stringtranslate.com

QPNC-СТРАНИЦА

QPNC-PAGE , или количественный препаративный непрерывный электрофорез в нативном полиакриламидном геле , представляет собой биоаналитический , одномерный , высокоразрешающий и высокоточный метод, применяемый в биохимии и бионеорганической химии для количественного разделения белков по изоэлектрической точке и путем непрерывного элюирования из колонки с гелем. . [1]

Этот стандартизированный вариант электрофореза в нативном геле и подмножество препаративного электрофореза в полиакриламидном геле используются биологами для разделения макромолекул в растворе с высоким выходом, например, в активные или нативные металлопротеины в биологических образцах или в правильно и неправильно свернутые белки, содержащие металл- кофактор , или белок. изоформы в сложных белковых смесях . [2]

Введение

Белки выполняют в живых организмах несколько функций , включая каталитические реакции и транспорт молекул или ионов внутри клеток , органов или всего тела . Понимание процессов в организме человека, обусловленных главным образом биохимическими реакциями и белок-белковыми взаимодействиями , во многом зависит от способности выделять активные белки в биологические образцы для более детального изучения химического строения и физиологических функций. Эта важная информация может служить важным показателем состояния здоровья пациента. [3]

Поскольку около 30–40% всех известных белков содержат один или несколько кофакторов ионов металлов (например, церулоплазмин , ферритин , белок-предшественник бета-амилоида , матриксную металлопротеиназу или металлошапероны ), особенно нативные и денатурированные металлопротеины необходимо выделить, идентифицировать и количественно оценить. после жидкой биопсии . Многие из этих кофакторов (например, железо , медь или цинк ) играют ключевую роль в жизненно важных ферментативно -каталитических процессах или стабилизируют молекулы глобулярных белков . [4] Таким образом, высокоточный гель- электрофорез и сопоставимые методы разделения очень актуальны в качестве начального этапа анализа состава белков и микроэлементов , за которым впоследствии следуют современные масс-спектрометрические и магнитно-резонансные методы для количественного определения и идентификации представляющих интерес растворимых белков. [5]

Метод

Механизмы разделения и буферизации

Оборудование для биоаналитического гель-электрофореза с непрерывным элюированием : камера для электрофореза, перистальтический насос , коллектор фракций, насос для рециркуляции буфера и УФ-детектор (в холодильнике), источник питания и регистратор (на столе). [6]

В гель-электрофорезе белки обычно разделяются по заряду , размеру или форме . [7] Целью изоэлектрического фокусирования (ИЭФ), например, является разделение белков в соответствии с их изоэлектрической точкой (pI), то есть в соответствии с их зарядом при различных значениях pH . [8] Здесь аналогичный механизм реализуется в имеющейся в продаже камере электрофореза (см. рис. Оборудование ) для разделения заряженных биомолекул , например, супероксиддисмутазы (СОД) [9] или аллергенов , [10] в условиях постоянного pH и разные скорости миграции в зависимости от разных изоэлектрических точек цвиттер -ионов . Отделенные (металлические) белки элюируются последовательно, начиная с самого низкого (pI > 2–4) и заканчивая самым высоким pI (pI < 10,0) растворенных белковых молекул, подлежащих анализу. [11]

Благодаря специфическим свойствам приготовленного геля и буферного раствора для электрофореза , который является основным и содержит трис - HCl и NaN 3 , [6] большинство белков биологической системы (например, Helicobacter pylori [12] ) в растворе заряжены отрицательно , и будет мигрировать от катода к аноду под действием электрического поля . В общем, уравнение реакции (1) показывает, что карбоксильная боковая группа протеиногенной аминокислоты заряжена отрицательно, уравнение (2) — что аминобоковые группы электрически нейтральны в этих условиях:

(1) R-COOH + OH − → R-COO − + H 2 O

(2) R-NH 3 + + OH − → R-NH 2 + H 2 O

На аноде электрохимически генерируемые ионы водорода реагируют с молекулами Трис с образованием одновалентных ионов Трис ( 3 ). Положительно заряженные ионы Трис мигрируют через гель к катоду, где нейтрализуют ионы гидроксида с образованием молекул Трис и воды (4):

(3) (НОСН 2 ) 3 CNH 2 + H + → [(НОСН 2 ) 3 CNH 3 ] +

(4) [(HOCH 2 ) 3 CNH 3 ] + + OH − → (HOCH 2 ) 3 CNH 2 + H 2 O

Таким образом, механизм буферизации на основе Триса обеспечивает постоянный уровень pH в непрерывной буферной системе с высокой буферной емкостью . [13]

При 25 °C Трис-буфер имеет эффективный диапазон pH от 7,5 до 9,0. В приведенных здесь условиях (с учетом концентрации компонентов буфера, механизма буферизации, pH и температуры) эффективный pH смещается в диапазоне примерно от 10,0 до 10,5. Все нативные буферные системы имеют низкую проводимость и диапазон pH от 3,8 до 10,2. Таким образом, непрерывные нативные буферные системы используются для разделения белков в соответствии с их pI. [14]

Хотя значение pH (10,00) буфера для электрофореза не соответствует физиологическому значению pH внутри типа клеток или тканей , разделенные кольцевые белковые полосы непрерывно элюируются в физиологический буферный раствор (pH 8,00) и выделяются в различных фракциях . (ср. рис. Электрофореграмма ). [6] При условии, что необратимая денатурация не может быть продемонстрирована независимой процедурой, большинство белковых молекул стабильны в водном растворе при значениях pH от 3 до 10, если температура ниже 50 ° C. [15] Поскольку Джоулево тепло и температура, генерируемые во время электрофореза, могут превышать 50 °C, [16] и, таким образом, оказывать негативное влияние на стабильность и миграцию белков в геле, система разделения, состоящая из камеры электрофореза, фракций Коллектор и другие устройства охлаждаются в холодильнике при температуре 4 °C, что значительно снижает риск возникновения тепловых конвекционных потоков. [17] Перегреву геля препятствует внутренний контур охлаждения колонны геля как неотъемлемой части камеры электрофореза, а также создание постоянной мощности с помощью источника питания (см. рис. Оборудование ). [18]

Свойства геля и время полимеризации

Наилучшие условия полимеризации акриламидных гелей достигаются при 25–30 °C [19] , и полимеризация завершается через 20–30 мин реакции, хотя после этого времени обнаруживаются остаточные мономеры (10–30%). [20] Сополимеризация мономера акриламида (АА)/ N,N'-метиленбисакриламидного (бис-АА) сшивающего агента, инициируемая реакциями персульфата аммония (APS)/ тетраметилэтилендиамина (TEMED), наиболее эффективна при щелочном pH среды. раствор акриламида. Таким образом, акриламидные цепи создаются и сшиваются одновременно. Благодаря свойствам буфера для электрофореза гель-полимеризация проводится при pH 10,00, что обеспечивает эффективное использование TEMED и APS в качестве катализаторов реакции полимеризации и одновременно подавляет конкурентный гидролиз образующейся сетки акриламидного полимера . Полимерные сети представляют собой трехмерно связанные полимерные цепи. В противном случае белки можно было бы модифицировать путем реакции с неполимеризованными мономерами акриламида, образуя продукты ковалентного присоединения акриламида , что может привести к образованию нескольких полос. [21]

Кроме того, время полимеризации геля может напрямую влиять на время элюирования пиков разделенных металлопротеинов на электрофореграмме из -за сжатия и расширения гелей и их пор , если время инкубации реакционной смеси (раствора геля), используемой для приготовления гель не оптимизированы (см. рис. Электрофореграмма , см. раздел Воспроизводимость и восстановление). Чтобы обеспечить максимальную воспроизводимость размера пор геля и получить полностью полимеризованный и нерестриктивный гель с большими порами для проведения PAGE, полиакриламидный гель полимеризуют в течение 69 часов при комнатной температуре (RT) в гелевой колонке. находится на литейном стенде. [18] Экзотермическое тепло, выделяемое в процессе полимеризации, постоянно рассеивается , в то время как температура может быстро подняться до более чем 75 ° C в первые минуты, после чего она медленно падает . [22] Через 69 часов гель достигает комнатной температуры и находится в самом низкоэнергетическом состоянии , поскольку основные химические реакции и гелеобразование завершены. [18] Гелеобразование означает, что растворитель (вода) иммобилизуется внутри полимерной сетки посредством водородных связей , а также сил Ван-дер-Ваальса . В результате приготовленный гель является однородным (с точки зрения однородного распределения поперечных связей по всему образцу геля [23] ), по своей природе стабильным и свободным от мономеров и радикалов . Свежие полиакриламидные гели также гидрофильны , электрически нейтральны и не связывают белки. [24] По тем же причинам можно исключить эффекты просеивания, вызванные гравитационным сжатием геля. Таким образом, в среде без свойств молекулярного сита можно ожидать высокого разрешения. [25]

Перед началом электрофореза подготовленный гель, содержащий 4% Т (общее содержание полимера (Т)), 2,67% С (концентрация сшивающего агента (С)) предварительно прогоняется для его уравновешивания . [6] По существу, он не требует просеивания и оптимален для электрофореза белков с молекулярной массой, превышающей или равной 200 k u . Белки мигрируют в нем в большей или меньшей степени на основе своей свободной подвижности. [26] По этим причинам взаимодействие геля с биомолекулами пренебрежимо мало, и, таким образом, белки разделяются чисто и предсказуемо при времени полимеризации 69 часов (см. рис. Электрофореграмма ). Отдельные металлопротеины, включая биомолекулы размером от приблизительно <1 ku до более 30 ku (например, металлические шапероны , прионы , белки-переносчики металлов, амилоиды , металлоферменты, металлопептиды, металлотионеин , фитохелатины ), не диссоциируются на апопротеины и кофакторы металлов. [27]

Воспроизводимость и восстановление

Электрофореграмма , показывающая четыре серии PAGE высокомолекулярного растительного белка (≈ 200 кДа ) в зависимости от времени полимеризации геля. Метод обнаружения для определения концентрации кофактора Cd (в мкг/л): GF-AAS . [6]

Биоактивные структуры (нативная или трехмерная конформация или форма) изолированных белковых молекул не претерпевают каких-либо существенных конформационных изменений . Таким образом, белки, содержащие кофактор активного металла, можно воспроизводимо выделять в одних и тех же фракциях после проведения электрофореза в электрофорезе. [11] Смещение пика на соответствующей электрофореграмме указывает на то, что стандартизированное время полимеризации в геле (69 часов, RT) не применяется в эксперименте PAGE . Более низкое отклонение стандартизированного времени полимеризации (<69 часов) означает неполную полимеризацию и, следовательно, внутреннюю нестабильность из-за размягчения геля во время сшивки полимеров, когда материал достигает равновесия набухания, [28] при превышении этого временного предела. (>69 часов) является показателем старения геля (см. рис. Электрофореграмма ). [29] Явление старения гелей тесно связано с долговременным снижением вязкости водных растворов полиакриламида [30] и повышенным набуханием гидрогелей. [31]

В стандартных условиях металлопротеины с различным диапазоном молекулярных масс и изоэлектрических точек были извлечены в биологически активную форму с количественным выходом более 95%. [18] С помощью препаративного SDS-PAGE стандартные белки ( цитохром с , альдолаза , овальбумин и бычий сывороточный альбумин ) с молекулярной массой 14–66 ку могут быть восстановлены со средним выходом около 73,6%. [32] Препаративный изотахофорез (ИТП) применяют для выделения палладийсодержащих белков с молекулярной массой 362 ку (выход: 67%) и 158 ку (выход: 97%). [33]

Количественная оценка и идентификация

Физиологические концентрации ( диапазон частей на миллиард ) Fe, Cu, Zn, Ni , Mo , Pd, Co , Mn , Pt , Cr , Cd и других видов металлических кофакторов могут быть идентифицированы и абсолютно количественно определены в аликвоте фракции с помощью индуктивно связанной плазмы. например, масс-спектрометрия (ICP-MS) [34] или рентгеновская флуоресценция полного отражения (TXRF) [35] . В случае ИСП-МС структурная информация связанных металлобиомолекул необратимо теряется из-за ионизации образца плазмой . [36] [37] Еще одним признанным высокочувствительным методом определения микроэлементов в биологических образцах является атомно-абсорбционная спектрометрия в графитовой печи (GF-AAS) (см. рис. Электроферограмма ). [38] Из-за высокой чистоты и оптимизированной концентрации разделенных металлопротеинов, например, терапевтических рекомбинантных фармацевтических препаратов растительного происхождения, таких как медный шаперон для супероксиддисмутазы (CCS) из лекарственных растений , в нескольких специфических фракциях PAGE родственные структуры этих аналиты можно определить количественно с помощью ЯМР-спектроскопии раствора в неденатурирующих условиях. [39]

Приложения

Неправильно свернутые металлические белки, например, CCS или Cu-Zn-супероксиддисмутаза (SOD1), присутствующие в мозге , крови или других клинических образцах, указывают на нейродегенеративные заболевания , такие как болезнь Альцгеймера (БА) или боковой амиотрофический склероз (БАС). [40] Активные молекулы CCS или SOD способствуют внутриклеточному гомеостатическому контролю основных ионов металлов (например, Cu 1+/2+ , Zn 2+ , Fe 2+/3+ , Mn 2+ , Ni 3+ ) в организмах, и таким образом, эти биомолекулы могут балансировать прооксидативные и антиоксидантные процессы в цитоплазме . [41] В противном случае свободные или слабосвязанные ионы переходных металлов принимают участие в реакциях типа Фентона , в которых образуется вредный гидроксильный радикал , который, если его не контролировать, будет разрушительным для белков. [42] Потеря активного CCS увеличивает выработку бета-амилоида в нейронах , что, в свою очередь, является основным патологическим признаком AD. [43] Таким образом, медный шаперон супероксиддисмутазы считается одним из наиболее многообещающих биомаркеров токсичности меди при этих заболеваниях. [44] CCS следует анализировать в первую очередь в крови, поскольку метаанализ данных сыворотки показал , что пациенты с АД имеют более высокие уровни Cu в сыворотке, чем здоровые люди из контрольной группы . [45]

Смотрите также

Рекомендации

  1. ^ Зелерт Х, Краузе Ф (2008). «Препаратное выделение белковых комплексов и других биочастиц путем элюирования из полиакриламидных гелей». Электрофорез . 29 (12): 2617–36. дои : 10.1002/elps.200800061. PMID  18494038. S2CID  35874355.
  2. ^ Кастенхольц Б (2007). «Новая надежда на диагностику и терапию болезни Альцгеймера». Буквы о белках и пептидах . 14 (4): 389–93. дои : 10.2174/092986607780363970. ПМИД  17504097.
  3. ^ Сварт С., Якубовски Н. (2016). «Обновленная информация о состоянии метрологии металлопротеинов». Журнал аналитической атомной спектрометрии . 31 (9): 1756–65. дои : 10.1039/C6JA00181E .
  4. ^ Финни Лос-Анджелес, О'Халлоран ТВ (2003). «Видование переходных металлов в клетке: идеи химии рецепторов ионов металлов». Наука . 300 (5621): 931–6. Бибкод : 2003Sci...300..931F. дои : 10.1126/science.1085049. PMID  12738850. S2CID  14863354.
  5. ^ Черкьяро Дж., Маньери Т.М., Бертучи Ф.Р. (2013). «Аналитические методы количественного определения меди, цинка и железа в клетках млекопитающих». Металломика . 5 (10): 1336–45. дои : 10.1039/c3mt00136a . ПМИД  23925479.
  6. ^ abcde Кастенхольц Б, Гарфин Д.Е. (2010). «Выделение кислых, основных и нейтральных металлопротеинов с помощью QPNC-PAGE». Предшественники природы : 1–4. дои : 10.1038/npre.2010.4617.1 .
  7. ^ Гарфин Д.Е. (1995). «Глава 2 – Электрофоретические методы». Введение в биофизические методы исследования белков и нуклеиновых кислот : 53–109. дои : 10.1016/B978-012286230-4/50003-1.
  8. ^ Гарфин Д.Э. (1990). «[35] Изоэлектрическая фокусировка». Изоэлектрическая фокусировка. Методы энзимологии. Том. 182. стр. 459–77. дои : 10.1016/0076-6879(90)82037-3. ISBN 9780121820831. ПМИД  2314254.
  9. ^ Юн Х.Д., Ким Э.Дж., Роу Дж.Х., Ха Ю.К., Кан СО (1996). «Новая никельсодержащая супероксиддисмутаза из Streptomyces spp». Биохимический журнал . 318 (Часть 3): 889–96. дои : 10.1042/bj3180889. ПМЦ 1217701 . ПМИД  8836134. 
  10. ^ Suck R, Петерсен А, Вебер Б, Фибиг Х, Кромвель О (2004). «Аналитический и препаративный электрофорез в нативном полиакриламидном геле: исследование рекомбинантного и природного основного аллергена пыльцы трав Phl p 2». Электрофорез . 25 (1): 14–9. дои : 10.1002/elps.200305697. PMID  14730563. S2CID  20585733.
  11. ^ аб Кастенхольц, Б (2004). «Препаративный непрерывный электрофорез в нативном полиакриламидном геле (PNC-PAGE): эффективный метод выделения кофакторов кадмия в биологических системах». Аналитические письма . Информа ЮК Лимитед. 37 (4): 657–665. дои : 10.1081/al-120029742. ISSN  0003-2719. S2CID  97636537.
  12. ^ Бэ С.Х., Харрис А.Г., Хейнс П.Г., Чен Х., Гарфин Д.Е., Хейзелл С.Л., Пайк Ю.К., Уолш Б.Дж., Кордвелл С.Дж. (2003). «Стратегии обогащения и идентификации основных белков в протеомных проектах». Протеомика . 3 (5): 569–79. дои : 10.1002/pmic.200300392 . PMID  12748937. S2CID  26482563.
  13. ^ Кастенхольц Б (2006). «Сравнение электрохимического поведения высокомолекулярных белков кадмия в Arabidopsis thaliana и овощных растениях при использовании препаративного нативного непрерывного электрофореза в полиакриламидном геле (PNC-PAGE)». Электроанализ . 18 (1): 103–6. дои : 10.1002/elan.200403344.
  14. ^ Маклеллан Т (1982). «Буферы для электрофореза для полиакриламидных гелей при различных pH». Аналитическая биохимия . 126 (1): 94–9. дои : 10.1016/0003-2697(82)90113-0. ПМИД  7181120.
  15. ^ Гордон А.Х. (1969). Лабораторные методы в биохимии и молекулярной биологии: электрофорез белков в полиакриламидных и крахмальных гелях (Часть I, Глава 2 Акриламидный гель, 34–45). Эльзевир. дои : 10.1016/S0075-7535(08)70324-3. ISBN 9780444533418.
  16. ^ Вулли П. (1987). «Термическая нестабильность гелей для электрофореза». Электрофорез . 8 (8): 339–45. дои : 10.1002/elps.1150080802. S2CID  97116687.
  17. ^ Тиселиус А (1937). «Новый аппарат для электрофоретического анализа коллоидных смесей». Труды Фарадеевского общества . 33 : 524–534. дои : 10.1039/TF9373300524.
  18. ^ abcd Кастенхольц Б (2006). «Важный вклад новой количественной препаративной процедуры непрерывного электрофореза в нативном полиакриламидном геле (QPNC-PAGE) для выяснения метаболизма металлических кофакторов при заболеваниях, связанных с неправильным сворачиванием белков - теория». Буквы о белках и пептидах . 13 (5): 503–8. дои : 10.2174/092986606776819637. ПМИД  16800806.
  19. ^ Гельфи С., Ригетти П.Г. (1981). «Кинетика полимеризации полиакриламидных гелей II. Влияние температуры». Электрофорез . 2 (4): 220–28. дои : 10.1002/elps.1150020405. S2CID  93109120.
  20. ^ Чен Б, Крамбах А (1979). «Оценка эффективности полимеризации при формировании полиакриламидного геля с использованием непрерывного оптического сканирования в процессе полимеризации». Журнал биохимических и биофизических методов . 1 (2): 105–16. дои : 10.1016/0165-022X(79)90017-4. ПМИД  551105.
  21. ^ Бонавентура С, Бонавентура Дж, Стивенс Р, Миллингтон Д (1994). «Акриламид в полиакриламидных гелях может модифицировать белки во время электрофореза». Аналитическая биохимия . 222 (1): 44–8. дои : 10.1006/abio.1994.1451. ПМИД  7856869.
  22. ^ Уитли Массачусетс, Филлипс CR (1983). «Температурные эффекты при полимеризации полиакриламидных гелей, используемых для иммобилизации бактериальных клеток». Биотехнология и биоинженерия . 25 (2): 623–6. дои : 10.1002/бит.260250228 . ПМИД  18548679.
  23. ^ Кизилай М.Ю., Хорошо О (2003). «Влияние гидролиза на пространственную неоднородность в поли(акриламидных) гелях различной плотности сшивки». Полимер . 44 (18): 5239–50. дои : 10.1016/S0032-3861(03)00494-4.
  24. ^ Гарфин Д.Э. (2009). «25-е ежегодное собрание Американского общества электрофореза». Экспертное обозрение по протеомике . 6 (3): 239–41. дои : 10.1586/апр.09.18 . PMID  19489696. S2CID  24490398.
  25. ^ Хертен С (1963). "«Молекулярно-ситовый» электрофорез в сшитых полиакриламидных гелях». Журнал хроматографии A. 11 : 66–70. doi : 10.1016/S0021-9673 (01) 80870-0. PMID  13954823.
  26. ^ Гарфин Д.Е. (2009) [1990]. «Глава 29 одномерный гель-электрофорез». Руководство по очистке белков, 2-е издание . Методы энзимологии. Том. 463. стр. 497–513. дои : 10.1016/S0076-6879(09)63029-9. ISBN 978-0-12-374536-1. ПМИД  19892189.
  27. ^ Фитри Н, Кастенхольц Б, Бухари Б, Амран МБ, Варганегара FM (2008). «Видование молибдена в сыром соке флоэмы клещевины». Аналитические письма . 41 (10): 1773–84. дои : 10.1080/00032710802162442. S2CID  95715133.
  28. ^ Дамлянович В., Лагерхольм BC, Якобсон К. (2005). «Объемная и микроструктурная конъюгация белков внеклеточного матрикса с охарактеризованными полиакриламидными субстратами для анализов клеточной механотрансдукции». БиоТехники . 39 (6): 847–51. дои : 10.2144/000112026 . ПМИД  16382902.
  29. ^ Стейскал Дж., Гордон М., Торкингтон Дж.А. (1980). «Коллапс полиакриламидных гелей». Полимерный вестник . 3 (11): 621–5. дои : 10.1007/BF01135333. S2CID  98565268.
  30. ^ Кулицке В.М., Кневске Р., Кляйн Дж. (1982). «Получение, характеристика, свойства раствора и реологическое поведение полиакриламида». Прогресс в науке о полимерах . 8 (4): 373–468. дои : 10.1016/0079-6700(82)90004-1.
  31. ^ Юн Дж, Цай С, Суо З, Хейворд RC (2010). «Кинетика пороупругого набухания тонких слоев гидрогеля: сравнение теории и эксперимента». Мягкая материя . 6 (23): 6004–12. Бибкод : 2010SMat....6.6004Y. дои : 10.1039/C0SM00434K. S2CID  2867196.
  32. ^ Охаши Т., Моритани С., Андох Х., Сато С., Омори С., Лотспейх Ф., Икеда М. (1991). «Препаративная высокопроизводительная электроэлюция белков после разделения электрофорезом в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия и ее применение для анализа аминокислотных последовательностей и получения антител». Журнал хроматографии . 585 (1): 153–9. дои : 10.1016/0021-9673(91)85069-р. ПМИД  1666109.
  33. ^ Вебер Г., Мессершмидт Дж., фон Болен А., Кастенхольц Б., Гюнтер К. (2004). «Улучшенное разделение палладия в биологических матрицах с помощью сочетания гель-проникающей хроматографии и изотахофореза». Электрофорез . 25 (12): 1758–64. дои : 10.1002/elps.200305833. PMID  15213973. S2CID  22292130.
  34. ^ Рашовский П (2011). «Использование колоночного гель-электрофореза для онлайн-подключения к ИСП-МС для металлопротеомики». Архив диссертаций Масариковского университета, Брно.
  35. ^ Пессанья С., Карвалью М.Л., Беккер М., фон Болен А. (2010). «Количественное определение тяжелых металлов на разных стадиях производства вина методами рентгеновской флуоресценции полного отражения и энергодисперсионной рентгеновской флуоресценции: сравнение на двух виноградниках». Spectrochimica Acta Часть B: Атомная спектроскопия . 65 (6): 504–7. Бибкод : 2010AcSpe..65..504P. дои : 10.1016/j.sab.2010.04.003.
  36. ^ Якубовский Н., Лобински Р., Моенс Л. (2004). «Металлобиомолекулы. Основа жизни, задача атомной спектроскопии». Журнал аналитической атомной спектрометрии . 19 (1): 1–4. дои : 10.1039/B313299B.
  37. ^ Мунику С., Шпунар Дж., Лобински Р. (2009). «Металломика: понятие и методология». Обзоры химического общества . 38 (4): 1119–38. дои : 10.1039/B713633C. ПМИД  19421584.
  38. ^ Линь Т.В., Хуан С.Д. (2001). «Прямое и одновременное определение меди, хрома, алюминия и марганца в моче с помощью многоэлементного атомно-абсорбционного спектрометра с графитовой печью». Аналитическая химия . 73 (17): 4319–25. дои : 10.1021/ac010319h. ПМИД  11569826.
  39. ^ Кастенхольц Б., Гарфин Д.Э. (2009). «Лекарственные растения: природный источник шаперонов для лечения неврологических расстройств». Буквы о белках и пептидах . 16 (2): 116–20. дои : 10.2174/092986609787316234. ПМИД  19200033.
  40. ^ Шюман К., Классен Х.Г., Дитер Х.Х., Кениг Дж., Мультауп Г., Рюкгауэр М., Саммер К.Х., Бернхардт Дж., Бисальски Х.К. (2002). «Семинар консенсуса в Хоэнхайме: медь». Европейский журнал клинического питания . 56 (6): 469–83. дои : 10.1038/sj.ejcn.1601315 . ПМИД  12032645.
  41. ^ Кастенхольц Б., Гарфин Д.Е., Хорст Дж., Нагель К.А. (2009). «Металлические шапероны растений: новый взгляд на терапию деменции». Амилоид . 16 (2): 81–83. дои : 10.1080/13506120902879392. PMID  20536399. S2CID  37490474.
  42. ^ Робинсон, штат Нью-Джерси, Winge DR (2010). «Медные металлочапероны». Ежегодный обзор биохимии . 79 : 537–62. doi : 10.1146/annurev-biochem-030409-143539. ПМЦ 3986808 . ПМИД  20205585. 
  43. ^ Грей Э.Х., Де Вос К.Дж., Дингуолл С., Перкинтон М.С., Миллер CC (2010). «Дефицит медного шаперона супероксиддисмутазы увеличивает выработку бета-амилоида». Журнал болезни Альцгеймера . 21 (4): 1101–5. дои : 10.3233/JAD-2010-100717. ПМК 3023902 . ПМИД  20693630. 
  44. ^ Пал А (2014). «Токсичность меди, вызванная гепатоцеребральными и нейродегенеративными заболеваниями: острая потребность в прогностических биомаркерах». Нейротоксикология . 40 : 97–101. дои : 10.1016/j.neuro.2013.12.001. ПМИД  24342654.
  45. ^ Букосси С., Вентриглия М., Панетта В., Салустри С., Паскуалетти П., Мариани С., Сиотто М., Россини П.М., Сквитти Р. (2011). «Медь при болезни Альцгеймера: метаанализ исследований сыворотки, плазмы и спинномозговой жидкости». Журнал болезни Альцгеймера . 24 (1): 175–85. дои : 10.3233/JAD-2010-101473. PMID  21187586. S2CID  33194620.

дальнейшее чтение

Внешние ссылки