за работу над витаминами, в число которых входили B 2 и B 6 . [55] В 1939 году было подтверждено, что рибофлавин необходим для здоровья человека, посредством клинических испытаний, проведенных Уильямом Х. Себреллом и Роем Э. Батлером. У женщин, получавших диету с низким содержанием рибофлавина, развивался стоматит и другие признаки дефицита, которые исчезали при лечении синтетическим рибофлавином. Симптомы вернулись, когда прием добавок был прекращен. [2]